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中华神经外科疾病研究杂志 2017年第3期16卷 202-206页

作者：李鹏起李秉琴闫志丰陈晓燕袁亮董秋峰杨鑫李三中甄海宁费舟第四军医大学西京医院神经外科陕西西安710032 海东市乐都区人民医院妇产科青海海东810700

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)蛋白pp65在胶质瘤中的表达水平及其意义。方法采用免疫组化方法检测HCMV蛋白pp65在175例人脑胶质瘤组织及10例正常人脑组织中的表达,分析其表达水平与胶质瘤临床病理学特征的关系。结果 pp65蛋白在胶质瘤组... 详细信息

目的探讨人巨细胞病毒(HCMV)蛋白pp65在胶质瘤中的表达水平及其意义。方法采用免疫组化方法检测HCMV蛋白pp65在175例人脑胶质瘤组织及10例正常人脑组织中的表达,分析其表达水平与胶质瘤临床病理学特征的关系。结果 pp65蛋白在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常人脑组织(Z=-4.338,P=0.000);pp65蛋白在高恶性度胶质瘤中的免疫染色强度明显强于低恶性度胶质瘤(Z=-0.960,P=0.037),而pp65蛋白免疫染色强度与胶质瘤的病理级别无明显的相关性(r=0.096,P=0.208),以及pp65蛋白免疫染色强度与胶质瘤患者的性别(r=0.138,P=0.069)、年龄(r=0.016,P=0.837)和肿瘤部位(r=-0.147,P=0.052)也均无明显相关性。结论HCMV感染及其蛋白pp65表达可能与人脑胶质瘤的发生存在一定关系,但其确切的致瘤机制尚需进一步研究。

关键词：人巨细胞病毒磷酸化糖蛋白65 胶质瘤免疫组化

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人巨细胞病毒在颅咽管瘤中的感染、表达及意义

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作者：闫志丰第四军医大学

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人巨细胞病毒（HCMV）是一种β疱疹病毒。近年来的研究显示在人类多种类型肿瘤组织中存在HCMV感染和病毒基因表达，并可能与肿瘤的恶性程度有关，这提示HCMV感染可能在人类某些类型肿瘤的形成和发展过程中扮演着重要的角色，有可能是一... 详细信息

