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砭贴百会、内关穴对急性低压缺氧大鼠心肌组织水通道蛋白-1表达的影响

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中华中医药杂志 2021年第4期36卷 2363-2366页

作者：郝多丽李航董瑞娟葛东宇侯中伟北京中医药大学北京100029 解放军总医院第六医学中心北京100142

目的:研究砭贴预处理对低压缺氧大鼠心肌组织缺血水肿的预防作用及对心肌组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、药物组、模型组、砭贴组,每组9只。在百会、内关穴处,模型组每天贴胶布1h,砭贴组每... 详细信息

目的:研究砭贴预处理对低压缺氧大鼠心肌组织缺血水肿的预防作用及对心肌组织水通道蛋白-1(AQP-1)表达的影响。方法:将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、药物组、模型组、砭贴组,每组9只。在百会、内关穴处,模型组每天贴胶布1h,砭贴组每天贴砭贴并用胶布固定1h,药物组给予红景天胶囊280mg/kg的剂量每天灌胃1次,均预处理14d。预处理完后,除正常组外,其它组均在第15天进入低压氧舱,模拟海拔6 000m高原,持续24h(断食断水),建立高原低压缺氧模型。出舱后取出心脏,HE染色观察心肌组织形态学变化;RTPCR技术检测心肌组织中AQP-1 mRNA的表达;Western blot检测心肌组织中AQP-1蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠心肌组织损伤明显,AQP-1 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P砭贴组和药物组大鼠心肌组织损伤减轻,AQP-1 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P砭贴预处理对急性低压缺氧大鼠心肌组织缺血水肿具有显著的预防作用,可显著降低低压缺氧状态造成的大鼠心肌组织缺血水肿程度,其机制可能与降低心肌组织中AQP-1的表达有关。

关键词：砭贴低压缺氧心肌损伤水通道蛋白-1 百会内关

砭贴预处理对急性低压缺氧肺水肿大鼠肺组织NF-κB及相关炎症因子表达的影响

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中华中医药杂志 2022年第10期37卷 5904-5907页

作者：吴春花李晓雅闫颖洁王登辉王梦杰侯中伟北京中医药大学北京100029

目的:观察砭贴预处理对急性低压缺氧肺水肿(即高原肺水肿)大鼠肺组织损伤的保护作用及其对NF-κB及相关炎症因子表达的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、砭贴组、药物组,每组8只。正常组和模型组正常饲养,砭贴组于... 详细信息

目的:观察砭贴预处理对急性低压缺氧肺水肿(即高原肺水肿)大鼠肺组织损伤的保护作用及其对NF-κB及相关炎症因子表达的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组、砭贴组、药物组,每组8只。正常组和模型组正常饲养,砭贴组于太渊、内关、人迎穴每天贴砭贴2h,药物组用大株红景天胶囊按280 mg/kg的剂量每天灌胃1次,均预处理14 d。除正常组外,其余3组于第15天置于低压低氧实验舱24 h建立急性低压缺氧肺水肿大鼠模型(即高原肺水肿模型)。出舱后采集腹主动脉血及肺组织,HE染色观察肺组织病理变化,测定肺含水量(LWC),血气分析仪检测血液酸碱度(pH)、动脉血二氧化碳分压(PaCO)、动脉血氧气分压(PaO),ELISA法测定肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β水平,RT-PCR检测肺组织核转录因子-κB p65(NF-κB p65)mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织损伤明显,LWC显著增加(P砭贴组与药物组肺组织损伤减轻,LWC显著降低(P砭贴预处理对急性低压缺氧肺水肿大鼠有明显保护及抗炎作用,其作用机制可能是通过下调NF-κB p65 mRNA表达,减少炎症因子的释放,从而抑制炎性损伤。

关键词：砭贴急性低压缺氧肺水肿血气分析炎性因子核转录因子-κB

砭贴或揿针百会与内关对模拟高原环境大鼠血清炎性因子及脑组织血管内皮生长因子的影响

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中华中医药杂志 2020年第7期35卷 3708-3710页

作者：于少敏张少鹏郑昊钰卢峻张伟娜侯中伟北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中科贴针灸健康科技有限公司北京100089

目的:研究砭贴或揿针百会与内关对模拟高原环境下大鼠脑组织损伤预防作用及其与血清炎性因子及脑组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为正常(A)组、模型(B)组、砭贴(C)组、揿针(D)组、药物(E)组,每组各9只... 详细信息

