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碳水化合物反应元件结合蛋白对L02细胞糖脂代谢的影响

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中国生物制品学杂志 2011年第4期24卷 421-425页

作者：熊玲沈薇重庆医科大学附属第二医院消化内科重庆400010

目的探讨碳水化合物反应元件结合蛋白(Carbohydrate response element binding protein,ChREBP)在高糖诱导肝细胞脂变中的作用。方法分别以18和25 mmol/L葡萄糖培养L02细胞,以11 mmol/L葡萄糖培养L02细胞作为对照,甘油三酯(TG)含量测定... 详细信息

目的探讨碳水化合物反应元件结合蛋白(Carbohydrate response element binding protein,ChREBP)在高糖诱导肝细胞脂变中的作用。方法分别以18和25 mmol/L葡萄糖培养L02细胞,以11 mmol/L葡萄糖培养L02细胞作为对照,甘油三酯(TG)含量测定及油红O染色观察细胞脂变程度;免疫荧光观察细胞ChREBP的核转位情况;RT-PCR检测细胞肝型丙酮酸激酶(Liver pyruvate kinase,LPK)基因mRNA的表达水平,Western blot分析细胞脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,高糖可使L02细胞内甘油三酯和脂滴含量增加,刺激ChREBP核转位,上调LPK基因mRNA和FAS蛋白的表达水平。结论葡萄糖可能通过其代谢产物经ChREBP-LPK-FAS途径诱导肝细胞脂肪变性。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白肝细胞高糖肝细胞脂肪变性

碳水化合物反应元件结合蛋白基因启动子甲基化与2型糖尿病的相关性研究

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内蒙古医科大学学报 2019年第3期41卷 228-231页

作者：王欣赵丰李丽君内蒙古医科大学附属医院全科医学科

目的:针对2型糖尿病(T2DM)患者单核细胞之中糖类反应组件结合蛋白(ChREBP)进行分析,确定其基因启动子范围的甲基化程度,并分析其与T2DM之间的相关性。方法:空腹抽取研究目标的静脉血液,肝素进行处理,分析测试机检测其在空腹状态下的生... 详细信息

目的:针对2型糖尿病(T2DM)患者单核细胞之中糖类反应组件结合蛋白(ChREBP)进行分析,确定其基因启动子范围的甲基化程度,并分析其与T2DM之间的相关性。方法:空腹抽取研究目标的静脉血液,肝素进行处理,分析测试机检测其在空腹状态下的生化指标,通过针对甲基化的PCR亚硫酸氢盐限制性内切酶法(BSP)考察ChREBP的启动子甲基化程度均值。结果:T2DM组病人ChREBP基因启动子的甲基化程度均值在P<0.05的条件下较对照组更高;对于实验组,其ChREBP基因之中的8个CpG位点和对照组相比拥有更高的甲基化程度,且在P<0.01的条件下存在统计学上的显著差别。结论:2型糖尿病病人具有更高的ChREBP基因启动子甲基化程度,所以本研究针对ChREBP基因进行分析,考察其启动子CpG位点的甲基化程度,结果显示,该甲基化程度的不正常可能和糖尿病存在一定的相关性。

关键词：糖尿病碳水化合物反应元件结合蛋白 DNA 甲基化

碳水化合物反应元件结合蛋白对L02细胞糖脂代谢的作用

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碳水化合物反应元件结合蛋白对L02细胞糖脂代谢的作用

作者：熊玲重庆医科大学

学位级别：硕士

研究背景与目的随着我国经济飞速发展和人民生活水平的提高,肥胖和胰岛素抵抗在人群中的发生频率越来越高,由此导致的非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）在人群中也呈逐年上升趋势,严重威胁国民的健... 详细信息

