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硫酸小檗碱微球制剂性状及稳定性研究

中国家禽 2020年第7期42卷 29-35页

作者：张艳王丽坤朱庆贺杨旭东王爽陈曦苗艳史同瑞黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

研究旨在考察硫酸小檗碱微球制剂的性状及稳定性。采用紫外分光光度法测定硫酸小檗微球的药物含量,并通过影响因素试验、加速试验、长期稳定性试验考察了温度((40±2)℃)、光照((4 500±500)lx)、冷藏(-4℃)和冷冻(-20℃)等因素对硫酸... 详细信息

研究旨在考察硫酸小檗碱微球制剂的性状及稳定性。采用紫外分光光度法测定硫酸小檗微球的药物含量,并通过影响因素试验、加速试验、长期稳定性试验考察了温度((40±2)℃)、光照((4 500±500)lx)、冷藏(-4℃)和冷冻(-20℃)等因素对硫酸小檗碱微球制剂的影响。结果显示:温度是影响硫酸小檗碱微球制剂稳定性的主要因素,高温能够使其黏度加大和硫酸小檗碱含量降低(P0.05);在加速试验与长期试验中,硫酸小檗碱微球制剂的p H值、粒径、沉降体积比、重分散性和硫酸小檗碱含量变化不明显(P>0.05),硫酸小檗碱微球制剂经振荡易于混悬均匀,未发现微球凝结现象。综上所述,制备的硫酸小檗碱微球制剂性状及稳定性良好,在室温保存24个月各项指标仍符合质量要求。

关键词：硫酸小檗碱微球稳定性

硫酸小檗碱微球制剂在绵羊体内的药代动力学研究

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畜牧与兽医 2020年第9期52卷 62-66页

作者：朱庆贺张艳王丽坤杨旭东王爽陈曦王观悦穆永才罗天瑶史同瑞黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

为研究硫酸小檗碱微球在绵羊体内的药代动力学,选取10只绵羊,随机分为2组,分别颈部皮下注射2%硫酸小檗碱微球制剂和2%硫酸小檗碱水溶液,在不同时间点颈静脉采血,经前处理后利用高效液相色谱进行含量检测。通过DAS2.1.1软件进行数据统计... 详细信息

为研究硫酸小檗碱微球在绵羊体内的药代动力学,选取10只绵羊,随机分为2组,分别颈部皮下注射2%硫酸小檗碱微球制剂和2%硫酸小檗碱水溶液,在不同时间点颈静脉采血,经前处理后利用高效液相色谱进行含量检测。通过DAS2.1.1软件进行数据统计分析,结果显示硫酸小檗碱微球组达峰时间Tmax为8 h,消除半衰期T1/2Z为5.22 h,达峰浓度Cmax为0.31μg/mL,清除率CLz/F为0.46 L/(kg·h);而硫酸小檗碱水溶液组达峰时间Tmax为1 h,消除半衰期T1/2Z为2.35 h,达峰浓度Cmax为0.28μg/mL,清除率CLz/F为2.21 L/(kg·h)。结果表明,硫酸小檗碱微球制剂与硫酸小檗碱水溶液相比具有更迟的达峰时间(P<0.05),更长的消除半衰期(P<0.05),在体内可起到缓释的效果。

关键词：硫酸小檗碱微球药代动力学缓释

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硫酸小檗碱微球体外释药性研究

动物医学进展 2020年第8期41卷 78-81页

作者：王丽坤张艳朱庆贺杨旭东陈曦王爽史同瑞黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

为预测硫酸小檗碱微球的体内释放效应,以及制备更加符合机体生理特点的微球制剂,以硫酸小檗碱为模型药物,制备了壳聚糖-海藻酸钠载药微球。以生理盐水、人工肠液和人工胃液为释放介质,采用转篮法测定了载药微球在1 h^48 h的药物累计释... 详细信息

为预测硫酸小檗碱微球的体内释放效应,以及制备更加符合机体生理特点的微球制剂,以硫酸小檗碱为模型药物,制备了壳聚糖-海藻酸钠载药微球。以生理盐水、人工肠液和人工胃液为释放介质,采用转篮法测定了载药微球在1 h^48 h的药物累计释放度。结果表明,在释放试验的1 h^12 h,人工肠液中的药物释放速度较快,在12 h药物累计释放率达到57.18%,而在生理盐水和人工胃液中的药物释放速度较慢,累计释放率分别为23.07%和11.04%,至48 h,在人工胃液、生理盐水和人工肠液中的药物累计释放率分别达到24.99%、51.29%和91.01%。在人工胃液中符合Higuchi方程,在人工肠液和生理盐水中的释放行为符合一级拟合方程,表明硫酸小檗碱壳聚糖-海藻酸钠微球具有良好的缓释性能。