目的:研究砭贴或揿针百会与内关对模拟高原环境下大鼠脑组织损伤预防作用及其与血清炎性因子及脑组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的关系。方法:45只雄性SD大鼠随机分为正常(A)组、模型(B)组、砭贴(C)组、揿针(D)组、药物(E)组,每组各9只。A组正常饲养,B组于百会、内关粘贴胶带,C组于百会、内关粘贴砭贴,D组于百会、内关刺入揿针,E组采用红景天提取物0.45g/kg灌胃。连续处理1周后,除A组均置于低压低氧环境下,24h后处死,HE染色鉴定脑组织形态,ELISA检测血清TNF-α、IL-6、IL-1β蛋白表达,RT-qPCR检测脑组织VEGF mRNA表达。结果:与A组比较,B组大鼠脑组织损伤明显,血清TNF-α、脑组织VEGF mRNA表达显著升高(P砭贴或揿针百会与内关可抑制高原环境大鼠脑损伤,可能与抑制血清TNF-α及脑组织VEGF表达相关。

关键词：砭贴揿针高原环境炎性因子血管内皮生长因子红景天百会内关

砭贴预处理对高原急性缺氧大鼠肺损伤的作用及机制研究

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砭贴预处理对高原急性缺氧大鼠肺损伤的作用及机制研究

作者：吴春花北京中医药大学

学位级别：硕士

近年来由于旅游业和基础交通建设的快速发展,以及西部大开发战略及军事活动的需要,越来越多的人前往高海拔地区。急进高原地区时,由于高原环境氧分压的变化,呼吸系统首先受到影响,容易引起肺组织病理损伤,导致高原肺水肿的发生。由此可... 详细信息

近年来由于旅游业和基础交通建设的快速发展,以及西部大开发战略及军事活动的需要,越来越多的人前往高海拔地区。急进高原地区时,由于高原环境氧分压的变化,呼吸系统首先受到影响,容易引起肺组织病理损伤,导致高原肺水肿的发生。由此可见,如何使急进高原人群能够较快适应高原环境,防止急性低压低氧肺损伤,对于预防高原病有重要意义。砭贴是一种以优质泗滨浮石为原材料,运用现代先进的超微粉涂布技术,将砭石粉末与低敏性医用压敏胶溶合研制而成,具有绿色、安全、无副作用等优点。砭贴因砭石粉独特的远红外、超声波、感应增温等理化特性,通过作用于经络腧穴,从而发挥益气活血、疏经通络、扶正祛邪等功效。课题组前期实验研究发现,砭贴预处理能够增加大鼠低压低氧环境下的存活时间,改善肺脑水肿,提高大鼠清除氧自由基的能力,减少脂质过氧化反应的发生,但未能充分反映砭贴预防急性高原病的整体效应,其预防机制尚不明确。因此,本实验在前期研究基础上,观察砭贴刺激“太渊”“内关”“人迎”穴对高原急性缺氧大鼠肺损伤的保护作用,并进一步探讨其可能的作用机制。目的通过低压低氧舱模拟高原环境,建立高原急性缺氧肺损伤大鼠模型,观察砭贴大鼠“太渊”“内关”“人迎”穴后肺组织含水量变化、病理学改变,血气指标和肺组织炎症因子水平变化,评价砭贴预处理对高原急性缺氧大鼠肺损伤的保护作用;分析大鼠肺组织低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、核转录因子-κBp65(nuclear factor kappaB p65,NF-κB p65)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的变化,进一步探讨砭贴疗法预防高原急性缺氧大鼠肺损伤可能涉及的机制,为临床应用砭贴疗法预防急性高原肺损伤提供实验依据。方法1.预处理方法:将32只健康SD雄性大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、药物组、砭贴组,每组8只。4组大鼠预处理前,大鼠“太渊”“内关”“人迎”穴处均用脱毛膏进行脱毛处理,使穴位充分暴露。正常组和模型组在常氧环境下正常饲养;砭贴组在大鼠“太渊”“内关”“人迎”穴处贴砭贴2 h/d,并用胶布固定;药物组大鼠每日给予大株红景天胶囊(280 mg/kg)。为防止大鼠撕咬胶布和砭贴,各组大鼠均佩戴鼠用头套单笼饲养2 h/d,2 h后摘除、回归大鼠笼饲养,各组干预持续14d。除正常组在常氧24h外,其余3组于第15d置于模拟高原6000 m低压氧舱中24 h,并断食水。2.指标的观察与检测:大鼠出舱后,取腹主动脉血和肺组织,测定肺组织含水量;HE染色观察肺组织病理学变化;血气分析仪检测血液酸碱度(pH)、动脉血二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO2)、动脉血氧气分压(partial pressure of oxygen,PaO2)情况;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠肺组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;通过实时荧光定量聚合酶链反应技术(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠肺组织 HIF-1α、NF-κB p65、VEGF mRNA 表达;Western Blot 法检测大鼠肺组织HIF-1α、NF-κB p65、VEGF蛋白表达。结果1.肺组织含水量:大鼠肺组织含水量测定结果显示,与正常组相比,模型组大鼠肺组织含水量升高了 3.29%(P砭贴组肺含水量降低了 2.39%(P砭贴组肺泡壁变薄,肺泡间隔增宽明显改善,肺间质水肿减轻,炎性细胞浸润明显减少,药物组大鼠肺泡结构趋于完整,肺泡壁变薄,无明显肺间质水肿,炎性细胞浸润明显减轻。3.血气分析指标:与正常组比较,模型组大鼠血液pH、PaO2、PaCO2值均有明显降低,差异有统计学意义(P砭贴组、药物