研究背景与目的随着我国经济飞速发展和人民生活水平的提高,肥胖和胰岛素抵抗在人群中的发生频率越来越高,由此导致的非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD）在人群中也呈逐年上升趋势,严重威胁国民的健康水平和生活质量。脂肪肝和糖尿病是最常见的伴发疾病之一,在高血糖的情况下,脂肪肝的发生率明显增加,但目前关于高糖状态下肝脂质代谢异常的机制并不十分清楚,深入探讨其机制,制定有效的预防和治疗措施显得极为重要。2001年,Yamashita等[1]发现了一种与LPK基因启动子上ChoRE序列结合的转录因子,命名为碳水化合物反应元件结合蛋白（ carbohydrate response element binding protein, ChREBP）。ChREBP是碱性螺旋-环-螺旋-亮氨酸锌指（ basic helix-loop-helix/leucine zipper, bHLH-ZIP）蛋白[2]。近年来研究发现,葡萄糖代谢产物通过ChREBP以独立于胰岛素信号途径的方式来调节糖酵解和脂肪合成相关酶的基因表达,影响肝脏的脂肪沉积。本实验利用高浓度葡萄糖体外培养人正常肝细胞株（L02细胞）,观察肝细胞的脂肪沉积、ChREBP转位以及LPK、FAS、LXRα、SREBP-1c表达的变化,首次从正常人肝细胞水平探讨高糖对肝细胞脂质沉积的影响及可能机制,为进一步寻找新的治疗靶点奠定基础。方法 1、人正常肝细胞株L02细胞用含10%胎牛血清的1640培养基常规培养、传代。 2、根据文献研究[11],实验设立G1组（对照组,培养基中所含葡萄糖浓度为11mmol/L）,G2组（葡萄糖浓度为18mmol/L）和G3组（葡萄糖浓度为25mmol/L）。 3、TG含量测定及油红O染色了解L02细胞脂肪变程度;细胞免疫荧光观察ChREBP的核转位情况,RT-PCR方法检测肝型丙酮酸激酶（liver-pyruvate kinase, LPK）和固醇调节元件结合蛋白-1c （ sterol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c）的mRNA表达,Western blot方法检测脂肪酸合成酶（fatty acid synthase, FAS）和肝x受体α（Liver X receptor alpha,LXRα）的蛋白表达。结果 1、成功建立高糖诱导L02肝细胞脂肪变的细胞模型。随着培养基葡萄糖浓度增加及造模时间延长,肝细胞脂肪变程度加重。 1)TG含量测定:高糖培养24小时,G2、G3组肝细胞内的TG水平较对照组G1稍升高（1.51±0.52、1.91±0.53 vs 1.28±0.44）,差异无统计学意义（P=0.3573）;高糖培养48小时, G2、G3组肝细胞内TG水平明显升高（3.18±0.25、6.62±0.95 vs 1.32±0.28）,与G1组比较差异均有统计学意义（P =0.0010和P =0.0008）,提示随着葡萄糖浓度增加及作用时间的延长,细胞内TG含量增加。 2)油红O染色显示:G1组仅见少量橘红色脂滴;G2、G3组肝细胞内橘红色脂滴较G1组细胞增多,随着培养时间延长,脂滴增加更明显。根据细胞内TG含量测定及油红O染色,G3组较G2组细胞脂变更明显,故我们选择葡萄糖浓度25mmol/l为高糖组观察浓度,进行后继实验。 2、各组细胞内ChREBP的核转位情况高糖刺激3小时ChREBP表达逐渐由胞浆转位至胞核,6-12小时达到高峰,转位率约20%左右,24小时开始减少。对照组ChREBP主要表达在胞浆。 3、两组细胞内LPK、SREBP-1c mRNA表达的变化与对照组比较,高糖组细胞随着葡萄糖的刺激,LPK mRNA表达量增加, 6h、12h、24h和36h分别为0.375±0.029 vs 0.215±0.045（P=0.0066）、0.527±0.016 vs 0.215±0.045（P=0.0003）、0.413±0.064 vs 0.215±0.045（P=0.0118）和0.306±0.025 vs 0.215±0.045 （P=0.0376）,各时间点LPK mRNA表达量差异有统计学意义,LPK mRNA表达量于12小时达高峰,后逐渐降低;高糖组各时间点SREBP-1c mRNA表达量与对照组比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）。 4、各组细胞内FAS、LXRα蛋白表达的变化与对照组比较,高糖组细胞24h、48h的FAS蛋白表达呈时间依赖增加,分别为0.375±0.025 vs 0.258±0.019（P =0.0030）和0.524±0.021 vs 0.258±0.019

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白高糖肝细胞脂肪变性固醇调节元件结合蛋白-1c 肝x受体α

碳水化合物反应元件结合蛋白与胰岛β细胞增殖及分化的关系

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国际内分泌代谢杂志 2017年第3期37卷 189-191页

作者：冉慧苏青上海交通大学医学院附属新华医院内分泌科 200092

碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）是调控糖酵解和脂质合成相关酶类基因表达的转录因子,除了在肝脏中促进糖类向脂质转化外,其还在胰岛中表达并参与β细胞增殖、分化等过程.ChREBP可通过促进β细胞增殖、参与分化及糖、脂毒性,在β... 详细信息

碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）是调控糖酵解和脂质合成相关酶类基因表达的转录因子,除了在肝脏中促进糖类向脂质转化外,其还在胰岛中表达并参与β细胞增殖、分化等过程.ChREBP可通过促进β细胞增殖、参与分化及糖、脂毒性,在β细胞病理生理过程中起作用,以此为ChREBP介导的糖尿病病理机制以及糖尿病的治疗提供了新思路.

