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新型细菌磷脂酶改性蛋黄卵磷脂

食品与发酵工业 2004年第8期30卷 9-12页

作者：段钢 Peter Birschbach Jay Shetty 无锡杰能科生物工程有限公司 Genencor International

蛋黄中含有丰富的磷脂 ,包括卵磷脂和磷脂酰乙醇胺。磷脂具有非常好的乳化性能 ,并能够通过酶法变性 ,譬如利用磷脂酶A2 生产 2 溶血磷脂 ,该物质与天然磷脂相比 ,具有更好的乳化性能。经过磷脂酶A2 变性的蛋黄就可以用于各种食品的生... 详细信息

蛋黄中含有丰富的磷脂 ,包括卵磷脂和磷脂酰乙醇胺。磷脂具有非常好的乳化性能 ,并能够通过酶法变性 ,譬如利用磷脂酶A2 生产 2 溶血磷脂 ,该物质与天然磷脂相比 ,具有更好的乳化性能。经过磷脂酶A2 变性的蛋黄就可以用于各种食品的生产 ,而有些食品对乳化性能的要求非常苛刻。LysoMax○R酶是一种非基因改造的细菌磷脂酶A2 ,这种酶能够使蛋黄充分变性 ,并且对其他富含磷脂的底物如大豆卵磷脂和玉米卵磷脂也非常有效。

关键词：酶改性磷脂酶A2 乳化性能食品变性蛋黄天然细菌酶法磷脂酰乙醇胺

植物FLOWERING LOCUS T/TERMINAL FLOWER1基因家族的研究进展

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西北植物学报 2008年第4期28卷 843-851页

作者：常丽丽吴连成库丽霞孙朝辉王新涛陈彦惠河南农业大学农学院郑州450002

植物FLOWERING LOCUS T/TERMINAL FLOWER1(FT/TFL1)基因家族是一个进化上高度保守的基因家族,它在植物的花发育过程中具有重要作用:其成员FT基因编码的蛋白产物是可以长距离转运的成花激素,在花形成过程中起关键作用;另一成员TFL1基因... 详细信息

植物FLOWERING LOCUS T/TERMINAL FLOWER1(FT/TFL1)基因家族是一个进化上高度保守的基因家族,它在植物的花发育过程中具有重要作用:其成员FT基因编码的蛋白产物是可以长距离转运的成花激素,在花形成过程中起关键作用;另一成员TFL1基因则在花序的形成和维持过程中起重要作用.本文就近年来国内外对植物FT/TFL1基因家族的结构、成员,以及各个成员在花发育转换过程中的功能等研究现状进行综述,并对该基因家族的研究前景提出展望.

关键词：磷脂酰乙醇胺花发育基因家族成花激素

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两种不同工艺制备的大豆浓缩磷脂组成的差异

中国油脂 2004年第12期29卷 65-67页

作者：汪勇温勇黄才欢欧仕益吴建中暨南大学食品科学与工程系广州市黄埔大道西601号510632 华南环境科学研究所广州市员村西街七号大院510655

用水化脱胶和无机陶瓷膜超滤两种不同工艺制备大豆浓缩磷脂,用高效液相色谱(HPLC)分析了两种不同工艺制备产品的磷脂各成分的组成。结果表明,无机陶瓷膜超滤法制备的大豆浓缩磷脂中磷脂酸(PA)的含量为17.20％,磷脂酰乙醇胺(PE)含量为10... 详细信息

用水化脱胶和无机陶瓷膜超滤两种不同工艺制备大豆浓缩磷脂,用高效液相色谱(HPLC)分析了两种不同工艺制备产品的磷脂各成分的组成。结果表明,无机陶瓷膜超滤法制备的大豆浓缩磷脂中磷脂酸(PA)的含量为17.20％,磷脂酰乙醇胺(PE)含量为10.30％;而水化脱胶法制备的大豆浓缩磷脂中磷脂酸(PA)的含量为11.72％,磷脂酰乙醇胺(PE)含量为20.92％。

关键词：大豆浓缩磷脂制备工艺无机陶瓷膜组成磷脂酰乙醇胺 PE 含量 PA 高效液相色谱(HPLC)

