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多药耐药相关蛋白2与谷胱甘肽共转运体系对肝脏砷代谢的影响

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中华劳动卫生职业病杂志 2006年第5期24卷 278-280页

作者：高怡裴秋玲李国星韩光田凤洁秦秀军张蕊候文胜李秀云天津市卫生防病中心

目的用谷胱甘肽(GSH)合成酶抑制剂丁硫氨酸亚甲矾胺(BSO)抑制大鼠GSH合成,探讨多药耐药相关蛋白2(MRP2)与GSH共转运体系在肝脏砷代谢过程中的作用。方法30只健康Wistar大鼠随机分为5组:第1组为对照组,给予生理盐水;第2～4组为染砷组,分... 详细信息

目的用谷胱甘肽(GSH)合成酶抑制剂丁硫氨酸亚甲矾胺(BSO)抑制大鼠GSH合成,探讨多药耐药相关蛋白2(MRP2)与GSH共转运体系在肝脏砷代谢过程中的作用。方法30只健康Wistar大鼠随机分为5组:第1组为对照组,给予生理盐水;第2～4组为染砷组,分别给予4、10和20 mg／kg体重的亚砷酸钠溶液,隔天染毒1次,2周后将动物处死。第5组为BSO干预组,在实验结束的前3 d,每天大鼠预先腹腔注射2 mmol／kg体重BSO溶液,4 h后再经口给予20 mg／kg体重的亚砷酸钠溶液,其他处理同上。原子吸收分光光度法测定胆汁、肝组织和全血中的总砷含量。蛋白印记法测定肝细胞膜上MRP2的含量改变。结果和对照组比较,各砷染毒组胆汁、肝脏和血砷含量均明显增高,差异有统计学意义(P砷差异无统计学意义(P>0．05)。随着染砷剂量增加,MRP2表达有增加的趋势,且MRP2表达量与胆汁砷的含量呈正相关(r=0．986,P砷酸钠溶液,胆汁砷含量明显高于对照组,而低于高剂量组;肝脏和血砷水平明显高于对照组和高剂量组,差异有统计学意义(P砷酸钠可以诱导MRP2的表达,随染砷剂量增加,MRP2表达量增加。MRP2在砷及其代谢产物的胆汁排泄过程中发挥了重要作用。MRP2转运砷及其代谢产物的作用与细胞内GSH水平相关,BSO通过抑制GSH合成,导致MRP2-GSH共转运功能减弱,砷在肝脏内蓄积增加。

关键词：多药耐药相关蛋白2 谷胱甘肽砷代谢

内蒙古某饮水型砷中毒病区人群体内砷蓄积与砷代谢的年内变化特征

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环境化学 2018年第11期37卷 2335-2341页

作者：孔畅杨林生李海蓉虞江萍韦炳干中国科学院地理科学与资源研究所陆地表层格局与模拟院重点实验室北京100101 中国科学院大学资源与环境学院北京100049

为分析砷暴露人群砷含量标志物的季节差异特征,本文测定内蒙古某饮水型地方性砷中毒村78名居民发砷、指甲砷、以及尿液总砷和各形态砷的含量,并分析其年内变化特征及相关性.结果表明,平水期、丰水期和枯水期的发砷含量均值分别为2.08、1... 详细信息

为分析砷暴露人群砷含量标志物的季节差异特征,本文测定内蒙古某饮水型地方性砷中毒村78名居民发砷、指甲砷、以及尿液总砷和各形态砷的含量,并分析其年内变化特征及相关性.结果表明,平水期、丰水期和枯水期的发砷含量均值分别为2.08、1.43、3.60μg·g^(-1),尿液总砷含量均值分别为236.63、184.29、306.72μg·L^(-1),指甲砷含量均值则分别为3.21、2.84、3.40μg·g^(-1).经单因素方差分析(ANOVA),发砷、尿液各形态砷含量存在显著的季节差异,表现为枯水期>平水期>丰水期;指甲砷含量的季节差异不显著,这可能是不同生物标志物对水砷含量变化响应速度的差异导致的.发砷、尿液无机砷和一甲基砷(MMA)含量有显著的性别差异,男性高于女性;指甲砷、尿液总砷和二甲基砷(DMA)含量性别差异不显著.发砷、尿液总砷和DMA含量均显著正相关,且与水砷含量的季节变化趋势一致,说明指甲砷比发砷与尿砷更能反映较长期的砷暴露特征.