关键词：砭贴低氧诱导因子-1α 核转录因子-κB 血管内皮生长因子急性缺氧肺损伤

砭贴预处理对急性低压低氧模型大鼠的自由基和炎性因子的影响

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砭贴预处理对急性低压低氧模型大鼠的自由基和炎性因子的影响

作者：郑昊钰北京中医药大学

学位级别：硕士

急性高原肺水肿（HAPE）起病急、发展快、症状严重,目前疗法携带不便、副作用多,已经成为严重危害去往高原人群健康和生命的常见病。因此,增加有关HAPE的研究,丰富治疗手段,对于降低疾病发生率和减缓疾病进程意义重大。砭贴疗法是以优... 详细信息

急性高原肺水肿（HAPE）起病急、发展快、症状严重,目前疗法携带不便、副作用多,已经成为严重危害去往高原人群健康和生命的常见病。因此,增加有关HAPE的研究,丰富治疗手段,对于降低疾病发生率和减缓疾病进程意义重大。砭贴疗法是以优质泗滨砭石为原材料,采用现代先进的超微粉涂布技术,将砭石粉末与低敏性医用压敏胶混合,研制而成的一种创新疗法,具有时效性强、治疗范围广、方便携带、绿色、安全、无副作用等优点,大大扩宽了其应用广度。本研究采用砭石疗法刺激大鼠“百会”、“内关”穴,观察此疗法对于大鼠氧自由基、炎性因子和肺组织含水量的影响,探究砭贴疗法对HAPE的防治作用。目的本实验以低压低氧24 h建立的急性高原肺水肿模型大鼠作为研究对象,大株红景天胶囊作为阳性对照组,“内关”“百会”穴为治疗穴位,在进舱之前用砭贴预处理14天。观察砭贴疗法对大鼠血清和肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、血清白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、肺组织含水量和肺脏病理组织形态学的影响,以探究砭贴疗法对高原肺水肿模型大鼠的防治作用、对低压低氧模型大鼠肺组织和血清中自由基和血清中炎性因子的影响,并探讨砭贴疗法防治模型大鼠高原肺水肿的可能机制。方法将雄性SD大鼠45只随机分成正常组、砭贴正常组、模型组、模型组+砭贴（砭贴组）、模型组+药物（药物组）,每组各9只。在“内关”“百会”处,模型组每天贴胶布1h,砭贴正常组和砭贴组每天贴方形砭贴（3×3 mm）1 h并用胶布固定,药物组根据大鼠体重按照大株红景天胶囊280 mg/kg的剂量每天灌胃一次,4组预处理持续14 d。预处理完成后,除正常组和砭贴正常组常温常压环境饲养外,其余3组于第15d置于模拟高原低压氧舱中24h。造模后心脏取血,用比色法测定肺组织和血清SOD、GSH-PX、CAT活力和MDA含量,用酶联免疫法测定血清中IL-6、TNF-α水平,并测定肺组织含水量和对肺大体及病理切片进行观察。结果1、一般情况比较:造模后,模型组反应迟钝,而砭贴组、药物组表现尚可。2、在预处理过程中,各组大鼠的体重均稳定增长,对各组增长量进行统计分析,结果表明均无显著差异（P＞0.05）,说明预处理对各组体重增加影响不大[1]。