人巨细胞病毒（HCMV）是一种β疱疹病毒。近年来的研究显示在人类多种类型肿瘤组织中存在HCMV感染和病毒基因表达，并可能与肿瘤的恶性程度有关，这提示HCMV感染可能在人类某些类型肿瘤的形成和发展过程中扮演着重要的角色，有可能是一种新的人类肿瘤相关病毒。HCMV基因产物可通过多种细胞信号通路抑制细胞凋亡、促进细胞增殖、侵袭、转移，也能促进微血管的生成及血管壁的损害，并形成独特的免疫逃避机制躲避机体的免疫反应。深入研究HCMV感染与肿瘤的病因学关系及其作用机制，可为肿瘤的临床防治提供新思路。颅咽管瘤是儿童和青少年最常见的颅内先天性肿瘤，约占颅内肿瘤的4%。颅咽管瘤的临床表现通常复杂且严重，治疗很棘手，手术往往难以彻底切除，放化疗效果较为有限，肿瘤复发率高，预后差。目前有关颅咽管瘤的病因学和发病机制尚不完全清楚，这也是临床上缺乏有效防治方法的一个重要因素。HCMV感染是否与其发生有关，国内外尚未见报道。本实验采用免疫组化方法和real-time PCR方法分别检测颅咽管瘤组织和正常脑组织中HCMV抗原表达情况和基因含量水平，分析HCMV感染与颅咽管瘤发生发展及临床特征的相关性。第一部分颅咽管瘤组织中人巨细胞病毒抗原表达的检测 1.方法： 2006年6月至2010年12月在西京医院神经外科行手术切除且经病理确诊为颅咽管瘤的患者89例，及行颅内高压造瘘手术部分切除的正常脑组织10例。以上手术均由有丰富经验的术者完成，在手术中收取适量标本，迅速放入足量甲醛溶液中固定;充分固定后，石蜡包埋，切片厚4μm，二氨基联苯胺（DAB）染色，苏木素复染，检测HCMV立刻早期蛋白1-72和磷酸化糖蛋白65抗体的表达情况，进而探讨HCMV感染与颅咽管瘤发生发展的关系。 2.结果： ***抗原在颅咽管瘤和正常人脑组织中的表达 HCMV IE1-72和pp65抗原在颅咽管瘤细胞的胞浆和胞核中都有棕黄色或棕褐色均质颗粒，在肿瘤组织上皮细胞中呈不均匀分布。颅咽管瘤组织中HCMV IE1-72和pp65抗原阳性率分别为77.5%和84.3%，而正常人脑组织全为阴性。HCMV IE1-72和pp65抗原表达阳性率在颅咽管瘤组织和正常人脑组织之间均有显著性差异（χ2=22.045，P=0.000;χ2=30.324，P=0.000）。 ***抗原表达与颅咽管瘤临床病理学特征的关系 HCMV IE1-72抗原在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织中阳性率分别为83.6%和67.6%，pp65抗原在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织中阳性率分别为89.1%和76.5%;两抗原在牙釉质型颅咽管瘤组织中的阳性率均略高于鳞状乳头型，但差异均无显著性(χ2=2.234，P=0.135;χ2=1.662，P=0.197)。IE1-72抗原男性阳性率为81.6%，女性为72.5%;pp65抗原男性阳性率为81.6%，女性为87.5%;IE1-72和pp65两抗原阳性率在性别间有差异，但差异无显著性（χ2=0.595，P=0.440;χ2=0.215，P=0.643），IE1-72和pp65两抗原阳性率与患者年龄亦无明显相关性（r=0.009, P=0.930;r=0.056, P=0.599）。 3.结论： 1.颅咽管瘤组织中HCMV抗原表达阳性率显著高于正常脑组织，提示HCMV感染可能是一个诱发颅咽管瘤发生的重要病因，并有可能促进肿瘤的演变。这对于临床预防和治疗颅咽管瘤有一定的启示作用。 ***抗原表达阳性率在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织间差异无显著性，但牙釉质型略高于鳞状乳头型，仍提示HCMV感染可能与颅咽管瘤的不同病理组织类型发生及演变有关;在男女性别间有差异，但无显著性，这与HCMV感染流行病学特征女性感染率高于男性不一致，可能与本组样本量较小及实验方法有关，也可能颅咽管瘤组织HCMV抗原表达与性别有一定关系。其致病机理需要进一步研究。第二部分人巨细胞病毒基因在颅咽管瘤组织中的定量检测 1.方法：在拟诊为颅咽管瘤的患者进行手术的过程中收集适量新鲜的病变组织，立即放入液态氮中冷冻，然后存于—80℃冰箱中备用。手术均由有丰富经验的术者完成。以病理报告为主要依据，排除非颅咽管瘤的标本，完全囊变组织标本和全钙化组织标本，共收集9例。定量检测HCMV基因在颅咽管瘤组织中的含量，进一步明确HCMV感染与颅咽管瘤发生发展的关系。 2.结果： 9例组织中HCMV基因定量全为阴性，但其中1例有阳性趋势，提示HCMV核酸有可能存在于颅咽管瘤组织中，但含量甚微，以至难以检测到，需要进一步优化实验方法和把握实验细节，也可能HCMV核酸潜伏于附近的其他组织。 3.结论：采用实时定量方法检测颅咽管瘤组织中HCMV核酸结果为阴性，可能是因为HCMV核酸在颅咽管瘤组织中含量较低，