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白 β细胞糖尿病转录因子

碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)的研究进展

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畜牧与饲料科学 2014年第9期35卷 40-42页

作者：马丽高鹏飞石建中牛姣艳黎威张燕青徐凯王泽艺刘宏郭晓红李步高曹果清山西农业大学动物科技学院山西太谷030801 山西省大同市种猪场山西大同037000

转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,ChREBP)可结合糖酵解和脂肪合成相关基因,调控糖脂代谢。糖脂代谢不仅是代谢疾病,如糖尿病和肥胖症等的研究热点,也是提高肉质品质、培育优良畜禽... 详细信息

转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element binding protein,ChREBP)可结合糖酵解和脂肪合成相关基因,调控糖脂代谢。糖脂代谢不仅是代谢疾病,如糖尿病和肥胖症等的研究热点,也是提高肉质品质、培育优良畜禽品种的关注点。主要综述了ChREBP的结构、组织分布、生物学功能及影响其表达的因素,以期能够为更好地调控糖脂代谢提供理论基础。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白糖酵解脂肪合成

舒洛地特联合羟苯磺酸钙治疗高血压合并2型糖尿病肾病患者的效果及对碳水化合物反应元件结合蛋白和分泌型卷曲相关蛋白5水平的影响

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中华高血压杂志 2022年第1期30卷 73-77页

作者：周琳刘伟韩硕蒋黎邱侠宁波市医疗中心李惠利医院药剂科浙江宁波315000 温州市中西医结合医院内科宁波市医疗中心李惠利医院急诊内科宁波市医疗中心李惠利医院内分泌科

目的探讨舒洛地特联合羟苯磺酸钙治疗高血压合并2型糖尿病肾病患者的效果及对碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、分泌型卷曲相关蛋白5(Sfrp5)水平的影响。方法选取于2017年1月—2019年1月收治的高血压合并2型糖尿病肾病患者330例为... 详细信息

目的探讨舒洛地特联合羟苯磺酸钙治疗高血压合并2型糖尿病肾病患者的效果及对碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)、分泌型卷曲相关蛋白5(Sfrp5)水平的影响。方法选取于2017年1月—2019年1月收治的高血压合并2型糖尿病肾病患者330例为研究对象,采用随机数字表法分为舒洛地特治疗组(1粒/次,2次/d)、羟苯磺酸钙治疗组(0.5 g/次,3次/d)及联合治疗组(舒洛地特胶囊1粒/次,2次/d和羟苯磺酸钙胶囊0.5 g/次,3次/d)3组,每组各110例,3组患者均在常规降血压、降血糖和基础性治疗基础上分别给予舒洛地特胶囊、羟苯磺酸钙胶囊以及两种药物联合治疗。连续治疗3个月后,比较3组患者临床疗效,同时比较各组患者治疗前后血压及血糖、肾功能、氧化应激指标、炎症因子水平、血管内皮功能以及ChREBP、Sfrp5表达水平变化情况。结果治疗后,联合治疗组患者临床治疗总有效率高于舒洛地特治疗组、羟苯磺酸钙治疗组(91.8%比72.7%比75.5%,χ^(2)=14.659,P=0.001)。治疗后,3组患者收缩压、舒张压以及空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2hPBG)明显降低(P蛋白定量(24hUAE)下降,估算的肾小球滤过率(eGFR)上升;且联合治疗组上述指标改善程度高于羟苯磺酸钙治疗组、舒洛地特治疗组(P物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)上升;联合治疗组上述指标高于羟苯磺酸钙治疗组、舒洛地特治疗组,舒洛地特治疗组上述指标高于羟苯磺酸钙治疗组(均P反应蛋白(hsCRP)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平下降;联合治疗组上述指标低于舒洛地特治疗组和羟苯磺酸钙治疗组,且苯磺酸钙治疗组低于舒洛地特治疗组(均P<0.05)。治疗后,3组患者ChREBP表达水平下降,Sfrp5表达水平上升;血流介导的血管舒张功能(FMD)升高,全血黏度降低(均P<0.05);且联合治疗组改善程度优于舒洛地特治疗组和羟苯磺酸钙治疗组,羟苯磺酸钙治疗组改善程度优于舒洛地特治疗组(均P<0.05)。结论舒洛地特联合羟苯磺酸钙治疗高血压合并2型糖尿病肾病患者可能通过有效改善患者血清ChREBP、Sfrp5表达水平以及炎症因子水平而改善患者肾功能,延缓血管病变。