第二周空腹24 h后,正常组体重降低较少,其余置于模拟高原低压氧舱中的其余各组体重均下降较多。3、大鼠血清SOD、GSH-PX、CAT和MDA情况:与正常组相比,模型组大鼠的SOD、GSH-PX、CAT均降低（P＜0.05）、MDA提高（P＜0.05）,与模型组相比,砭贴组的大鼠SOD、GSH-PX、CAT显著提高（P＜0.05）、MDA含量显著降低（P＜0.05）;砭贴组与药物组相较均无显著差异（P＞0.05）。4、大鼠血清IL-6、TNF-α情况:与正常组相比,模型组大鼠的血清IL-6、TNF-α均提高（P＜0.05）,与模型组相比,砭贴组的大鼠血清IL-6、TNF-α显著降低（P＜0.05）;砭贴组与药物组相较均无显著差异（P＞0.05）。5、大鼠肺组织SOD、GSH-PX、CAT和MDA情况:与正常组相比,模型组大鼠的SOD、GSH-PX、CAT均降低（P＜0.05）、MDA提高（P＜0.05）,与砭贴正常组相较均无显著差异（P＞0.05）;与模型组相比,砭贴组的大鼠SOD、GSH-PX、CAT显著提高（P＜0.05）、MDA含量显著降低（P＜0.05）;砭贴组与药物组相较均无显著差异（P＞0.05）。6、大鼠肺组织含水量情况:与正常组相比,模型组大鼠的肺组织含水量增多（P＜0.05）,与模型组相比,砭贴组的大鼠血清肺组织含水量显著降低（P＜0.05）;砭贴组与药物组相较均无显著差异（P＞0.05）。7、肺大体情况:正常组、砭贴正常组大鼠肺表面光滑,色淡红,弹性良好;模型组肺脏肿胀饱满,肺膜紧张,色暗红,包膜下有点片状瘀血和出血点;砭贴组肺脏表面光滑,色淡红,弹性较好,包膜少见出血点;药物组肺脏略显肿胀,色淡红,包膜下有散在出血点。8、HE染色切片情况:正常组、砭贴正常组肺组织结构未见明显充血水肿及炎症反应;模型组肺间质及肺泡腔内有大量炎症细胞浸润,肺组织血管充血,组织水肿;砭贴组出现轻度的组织水肿及炎症细胞浸润;药物组出现轻度的组织水肿及炎症细胞浸润,肺泡上皮增生,肺泡壁增厚,间隔增宽,水肿较轻,局部组织细胞增生。与正常组大鼠相比,模型组大鼠肺组织肺泡间隔增宽,肺间质水肿,砭贴组有效减轻了缺氧引起的肺泡间质增宽,肺间质水肿。结论1.1砭贴疗法对低压低氧模型大鼠肺脏具有一定的保护作用。其一,砭贴疗法能提高模型大鼠体重增长的速度;其二,砭贴疗法能够降低模型大鼠的肺组织含水量,即降低肺组织水肿;其三,通过病理切

关键词：砭贴百会穴低压低氧内关穴炎性因子自由基

砭贴预处理对低压缺氧大鼠诱发的急性心肌损伤的保护效应研究

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砭贴预处理对低压缺氧大鼠诱发的急性心肌损伤的保护效应研究

作者：郝多丽北京中医药大学

学位级别：硕士

在高海拔低压缺氧环境中,机体的各个系统和器官中往往会出现缺氧的情况,心肌是在机体各个系统和器官中缺氧比较敏感的组织之一。心肌组织维持着机体血液循环,保障着机体氧气供应,但是心脏也是耗氧较大的组织器官,对缺氧十分敏感,如果不... 详细信息

