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幽门螺杆菌硫氧还蛋白的研究进展

胃肠病学 2022年第5期27卷 311-315页

作者：关馨宁静张静丁士刚北京大学第三医院消化科、幽门螺杆菌感染及上胃肠疾病防治研究北京市重点实验室 100191

幽门螺杆菌(Hp)感染是胃癌发生的主要原因之一。在欧美国家,Hp毒力因子细胞毒素相关基因A(CagA)和空泡毒素A(VacA)与Hp的致病性密切相关。然而在东亚国家,CagA的阳性率高达90%,并不能完全解释Hp致病性的差异,可能存在其他致病因子。本... 详细信息

幽门螺杆菌(Hp)感染是胃癌发生的主要原因之一。在欧美国家,Hp毒力因子细胞毒素相关基因A(CagA)和空泡毒素A(VacA)与Hp的致病性密切相关。然而在东亚国家,CagA的阳性率高达90%,并不能完全解释Hp致病性的差异,可能存在其他致病因子。本课题组的前期研究发现硫氧还蛋白1(Trx1)可能为高致病性Hp的毒力因子,并针对Hp Trx1在细胞学、动物学、人体组织学等方面进行了一系列研究。本文就Hp Trx1的研究进展作一综述。

关键词：幽门螺杆菌硫氧还蛋白质类胃肿瘤

右美托咪定对肠缺血再灌注小鼠TXNIP/ASK1信号通路的影响

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中华麻醉学杂志 2023年第4期43卷 445-449页

作者：冷玉芳李晓曦张健民陈凤石亚静刘永强兰州大学第一临床医学院兰州730000 兰州大学第一医院麻醉科兰州730000

目的评价右美托咪定对肠缺血再灌注小鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)信号通路的影响。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只,8~10周龄,体质量18~22 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)... 详细信息

目的评价右美托咪定对肠缺血再灌注小鼠硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/细胞凋亡信号调节激酶1(ASK1)信号通路的影响。方法SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠32只,8~10周龄,体质量18~22 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、TXNIP抑制剂白藜芦醇组(Res组)和右美托咪定组(Dex组)。采用夹闭肠系膜上动脉45 min后恢复灌注120 min的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。Res组小鼠造模前腹腔注射白藜芦醇30 mg/kg,Dex组小鼠于缺血前30 min腹腔注射右美托咪定25μg/kg。于再灌注120 min时,心脏穿刺法采集小鼠血标本,随后处死小鼠取小肠组织,光镜下观察病理学结果并行Chiu评分;采用ELISA法检测血清二胺氧化酶(DAO)浓度;采用Western blot法检测小肠组织TXNIP、ASK1和cleaved-caspase-3的表达水平。结果与Sham比较,I/R组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率升高,TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达上调(P<0.05);与I/R组比较,Res组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率降低,TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达下调(P<0.05);与I/R组比较,Dex组Chiu评分、血清DAO浓度和肠黏膜上皮细胞凋亡率降低,TXNIP、ASK-1和cleaved-caspase-3表达下调(P<0.05)。结论右美托咪定减轻小鼠肠缺血再灌注损伤的机制可能与抑制TXNIP/ASK1信号通路,减少细胞凋亡有关。

关键词：右美托咪啶再灌注损伤肠硫氧还蛋白质类 MAP激酶激酶激酶5

利拉鲁肽对高脂饮食诱导的糖尿病小鼠肾损伤的影响及机制初步探讨

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中华医学杂志 2019年第20期99卷 1576-1581页

作者：符畅梁日英徐芬梁华穆攀伟朱延华谭莺邓洪容王美君蔡梦茵中山大学附属第三医院内分泌与代谢病学科广州510630

目的探讨利拉鲁肽对高脂饮食诱导的糖尿病小鼠的肾脏保护作用及其可能机制。方法C57BL/6J雄性8周龄小鼠高脂诱导12周,采用随机数字表法分为高脂饮食组(8只)和高脂干预组(9只),同时设对照组,分为正常饮食组(4只)、正常干预组(4只)。正常... 详细信息