关键词：颅咽管瘤免疫组化人巨细胞病毒立刻早期蛋白1-72 磷酸化糖蛋白65 实时定量PCR

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作者：李鹏起第四军医大学

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胶质瘤是中枢神经系统发病率最高的恶性肿瘤,其发病率约占颅内肿瘤的45%。虽然在胶质瘤的影像诊断、手术治疗、放射治疗以及新的抗癌药物开发方面取得了长足的进展,但胶质瘤患者的预后并未得到根本的改善,经规范的综合治疗后,目前恶性... 详细信息

胶质瘤是中枢神经系统发病率最高的恶性肿瘤,其发病率约占颅内肿瘤的45%。虽然在胶质瘤的影像诊断、手术治疗、放射治疗以及新的抗癌药物开发方面取得了长足的进展,但胶质瘤患者的预后并未得到根本的改善,经规范的综合治疗后,目前恶性胶质瘤患者的中位生存期尚不足15个月。因此,需要对胶质瘤的病因学和发病机制进行更深入的研究,以期为临床提供新的更为有效的治疗策略。近年来有研究显示在人胶质瘤以及其它类型的恶性肿瘤中存在人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)的感染及其病毒蛋白的表达,提示HCMV可能与人类某些恶性肿瘤的发生和发展存在一定关系,但研究结果仍存在很大分歧。基于此,本研究采用免疫组化方法检测了HCMV立刻早期基因1-72(immediate early gene1-72,IE1-72)蛋白和磷酸化糖蛋白65(phosphorylated glycoprotein 65,pp65)在人脑胶质瘤组织中的表达水平,分析了IE1-72蛋白和pp65蛋白表达水平与胶质瘤临床病理学特征的关系,并进一步采用原位杂交技术检测了HCMV DNA在胶质瘤组织中的含量状况。目的检测HCMV蛋白在胶质瘤组织中的表达水平和HCMV DNA在胶质瘤组织中的存在水平;分析HCMV蛋白表达与胶质瘤临床病理学特征的关系;探讨HCMV感染与胶质瘤发生和发展的病因学关系。方法1.175例胶质瘤组织均取自西京医院神经外科手术切除的肿瘤标本,10例正常人脑组织为该科室在脑外伤内减压术或高血压脑出血皮层造瘘术中获得。采用免疫组化法检测其中125例胶质瘤组织标本和10例正常人脑组织标本中IE1-72蛋白表达水平,并分析其表达水平与胶质瘤临床病理学特征的关系。2.采用免疫组化法检测175例胶质瘤组织标本和10例正常人脑组织标本中pp65蛋白表达水平,进一步分析pp65蛋白表达水平与胶质瘤临床病理学特征的关系以及pp65蛋白表达与IE1-72蛋白表达在胶质瘤组织中的关系。3.采用原位杂交技术检测22例WHO IV级胶质瘤组织中HCMV DNA含量状况并分析其意义,选取的胶质瘤组织均采用免疫组化法证实HCMV蛋白pp65表达阳性。结果***蛋白IE1-72在胶质瘤和正常人脑组织中的表达IE1-72蛋白在125例胶质瘤组织中有90例呈现阳性表达,阳性表达率72.0%。免疫反应信号定位于胞核和/或胞浆,主要定位于胞核,部分定位于胞浆。IE1-72蛋白在10例正常人脑组织中均无表达。IE1-72蛋白在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常人脑组织(Z=-3.923,P=0.000)。***1-72蛋白表达与胶质瘤临床病理学特征的关系IE1-72蛋白的免疫染色强度随胶质瘤病理级别的升高而明显增强(r=0.310,P=0.000),其在高恶性度胶质瘤中的染色强度明显强于低恶性度胶质瘤(Z=-2.893,P=0.004)。IE1-72蛋白染色强度与胶质瘤患者的年龄存在正相关(r=0.234,P=0.009),而与胶质瘤患者的性别(r=0.038,P=0.675)以及肿瘤部位(r=0.086,P=0.341)均无明显相关性。***蛋白pp65在胶质瘤和正常人脑组织中的表达pp65蛋白在175例胶质瘤组织中有138例呈现阳性表达,阳性表达率78.9%。pp65蛋白免疫反应信号定位于胞核和/或胞浆,以胞核为主。pp65蛋白在10例正常人脑组织中均无表达。pp65蛋白在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常人脑组织(Z=-4.338,P=0.000)。***65蛋白表达与胶质瘤临床病理学特征的关系pp65蛋白免疫染色强度与胶质瘤的病理级别(r=0.096,P=0.208)和恶性度(Z=-0.960,P=0.337),以及与胶质瘤患者的性别(r=0.138,P=0.069)、年龄(r=0.016,P=0.837)和肿瘤部位(r=-0.147,P=0.052)均无明显相关性。***65蛋白与IE1-72蛋白在胶质瘤组织中的表达水平之间的关系175例胶质瘤组织中检测了pp65蛋白表达水平,其中的125例胶质瘤组织同时检测了IE1-72蛋白表达水平,分析他们之间表达水平存在明显的相关关系(χ2=25.637,P=0.002)。*** DNA在胶质瘤组织中的检测原位杂交结果显示,22例pp65蛋白表达阳性的胶质瘤组织中,HCMV DNA在3例胶质瘤组织中呈现弱阳性着色,1例胶质瘤组织中可疑阳性,阳性着色颗粒分布在胞核,其余18例胶质瘤组织中均无明显着色。结论***蛋白IE1-72和pp65均在胶质瘤组织中高表达,而在正常人脑组织中无表达;二者表达水平呈明显正相关;而且IE1-72蛋白随胶质瘤病理级别和恶性度的升高表达明显增强。提示HCMV蛋白IE1-72和pp65