在高海拔低压缺氧环境中,机体的各个系统和器官中往往会出现缺氧的情况,心肌是在机体各个系统和器官中缺氧比较敏感的组织之一。心肌组织维持着机体血液循环,保障着机体氧气供应,但是心脏也是耗氧较大的组织器官,对缺氧十分敏感,如果不及时干预治疗,危害将特别大。因此,增加有关对低压缺氧大鼠诱发的心肌损伤防治的研究,丰富其治疗手段,对于减轻心肌组织损伤程度具有重要的意义。砭贴疗法的原材料是优质的泗滨砭石,并且结合了当代先进的超微粉涂布技术,将砭石粉末与低敏性医用压敏胶混合,研制而成的一种创新疗法,具有安全、无痛、时效性强等很多的优点。本研究采用砭石疗法贴敷大鼠“百会”、“内关”穴,观察此疗法对于大鼠心脏功能、内皮细胞活性以及水通道蛋白表达水平的影响,探究砭贴疗法对低压缺氧心肌损伤的保护作用。目的本实验通过观察砭贴疗法对大鼠血清和心肌组织中内皮素-1(ET-1)和心钠素(ANP)含量变化以及心肌组织中水通道蛋白-1(AQP-1)的表达水平及对心肌组织病理形态学的影响,以探究砭贴疗法对急性心肌损伤模型大鼠的保护作用。方法1.实验动物分组:SPF级成年雄性SD大鼠45只,按照随机数字表法分为5组,分别为正常组、模型组、模型+砭贴组、模型+阳性药物组和正常+砭贴组,每组9只大鼠。2.急性缺氧模型的建立:采用低压氧舱模拟高海拔环境,模拟海拔高度6000 m,将模型组、模型+砭贴组、模型+阳性药物组大鼠置于舱内24h,进舱期间断食断水,建立低压缺氧模型。3.干预方法:正常组和正常+砭贴组在常氧环境下正常饲养,正常+砭贴组每天贴方形砭贴(3*3 mm)1h并用胶布固定,预处理14 d;模型组大鼠每天贴胶布1h,模型+砭贴组大鼠每天贴方形砭贴(3*3 mm)1h并用胶布固定,模型+阳性药物组根据大鼠体重按照大株红景天胶囊280 mg/kg的剂量每天灌胃一次,这3组大鼠在第15 d置于模拟高原低压氧舱中24 h。这5组大鼠在第15 d均断食断水24 h。4.外观观察:造模结束后,从体重、外形、反应等方面对大鼠进行观察,比较不同组之间的变化。5.组织形态学观察:造模结束后,将大鼠心脏取出,切取心尖部分置于固定液中,制备切片,常规苏木精-伊红染色,光镜下观察组织形态学变化。6.血生化指标的检测:造模结束后,将大鼠心尖取血,离心血清,利用酶联免疫检测法测定大鼠血清中ET-1和ANP的含量。7.心肌组织指标检测:造模结束后,将大鼠心脏取出,将剩余心脏部分置于冻存管中保存,用酶联免疫法检测法、RT-PCR技术检法和Western blot技术检测法检测大鼠心肌组织中ET-1和ANP的含量、AQP-1 mRNA和AQP-1蛋白的表达水平。结果1.一般情况比较:造模后,模型组大鼠体重下降,反应迟钝,耳朵发白,呼吸频率加快;而砭贴组、药物组表现尚可。***染色结果:大鼠心肌组织切片发现:正常组和正常+砭贴组大鼠心肌主要表现为胞浆饱满,核缘清晰,肌纤维排列紧密有序,无明显缺氧性病变。模型组的大鼠心肌主要表现为,细胞核萎缩坏死,细胞胞浆皱缩、肌纤维排列疏松而紊乱、可见波浪状排列,有明显的缺氧损伤性病理改变;在砭贴和药物的干预下,模型+砭贴组和模型+阳性药物组大鼠的心肌组织缺氧性病理改变得到了显著的改善,肌纤维整体排列较好,排列紧密而有序。3.血生化指标的检测结果:本实验检测结果显示,与正常组相比,模型组中ET-1和ANP含量显著升高(p砭贴组中ET-1和ANP含量无明显差异;与模型组相比,模型+砭贴组和模型+阳性药物组中ET-1和ANP含量显著降低(p砭贴组和模型+阳性药物组大鼠血清中ET-1和ANP含量相比较均无明显差异。4.心肌组织生化指标检测结果:4.1.心肌组织中ET-1和ANP检测结果显示,与正常组相比,模型组中ET-1和ANP含量显著升高(p砭贴组中ET-1和ANP含量无明显差异;与模型组相比,模型+砭贴组和模型+阳性药物组中ET-1和ANP含量显著降低(p砭贴组和模型+阳性药物组大鼠心肌组织中ET-1和ANP含量相比较无明显差异。4.2.心肌组织中AQP-1 mRNA表达检测结果显示,与正常组相比,模型组中AQP-1 mRNA表达水平显著升高(p砭贴组中AQP-1 mRNA表达水平无明显差异;与模型组相比,模型+砭贴组和模型+阳性药物组大鼠中AQP-1 mRNA表达水平显著降低(p砭贴组和模型+阳性药物组相比AQP-1 mRNA表达水平无明显差异。4.3.心肌组织中AQP-1蛋白表达检测结果显示,与正常组相比,模型组中AQP-1的蛋白表达水平显著升高(p砭贴组中AQP-1的蛋白表达水平无显著差异;与模型组相比,模型+砭贴组和

