检索结果-南通市图书馆

维普期刊数据库

抑制磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）克服肺腺癌厄洛替尼靶向治疗耐药作用的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抑制磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）克服肺腺癌厄洛替尼靶向治疗耐药...

作者：董江锴上海交通大学

学位级别：硕士

以厄洛替尼为代表的第一代表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs）靶向治疗EGFR敏感型活化突变的肺腺癌疗效显著,但极易耐药复发,成为TKIs类药物临床使用的最大... 详细信息

以厄洛替尼为代表的第一代表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs）靶向治疗EGFR敏感型活化突变的肺腺癌疗效显著,但极易耐药复发,成为TKIs类药物临床使用的最大障碍,寻找耐药靶标、探索克服耐药的靶向药物组合,已成为研究热点。已知耐药机制有靶基因突变、旁/下游通路代偿激活等,代谢重编程调控机制也引起越来越多的关注。磷酸甘油酸脱氢酶（phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH）促进糖酵解通路向丝氨酸合成途径转变,是丝氨酸合成途径的关键起始酶,与多种肿瘤的发生发展密切相关,已有临床研究报道发现PHGDH表达水平与肺腺癌患者预后呈负相关,但是在肺腺癌耐药中的作用尚未见报道。本课题对PHGDH在肺腺癌厄洛替尼耐药中的作用和调控机制进行了研究。我们在体外厄洛替尼剂量爬坡法诱导构建的肺腺癌获得性耐厄洛替尼细胞（简称耐药细胞）中,体内外实验结果表明:与亲本敏感细胞相比,耐药细胞中1.细胞内和分泌到细胞外的丝氨酸含量及消耗量均显著增加;2.丝氨酸合成关键酶PHGDH的m RNA和蛋白水平显著增加;3.下调PHGDH在完全营养条件下,抑制细胞增殖和肿瘤生长,抑制敏感细胞皮下移植瘤适应性耐药,并逆转耐药细胞皮下移植瘤对厄洛替尼的敏感性;4.抑制PHGDH能抑制细胞能量代谢,下调细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）含量,引起细胞中活性氧蓄积,明显提高DNA损伤标记物γH2AX水平,诱导细胞凋亡;5.采用抗氧化剂NAC预处理,可以逆转活性氧和γH2AX的升高,提示抑制PHGDH引起DNA损伤和细胞凋亡主要或者部分通过下调GSH、提高细胞内活性氧水平导致。本研究首次发现抑制PHGDH能克服肺腺癌厄洛替尼靶向治疗耐药,揭示PHGDH有望作为耐药治疗的潜在靶点之一,为PHGDH抑制剂联合厄洛替尼治疗肺腺癌提供实验理论依据,对肺腺癌个体化治疗具有重要临床意义。

关键词：磷酸甘油酸脱氢酶肺腺癌靶向治疗耐药代谢重编程活性氧

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

新型磷酸甘油酸脱氢酶别构抑制剂的研究

新型磷酸甘油酸脱氢酶别构抑制剂的研究

NaAsO_(2)染毒HaCaT细胞中丝氨酸合成途径关键酶的表达及其作用

中国化学会第29届学术年会

作者：刘培王倩刘莹来鲁华北京分子科学国家实验室分子动态与稳态结构国家重点实验室北京大学化学与分子工程学院

癌细胞为了满足快速增殖的需求,其代谢过程不同于正常细胞,更倾向于通过糖酵解途径进行代谢。磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）是催化生物体内合成丝氨酸第一步反应的关键酶,在人的黑色素瘤1和乳腺癌细胞2中均被发现有过表达,并且PHGDH对于这... 详细信息