HPLC与MALDI-TOFMS联用技术分析蛋黄中的磷脂

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分析试验室 2009年第4期28卷 30-33页

作者：李国琛王颜红吴仁安王世成中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳110016 中国科学院大连化学物理研究所大连116023

蛋黄中含有大量磷脂,其中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)最为丰富。本研究采用高效液相色谱法(HPLC)与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用技术分析了蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离,... 详细信息

蛋黄中含有大量磷脂,其中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)最为丰富。本研究采用高效液相色谱法(HPLC)与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用技术分析了蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离,收集各组分后分别进行MALDI-TOF MS分析得到比较清晰的质谱图。通过质谱图解析确定了蛋黄中磷脂酰胆碱、神经鞘磷脂(SM)的脂肪酸组成。

关键词：磷脂磷脂酰胆碱磷脂酰乙醇胺神经鞘磷脂 HPLC MALDI-TOF MS

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酒石酸长春瑞滨pH敏感脂质体的研究

酒石酸长春瑞滨pH敏感脂质体的研究

作者：张芳山东大学

学位级别：硕士

本课题以磷脂酰乙醇胺（PE）为主要载体材料,以VB为模型药物,采用薄膜分散法,制备了VB pH敏感脂质体,对这一给药系统进行相关的研究,考察了其注射后在体内的药物动力学行为和组织分布特征,为这一抗癌药物制剂的开发应用提供了试验基础... 详细信息

本课题以磷脂酰乙醇胺（PE）为主要载体材料,以VB为模型药物,采用薄膜分散法,制备了VB pH敏感脂质体,对这一给药系统进行相关的研究,考察了其注射后在体内的药物动力学行为和组织分布特征,为这一抗癌药物制剂的开发应用提供了试验基础和理论依据。课题主要研究方法和结果如下： 1. VB pH敏感脂质体的制备及理化性质考察建立了HPLC测定VB的含量的方法,并通过sephadexG-50凝胶柱分离游离药物和脂质体,对药物包封率测定条件进行了考察。采用薄膜水化法制备VB pH敏感脂质体,以包封率为主要考察指标,单因素考察旋转蒸发温度、水化时间、油酸（OA）和胆固醇（CHOL）投量等影响因素,在此基础上,采用正交设计法对VB pH敏感脂质体的处方进行优化,选用投药量、胆固醇用量和油酸用量为考察因素,以包封率、载药量为指标进行评价,得到VBpH敏感脂质体的优化处方：VB10mg, PE60mg, OA10mg, CHOL30mg。在最优处方基础上,制备了冷冻干燥VBpH敏感脂质体,所得脂质体冻干粉粉末均匀、疏松,具有良好的再分散性。优化得到的VB pH敏感脂质体外观圆整,分布均匀,平均粒径为298.3nm,包封率为（64±0.44）%,载药量为（7.6±0.26）%。通过稳定性考察发现,所制备的脂质体冻干粉包封率和药物含量均有良好的稳定性,在八周内,药物包封率和含量变化很小,符合制剂制备的标准。 2. VB pH敏感脂质体体外释药动力学研究以VB生理盐水溶液为对照,VB pH敏感脂质体在不同pH值（pH分别为7.4,5.0,4.0,3.4）释放介质中的释放均具有一定的缓释效果,且药物在酸性环境中的释放较pH7.4的生理环境快,显示了较明显的pH敏感性。VB溶液的体外释药符合一级动力学数学模型,回归系数r=0.9950;VBpH敏感脂质体在在pH7.4的释放介质中较符合一级动力学数学模型,而在其他pH值释放介质中的的体外释药均更好地符合Ritger-Peppas动力学数学模型。 3. VB pH敏感脂质体小鼠体内动力学以及体内组织分布研究课题以静脉注射VB溶液为对照,考察了小鼠静注后药物在体内药物动力学及组织分布。结果表明,静注VB pH敏感脂质体AUC0-24h的相对于静脉注射VB溶液的224%。由于脂质体的包封作用,延缓了药物释放,一定程度上延长了药物体内循环时间。组织分布结果显示,与药物溶液相比,药物在肝、脾、肺部蓄积增加;心、肾蓄积有所减少,因而可在一定程度上减小药物对心脏及肾部的毒副作用。以上结果说明,VB pH敏感脂质体可作为抗癌药物载体,并能提高其在某些组织的靶向效率,降低其毒副作用。故本课题为进一步开发为安全、合理、有效的抗癌药物制剂提供新思路。通过稳定性考察发现,所制备的脂质体冻干粉包封率和药物含量均有良好的稳定性,在八周内,药物包封率和含量变化很小,符合制剂制备的标准。