关键词：砭贴百会穴低压缺氧内关穴内皮素-1 水通道蛋白-1 心钠素

砭贴预处理对急性低压低氧模型大鼠氧化应激及心肌损伤的影响研究

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砭贴预处理对急性低压低氧模型大鼠氧化应激及心肌损伤的影响研究

作者：闫颖洁北京中医药大学

学位级别：硕士

短期暴露在高原低压低氧环境后,机体会由于供氧不足产生一系列病理学改变和功能紊乱。心脏对缺氧适应尤为敏感,低压低氧环境使心脏阻力增大,心肌收缩力下降,心排血量减少,严重时可导致心力衰竭,对机体造成严重损伤。高原低压低氧条件易... 详细信息

短期暴露在高原低压低氧环境后,机体会由于供氧不足产生一系列病理学改变和功能紊乱。心脏对缺氧适应尤为敏感,低压低氧环境使心脏阻力增大,心肌收缩力下降,心排血量减少,严重时可导致心力衰竭,对机体造成严重损伤。高原低压低氧条件易发生氧化应激反应,大量活性氧(reactive oxygen,ROS)蓄积可使心肌细胞严重受损,影响心脏功能。急性高原病起病急且病情具有未知性,本研究选用砭贴穴位预处理,发挥中医治未病的独特优势,以达到“未病先防,已病防变”的目的。砭贴又称“贴针灸”,为砭石发展的第三代软介质贴敷工具,通过砭石特殊的理化性质和穴位的双重功效达到疏通经络,调和气血等作用。课题组前期研究发现,砭贴预处理可以调节低压低氧模型大鼠机体过氧化状态,本研究在前期研究基础上建立急性低压低氧大鼠模型,选择“内关、太渊、人迎”穴进一步探究砭贴对心脏的特异性调节作用,对比各组大鼠心肌损伤程度,探索砭贴对心脏的过氧化保护作用和起效靶点,为砭贴预防高原急性低压低氧导致的心肌损伤提供实验依据。目的建立急性低压低氧大鼠模型,观察砭贴预处理“太渊、内关、人迎”穴后模型大鼠心组织含水量,病理形态学,血气指标及肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、肌钙蛋白 Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)、脑钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和氧化应激代谢指标丙二醇(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢(HO)变化情况,评价砭贴预处理对高原急性低压低氧模型大鼠心脏的保护作用;分析大鼠心肌组织血红素加氧酶-1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白相对表达量和mRNA表达水平的变化,进一步探讨砭贴疗法预防急性低压低氧模型大鼠心肌损伤可能涉及的靶点。方法1.干预方法:将36只健康SD雄性大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组、药物组、砭贴组,每组9只。4组大鼠预处理前,大鼠“太渊、内关、人迎”穴处均用脱毛膏进行脱毛处理,使穴位充分暴露。正常组和模型组在常氧环境下正常饲养;砭贴组在大鼠“太渊、内关、人迎”穴处贴砭贴2h/d,并用胶布固定;药物组大鼠每日给予大株红景天胶囊(280mg/kg)。为防止大鼠撕咬胶布和砭贴,各组大鼠均佩戴鼠用头套单笼饲养2 h/d,2h后摘除、回归大鼠笼饲养,各组干预持续14d。除正常组在常氧24 h外,其余3组于第15d置于模拟高原6000 m低压氧舱中24 h,并断食水。2.指标的观察与检测:大鼠出舱后,取腹主动脉血和心肌组织,干湿重法测定心组织含水量;HE染色观察心组织病理学变化;应用血气分析仪检测模型大鼠氧合状态和代谢情况。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测大鼠心肌 HIF-1α、MDA、HO、CK-MB、cTnⅠ、BNP 表达和血清 CK-MB、cTnⅠ、BNP 表达情况;通过Western blot法检测HO-1蛋白表达;通过实时荧光定量聚合酶链反应技术(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测大鼠心肌组织 HO-1mRNA 表达。结果1.模型组大鼠反应迟钝、倦卧,毛发枯燥微黄无光泽,呼吸频率加快,口鼻及四肢末端发绀。砭贴组和药物组大鼠灵活度及毛发光泽度较好,呼吸频率较快,口鼻四肢无明显发绀。2.心组织含水量:大鼠心组织含水量测定结果显示,与空白组相比,模型组心组织含水量增加(P砭贴组心组织含水量降低(P0.05)。***染色结果:空白组大鼠心肌细胞形态排列规整,未出现明显病理改变。模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,细胞间隙明显增宽,细胞核固缩,可见明显的炎症反应,存在细胞断裂、溶解现象,心肌损伤严重,层次不清,缺氧损伤明显。砭贴组和药物组心肌细胞排列比较整齐,炎症反应减轻,细胞间隙正常,砭贴较药物缓解心肌炎症和损伤更为明显。4.血气分析指标:代谢方面:与空白组相比,模型组实际碳酸氢根(actual bicarbonate,HCO(act))、标准碳酸氢根(standard bicarbonate,HCO(std))、ctCO水平降低(P砭贴组HCO(act)、HCO(std)、ctCO水平升高(P<0.01);药物组 HCO(act)、HCO(std)、ctCO水平升高(P<0.01)。与药物组相比,HCO(std)水平增加(P<0.05)。氧合状态:与空白组相比,模型组总血红蛋白(total