关键词：砷中毒病区砷代谢砷蓄积季节变化体内内蒙古

砷化合物致人表皮癌A431细胞的毒性及氧化应激和砷代谢研究

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环境与健康杂志 2012年第9期29卷 806-809页

作者：陆景坤田艳俞腾飞陈朝军王一博尹若熙内蒙古医科大学蒙医药研究院内蒙古呼和浩特010010

目的探讨不同砷化合物致人表皮癌细胞(A431)的细胞毒性及氧化应激和砷代谢的情况。方法培养的A431细胞分别暴露于0.05～50.0μmol/L一甲基亚胂酸(MMAⅢ),0.05～200.0μmol/L三氧化二砷(As2O3,As3+),0.5～500.0μmol/L砷酸氢二纳(As5+)... 详细信息

目的探讨不同砷化合物致人表皮癌细胞(A431)的细胞毒性及氧化应激和砷代谢的情况。方法培养的A431细胞分别暴露于0.05～50.0μmol/L一甲基亚胂酸(MMAⅢ),0.05～200.0μmol/L三氧化二砷(As2O3,As3+),0.5～500.0μmol/L砷酸氢二纳(As5+)和二甲基胂酸钠(DMAⅤ)24 h,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生存率;检测砷化物对丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;以流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS);以原子荧光分析方法检测细胞内外不同形态砷含量。结果在一定剂量范围的MMAⅢ(≥5.0μmol/L)、As2O(3≥200.0μmol/L)、砷酸氢二钠(0.5,≥200.0μmol/L)和二甲基胂酸钠(500.0μmol/L)能够显著降低A431的细胞生存率(P砷化物能显著促进A431细胞增殖(P砷酸氢二钠组MDA含量均显著升高(P砷酸氢二钠和5.0～250.0μmol/L二甲基胂酸钠组MDA含量均显著降低(P砷酸氢二钠组和0.5～500.0μmol/L二甲基胂酸钠组的SOD活力显著升高(P50.0μmol/L As2O3>100.0μmol/L砷酸氢二钠>100.0μmol/L二甲基胂酸钠。低剂量As2O3、砷酸氢二钠组细胞内砷甲基化率高于高剂量组,且As2O3组甲基化率高于砷酸氢二钠。结论在本实验条件下,不同砷化物在低剂量促进A431细胞增殖,高剂量抑制增殖,可能与A431细胞的氧化应激和砷代谢有关。

关键词：砷化合物 A431细胞氧化应激砷代谢

慢性砷暴露对人皮肤角质形成细胞药物转运相关蛋白mRNA表达和砷代谢的影响

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环境与健康杂志 2016年第9期33卷 777-780页

作者：武瑞瑞武夏芳陈佳雯鞠明光胡玉鑫高岚岳徐苑苑中国医科大学公共卫生学院环境毒理学研究室辽宁沈阳110122 中国医科大学临床一系中国医科大学公共卫生与预防医学实验教学示范中心

目的探讨慢性砷暴露对人皮肤角质形成细胞(human keratinocytes,HaCaT)药物转运蛋白mRNA表达和砷代谢的影响。方法将HaCaT细胞随机分为慢性对照(不予以砷处理)组和慢性砷暴露(100 nmol/L亚砷酸钠染毒28周)组,培养于含10%胎牛血清和1%双... 详细信息

目的探讨慢性砷暴露对人皮肤角质形成细胞(human keratinocytes,HaCaT)药物转运蛋白mRNA表达和砷代谢的影响。方法将HaCaT细胞随机分为慢性对照(不予以砷处理)组和慢性砷暴露(100 nmol/L亚砷酸钠染毒28周)组,培养于含10%胎牛血清和1%双抗的培养基中,收集处于对数生长期的细胞,采用实时荧光定量(real-time quantitative PCR)法检测细胞多药耐药相关蛋白mRNA的表达水平。将处于对数生长期的HaCaT对照细胞和慢性砷暴露细胞分别暴露于含终浓度为0(对照)、2.5、5、10、20、30、40、50、60、80、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中孵育24 h,采用MTS法检测细胞活性。将慢性砷暴露组细胞和对照细胞予以10μmol/L亚砷酸钠处理24 h,采用氢化物发生-原子吸收分光光度法检测细胞砷蓄积和砷排放量。结果与对照细胞相比,慢性砷暴露HaCaT细胞多药耐药相关蛋白ABCC2和ABCC4 mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P砷暴露HaCaT经各浓度急性砷处理后细胞存活率均升高,差异有统计学意义(P砷酸钠染毒24 h后,慢性砷暴露细胞内的砷蓄积量降低,而砷排放量升高,差异均有统计学意义(P砷暴露的HaCaT细胞药物转运蛋白mRNA的表达升高,砷排出能力增强,对砷毒性产生耐受性。