关键词：酒石酸长春瑞滨 pH敏感脂质体磷脂酰乙醇胺正交设计法组织分布

蛋黄卵磷脂活性组分的分离纯化及其辅助增强记忆功能研究

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蛋黄卵磷脂活性组分的分离纯化及其辅助增强记忆功能研究

作者：陈晋大连工业大学

学位级别：硕士

卵磷脂作为植物和动物生物膜的主要组成成分,具有很多生理活性功能,如调节脂质代谢,预防心血管疾病,增强大脑功能等。我国作为禽蛋产销大国,有必要对蛋黄卵磷脂及其活性组分进行深入研究,为禽蛋高值化应用提供技术支撑。基于此,本研究... 详细信息

卵磷脂作为植物和动物生物膜的主要组成成分,具有很多生理活性功能,如调节脂质代谢,预防心血管疾病,增强大脑功能等。我国作为禽蛋产销大国,有必要对蛋黄卵磷脂及其活性组分进行深入研究,为禽蛋高值化应用提供技术支撑。基于此,本研究采用有机溶剂提取技术结合单因素和响应面方法优化蛋黄卵磷脂提取工艺,基于BABL/C动物模型研究蛋黄卵磷脂辅助增强记忆功能,同时利用硅胶柱层析技术纯化蛋黄卵磷脂PC和PE,并利用体外PC12细胞模型研究蛋黄卵磷脂及其活性组分辅助增强记忆功能和神经保护作用。研究结果如下:(1)蛋黄卵磷脂提取工艺优化。采用乙醇-正己烷混合溶剂(萃取)和丙酮(沉淀)联合提取蛋黄卵磷脂,基于HPLC-ELSD技术以PC和PE的含量为指标,采用单因素和响应面技术优化蛋黄卵磷脂提取工艺。研究表明在乙醇浓度91.1%和提取温度39.5 C条件下提取得到的PC含量最高(226.78±0.18μg/mL)。在乙醇与正己烷的溶剂比为4.6:1、提取温度为40.7 C、乙醇浓度为98%条件下,提取得到PE含量最高(56.91±0.14μg/mL)。(2)基于动物模型研究蛋黄卵磷脂辅助增强记忆功能。通过构造小鼠痴呆模型,以行为学实验和酶活测定以及脑组织病理学染色为评价指标对比分析蛋黄卵磷脂改善记忆力的活性。行为学实验(水迷宫和避暗实验)结果表明摄入蛋黄卵磷脂的小鼠潜伏时间和错误次数相比于模型组显著减少(P磷脂能显著下调乙酰胆碱酯酶(AChE)活力并上调乙酰胆碱转移酶(ChAT)活力(P磷脂组与模型组相比大脑皮层和海马区的细胞萎缩状态有所恢复。在此基础上,通过血液指标、小鼠体成分实验以及小鼠肝脏和结肠HE染色证明蛋黄卵磷脂在实验条件下对小鼠的血糖和血脂无显著影响。动物实验结果说明蛋黄卵磷脂在不影响血糖和血脂条件下通过下调AChE活力和上调ChAT活力达到增强记忆力的效果。(3)蛋黄卵磷脂活性组分分离纯化及结构解析。基于研究发现蛋黄卵磷脂具有辅助增强记忆功能,因此本章利用硅胶柱层析技术纯化蛋黄卵磷脂活性组分PC和PE,为后续蛋黄卵磷脂活性组分PC和PE活性研究提供基础。结果研究发现用体积比18:5:1的氯仿-甲醇-乙酸三元混合溶剂作为洗脱剂,利用等度洗脱模式,可成功纯化PE,其纯度达到98%。利用梯度洗脱模式,先使用体积比18:5:1的氯仿-甲醇-乙酸三元混合溶剂A洗脱,后用极性更大的体积比10:5:1的氯仿-甲醇-乙酸三元混合溶剂B洗脱,成功纯化PC,其纯度达到98%。利用MALDI-TOF-MS和GC-MS鉴定和解析PC和PE分子结构。PC的分子结构为16:0/16:0-PC,16:0/16:1-PC,16:0/18:0-PC,16:0/18:1-PC,16:0/18:2-PC,18:0/18:1-PC,18:0/18:2-PC,18:1/18:2-PC和18:0/20:4-PC。PE的分子结构为16:0/18:1-PE,16:0/18:2-PE,16:0/20:4-PE,18:0/18:1-PE,18:0/18:2-PE和18:0/20:4-PE。(4)基于PC12细胞模型研究蛋黄卵磷脂及其活性组分的神经保护作用。利用电子顺磁共振(EPR)技术通过对PC和PE清除DPPH自由基能力测定评价其抗氧化活性。结果发现PC和PE能显著降低DPPH自由基的EPR信号强度,且其清除能力与剂量呈正相关。在此基础上,利用莨菪碱构造PC12细胞氧化损伤模型,通过测定AChE活性、单胺氧化酶(MAO)活力和丙二醛(MDA)含量研究蛋黄卵磷脂及其活性组分的神经保护作用。结果发现,4 mg/mL莨菪碱处理PC12细胞4 h后其细胞活力为50.30±2.65%,是最适的损伤模型。使用浓度为0.2 mg/mL的蛋黄卵磷脂、标准品PC、纯化PC、标准品PE、纯化PE对PC12细胞预保护24 h,与莨菪碱氧化损伤组比较,细胞内AChE活性、MDA含量和MAO活力显著降低(P磷脂及其活性组分PC和PE能通过抑制莨菪碱诱导PC12细胞产生的神经毒性和氧化应激发挥神经保护作用。上述结果说明,蛋黄卵磷脂及其活性组分可以通过下调AChE活性抑制莨菪碱诱导产生的神经毒性以及通过下调MDA含量和MAO活力抑制莨菪碱诱导的氧化应激发挥神经保护作用,进而达到辅助增强记忆功能,是缓解记忆障碍的潜在营养物质。