关键词：人巨细胞病毒立刻早期基因1-72 磷酸化糖蛋白65 胶质瘤免疫组化原位杂交

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人巨细胞病毒感染在颅咽管瘤中的表达及意义

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中华神经外科疾病研究杂志 2016年第2期15卷 148-151页

作者：闫志丰李三中董秋峰陈晓燕李娟霍军丽高大宽甄海宁费舟第四军医大学西京医院神经外科陕西西安710032

目的检测人巨细胞病毒(HCMV)感染在颅咽管瘤组织中的表达,探讨HCMV感染与颅咽管瘤发生的病因学关系。方法采用免疫组化方法检测HCMV立刻早期蛋白1-72(IE1-72)和磷酸化糖蛋白65(pp65)抗原在89例颅咽管瘤组织及10例正常脑组织中的表达情... 详细信息

目的检测人巨细胞病毒(HCMV)感染在颅咽管瘤组织中的表达,探讨HCMV感染与颅咽管瘤发生的病因学关系。方法采用免疫组化方法检测HCMV立刻早期蛋白1-72(IE1-72)和磷酸化糖蛋白65(pp65)抗原在89例颅咽管瘤组织及10例正常脑组织中的表达情况。结果在颅咽管瘤组织中HCMV IE1-72和pp65抗原表达阳性率分别为77.5%和84.3%,而在正常脑组织中两抗原均为阴性,IE1-72和pp65抗原表达阳性率在颅咽管瘤组织和正常脑组织间均有显著性差异(P=0.000,P=0.000)。IE1-72抗原在牙釉质型和鳞状乳头型颅咽管瘤组织中阳性率分别为83.6%和67.6%,pp65抗原分别为89.1%和76.5%;两抗原在牙釉质型颅咽管瘤组织中的阳性率均略高于鳞状乳头型,但均无统计学差异(P=0.135,P=0.197)。结论 HCMV IE1-72和pp65抗原在颅咽管瘤组织中均有高表达,而在正常脑组织中无表达,HCMV感染及其抗原表达可能与颅咽管瘤的发生有一定关系,其致病机制尚需进一步研究。

关键词：人巨细胞病毒颅咽管瘤免疫组化立刻早期蛋白1-72 磷酸化糖蛋白65

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