癌细胞为了满足快速增殖的需求,其代谢过程不同于正常细胞,更倾向于通过糖酵解途径进行代谢。磷酸甘油酸脱氢酶（PHGDH）是催化生物体内合成丝氨酸第一步反应的关键酶,在人的黑色素瘤1和乳腺癌细胞2中均被发现有过表达,并且PHGDH对于这些细胞的生长和生存必不可少。因此,以PHGDH作为靶标设计抑制剂有望成为治疗癌症的一种新策略。别构抑制剂在提供新的结合位点、提高选择性、改善耐药突变的影响等方面优于底物竞争型抑制剂。本文通过结合位点探测程序Cavity以及人工挑选,预测了PHGDH的潜在别构口袋,分别针对这些口袋进行虚拟筛选,购买化合物进行酶活测定,初步得到作用于5个不同别构口袋的先导化合物,其中对III号口袋活性最好的化合物（5-1）的半数抑制常数IC50为3.0.M。我们对此化合物进行了结构修饰,合成了29个新化合物以探索结构与活性关系,深入研究正在进行之中。

关键词：磷酸甘油酸脱氢酶别构抑制剂虚拟筛选酶活测定合成

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

环境与职业医学 2022年第5期39卷 545-549页

作者：李凤敏韩进美黄红茜王娜张爱华韩雪贵州医科大学公共卫生与健康学院/环境污染与疾病监控教育部重点实验室贵州贵阳550025

[背景]丝氨酸合成途径(SSP)关键酶在肿瘤的生长、增殖、侵袭中发挥重要作用,但其在砷致癌中的作用尚不明确。[目的]以人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)和NaAsO_(2)所致恶性转化HaCaT(T-HaCaT)细胞为研究对象,观察NaAsO_(2)染毒对SS... 详细信息

[背景]丝氨酸合成途径(SSP)关键酶在肿瘤的生长、增殖、侵袭中发挥重要作用,但其在砷致癌中的作用尚不明确。[目的]以人永生化皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)和NaAsO_(2)所致恶性转化HaCaT(T-HaCaT)细胞为研究对象,观察NaAsO_(2)染毒对SSP关键酶[如磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)、磷酸丝氨酸转氨酶1(PSAT1)和磷酸丝氨酸磷酸酶(PSPH)]表达及对细胞增殖、迁移能力的影响,探讨SSP关键酶在砷致癌中的作用。[方法](1)取课题组前期构建的T-HaCaT细胞,实验分组为传代对照(0μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组、THaCaT(0.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组、NCT503(PHGDH抑制剂,25μmol·L^(-1)组、NCT503(25μmol·L^(-1)+T-HaCaT(0.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组。Western blotting法检测传代对照组和T-HaCaT组细胞的SSP关键酶蛋白表达水平,CCK8法和细胞划痕试验分别检测各组细胞的增殖率和迁移率。(2)取生长良好的对数生长期HaCaT细胞,以0、0.625、1.25和2.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2)染毒细胞0、24、48和72 h,检测细胞增殖率和SSP关键酶的蛋白表达水平。后续实验给予HaCaT细胞25μmol·L^(-1)NCT503预处理6 h后,用2.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2)继续染毒72 h,实验分组为对照(0μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组、染毒(2.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组、预处理组(25μmol·L^(-1)NCT503)、预处理(25μmol·L^(-1)NCT503)+染毒(2.5μmol·L^(-1)NaAsO_(2))组,检测各组细胞的增殖率。[结果] T-HaCaT组细胞中PHGDH的蛋白表达水平是传代对照组的1.60倍(P 酶的蛋白水平均较对照组表达增加(均P 酶可能在NaAsO_(2)所致的T-HaCaT细胞增殖中扮演重要的角色。

关键词：磷酸甘油酸脱氢酶磷酸丝氨酸氨基转移酶磷酸丝氨酸磷酸酶亚砷酸钠 HaCaT细胞 NaAsO_(2)所致的恶性转化HaCaT细胞

维普期刊数据库

雌激素受体阴性（ER-）乳腺癌中miRNA调控PHGDH的相关性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

雌激素受体阴性（ER-）乳腺癌中miRNA调控PHGDH的相关性研究

作者：廉莹新乡医学院

学位级别：硕士

背景乳腺癌(Breast cancer)是女性常见恶性肿瘤之一,致死率较高,已成为严重威胁我国女性生命的严重疾病之一。随着分子生物学的日益发展,靶向性治疗受到越来越多的关注,寻找到与乳腺癌治疗相关的调控基因变得尤为重要。磷酸甘油酸脱氢酶... 详细信息