关键词：砭贴急性低压低氧心肌损伤氧化应激 HO-1mRNA

“砭贴”大椎太阳穴对56名大学生焦虑抑郁状态的调控效应研究

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中华中医药杂志 2015年第3期30卷 702-704页

作者：侯中伟杨轶刘媛黄玉海李青伟刘津源秦闻檑谷晓红谷世喆北京中医药大学针灸推拿学院北京100029 北京中科贴针灸健康科技有限公司北京100142

目的:探讨"砭贴"大椎、太阳穴对大学生精神心理的调控效应。方法:选取符合纳入标准的健康大学生志愿者70例,随机分组。最终单一测试组入组24例、混合测试组入组32例。两组均选大椎、太阳穴为观察穴位,"砭贴"每穴黏贴时间为8-12h,以5d为... 详细信息

目的:探讨"砭贴"大椎、太阳穴对大学生精神心理的调控效应。方法:选取符合纳入标准的健康大学生志愿者70例,随机分组。最终单一测试组入组24例、混合测试组入组32例。两组均选大椎、太阳穴为观察穴位,"砭贴"每穴黏贴时间为8-12h,以5d为1个疗程,坚持4个疗程,每个疗程间隔2d。单一测试组4个疗程始终坚持贴标准砭贴,混合测试组前2个疗程贴安慰贴,后2个疗程贴标准砭贴。研究于试验0、2、4个疗程末按照国际通用SAS、SDS心理量表评分比较疗效。结果:两组对于受试者的焦虑、抑郁状态产生显著良性影响。1单一测试组:SAS评分:4个疗程显著下降(P砭贴"大椎、太阳穴具有明显的精神心理调控效应,对于青少年有明显的优势,适合在广大学生群体中普及,值得深入探索。

关键词：砭贴大学生心理健康

基于PHD2/HIF-1α探讨砭贴预防低压低氧模型大鼠脑组织损伤的作用机制

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基于PHD2/HIF-1α探讨砭贴预防低压低氧模型大鼠脑组织损伤的作用...

作者：李晓雅北京中医药大学

学位级别：硕士

脑对缺氧的耐受性极低,在高原低气压缺氧环境下易出现脑组织水肿、神经损伤等病理表现,高原低气压缺氧一方面会引发脑细胞有氧代谢障碍,引发细胞毒性脑水肿,另一方面缺氧也可直接作用于血管内皮细胞,使血管壁通透性增加,引发脑间质水肿... 详细信息