目的探讨利拉鲁肽对高脂饮食诱导的糖尿病小鼠的肾脏保护作用及其可能机制。方法C57BL/6J雄性8周龄小鼠高脂诱导12周,采用随机数字表法分为高脂饮食组(8只)和高脂干预组(9只),同时设对照组,分为正常饮食组(4只)、正常干预组(4只)。正常干预组和高脂干预组腹腔注射利拉鲁肽(400 μg·kg-1·d^-1),正常饮食组和高脂饮食组腹腔注射等量生理盐水,连续注射8周。酶联免疫吸附(ELISA)法检测尿白蛋白、肌酐水平,HE染色观察肾脏组织形态学特征,Western印迹检测肾脏沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)和硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)的表达水平。结果高脂干预组与高脂饮食组相比,利拉鲁肽干预后糖尿病小鼠体重[(30.98±1.29)g比(39.43±2.58)g]、空腹血糖[(7.21±0.15)mmol/L比(9.55±0.29)mmol/L]及尿白蛋白肌酐比[(205.48±17.14)μg/mg比(319.86±34.14)μg/mg]均降低(均P<0.05)。HE染色显示,高脂干预组糖尿病小鼠比高脂饮食组小鼠的肾小球肥大情况改善。Western印迹结果显示,与高脂饮食组相比,高脂干预组小鼠肾脏TXNIP表达(0.41±0.10比3.50±0.70)下降,SIRT1表达(0.75±0.15比0.32±0.04)升高(均P<0.05)。结论利拉鲁肽可能通过上调SIRT1和下调TXNIP表达改善高脂饮食诱导的糖尿病小鼠肾脏损伤。

关键词：糖尿病肾病胰高血糖素样肽1 硫氧还蛋白质类沉默信息调节因子2相关酶1 利拉鲁肽

人硫氧还蛋白基因表达对病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制

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中华心血管病杂志 2018年第6期46卷 444-449页

作者：郭玉博周令望陈福来邹宁哈尔滨医科大学第二临床医学院 150081 哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心中心实验室哈尔滨医科大学病理教研室

目的探讨携带人硫氧还蛋白（hTRX）的重组腺病毒对柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制。方法雄性Balb/c小鼠60只，4周龄，体重l2-14 g，分为3组，即对照组、心肌炎组和hTRX组，每组20只。hTRX组及心肌炎组小... 详细信息

目的探讨携带人硫氧还蛋白（hTRX）的重组腺病毒对柯萨奇B3（CVB3）病毒性心肌炎小鼠心肌炎症反应的影响及其机制。方法雄性Balb/c小鼠60只，4周龄，体重l2-14 g，分为3组，即对照组、心肌炎组和hTRX组，每组20只。hTRX组及心肌炎组小鼠腹腔注射100 TCID50的CVB3病毒0.1 ml，对照组同时给予等量的生理盐水。接种病毒前2 d，hTRX组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5×108 pfu/ml的TRX重组腺病毒30 μl，心肌炎组小鼠心包腔穿刺注射滴度为2.5×108 pfu/ml的空载体重组腺病毒30 μl。于接种病毒的第7天将小鼠处死取心脏。心脏病理切片苏木素伊红染色观察各组心肌病理改变，电镜观察心肌超微结构改变，Western blot法检测心肌组织核因子κB（NF-κB）蛋白含量，ELISA法检测心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素1β（IL-1β）蛋白含量。结果（1）各组小鼠心肌组织光镜观察结果：心肌炎组小鼠心肌炎病变检出14只，hTRX组检出5只，对照组未检出。光镜下观察可见，对照组小鼠心肌组织未见炎性细胞浸润及坏死灶，细胞排列整齐，呈圆柱状，细胞质丰富红染，胞核卵圆，位于细胞中央；心肌炎组小鼠可见局灶性心肌坏死和炎性细胞浸润；hTRX组小鼠可见点状心肌坏死和炎性细胞浸润。（2）各组小鼠心肌组织透射电镜观察结果：心肌炎组小鼠心肌细胞肿胀、大量肌丝溶解、线粒体肿胀空化。而与心肌炎组相比，hTRX组小鼠心肌细胞肿胀较轻、肌丝溶解较少、线粒体肿胀空化较少。（3）各组小鼠心肌细胞核中NF-κB的蛋白含量：心肌炎组小鼠心肌组织细胞核NF-κB蛋白含量高于对照组（F=6.237，P〈0.01）, hTRX组则低于心肌炎组（F=6.009，P〈0.01）。（4）各组小鼠心肌组织中TNF-α和IL-1β的蛋白含量：心肌炎组小鼠心肌组织TNF-α和IL-1β蛋白含量均高于对照组（F值分别为8.670和8.462，P均〈0.01），而hTRX组则均低于心肌炎组（F值分别为7.542和7.219，P均〈0.01）。结论hTRX可减轻病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤和炎症反应，其机制可能与hTRX可下调NF-κB、TNF-α和IL-1β蛋白表达密切相关。