关键词：硫酸小檗碱微球体外释药

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硫酸小檗碱对铜绿微囊藻生物活性的评价

农药 2012年第5期51卷 382-384页

作者：胡豫杰倪汉文中国农业大学农学与生物技术学院北京100193

[目的]评价硫酸小檗碱对水华蓝藻铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生物抑制活性。[方法]实验测定了藻液光密度和叶绿素a含量2个生物量指标的变化。[结果]以上2种方法得到硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的EC50值分别为1.627、0.851 mg a.i... 详细信息

[目的]评价硫酸小檗碱对水华蓝藻铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生物抑制活性。[方法]实验测定了藻液光密度和叶绿素a含量2个生物量指标的变化。[结果]以上2种方法得到硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的EC50值分别为1.627、0.851 mg a.i./L。[结论]试验结果表明硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的生长有良好的抑制作用。

关键词：铜绿微囊藻硫酸小檗碱抑制光密度叶绿素a含量

硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的药动学及冰片对其影响作用研究

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硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的药动学及冰片对其影响作用研究

作者：马畅山东农业大学

学位级别：硕士

小檗碱俗称黄连素,是中药黄连、黄柏等药材的主成分,小檗碱可从天然植物中提取,也可以人工合成,临床应用多为人工合成,常用其硫酸盐。硫酸小檗碱具有抗菌、杀菌的作用,在畜禽业常用于治疗细菌性疾病。由于硫酸小檗碱相对吸收较差,为了... 详细信息

小檗碱俗称黄连素,是中药黄连、黄柏等药材的主成分,小檗碱可从天然植物中提取,也可以人工合成,临床应用多为人工合成,常用其硫酸盐。硫酸小檗碱具有抗菌、杀菌的作用,在畜禽业常用于治疗细菌性疾病。由于硫酸小檗碱相对吸收较差,为了提高其口服吸收效果,本试验研究不同剂量的硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的动力学过程,以及配伍冰片后,冰片对硫酸小檗碱吸收的影响。以健康白羽肉鸡为试验动物,通过口服给药,在给药前及给药后不同时间点,从鸡翅下静脉采集0.5 mL血液,放入加有肝素离心管中,高速离心取出血浆。血浆样品用乙腈沉淀蛋白法预处理,苯甲酸作为内标。色谱条件为:检测波长为346 nm;流动相为:乙腈+磷酸盐缓冲液(0.05 mol/L磷酸二氢钾:0.05 mol/L庚烷磺酸钠(1:1),加入0.2%的三乙胺,并使用磷酸调节pH值至3.0±0.1)(37:63,v/v);流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL。运用高效液相色谱法测定在白羽肉鸡体内硫酸小檗碱血药浓度及含量,计算硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的药动学参数,研究硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内药动学过程。通过测定低、中、高三个剂量组(50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg)硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的血药浓度,计算其药动学参数,低、中、高三剂量组硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的主要药动学参数为:药峰浓度C为(142.70±41.69、179.62±109.30、439.83±249.58)ng/mL,药峰时间T分别为(3.83±0.41、3.17±0.98、3.17±1.47)h,半衰期t分别为(15.35±3.76、13.67±3.41、15.36±7.94)h,平均滞留时间MRT分别为(14.95±2.05、13.45±1.63、12.98±1.80)h,清除率CL为(976.00±514.80、788.33±368.61、976.00±514.80)mL·min。冰片与硫酸小檗碱配伍(50 mg/kg冰片+100 mg/kg硫酸小檗碱)给药,硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的主要药动学参数:药峰浓度C为(220.18±87.80)ng/mL,药峰时间T为(4.50±1.22)h,半衰期t为(13.45±2.86)h,平均滞留时间MRT为(14.65±1.83)h,清除率CL为(452.33±167.47)mL·min-1·kg。采用LC-UV法测定了硫酸小檗碱在白羽肉鸡体内的血药浓度的经时变化,研究了硫酸小檗碱在白羽肉鸡的药动学行为,结果表明冰片可提高硫酸小檗碱在白羽肉鸡口服给药的生物利用度。

关键词：硫酸小檗碱冰片白羽肉鸡 LC-UV法药代动力学

硫酸小檗碱对损伤IPEC-J2中EGFR、EGF、IGF1基因mRNA表达的影响

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硫酸小檗碱对损伤IPEC-J2中EGFR、EGF、IGF1基因mRNA表达的影响