关键词：砷皮肤角质形成细胞多药耐药相关蛋白砷代谢

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生物体砷代谢解毒机制的研究进展

安徽农业科学 2009年第17期37卷 8144-8147页

作者：王利红尹西翔段桂兰孙国新徐清忠李赛钰山东省分析测试中心山东济南250014 中国科学院城市环境研究所福建厦门361021 中国科学院生态环境研究中心北京10085

近年来砷污染问题引起了世界各地的广泛关注,砷通过地下水饮用、食物链传递进入人体,对人体产生伤害。因此,必须采取措施控制砷进入动植物和人体的数量,改变砷在生物体内的赋存形态,从而降低砷对人体产生的毒害。本文综述了砷在生物体... 详细信息

近年来砷污染问题引起了世界各地的广泛关注,砷通过地下水饮用、食物链传递进入人体,对人体产生伤害。因此,必须采取措施控制砷进入动植物和人体的数量,改变砷在生物体内的赋存形态,从而降低砷对人体产生的毒害。本文综述了砷在生物体内的基本代谢过程;砷代谢过程中的关键酶:砷酸盐还原酶、亚砷酸甲基转移酶的结构及功能。通过调控砷代谢过程中的关键酶活性,可改变砷在生物体内的形态配比和毒性,从而降低砷对人体产生的健康风险。

关键词：砷代谢砷还原砷甲基化砷酸盐还原酶亚砷酸甲基转移酶

雄黄与亚砷酸钠亚急性暴露对小鼠砷代谢及氧化应激影响的比较

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环境与健康杂志 2018年第6期35卷 480-482页

作者：王达李永芳林琳李冰孙贵范中国医科大学公共卫生学院辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院

目的探讨经口染毒雄黄、亚砷酸钠后,小鼠体内砷代谢及氧化应激指标的变化,为评价雄黄的毒性提供实验数据。方法清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)、0.5 g/kg雄黄组和0.1 g/kg亚砷酸钠组,各组均灌胃染毒3 d,用氢化... 详细信息

目的探讨经口染毒雄黄、亚砷酸钠后,小鼠体内砷代谢及氧化应激指标的变化,为评价雄黄的毒性提供实验数据。方法清洁级雌性昆明小鼠随机分为对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)、0.5 g/kg雄黄组和0.1 g/kg亚砷酸钠组,各组均灌胃染毒3 d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法分别测定尿液和肝组织中无机砷(iAs)、一甲基胂(MMA)和二甲基胂(DMA)。用试剂盒法测定全血中GSH和肝脏T-AOC水平。结果雄黄组小鼠尿液和肝脏中各形态砷和总砷含量高于对照组,但低于亚砷酸钠组;一甲基化率(FMR)和二甲基化率(SMR)高于亚砷酸钠组,差异均有统计学意义(P砷酸钠组(P0.05)。结论与亚砷酸钠相比,雄黄中的砷在小鼠体内代谢较慢,对氧化应激指标影响较小。

关键词：雄黄亚砷酸钠砷代谢氧化应激小鼠

外源性谷胱甘肽对慢性砷暴露小鼠尿砷代谢及氧化应激的影响

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环境与健康杂志 2018年第6期35卷 477-480页

作者：王达李永芳林琳李冰孙贵范中国医科大学公共卫生学院辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院

目的探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响。方法将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 mg/L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH... 详细信息

目的探讨给与谷胱甘肽(GSH)及其拮抗剂——丁硫氨酸亚砜胺(BSO)对慢性砷暴露小鼠体内砷代谢及氧化应激的影响。方法将SPF级雌性昆明小鼠随机分为对照组(蒸馏水)、单纯染砷组(50 mg/L亚砷酸钠)、GSH干预组(50 mg/L亚砷酸钠+400 mg/kg GSH)和BSO(50 mg/L亚砷酸钠+600mg/kg BSO)干预组,除对照组小鼠饮用蒸馏水外,其余各组均饮用含50 mg/L亚砷酸钠的水溶液连续染毒30周,然后给予400 mg/kg GSH或600 mg/kg BSO,用蒸馏水配制GSH和BSO水溶液,每天两次腹腔注射,连续2 d,用氢化物发生-超低温捕集-原子吸收分光光度法测定尿液各形态砷水平,用DTNB及试剂盒法分别测定全血及肝脏中GSH和总抗氧化能力(T-AOC)水平。结果 GSH干预组小鼠尿中二甲基胂(DMA)、DMA含量构成比、二甲基化率(SMR)及总砷含量高于单纯染砷组(P砷、DMA含量构成比、一甲基化率(FMR)、SMR及总砷含量均低于单纯染砷组(P砷组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于对照组(P砷组(P0.05)。BSO干预组小鼠肝脏和血液GSH和T-AOC的水平均低于其他各组(P砷暴露小鼠的砷甲基化能力,增加砷从尿液中的排出,拮抗砷所致的GSH和T-AOC水平下降,从而减少了砷对机体造成的氧化损伤。

