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上海师范大学学报（自然科学版） 2004年第2期33卷 65-69页

作者：祝宁宁上海师范大学生命与环境科学学院上海200234

在水溶液中合成了表面具有自由羧基的硫化铅(PbS)纳米颗粒,以乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC)为偶联活化剂,将其标记于人工合成的5′端氨基修饰的寡聚核苷酸(ODN)片段上,制备成PbS纳米颗粒标记DNA探针。在一定的条件下,使其与... 详细信息

在水溶液中合成了表面具有自由羧基的硫化铅(PbS)纳米颗粒,以乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDAC)为偶联活化剂,将其标记于人工合成的5′端氨基修饰的寡聚核苷酸(ODN)片段上,制备成PbS纳米颗粒标记DNA探针。在一定的条件下,使其与固定在玻碳电极表面的待测DNA序列进行杂交反应,利用阳极溶出示差脉冲伏安法间接测定Pb(Ⅱ)的量,从而实现对互补、非互补DNA片段的识别和电化学检测。同时对该探针的稳定性、选择性进行了讨论。

关键词：硫化铅纳米颗粒电化学DNA探针 DNA杂交

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基于氧化石墨烯和硫化铅纳米颗粒的荧光生物传感器研究

基于氧化石墨烯和硫化铅纳米颗粒的荧光生物传感器研究

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作者：郝丽娟湖南大学

学位级别：硕士

纳米材料指的是三维空间尺寸中至少有一维处于纳米量级(1-100nm)的材料，纳米材料具有表面效应、小尺寸效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应。自20世纪80年代起，纳米科学使材料的结构从根本上发生了改变，在其他学科和领域不断渗透... 详细信息

纳米材料指的是三维空间尺寸中至少有一维处于纳米量级(1-100nm)的材料，纳米材料具有表面效应、小尺寸效应、量子尺寸效应和宏观量子隧道效应。自20世纪80年代起，纳米科学使材料的结构从根本上发生了改变，在其他学科和领域不断渗透，带动了许多研究领域中热点的不断涌现，目前被广泛应用于物理、化学等许多领域，被公认为21世纪最具前途的科研领域之一。纳米粒子与生物体有着密切的关系：生物体内组分的尺寸一般在5-200nm范围内，这就标志着纳米生物学可以在纳米尺度范围了解生物大分子的精细结构以及其功能关系，获得生命信息。近些年来，纳米技术与生物传感技术相结合，为纳米科学的发展注入了新的活力。蛋白质是生命的物质基础，它是与生命及各种形式的生命活动(进化、物质运转、遗传等)紧密联系在一起的物质，有些蛋白质还可以作为疾病判别与诊断的依据。因此，建立简单、实用的蛋白质检测方法对药物研究、临床诊治等具有重要的意义。三聚氰胺属于难代谢物质，如果进入人和动物体内能够不同程度地导致肾衰竭或者死亡，三聚氰胺还能导致结石从而诱发泌尿系统疾病。因此，严格控制三聚氰胺的使用越来越受到人们关注。但由于现有的三聚氰胺的检测方法存在需要使用大型仪器，检测成本高，操作复杂耗时等缺点，使发展新型的、高灵敏度、好特异性的三聚氰胺检测方法显得尤为重要。本研究论文将两种纳米材料氧化石墨烯和PbS纳米颗粒与生物传感技术相结合，构建新型的生物传感器，针对当前分析化学的发展和医学检验中存在的焦点问题，提出了新颖的传感方法和信号放大模式，设计了高灵敏度的荧光传感器，实现了对多种生命物质的检测。采用荧光分析法、免疫分析法等化学生物传感技术来检测人IgG、DNA甲基化酶、三聚氰胺等，为遗传疾病的快速准确诊断、流行病的现场筛查与群体控制，环境监测，食品安全检测等研究提供新方法。 (1)第二章，我们设计了基于氧化石墨烯的荧光DNA传感器用于甲基化酶活性检测。我们使用一条可以甲基化的DNA底物探针(发夹探针)，在DNA甲基化酶DamMTase的催化下，进行完全甲基化，使用可以特异性切割甲基化位点的限制性内切酶DpnⅠ切割发夹探针，释放ssDNA。然后利用氧化石墨烯(GO)对于ssDNA和dsDNA吸附能力的不同，使荧光信号产生较大的变化，实现信号的输出。该方法易于操作，较低背景干扰，可实现对DNA甲基化酶DamMTase活性的简单，准确，快速，灵敏检测，响应的动态范围可从0.8U/mL到25U/mL。 (2)第三章，我们设计了基于氧化石墨烯的荧光DNA传感器用于三聚氰胺检测。利用胸腺嘧啶(T)与三聚氰胺(Melamine)的特异性结合的原理，我们设计一种基于氧化石墨烯的荧光传感器，通过聚T探针上的胸腺嘧啶(T)与三聚氰胺(Melamine)的特异性结合前后，聚T探针与氧化石墨烯的作用力的变化而引起的荧光信号的变化，来实现对三聚氰胺的特异性检测。该方法设计简单、快速、成本低且灵敏度高，将在食品安全、生物分析等领域具有广阔的应用前景。实验中采用荧光光谱法进行了表征。该方法较低背景干扰，易于操作，响应的动态范围可从10nM到1200nM。 (3)第四章，我们设计了基于硫化铅纳米颗粒放大的免疫传感器用于人免疫球蛋白G(IgG)的检测。反应分两步进行。第一步：在聚苯乙烯微孔板表面固定羊抗人IgG，接着加入分析物人IgG，通过免疫夹心反应与标记PbS纳米颗粒的羊抗人IgG结合，再加入硝酸将PbS纳米颗粒溶解，使Pb完全释放出来，得到Pb样品。第二步： Pb相应的脱氧核酶DNAzyme底物链标记荧光基团FAM，酶链标记猝灭基团DABCYL，在一定条件下，使上述两条链形成稳定的DNAzyme，这时FAM的荧光被猝灭。当加入上述免疫反应所得Pb样品时，DNAzyme被特异性切割，标记荧光基团FAM的链可以游离出来，所测的荧光信号增强，实现了对分析物H IgG的检测。检测范围从1ng/mL到10μg/mL，检测下限为0.97ng/mL，有望用于临床检测。

