检索结果-南通市图书馆

作者：杜畅安徽农业大学

学位级别：硕士

家蚕（Bombyx mori）在我国已有五千多年的饲养历史，有着重要的经济价值。它不仅是鳞翅目昆虫的典型代表，同时也是重要的模式生物。随着家蚕基因组测序的完成，国内外的研究重点将逐渐转向功能基因组的研究。而蛋白质是基因功能的实... 详细信息

家蚕（Bombyx mori）在我国已有五千多年的饲养历史，有着重要的经济价值。它不仅是鳞翅目昆虫的典型代表，同时也是重要的模式生物。随着家蚕基因组测序的完成，国内外的研究重点将逐渐转向功能基因组的研究。而蛋白质是基因功能的实施者，是生命过程及现象的直接体现者，没有对蛋白质进行深入的分析，就无法了解到生物学问题发生的本质。新突变是遗传学研究的重要对象，也是功能基因研究的主要材料，遗传学发展的众多成果取得都得益于对突变基因的研究。家蚕有四百多种突变品种，石蚕st是其中比较典型的体型突变之一。其最主要的特征就是表皮紧绷，身体硬实，各环节后缘肿胀，且这种性状在5龄盛食期至上簇前表现尤为明显。目前双向凝胶电泳技术联合质谱技术是蛋白质组学研究中应用最为广泛的分析方法，这恰好为突变材料的研究提供了良好的机会，利用其原理简单，操作便捷的研究特点，通过比较突变蚕体与正常蚕体的组织样品，可以找出与突变基因功能相关的关键蛋白，充分地阐明突变基因的遗传基础，扩大研究利用。本文首先以家蚕C108为回交亲本构建了石蚕st近等基因系C8，通过研究C8与C108的差异性来反应石蚕st突变体与野生型差异。比较C8与C108表皮的几丁质含量，发现C8表皮组织中几丁质含量比C108中稍低，但差异并不显著，几丁质含量与这种突变性状的形成关系还需进一步研究。其次本文运用蛋白质双向电泳技术比较分析了C8与C108的表皮组织、中肠组织、脂肪体组织的蛋白质构成差异，利用软件分析挑选了39个蛋白进行基质辅助激光解吸飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS），成功鉴定31个蛋白，其中以酶类蛋白为主，还包括结构蛋白、转录因子、热激蛋白、糖蛋白、转运蛋白等等，另外还鉴定到5个功能未知蛋白。为了对双向电泳结果进行验证，本文从已鉴定到的差异蛋白中挑选GSTd2、GSTs1、Pglym、Tpi、Pdi5个酶类蛋白基因，以家蚕RpS3基因为内参，利用Real-timePCR分析这5个酶类基因在C8与C108的5龄第5天幼虫表皮中的相对表达水平，结果与二维电泳基本一致，但其中只有GSTs1、Pglym、Tpi这3个基因的转录差异达到显著水平（P＜0.05）。这3个基因是怎样受到调控来影响性状的形成还需进一步研究。

关键词：石蚕突变体几丁质双向电泳基质辅助激光解吸飞行时间质谱

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

家蚕石蚕突变(st)近等基因系与其回交亲本的表皮蛋白质组学差异分析

引用

蚕业科学 2013年第3期39卷 486-491页

作者：杜畅汪婉琳王学杨张彦徐家萍安徽农业大学生命科学学院合肥230036

以家蚕石蚕突变(st)近等基因系C8和其回交亲本C108(正常体型)的5龄幼虫表皮组织为材料,运用双向电泳(2-DE)技术分析家蚕st突变体与正常蚕体的表皮蛋白质组成差异。从2-DE图谱中选取表达差异较明显的蛋白点,用基质辅助激光解析飞行时间质... 详细信息

以家蚕石蚕突变(st)近等基因系C8和其回交亲本C108(正常体型)的5龄幼虫表皮组织为材料,运用双向电泳(2-DE)技术分析家蚕st突变体与正常蚕体的表皮蛋白质组成差异。从2-DE图谱中选取表达差异较明显的蛋白点,用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)成功鉴定出13种蛋白质,其中酶类相关蛋白质占50%以上。通过Real-time PCR检测这些酶类蛋白质基因在C8和C108的5龄幼虫表皮组织的转录水平,发现谷胱甘肽S-转移酶σ1(GSTs1)、磷酸甘油酸变位酶(Pglym)、磷酸丙糖异构酶(TPi)3个酶类蛋白质基因的转录水平差异显著,其中Pglym和TPi在C8表皮中的转录水平明显高于在C108表皮中的转录水平,而GSTs1在C108表皮中的转录水平相对较高。初步推测这些差异蛋白质可能与st突变体形成和导致蚕体硬实的性状有关。

关键词：家蚕石蚕突变体差异蛋白质双向电泳基质辅助激光解析飞行时间质谱基因转录荧光定量PCR

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：