关键词：蛋黄卵磷脂磷脂酰胆碱磷脂酰乙醇胺分离纯化结构解析增强记忆氧化应激神经保护

PEBP4蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达及其意义

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中华胸心血管外科杂志 2012年第5期28卷 310-311页

作者：虞桂平黄斌陈国强吴松沈凯东南大学医学院附属江阴医院胸心血管外科 214400

磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP）家族是由一类具有与磷脂酰乙醇胺结合能力的碱性蛋白所组成，广泛表达于多种植物和动物。PEBP4的高表达与多种肿瘤的发生、发展以及浸润、转移相关。我们通过检测肺鳞状细胞癌组织及其癌旁正常组织中PEBP4... 详细信息

磷脂酰乙醇胺结合蛋白（PEBP）家族是由一类具有与磷脂酰乙醇胺结合能力的碱性蛋白所组成，广泛表达于多种植物和动物。PEBP4的高表达与多种肿瘤的发生、发展以及浸润、转移相关。我们通过检测肺鳞状细胞癌组织及其癌旁正常组织中PEBP4的表达情况，探讨PEBP4与肺鳞状细胞癌的发生、发展、浸润转移以及分化之间的关系。

关键词：肺鳞状细胞癌碱性蛋白癌组织磷脂酰乙醇胺癌旁正常组织浸润转移结合能力结合蛋白

PEMT基因Val175Met多态性与非酒精性脂肪性肝炎易感性的研究

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PEMT基因Val175Met多态性与非酒精性脂肪性肝炎易感性的研究

作者：董航佳木斯大学

学位级别：硕士

目的研究磷酯酰乙醇胺N-甲基转移酶(phosphatidylethnolamine N-methyltransfefase,PEMT)基因V175M多态性与日本高知地区非酒精性脂肪性肝炎(NASH)易感性的相关性方法提取日本高知地区107例NASH患者和150例正常健康者外周静脉血。采用... 详细信息