关键词：荧光—免疫传感器氧化石墨烯硫化铅纳米颗粒三聚氰胺 DNA甲基化脱氧核酶

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蛋壳膜原位生长PbS纳米颗粒及其机理初探

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化学研究与应用 2011年第7期23卷 907-910页

作者：杨引玲温雅琼李毅袁红雁四川大学化学学院四川成都610064 四川大学化学工程学院四川成都610065 西南化工研究院四川成都610225

基于双扩散原理,在室温条件下,利用活性蛋壳膜具有的特殊渗透功能,成功地在蛋壳膜的活性位点处原位生长出绣球花状的硫化铅纳米颗粒。用X-射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对硫化铅纳米颗粒的形貌和... 详细信息

基于双扩散原理,在室温条件下,利用活性蛋壳膜具有的特殊渗透功能,成功地在蛋壳膜的活性位点处原位生长出绣球花状的硫化铅纳米颗粒。用X-射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)对硫化铅纳米颗粒的形貌和结构进行了表征,并对蛋壳膜上原位生长硫化铅纳米颗粒的生长机理进行了初步探讨。

关键词：硫化铅纳米颗粒双扩散蛋壳膜原位生长

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Synthesis of the PbS Nanoparticle and its Translocation in Plant

Synthesis of the PbS Nanoparticle and its Translocation in P...

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作者：安宁（Hameed Ullah）陕西师范大学

学位级别：硕士

在过去的十年中,金属基纳米颗粒和金属氧化物纳米颗粒（分别为MBNP和MONP）与大块材料相比,因其具有特殊的理化特性和生物活性备受青睐,因此MBNP和MONP的生产和应用显著增加。同时,工程纳米颗粒（NPs）的使用量也在持续增加。在纳米材... 详细信息