关键词：心肌炎硫氧还蛋白质类炎症

血清TXNIP在2型糖尿病视网膜病变患者中的表达及其与氧化应激的关系

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天津医药 2022年第2期50卷 186-190页

作者：陶琳赵晓莲齐淑芳佳木斯大学基础医学院生理教研室 154007 佳木斯市中心医院

目的探讨血清硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)在2型糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达及其与氧化应激的关系。方法选取DR患者(DR组)82例,根据疾病严重程度将其分为增生性糖尿病视网膜病变(PDR)组(42例)以及非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)组... 详细信息

目的探讨血清硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)在2型糖尿病视网膜病变(DR)患者中的表达及其与氧化应激的关系。方法选取DR患者(DR组)82例,根据疾病严重程度将其分为增生性糖尿病视网膜病变(PDR)组(42例)以及非增生性糖尿病视网膜病变(NPDR)组(40例)。另选取健康志愿者(对照组)50例以及单纯2型糖尿病患者(糖尿病组)50例。收集所有研究对象的一般资料。采用酶联免疫吸附试验检测血清TXNIP水平,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)水平,二硫代二硝基苯甲酸比色法测定还原型谷胱甘肽(GSH)水平,硫代巴比妥法检测血清丙二醛(MDA)水平。全自动生化分析仪测定糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)。结果与对照组比较,糖尿病组和DR组TG、TC升高(P<0.05),但后2组间差异无统计学意义。对照组、糖尿病组及DR组HbA1c、FPG、MDA及TXNIP依次增加,而SOD和GSH依次降低(均P<0.05)。与PDR组比较,NPDR组MDA和TXNIP降低,而SOD和GSH升高(P<0.05);2组HbA1c、FPG、TG及TC差异无统计学意义。较高水平的MDA和TXNIP是DR患者发生PDR的危险因素,而较高水平的SOD和GSH则是保护因素(P<0.05)。血清TXNIP诊断DR的ROC曲线下面积为0.803(95%CI:0.730~0.875),当截断值取3.01μg/L时,敏感度、特异度和约登指数分别为53.66%、94.00%和0.477。结论 TXNIP在DR患者血清中呈异常高表达,是DR患者发生PDR的危险因素,且可能通过调节氧化应激反应促进疾病的发生、发展,对临床诊断DR有一定辅助价值。

关键词：糖尿病视网膜病变糖尿病 2型氧化性应激硫氧还蛋白质类 Logistic模型 ROC曲线硫氧还蛋白互作蛋白

硫氧还蛋白-1高表达的幽门螺杆菌慢性感染蒙古沙土鼠模型的建立与评价

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北京大学学报（医学版） 2016年第5期48卷 766-770页

作者：张贺军刘琳娜张超石岩岩丁士刚北京大学第三医院消化科幽门螺杆菌感染及上胃肠疾病防治研究北京市重点实验室北京100191 华北理工大学附属医院消化内科河北唐山063000

目的:建立硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因高表达的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)慢性感染蒙古沙土鼠模型,评价Trx1在Hp长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法:健康雄性蒙古沙土鼠75只,随机分为3组:Trx1高表达H... 详细信息

目的:建立硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因高表达的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)慢性感染蒙古沙土鼠模型,评价Trx1在Hp长期定植导致胃黏膜的病变及其致癌性中的作用。方法:健康雄性蒙古沙土鼠75只,随机分为3组:Trx1高表达Hp组(30只),Trx1低表达Hp组(30只)和对照组(15只)。分别采用Trx1高表达和低表达Hp菌株灌胃,建立Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃模型。在接种Hp后第4、20、34、48、70和90周分批处死动物,行快速尿素酶实验和Warthin-Starry银染判定Hp定植情况,HE染色观察胃黏膜病理改变。结果:(1)成功建立了Trx1高表达和低表达Hp长期感染蒙古沙土鼠腺胃的动物模型。(2)Trx1高表达和低表达Hp组胃黏膜病变随时间延长而逐渐加重,Trx1高表达Hp组出现黏膜不平及结节性病变的时间分别为第20周和第34周,早于Trx1低表达Hp组(分别为第48周和第70周);Trx1高表达Hp组从第48周起观察到黏膜糜烂(3只),而Trx1低表达Hp组和对照组在整个实验过程中均未见明显的黏膜糜烂改变。Trx1高表达Hp组出现病变的时间和病变范围明显早于/重于Trx1低表达Hp组。(3)Trx1高表达Hp组在接种后第34周可观察到上皮细胞的轻度异型增生,明显早于Trx1低表达Hp组(第48周)。第90周,Trx1高表达Hp组有71.4%(5/7)、Trx1低表达Hp组有42.8%(3/7)检出管状腺癌(P=0.592),均为早期癌,且Trx1高表达Hp组有1例为黏膜下癌,此外,Trx1高表达Hp组还观察到2例上皮细胞重度异型增生(28.6%,2/7),而在Trx1低表达Hp组仅观察到3例上皮细胞中度异型增生(42.8%,3/7)。结论:Trx1高表达和低表达的Hp可稳定定植于蒙古沙土鼠腺胃,出现类似于人感染Hp后出现的各种病理变化,并诱发腺癌的发生;Trx1高表达Hp组胃黏膜病变明显重于Trx1低表达Hp组,Trx1可能是我国人群Hp致病及致癌的毒力因子。