脑对缺氧的耐受性极低,在高原低气压缺氧环境下易出现脑组织水肿、神经损伤等病理表现,高原低气压缺氧一方面会引发脑细胞有氧代谢障碍,引发细胞毒性脑水肿,另一方面缺氧也可直接作用于血管内皮细胞,使血管壁通透性增加,引发脑间质水肿,进而出现脑功能障碍,导致高原脑水肿(High altitude cerebral edema,HACE)的发生。HACE作为高原相关疾病中最严重的疾病之一,严重影响人们的生命安全和生活质量。HACE发病机制复杂,血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)损害是其形成的的关键因素,脯氨酸羟化酶2(Prolyl hydroxylase 2,PHD2)和低氧诱导因子1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)作为低氧通路的关键因子,其下游血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)水平和闭合蛋白(Occludin)等因子的变化在血脑屏障破坏过程中发挥重要作用。砭贴作为由砭术发展而来的新型穴位贴敷疗法,通过砭石红外超声等物理特性,可以对穴位局部产生刺激作用,激发经气,起到疏通经络、益气活血的功效。课题组前期研究发现,砭贴刺激穴位能够抑制急性低压低氧大鼠脑组织损伤,减轻脑组织水肿,但相关机制和通路仍不明确,是否在BBB破坏过程中发挥作用仍不清楚。故本研究将在前期研究基础上进一步观察砭贴“太渊”“内关”“人迎”穴对急性低压低氧大鼠的脑组织损伤和血脑屏障破坏的预防作用,探讨砭贴对高原脑组织损伤的相关保护机制。目的观察砭贴“太渊”“内关”“人迎”穴对急性低压低氧大鼠脑组织损伤的保护作用,探究砭贴对PHD2、HIF-1α、VEGF、Occludin表达的影响,进一步研究砭贴预防急性高原脑水肿的可能机制,阐释砭贴对急性高原脑水肿的预防作用。方法健康SD雄性大鼠45只随机分为5组:空白对照组、模型组、砭贴组、药物组、砭贴+DMOG组,每组9只大鼠。各组大鼠干预前进行穴位局部脱毛。空白对照组和模型组大鼠除每日带鼠套单独饲养2h以外,不做其他干预,每日正常饲养。砭贴组和砭贴+DMOG组大鼠在“太渊”“内关”“人迎”穴位局部贴敷砭贴2 h/d,并用胶带缠绕固定,药物组大鼠每日灌胃大株红景天溶液(灌胃剂量为280mg/kg)。各组大鼠每日干预过程中均需佩戴鼠套单独饲养,共干预14天。除空白对照组大鼠外,其余四组大鼠进入氧舱模拟高原6000 m海拔低压低氧处理24 h,砭贴+DMOG组进舱前24 h腹腔注射PHD2抑制剂DMOG(40mg/kg)。出舱后,观察大鼠一般形态,取大鼠腹主动脉血和脑组织,血气分析仪检测大鼠血氧饱和度(Oxygen saturation of blood,SaO2)、钠离子(Na+)和钾离子(K+),HE染色观察脑组织病理学改变并用干湿重法测定脑组织含水量,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清 PHD2、HIF-1α、VEGF 水平,Western blot法检测脑组织PHD2、HIF-1α、VEGF、Occludin蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链反应技术(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR)检测脑组织HIF-1α、VEGF mRNA 表达。结果1.一般情况观察结果显示:低压低氧处理后,模型组和大鼠反应迟钝、倦卧,毛发枯燥少泽,呼吸频率加快,口鼻及四肢肢端发绀。砭贴组和药物组大鼠灵活度及毛发光泽度较好,呼吸频率较快,口鼻四肢无明显发绀。砭贴+DMOG组大鼠反应略显迟钝、毛发枯燥少泽凌乱,呼吸频率加快,口鼻及四肢末端略有发绀。2.脑组织含水量结果显示:与空白对照组比较,模型组在低压低氧24 h后含水量显著增多(P砭贴组、药物组脑含水量均降低(P砭贴组比较,药物组和砭贴+DMOG组脑含水量差异无统计学意义(P>0.05)。3.脑组织HE染色结果显示:与空白对照组相比,模型组大鼠软脑膜与脑组织分离,脑组织细胞排列松散,呈现紊乱状态。皮质血管扩张,细胞肿胀明显,细胞间隙增宽。胞核周围空泡明显,细胞内层次不清,神经元细胞核固缩深染,缺氧损伤严重。砭贴组与药物组软脑膜与脑组织连接紧密几乎不分离,神经细胞病理变化较轻微,较模型组神经细胞的排列更整齐,细胞略微肿胀,具有均匀的细胞质,与模型组相比缺氧损伤表现不明显。砭贴+DMOG组脑组织软脑膜与脑组织出现部分分离,细胞排列松散,出现较明显的细胞肿胀和神经元细胞损伤。4.血气生化结果显示:与空白对照组相比,模型组SaO2和Na+水平显著降低(P砭贴组和药物组SaO2显著升高(

关键词：闭合蛋白砭贴低压低氧低氧诱导因子-1α 脯氨酸羟化酶2 血管内皮生长因子穴位