在过去的十年中,金属基纳米颗粒和金属氧化物纳米颗粒（分别为MBNP和MONP）与大块材料相比,因其具有特殊的理化特性和生物活性备受青睐,因此MBNP和MONP的生产和应用显著增加。同时,工程纳米颗粒（NPs）的使用量也在持续增加。在纳米材料的生产,运输,消费和废弃过程中,纳米颗粒不可避免地进入生态系统和环境。一旦MBNP和MONP通过直接或间接途径进入农业土壤,就会与农作物发生相互作用,进而通过食物链对动物和人类健康构成威胁。由于PbS纳米材料的潜在毒性和多种纳米颗粒（NPs）在商业用途的过程中被不可避免地被释放到环境中,使其使用及环境行为等方面备受关注。商业NP充当破坏植物细胞的介质,对植物和人类健康构成潜在的毒性。因此,本研究采取化学合成法合成高纯度的PbS纳米粒子（PbS NPs）,并以纳米粒子的植物效应为出发点设计实验,通过玉米幼苗水培实验（1）研究了 PbS NPs对种子萌发和幼苗生长的影响;（2）揭示了PbS NPs对玉米（Zea mays L.）的毒性作用及相应的毒性机理;（3）探索玉米胚芽体内PbS NPs的吸收和运输;（4）阐明了 PbS NPs进入植物的可能途径以及与PbS NPs在植物中的分布和积累有关的机理;（5）阐明了纳米PbS对高等植物的毒理作用定律以及与其原理和机理相对应的毒理作用。在这项研究中,通过化学途径合成了 PbS纳米粒子,并采用XRD,XPS,SEM,HRTEM,EDS等技术手段对PbS NPs进行了表征。合成的PbS NPs的平均物理尺寸为16±6 nm,纯度接近100%。通过郑单958玉米种子萌发实验,发现PbS NPs对玉米种子发芽的影响,结果表明PbS NPs对种子发芽具有植物毒性作用,并且对根系伸长也具有相同的作用。但是,与对照组相比,所有实验组之间都存在一些差异。例如,在6天后,浓度为5、10、20、30、40、50 mg/L的PbS NPs悬浮液和Pb2+会使发芽率降低20.33%,1.33%,20.33%,7.67%,10.33%,与对照组相比,分别为 17.67%,10.33%。同时,在实验条件下,观察到在10和30 mg/L PbS NPs浓度下实验时,PbS NPs具有既促进根伸长又在其他水平发挥抑制作用的双重行为。我们也记录了与其他处理相比,20 mg/L PbS NPs处理下对玉米根伸长的抑制作用。结果表明,随着PbS NPs浓度的升高,植物生物量和根长显著降低,这说明植物毒性取决于PbS NPs的浓度。在PbS NPs处理和Pb2+（1.5 mg/L）处理下,鲜苗生物量分别减少49.11%（5 mg/L PbS NPs）,32.58%（10 mg/L PbS NPs）,62.246%（20 mg/L PbS NPs）,46.23%（30 mg/L）与对照（CK）相比,PbS NPs分别为69.42%（40 mg/L PbS NPs）,56.37%（50mg/L PbS NPs）和62.32%（1.5 mg/L Pb离子）。这表明包括Pb2+组在内的所有PbS NPs处理均显著降低了玉米生物量,但20、30、40mg/L和Pb2+的PbS NPs处理与CK有明显差异。与CK相比,干生物量的5 mg/L,10 mg/L,50 mg/L处理无显著差异,但20、30、40 mg/L和Pb2+组有显著差异。对于玉米幼苗的根鲜重和干重,PbS纳米颗粒悬浮液和Pb2+溶液的浓度影响显著不同,与CK相比也显著不同。但是,暴露于较低浓度（例如5 mg/L,10mg/L的PbS NPs）的玉米幼苗与除CK以外其他浓度的实验组相比,芽和根生物量（新鲜和干燥）有所增加。此外,本研究还探索了玉米幼苗对PbS纳米颗粒的吸收和转运。通过对玉米幼苗的实验以及玉米根部和地上部分总铅含量的测定,可以看出对不同浓度的PbS纳米颗粒进行处理是有效的。将玉米幼苗暴露于不同浓度的PbS NPs（5、10、20、30、40和50 mg/L）和1.5 mg/L Pb2+溶液15天后,玉米芽和根中的Pb浓度随着NPs浓度的增加而增加。与CK相比,植物中PbS NPs与Pb2+的含量也在增加。我们发现在所有处理组中芽的Pb含量显著不同,并且与CK处理组相比也显著不同。以5、10、20、30、40和50 mg/L的PbS NPs水平暴露的玉米幼苗枝条中的Pb浓度与对照相比,分别高出1.7、1.9、1.8、1.9、1.8和2倍,其他实验组分别比Pb离子组高1.2倍以上。但是,在5、10、20、30、40和50mg/L的不同处理水平处理的PbS NPs中,根中Pb含量分别比对照组和2.4、4.0水平实验组高 3.4、5.6、6.5、6.3、5.2 和 6.1 倍,比 Pb2+高 4.6 倍,4.4 倍,3.6 倍,4

关键词：硫化铅纳米颗粒体内吸收植物毒理学易位玉米(Zeamays L.)

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