关键词：砷代谢谷胱甘肽(GSH) 氧化应激小鼠

不同价态砷染毒大鼠脑组织砷代谢性别差异研究

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不同价态砷染毒大鼠脑组织砷代谢性别差异研究

作者：刘嘉鸣新疆医科大学

学位级别：硕士

目的：研究不同价态砷染毒大鼠脑组织中砷代谢产物以及砷代谢相关酶的性别差异,为进一步阐明砷代谢进程及毒作用机制奠定基础。方法：将70只健康7周龄清洁级Wistar大鼠随机分为7组,分别为对照(去离子水)组及20、6.7、2.2mg/kg亚砷酸钠(i... 详细信息

目的：研究不同价态砷染毒大鼠脑组织中砷代谢产物以及砷代谢相关酶的性别差异,为进一步阐明砷代谢进程及毒作用机制奠定基础。方法：将70只健康7周龄清洁级Wistar大鼠随机分为7组,分别为对照(去离子水)组及20、6.7、2.2mg/kg亚砷酸钠(iAs3+)和砷酸钠(iAs5+)染毒组,每组10只,雌雄各半。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月后处死,采集血样,采用酶联免疫分析法(ELISA)测定大鼠血清中氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽转移酶(GST)、糖酵解酶(GE)以及甲基转移酶(As3MT)谷胱甘肽还原酶(GR)的变化,采用高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱(HPLC-HGAFS)法测定脑组织中砷形态产物[iAs3+、iAs5+、一甲基砷酸(MMA)、二甲基砷酸(DMA)及总砷(TAs)]含量。结果：***3+高剂量染毒组第二个月、中高剂量第三个月以及iAs5+高剂量染毒组第三个月雄性大鼠体重增加量高于雌性,差异有显著性意义(P砷含量高于雌性大鼠,差异有显著性意义(P砷外暴露的增加会导致血液中砷形态产物含量的增加,进而使通过血脑屏障在脑组织中蓄积的砷形态代谢产物含量增加。雄性大鼠对无机砷的易感性更强,比雌性大鼠更易在体内蓄积,且雄性大鼠无机砷的一甲基化强于雌性大鼠。提示相同砷暴露下存在雌、雄大鼠间性别差异,且砷代谢对雄性大鼠的细胞毒性高于雌性。

关键词：砷代谢甲基化性别差异

人摄入海产品中的砷与饮水中的无机砷尿砷代谢产物的比较

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人摄入海产品中的砷与饮水中的无机砷尿砷代谢产物的比较

作者：徐磊中国医科大学

学位级别：硕士

目的砷是环境中广泛存在的有毒类金属元素之一,已被美国疾病预防控制中心和国际防癌研究机构确定为人类致癌物。人类在生产生活中会通过消化道、呼吸道和皮肤等途径接触到砷的化合物。到目前为止,全世界已有接近2亿人处在饮用高砷水的... 详细信息