关键词：高血压 2型糖尿病肾病舒洛地特羟苯磺酸钙分泌型卷曲相关蛋白5 碳水化合物反应元件结合蛋白

脂肪酸合成酶和碳水化合物反应元件结合蛋白在1型糖尿病小鼠肾脏的表达及胰岛素对其的调节作用

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中国糖尿病杂志 2016年第1期24卷 64-68页

作者：王冰程丽静刘明川高政南大连市中心医院内分泌科 116033 大连医科大学附属第二医院肾内科大连医科大学

目的探讨脂肪酸合成酶(FAS)及其调节因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)在T1DM小鼠肾脏的表达及胰岛素对其调节的作用。方法将15只C57BL/6小鼠分为对照(Con)组、糖尿病(DM)组和胰岛素治疗(Ins)组,各5只。腹腔注射STZ诱导T1DM小鼠模... 详细信息

目的探讨脂肪酸合成酶(FAS)及其调节因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)在T1DM小鼠肾脏的表达及胰岛素对其调节的作用。方法将15只C57BL/6小鼠分为对照(Con)组、糖尿病(DM)组和胰岛素治疗(Ins)组,各5只。腹腔注射STZ诱导T1DM小鼠模型,观察FAS、ChREBP在其肾脏的表达,以及胰岛素对其的调节。结果 Con、DM、Ins组TG水平为(0.99±0.46),(2.25±0.66),(1.29±0.24)mmol/L,TC水平为(1.62±0.10),(1.90±0.12),(1.68±0.11)mmol/L(P蛋白均相对集中表达于肾皮质的肾小管上皮细胞;DM组肾组织中FAS和ChREBP蛋白水平较Con组降低,胰岛素可使糖尿病小鼠肾脏以上2种蛋白含量有所回升;DM组肾脏FAS含量在mRNA水平也较Con组低,下降约50%(P<0.01)。胰岛素治疗可使糖尿病小鼠肾脏FAS含量上升0.34倍(P<0.01);与Con组相比,糖尿病小鼠肾脏ChREBP含量在mRNA水平降低,下降约70%(P<0.01),胰岛素治疗可使糖尿病小鼠肾脏ChREBP含量上升1.96倍(P<0.01)。结论糖尿病小鼠肾脏FAS和ChREBP的表达量较非糖尿病小鼠降低,胰岛素可上调糖尿病小鼠肾脏FAS和ChREBP的表达水平。

关键词：糖尿病,1型脂肪酸合成酶碳水化合物反应元件结合蛋白

调控糖酵解和生脂的重要转录因子:碳水化合物反应元件结合蛋白

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生理科学进展 2006年第3期37卷 266-269页

作者：卢建雄陈粉粉杨公社西北农林科技大学动物脂肪沉积和肌肉发育实验室

碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element bind ing protein,ChREBP)是最近发现和分离的一种重要的转录调控因子,它直接激活多个参与糖酵解和脂肪合成基因的表达,从而调控糖代谢和脂肪酸合成。研究ChREBP表达的调控... 详细信息

碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate response element bind ing protein,ChREBP)是最近发现和分离的一种重要的转录调控因子,它直接激活多个参与糖酵解和脂肪合成基因的表达,从而调控糖代谢和脂肪酸合成。研究ChREBP表达的调控机制及生物学效应,将有助于全面认识肥胖、糖尿病等代谢综合征的发病机制。本文综述了碳水化合物调控元件(carbohydrate response ele-ment,ChRE)及ChREBP的结构,ChREBP DNA结合活性的活化过程和分子机制,以及对靶基因的作用。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白转录因子糖酵解脂肪合成

转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白对肝脏糖脂代谢的调节作用

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第二军医大学学报 2011年第3期32卷 318-322页

作者：周露婷章卫平第二军医大学基础部病理生理学教研室上海200433

肝脏是体内糖脂代谢的重要器官,转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是调节肝脏糖酵解及脂肪合成的重要转录因子。ChREBP与Max样蛋白X以异二聚体的形式调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异... 详细信息

肝脏是体内糖脂代谢的重要器官,转录因子碳水化合物反应元件结合蛋白(ChREBP)是调节肝脏糖酵解及脂肪合成的重要转录因子。ChREBP与Max样蛋白X以异二聚体的形式调控葡萄糖利用及转化为脂肪过程中大量基因的表达。在ob/ob小鼠肝细胞特异性敲除ChREBP基因后能明显改善其脂肪肝及胰岛素抵抗。阐明ChREBP对糖脂代谢的调控机制及其生物学功能,可进一步解释葡萄糖诱导脂肪形成的过程,并有望为脂肪肝等代谢性疾病的干预治疗提供新的思路。本文对ChREBP的结构特征、调控机制、生物学功能及其与疾病的关系等最新进展进行综述。

关键词：碳水化合物反应元件结合蛋白糖酵解脂肪生成脂肪肝