作者：徐环叶河北农业大学

学位级别：硕士

仔猪腹泻是各国生猪业发展中遇到的普遍困难。其中,在规模化养殖场病毒性腹泻的发生率呈显著升高趋势,猪轮状病毒(PoRV)的感染作为导致仔猪发生腹泻的重要原因,其主要侵害小肠,使得黏膜受损和消化功能障碍,引发腹泻。近几年,仔猪腹泻导... 详细信息

仔猪腹泻是各国生猪业发展中遇到的普遍困难。其中,在规模化养殖场病毒性腹泻的发生率呈显著升高趋势,猪轮状病毒(PoRV)的感染作为导致仔猪发生腹泻的重要原因,其主要侵害小肠,使得黏膜受损和消化功能障碍,引发腹泻。近几年,仔猪腹泻导致的伤亡率非常高,猪场损失惨重,严重阻碍了养猪业的发展。因而,养猪生产中面临的首要难题,是如何有效保护和快速修复肠道损伤,有效防治仔猪腹泻。近年来,许多文献报道小檗碱具有抗肠黏膜损伤、治疗腹泻、调节机体免疫等药理作用,但关于其对肠道修复因子基因表达的影响报道较少。肠道上黏膜的损伤和后期修复是腹泻病程的重要阶段,决定着腹泻仔猪的转归和预后。其中促进仔猪肠道发育和修复的生长因子主要有表皮生长因子受体(EGFR)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素样生长因子1(IGF)。本试验通过研究硫酸小檗碱(BS)对EGFR、EGF、IGF mRNA表达的影响,从而揭示BS防治腹泻的作用机理,研究如下:1.首先采取在体外培养的Marc145细胞上扩增PoRV,结果测定PoRV的TCID为10/0.1mL,为后期采用PoRV感染IPEC-J2,制备试验模型,打下了良好的基础。2.本研究根据EGFR、EGF、IGF和β-actin基因保守区序列,设计合成特异性引物,扩增各目的基因,通过纯化后回收目的基因,构建重组质粒,最后以重组质粒DNA为模板,利用实时荧光定量PCR(qPCR)构建各目的基因标准曲线。结果各靶基因和内参的相关系数R都大于0.99,标准曲线斜率均在-3.9-3.3之间,扩增效率都大于92.1%。表明各目的基因模板含量的对数值与其Ct值之间呈良好的线性关系,试验中目的基因及内参基因的扩增效率基本一致,可以减小2法所带来的实验误差。为后续样品细胞所要进行的qPCR反应体系确立了标准。3.采用PoRV感染IPEC-J2建立试验模型,继而分攻毒前(预防组)和攻毒后(治疗组)使用BS进行干预,同时设空白对照组,最后定量分析修复因子EGFR、EGF与IGF表达水平。预防组先采用0μmol/L、5μmol/L、10μmol/L三个浓度的BS对IPEC-J2进行预防处理,作用一定时间,再采用PoRV攻击细胞造成损伤;处理组则先采用PoRV对IPEC-J2造成损伤,再用BS对受损的IPEC-J2治疗用药。对不同处理的细胞提取总RNA,采用qPCR法测定BS对IPEC-J2中EGFR、EGF、IGF mRNA表达量的影响。结果显示,PoRV能够显著引起IPEC-J2细胞变性和坏死脱落,然而使用BS药物处理组的IPEC-J2则生长基本良好。同时计算试验组相对于对照组各因子mRNA表达的情况,显示BS有促进病毒损伤IPEC-J2中EGFR mRNA表达,抑制EGF和IGF mRNA表达的作用。预防组和治疗组比较,预防组在时间上表现更提前。在肠黏膜细胞损伤修复过程中,各细胞因子发挥的作用以及作用时间存在差异。提示,中药提取物BS可能通过调节损伤的肠黏膜上皮细胞修复因子的基因表达,进而调控肠道上皮细胞的转化和发育,对损伤的肠道黏膜起到保护和修复功能。

关键词：仔猪肠黏膜上皮细胞猪轮状病毒肠道修复因子硫酸小檗碱 qPCR

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硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的活性及其作用机理

硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的活性及其作用机理

作者：王欣华中农业大学

学位级别：硕士

近年来,有害蓝藻水华在世界各地富营养水域中频繁发生,这一现象已成为水生生态系统中一个普遍存在的问题。就目前防除效果来看,硫酸铜和部分除草剂等化学除藻方法具有明显优势,但这类化学物质在使用过程中引起了水环境的二次污染问题,... 详细信息