关键词：硫氧还蛋白质类螺杆菌,幽门胃肿瘤模型,动物沙鼠亚科

慢性高眼压大鼠外侧膝状体硫氧还蛋白抗氧化系统的变化研究

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中华眼科杂志 2015年第2期51卷 120-125页

作者：陈歆雅张圣海吴继红孙兴怀复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科上海200031

目的研究慢性高眼压大鼠外侧膝状体硫氧还蛋白抗氧化系统的动态变化及其可能的分子调控机制.方法采用烧灼巩膜上静脉诱导高眼压的方法建立大鼠慢性高眼压模型,有眼作为实验眼（实验组）,左眼仅分离静脉但不烧灼,作为假手术眼（假手术... 详细信息

目的研究慢性高眼压大鼠外侧膝状体硫氧还蛋白抗氧化系统的动态变化及其可能的分子调控机制.方法采用烧灼巩膜上静脉诱导高眼压的方法建立大鼠慢性高眼压模型,有眼作为实验眼（实验组）,左眼仅分离静脉但不烧灼,作为假手术眼（假手术组）.高眼压模型大鼠共25只,4只大鼠作为空白对照组.在眼压升高后不同时间点（1、3、7、14、28 d）采用免疫印迹法和RT-PCR方法检测硫氧还蛋白Trx1、Trx2蛋白和mRNA表达以及硫氧还蛋白调控基因Txnip、Sesn2和Srxn1的表达,并按照时间进行分组.在各时间分组组内数据采用配对t检验;在各时间分组组问采用单因素方差分析.结果大鼠高眼压3d,硫氧还蛋白抗氧化系统中硫氧还蛋白表达灰度值为0.83±0.02,较对照组（1.02±0.04）有所下降,差异具有统计学意义（F=4.871,P=0.005）;14d组,Trx1的mRNA相对表达量0.63 ±0.04,较对照组（0.96±0.03）有所下调,差异具有统计学意义（t=13.647,P＜0.05）;7 d组,上游基因Sesn2 mRNA相对表达量为0.53±0.11,较对照组（0.96±0.03）有所下降（t=13.812,P＜0.05）;7d组和14 d组Srxn1的mRNA相对表达量分别为0.71 ±0.05、0.49±0.03,较对照组（0.97±0.02、0.96 ±0.02）有所下降（7d组t=9.451,P＜0.05; 14 d组t=13.611,P＜0.01）,差异具有统计学意义.抑制基因Txinp mRNA表达分别为1.83±0.04、2.37±0.03,较对照组（1.00 ±0.02、0.95 ±0.03）有所上调,差异具有统计学意义（7 d组t=-7.924,P＜0.05,14 d组t=12.637,P ＜0.01）.结论慢性高眼压大鼠外侧膝状体存在氧化损伤,且发生氧化损伤时外侧膝状体内Trx系统Trx1、Trx2受多途径抑制发生不同程度表达下调,其上游抑制基因表达上调,上游促进基因表达下调.