背景乳腺癌(Breast cancer)是女性常见恶性肿瘤之一,致死率较高,已成为严重威胁我国女性生命的严重疾病之一。随着分子生物学的日益发展,靶向性治疗受到越来越多的关注,寻找到与乳腺癌治疗相关的调控基因变得尤为重要。磷酸甘油酸脱氢酶(phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)是丝氨酸合成通路的第一个酶。研究发现乳腺癌细胞需要PHGDH保持增殖和存活,且在乳腺癌中有PHGDH过量表达。近几年对miRNAs的研究发现,不同的miRNAs在肿瘤中的作用也不同,它可分为癌基因或抑癌基因参与人体的一系列生命活动,miRNAs对靶基因蛋白的调控成为研究热点。本课题以PHGDH为靶基因,预测针对靶基因3"UTR的miRNAs,选取6个可能相关的miRNAs进行后续研究,分析是否存在miRNA调控靶基因PHGDH导致乳腺癌的发生,根据实验结果进行后续治疗乳腺癌的可行性分析。目的本研究旨在探讨在雌激素受体阴性乳腺癌中靶基因PHGDH的miRNA分子调控机制,分析通过miRNA调控PHGDH在乳腺癌细胞中的作用和治疗的可行性。方法①采用生物信息学工具预测能够调控目的基因PHGDH的miRNAs;②qRT-PCR实验方法验证MCF-7、T-47D、ZR-75-1和MDA-MB-231细胞中PHGDH mRNA和预测相关miRNAs的表达水平;③采用miRNA mimics上调MDA-MB-231细胞中miRNA表达水平,通过qRT-PCR及Western-blotting方法验证靶基因PHGDH的表达水平;④采用雌二醇(E2)及他莫昔芬(TAM)结合miRNA mimics对上述细胞进行处理,用CCK-8方法来检测细胞的凋亡或增殖情况。结果①成功运用生物信息学软件预测分析得到miR-27、miR-128、miR-137、miR-759、miR-1290及miR-4718等六个miRNAs具有调控PHGDH的可能;②qRT-PCR结果显示,在预测得到的6个miRNAs中,miR-128与PHGDH mRNA表达存在负相关关系;③通过对MDA-MB-231细胞系转染miR-128 mimics,显示上调miR-128能够抑制PHGDH的表达;④采用miRNA-128 mimics上调miR-128后能够在雌二醇(E2)和他莫昔芬(TAM)干预情况下,MDA-MB-231细胞的生长曲线受到抑制。结论1.上调miR-128能够抑制雌激素受体阴性乳腺癌中PHGDH的表达,并影H响细胞生长。2.1miR-128对雌激素受体阴性乳腺癌进行雌激素治疗具有积极意义。

关键词：乳腺癌细胞磷酸甘油酸脱氢酶 miRNAs miR-128

坛紫菜丝状孢子体EST的获取、生物信息学分析及功能基因的克隆和序列测定

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

坛紫菜丝状孢子体EST的获取、生物信息学分析及功能基因的克隆和...

作者：庞国兴中国科学院研究生院（海洋研究所）

学位级别：硕士

本文采用改进的一步法从坛紫菜丝状孢子体中提取总RNA，使用Oligotex mRNA Kits(QIAGEN) 分离mRNA，经过一系列酶促反应合成双链cDNA，通过QIAEXII GEL Extraction Kit (QIAGEN)胶回收大于500 bp的片段，连接到载体pBluescript SK(+)，... 详细信息