目的砷是环境中广泛存在的有毒类金属元素之一,已被美国疾病预防控制中心和国际防癌研究机构确定为人类致癌物。人类在生产生活中会通过消化道、呼吸道和皮肤等途径接触到砷的化合物。到目前为止,全世界已有接近2亿人处在饮用高砷水的健康损害中,所以饮水中含有高浓度的砷而导致的砷中毒是全世界广泛关注的公共卫生问题。慢性砷中毒的典型病变是皮肤色素异常和角化,甚至癌变,此外还可累及多器官系统,如呼吸系统,消化系统,循环系统,中枢神经系统等,严重的后果可诱发多脏器的肿瘤。研究无机砷在体内的代谢规律对研究无机砷的致病机理,寻找慢性砷中毒的有效治疗手段都有重要的提示意义。因此,无机砷在体内的代谢规律成为砷中毒研究的热点问题之一。研究表明:无机砷在人体内的代谢迅速,其半衰期很短,约为4天。目前科学研究中广泛采用尿砷作为评价近期砷暴露的指标。因为尿是人体摄入砷主要的排泄途径,每日摄入砷的60%-70%直接排泄在尿中,所以尿中砷的种类和含量是研究人体砷代谢模式的重要指标。现场流行病学调查中通常使用尿砷来评价人群砷暴露情况,为确定其病情提供一定的参考依据。除饮水途径之外,人类还可以通过饮食途径,特别是食用海产品发生砷暴露。研究表明,海产品中还有大量复杂的有机砷复合物和少量的无机砷,尽管海产品中含有总砷水平很高,但是目前认为摄入海产品对人体没有毒性。所以,本研究重点关注的问题是:在大量食用海产品后尿砷的排泄规律,并通过比较食用海产品后尿砷含量、慢性饮水型砷中毒病区人群和对照人群中尿砷种类和含量的差异,进一步探讨食用海产品对使用尿砷进行无机砷暴露评价和无机砷代谢机制研究的影响。方法一、实验方法1、海产品中砷代谢规律研究选取志愿者30名同学,男女各15人,均为自中国医科大学预防医学专业本科在校学生,身体健康,无不良嗜好。30名志愿者禁食海产品3天后,分成海苔组和紫菜组。海苔组10人,同早餐一起,一次性食入海苔20g(上海兰光海苔有限公司)。紫菜组20人,同早餐一起,一次性食入紫菜20g(购自沃尔马超市)。各组分别于食用海产品前1小时和食用紫菜后1、3、5、8、12、24、36、48、60和72小时,收集尿样于10ml采尿管中,封口,-20℃冰冻保存。2、现场调查渔村组选取辽宁省丹东市安康村为调查地区,选取身体健康近3天食用海产品的当地居民50人。慢性砷中毒病区组选取中国内蒙古呼和浩特市附近口肯板村和乃莫板村(水砷浓度分别为0.09mg/l,0.16mg/l)中身体健康、、近3天没有食用海产品的当地居民各30人。对照组选取中国内蒙古呼和浩特市附近塔布塞村(水砷浓度低于0.05 mg/l)身体健康、近3天没有食用海产品的当地居民共40人为对照。现场收集尿样于10ml采尿管中,-20℃冰箱保存。3、主要试剂与仪器(1)主要试剂:2mol/L氢氧化钠(日本和光纯药工业株式会社)、1%盐酸(北京化学试剂研究所)、10%硼酸钠(日本和光纯药工业株式会社)。(2)试验仪器:多砷形态检测专用仪器冷阱捕集氢化物发生原子分光光度计(日本SHIMADZU公司生产)。4、尿样测定融化冷冻尿样,经过消化处理,iAs、MMA、DMA在消化处理后形态不发生改变。以1%的盐酸和10%的硼酸钠为反应液,使用冷阱捕集氢化物发生原子分光光度计测定待测样品中的砷含量。该方法测定3种形态砷化物检测限均为1 ng,变异系数＜5%。标准物质为日本环境研究所人尿。二、统计学处理采用SPSS 11.5统计软件进行分析,组与组之间用两组独立样本t-test;组间比较采用单因素方差分析(ANOVA),两两比较采用LSD-t检验。结果1、海产品中砷代谢规律实验的结果(1)尿总砷浓度随时间的变化海苔组在食用海苔后8h、24h,尿总砷浓度与食用前相比显著升高(p＜0.05),紫菜组在食用紫菜后8h、12h、24h、36h、48h,尿总砷浓度与食用前相比显著升高(p＜0.05)。(2)尿iAs浓度随时间的变化海苔组在食用海苔后3h,尿iAs浓度与食用前相比显著升高(p＜0.05),紫菜组在食用紫菜后3h、8h、12h、36h、60h、72h,尿iAs浓度与食用前相比显著升高(p＜0.05)。(3)尿MMA浓度随时间的变化海苔组在食用海苔后3h、5h、8h、12h、24h,尿MMA浓度与食用前相比显著升高(p＜0.05),紫菜组在食用紫菜后3h、8h、24h、36h、48h、60h、72h,尿MMA浓度与食用前

关键词：海产品砷代谢无机砷有机砷一甲基砷酸二甲基砷酸三甲基砷酸海苔紫菜尿砷