关键词：高眼压膝状体硫氧还蛋白质类氧化性应激

血清OSM、Trx-1及HBP与脓毒症严重程度相关性及对临床转归的预测研究

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临床和实验医学杂志 2024年第5期23卷 473-477页

作者：周滟李晓茜汪思琴乐山市市中区人民医院重症医学科四川乐山614000 乐山市人民医院重症医学科四川乐山614000

目的分析血清抑癌蛋白M(OSM)、硫氧还蛋白-1(Trx-1)及肝素结合蛋白(HBP)与脓毒症严重程度相关性及对临床转归的预测。方法回顾性选取2021年1月至2023年6月乐山市市中区人民医院收治的120例脓毒症患者作为研究对象,根据Sepsis-3.0脓毒症... 详细信息

目的分析血清抑癌蛋白M(OSM)、硫氧还蛋白-1(Trx-1)及肝素结合蛋白(HBP)与脓毒症严重程度相关性及对临床转归的预测。方法回顾性选取2021年1月至2023年6月乐山市市中区人民医院收治的120例脓毒症患者作为研究对象,根据Sepsis-3.0脓毒症诊断标准,分为脓毒症组(n=82)和脓毒症休克组(n=38)。检测所有患者血清OSM、Trx-1及HBP水平,并进行急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ),比较2组患者及不同APACHEⅡ评分分层组间血清OSM、Trx-1及HBP水平,使用Spearman相关性分析对血清OSM、Trx-1及HBP水平与APACHEⅡ评分的相关性进行分析;根据患者的临床转归,将患者分为死亡组和存活组,比较两组血清OSM、Trx-1及HBP水平,使用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清OSM、Trx-1及HBP对脓毒症临床转归的预测效能。结果脓毒症休克组血清OSM及HBP水平分别为(503.68±123.54)pg/mL、(145.53±36.71)ng/mL,均高于脓毒症组[(300.12±56.26)pg/mL、(45.21±10.29)ng/mL],Trx-1水平为(3.23±1.01)ng/mL,低于脓毒症组[(6.89±2.57)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。随着脓毒症患者APACHEⅡ评分升高,血清OSM及HBP水平随之升高,Trx-1水平随之降低;血清OSM、Trx-1及HBP水平在APACHEⅡ评分各分层组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。经Spearman相关性分析,脓毒症患者APACHEⅡ评分与血清OSM及HBP水平呈正相关(P<0.05),与Trx-1水平呈负相关(P<0.05)。死亡组患者血清OSM及HBP水平分别为(600.23±156.86)pg/mL、(168.42±52.31)ng/mL,均高于存活组[(180.16±28.79)pg/mL、(25.09±7.15)ng/mL],Trx-1水平为(1.89±0.52)ng/mL,低于存活组[(10.45±3.84)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。经ROC曲线分析,血清OSM、Trx-1联合HBP预测脓毒症患者28 d死亡的曲线下面积为0.921,大于单项指标OSM的0.630、Trx-1的0.686和HBP的0.606(P<0.05)。结论血清OSM、Trx-1及HBP与脓毒症严重程度密切相关,三者联合可以提高对患者临床转归的预测效能,值得进一步研究应用。

关键词：硫氧还蛋白质类急性生理学和长期健康评价脓毒症抑癌蛋白M 肝素结合蛋白严重程度临床转归

幽门螺杆菌硫氧还蛋白-1基因克隆及其重组蛋白表达与活性测定

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北京大学学报（医学版） 2014年第2期46卷 190-194页

作者：石岩岩丁士刚张婷鲁凤民张静王晔北京大学第三医院消化科北京100191 北京大学基础医学院病原生物学系北京100191

目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性。方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引... 详细信息

目的:克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)硫氧还蛋白-1(thioredoxin-1,Trx1)基因,构建含有该目的基因的原核细胞表达载体,表达纯化该蛋白,并检测该蛋白活性。方法:以Hp国际标准菌株26695的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法扩增Hp Trx1的cDNA,连接至pEASY-T1载体构建成pEASY-T1-Hp Trx1。对pEASY-T1-Hp Trx1进行双酶切后将目的片段连接至pET-30a,形成pET-30a-Hp Trx1重组质粒,并在大肠杆菌BL21 plys S中进行表达。应用镍柱亲和层析纯化重组的Hp Trx1蛋白,并检测其二硫键还原酶的活性。结果:测序结果显示Hp Trx1 cDNA成功连入pET-30a质粒,且与GenBank(HP0824)完全一致。含质粒pET-30a-Hp Trx1的大肠杆菌BL21 plys S成功表达出Hp Trx1蛋白,活性检测显示重组Hp Trx1蛋白具有二硫键还原酶的活性。结论:成功构建原核表达载体pET-30a-Hp Trx1,并表达、纯化出有活性的Hp Trx1蛋白,为进一步研究Hp Trx1的生物学活性及其对肿瘤发生的作用机制奠定了基础。

关键词：幽门螺杆菌硫氧还蛋白质类重组蛋白质类遗传载体