本文采用改进的一步法从坛紫菜丝状孢子体中提取总RNA，使用Oligotex mRNA Kits(QIAGEN) 分离mRNA，经过一系列酶促反应合成双链cDNA，通过QIAEXII GEL Extraction Kit (QIAGEN)胶回收大于500 bp的片段，连接到载体pBluescript SK(+)，转染宿主菌DH 10B，成功地构建了坛紫菜丝状孢子体的cDNA文库，获得了2.5×105个原始克隆。测序得到1280个EST，这些EST拼接出的叠连群(多拷贝EST)有91个，单拷贝EST有399个，做Blastx和NCBI非冗余蛋白库比对(e-value磷酸甘油酸脱氢酶的序列的保守区，使用Primer 5软件，设计了该酶的正反向引物，并得到了磷酸甘油酸脱氢酶的部分基因序列，并在GenBank中和其它物种的同类基因序列比对。与此序列相似度最高的序列是红海束毛藻Trichodesmium erythraeum的磷酸甘油酸脱氢酶的基因序列(ACCESSION　number: ZP0073958)，E-value为：4e-25，相似性为：30%，Score为：117。

关键词：坛紫菜 cDNA文库 EST 密码子 GC含量磷酸甘油酸脱氢酶

KDM4B通过调控PHGDH的表达抑制乳腺癌细胞干性和增殖迁移

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

KDM4B通过调控PHGDH的表达抑制乳腺癌细胞干性和增殖迁移

作者：王欣宇北京工业大学

学位级别：硕士

乳腺癌已成为威胁全球女性生命健康的最主要原因之一,其逐年增加的发病率,高复发和转移的特性加大了癌症的治疗难度,因此为乳腺癌的靶向治疗寻找潜在分子靶点十分紧迫。组蛋白赖氨酸去甲基化酶4B(KDM4B)能够特异性地催化组蛋白赖氨酸残... 详细信息

乳腺癌已成为威胁全球女性生命健康的最主要原因之一,其逐年增加的发病率,高复发和转移的特性加大了癌症的治疗难度,因此为乳腺癌的靶向治疗寻找潜在分子靶点十分紧迫。组蛋白赖氨酸去甲基化酶4B(KDM4B)能够特异性地催化组蛋白赖氨酸残基H3K9和H3K36位点的去甲基化,由于H3K9和H3K36位点具有不同的甲基化程度,在其去甲基化后能够促进或抑制下游基因表达以及调控代谢通路。本文首先探究了KDM4B对乳腺癌细胞MCF-7与MDA-MB-231生长的影响,随后分析了KDM4B调控磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)的分子机制并探究二者对乳腺癌细胞干性及增殖迁移的影响。通过研究发现KDM4B的表达水平在乳腺癌中具有亚型特异性的特点,低表达的KDM4B与不良预后显著相关,敲低KDM4B显著增强MCF-7和MDA-MB-231细胞的增殖迁移能力,促进了乳腺癌细胞干性、上皮间质转化(EMT)途径和细胞周期进展;相反,过表达KDM4B抑制了乳腺癌细胞干性、EMT途径和细胞周期,降低了癌细胞的增殖迁移能力。PHGDH能够介导丝氨酸合成,促进癌细胞干性的获得及增强,加速肿瘤生长。KDM4B能够催化PHGDH启动子区域的H3K36me3发生去甲基化导致PHGDH转录活性下降,从而抑制PHGDH的表达。值得注意的是,PHGDH的敲低逆转了KDM4B缺失所导致的细胞恶性表型的增强,恢复了MCF-7和MDA-MB-231细胞中的癌细胞干性、增殖迁移能力及细胞周期阻滞。综上所述,本文发现了乳腺癌中KDM4B通过减少组蛋白H3赖氨酸36三甲基化(H3K36me3)以降低PHGDH的表达,抑制了MCF-7和MDA-MB-231细胞干性、EMT和细胞周期进展从而降低癌细胞增殖迁移能力。本文的发现或许可以给乳腺癌的研究提供新方向,为乳腺癌精准治疗提供治疗靶点和理论依据。