近年来,有害蓝藻水华在世界各地富营养水域中频繁发生,这一现象已成为水生生态系统中一个普遍存在的问题。就目前防除效果来看,硫酸铜和部分除草剂等化学除藻方法具有明显优势,但这类化学物质在使用过程中引起了水环境的二次污染问题,并且大多数化学除藻剂选择性不强,对非靶标生物不安全。研究发现硫酸小檗碱对铜绿微囊藻有显著抑制作用,硫酸小檗碱为中药黄连等小檗科植物中的主要成分,具有环境相容性好等优点。本实验研究了硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的活性及其潜在的抑藻机理,研究结果如下：1.硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的生物活性测定为明确硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的活性,实验中硫酸小檗碱的浓度设置为0.625mg/L,1.25mg/L,2.5mg/L,5mg/L,10mg/L,20mg/L,40mg/L和80mg/L,实验结果表明,硫酸小檗碱对铜绿微囊藻的抑制中浓度(IC50)为3.341mg/L,且随着硫酸小檗碱浓度升高,抑制率明显升高。硫酸小檗碱浓度在10mg/L和80mg/L时,对铜绿微囊藻细胞在680.5nm处光密度的抑制率分别为77.83%和85.16%,表明硫酸小檗碱对铜绿微囊藻细胞的生长有显著抑制作用。2.环境因子对硫酸小檗碱抑藻效果的影响研究了pH值、温度、光照、水硬度、氮营养水平及磷营养水平六个环境因子对硫酸小檗碱抑藻效果的影响。硫酸小檗碱的活性随pH值升高,光照强度减弱以及水硬度值增加基本呈下降趋势;高温和低温条件下,硫酸小檗碱的抑藻作用明显增强;N和P营养对硫酸小檗碱的抑藻效果无显著影响。3.硫酸小碱对铜绿微囊藻作用机理的研究对铜绿微囊藻细胞内活性氧含量进行测定,发现80mg/L硫酸小檗碱处理0.5h时,藻细胞内活性氧含量急剧升高,且随处理时间延长逐渐下降;藻细胞H+流速与叶绿素荧光实验结果表明,经硫酸小檗碱处理2h后,藻细胞膜通透性增强,部分H+外排,光合效率逐渐降低;从电子显微镜拍摄的照片可以看出,硫酸小檗碱处理24h时,藻细胞膜上出现明显孔洞。由以上结果可以推测硫酸小檗碱对铜绿微囊藻潜在的抑制机理主要是阻断铜绿微囊藻细胞电子传递,引起藻细胞氧化损伤,导致光合机能受损,进而引起藻细胞膜穿孔甚至破裂,最后导致藻细胞死亡

关键词：硫酸小檗碱铜绿微囊藻环境因子抑制机理

中药HHK注射液中黄芩甙和硫酸小檗碱的薄层色谱-分光光度分析法

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中国药科大学学报 1993年第3期24卷 184-186页

作者：刘丛盛周宪晖刘文英中国药科大学药物分析教研室

HHK注射液是由黄芩甙、黄柏、苦参等组成的一种中药针剂,具有明显的消炎、利尿、兴奋呼吸等功能。其中药理作用明确的主要成分有黄芩甙、硫酸小檗碱和苦参碱。

关键词： HHK 黄芩甙硫酸小檗碱针剂分析

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高效液相色谱法测定微球中硫酸小檗碱的含量

中国兽药杂志 2020年第2期54卷 34-38页

作者：朱庆贺王丽坤张艳杨旭东王爽陈曦王观悦穆永才罗天瑶史同瑞黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院黑龙江齐齐哈尔161005

建立了测定微球中硫酸小檗碱含量的高效液相色谱法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈-水(45∶55)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长349 nm,进样量5μL,柱温30℃。硫酸小檗碱浓度在0.098~49.00μg/mL时,其峰面积与浓度线... 详细信息

建立了测定微球中硫酸小檗碱含量的高效液相色谱法(HPLC)。采用C18色谱柱(4.6×250 mm,5μm),以乙腈-水(45∶55)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长349 nm,进样量5μL,柱温30℃。硫酸小檗碱浓度在0.098~49.00μg/mL时,其峰面积与浓度线性关系良好(R 2=0.9991),无杂质干扰,稳定性高,平均回收率为98.98%。本操作方法简便,分析快速,结果准确,适用于微球中硫酸小檗碱的含量测定。

关键词：硫酸小檗碱微球高效液相色谱法含量