目的研究磷酯酰乙醇胺N-甲基转移酶(phosphatidylethnolamine N-methyltransfefase,PEMT)基因V175M多态性与日本高知地区非酒精性脂肪性肝炎(NASH)易感性的相关性方法提取日本高知地区107例NASH患者和150例正常健康者外周静脉血。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-PFLP)方法进行分析。结果NASH病例组中M等位基因的频率显著高于正常对照组(p<0.001);NASH病例组中M/-基因型的频率显著高于正常对照组(p<0.01);M/-基因型组BMI明显低于V/V基因型组(p<0.05);卡方检验非肥胖患者的比率M/-基因型组明显高于V/V基因型组(p<0.001);M/-基因型组血浆中HDL-C水平明显低于V/V基因型组(p<0.03 );M/-基因型组LDL-C水平明显高于V/V基因型组(p<0.01)。结论PEMT基因位于外显子8上175位点的M等位基因与NASH发生发展有显著相关性,V/V和M/-基因型的NASH患者相比,M/-基因型组BMI明显低于V/V基因型组,携带M/-基因型是导致非肥胖人群中易患NASH发生的一个因素。M/-基因型携带者HDL-C水平降低,LDL-C水平增高,NASH患者携带M/-基因型是代谢综合征的易患因素。

关键词：磷酯酰乙醇胺N-甲基转移酶非酒精性脂肪性肝炎磷脂酰胆碱磷脂酰乙醇胺极低密度脂蛋白

膜脂成分和亚结构对大肠杆菌生物力学性质的影响

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膜脂成分和亚结构对大肠杆菌生物力学性质的影响

作者：李明南昌大学

学位级别：硕士

细菌的生物力学性质(如刚性和粘附性等)在细菌粘附和感染等生理、病理过程中起重要作用。目前,研究各种药物对细菌的刚性和粘附性的影响已有不少报道,但细菌不同亚结构对细菌的刚性的影响和膜脂成分对细菌粘附性的影响的研究较少。本课... 详细信息

细菌的生物力学性质(如刚性和粘附性等)在细菌粘附和感染等生理、病理过程中起重要作用。目前,研究各种药物对细菌的刚性和粘附性的影响已有不少报道,但细菌不同亚结构对细菌的刚性的影响和膜脂成分对细菌粘附性的影响的研究较少。本课题旨在探讨这两个方面。我们首先探讨了细菌的各种亚结构对其刚性的影响。本课题选用了DH5a(PE+PC-),AD93/pDD72(PE+PC-),AD93/ptac67(PE-PC+),AD93(PE-PC-)四种具有不同磷脂成分的大肠杆菌菌株来研究膜脂成分对大肠杆菌刚性的影响;并通过EDTA(乙二胺四乙酸)、溶菌酶(lysozyme)和链霉素(Streptomycin)三种药物分别破坏细胞膜、细胞壁和细菌蛋白等来研究不同亚结构对大肠杆菌刚性的影响。我们发现,大肠杆菌的不同亚结构(膜脂成分、细胞膜的完整性、细胞壁和细胞内含物等)对细菌的刚性有不同程度的影响,其中细胞壁和细胞内含物的影响最大,而膜脂成分的影响最小。这为我们深入理解细菌的性质和某些行为提供了有用信息。我们随后选用了具有不同亲疏水性的五种基底(如普通玻璃、hydrophilic-glass、OTS-glass、塑料和陶瓷)和一种细胞株(巨噬细胞)来研究这四种大肠杆菌菌株的粘附性。与以往报道相符,基底的亲疏水性显著影响细菌的粘附。有趣的是,当磷脂酰乙醇胺(PE)缺陷时,大肠杆菌(PE-PC-和PE-PC+菌)的粘附性显著下降且几乎不受基底亲疏水性和磷脂酰胆碱(PC)含量的影响,说明细菌膜脂成分(主要是PE)是决定细菌粘附性的更重要的因素。通过荧光共聚焦显微镜、流式细胞仪和SDS-PAGE银染等多种方法,我们发现PE-菌表面的脂多糖(LPS)含量显著下降,说明细菌外膜中PE含量会通过改变LPS的含量来影响细菌的粘附性,其分子机制有待进一步研究。这为我们提供了一种思路,也许可通过调节膜PE含量来改变细菌粘附性、从而抑制细菌感染。

关键词：大肠杆菌刚性黏附性磷脂酰乙醇胺原子力显微镜抗菌性药物