关键词：乳腺癌表观遗传修饰组蛋白赖氨酸去甲基化酶4B 代谢重编程磷酸甘油酸脱氢酶

piR-823在宫颈鳞癌中的表达及对侵袭、转移的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

临床肿瘤学杂志 2023年第3期28卷 200-206页

作者：仇姝陆红梅王成海扬州大学附属医院扬州市妇幼保健院妇产科江苏扬州225000 扬州市妇幼保健院病理科 225000 扬州大学医学院病理教研室 225000

目的探讨宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中PIWI相互作用RNA(piR)-823的表达、与临床病理特征的关系及对侵袭、转移的影响。方法收集2019年1月至2021年12月95例CSCC手术切除标本及配对癌旁组织。采用piRNA表达谱芯片技术获取5例CSCC中差异表达的pi... 详细信息

目的探讨宫颈鳞状细胞癌(CSCC)中PIWI相互作用RNA(piR)-823的表达、与临床病理特征的关系及对侵袭、转移的影响。方法收集2019年1月至2021年12月95例CSCC手术切除标本及配对癌旁组织。采用piRNA表达谱芯片技术获取5例CSCC中差异表达的piRNA表达谱。在宫颈癌细胞株C33A和HeLa中分别转染piR-823-mimic质粒(piR-823过表达组)、阴性对照质粒(对照组)、si-piR-823质粒(piR-823干扰组)和si-对照组质粒(si-对照组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测piR-823表达水平,Transwell小室实验检测piRNA-823对CSCC细胞侵袭的影响。生物信息学预测piR-823下游靶基因,采用qPCR和Western blotting检测piR-823表达水平对靶基因mRNA和蛋白表达的影响。裸鼠肺转移成瘤实验观察piR-823对CSCC细胞肺转移的影响。结果CSCC的piRNA表达谱中符合条件且表达上调的piRNA共有5个,在95例CSCC组织中piR-823和piR-37390表达上调得到了验证,选择上调倍数更高的piR-823作为研究对象。piR-823表达与CSCC病理分级和淋巴结转移有关(P0.05)。Transwell小室实验显示,过表达piR-823能促进CSCC细胞的侵袭,而干扰piRNA-823表达能抑制CSCC细胞的侵袭(P磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)的mRNA和蛋白表达,而干扰piR-823表达则提高了PHGDH的mRNA和蛋白表达(P<0.05)。裸鼠肺转移成瘤实验表明,干扰piR-823表达后肺转移瘤数目明显减少(P<0.05)。结论在CSCC组织中piR-823表达水平上调。piR-823可能通过抑制PHGDH的mRNA和蛋白表达,从而促进了CSCC细胞的侵袭和转移。

关键词：宫颈鳞状细胞癌 PIWI相互作用RNA-823 迁移转移磷酸甘油酸脱氢酶

维普期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

丝氨酸代谢在胶质瘤中的研究进展

临床神经外科杂志 2024年第2期21卷 216-219页

作者：奥格斯·阿力甫刘宏毅赵梦洁肖红南京医科大学附属脑科医院神经外科南京210029 南京医科大学附属脑科医院研究所南京210029

神经胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤,治疗难度大,且预后不佳。因此,胶质瘤的致病机制和治疗策略的研究是当前神经肿瘤领域的热点。丝氨酸是一种重要的非必需氨基酸,不仅为细胞内蛋白质、核酸和脂质的合成提供必要的前体,还可以为肿瘤细胞中... 详细信息

神经胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤,治疗难度大,且预后不佳。因此,胶质瘤的致病机制和治疗策略的研究是当前神经肿瘤领域的热点。丝氨酸是一种重要的非必需氨基酸,不仅为细胞内蛋白质、核酸和脂质的合成提供必要的前体,还可以为肿瘤细胞中氧化还原稳态的维持提供还原力,在细胞的生理和病理过程中发挥重要作用。近年来,有研究发现丝氨酸代谢与神经胶质瘤发展过程密切相关。本文旨在对丝氨酸在胶质瘤进展中的作用、潜在机制以及治疗策略做一综述。

关键词：丝氨酸代谢神经胶质瘤磷酸甘油酸脱氢酶磷酸丝氨酸转氨酶1 磷酸丝氨酸磷酸酶

维普期刊数据库博看期刊