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基于GC-MS与生物信息学探讨矮地茶中挥发油治疗慢性阻塞性肺疾病的主要活性成分及作用机制

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中国现代应用药学 2023年第1期40卷 38-46页

作者：刘国伦赵迪冯素香河南中医药大学郑州450046 呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心郑州450046 河南中医药防治呼吸病重点实验室郑州450046

目的基于GC-MS技术和系统生物学方法预测矮地茶挥发性成分治疗慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructive pulmonary disease,COPD)的作用机制。方法采用GC-MS分析矮地茶挥发油成分并通过面积归一化法确定各成分的相对含量,利用TCMID、TCMSP... 详细信息

目的基于GC-MS技术和系统生物学方法预测矮地茶挥发性成分治疗慢性阻塞性肺疾病(chronicobstructive pulmonary disease,COPD)的作用机制。方法采用GC-MS分析矮地茶挥发油成分并通过面积归一化法确定各成分的相对含量,利用TCMID、TCMSP、PharmMapper数据库筛选矮地茶挥发油主要活性成分与靶点,运用Cytoscape软件构建矮地茶“成分-靶点”网络,OMIM、Genecards数据库挖掘COPD相关靶点,利用String数据库和Cytoscape软件构建并绘制蛋白互作网络;通过Metascape数据库进行通路富集分析;进一步借助DiscoveryStudio(Version4.5)软件评估化合物与核心靶点的亲和能力。结果筛选出5个主要共有活性成分,潜在靶点154个,核心靶点包括NTRK1、TNF、VEGFA、MAPK1和M2C2。通过GO富集分析得到2665个条目(P矮地茶挥发油可能通过TNF、VEGFA、MAPK1等靶点调节VEGF、TNF、NF-κB等通路治疗COPD。

关键词：矮地茶挥发油气相色谱-质谱联用网络药理学分子对接

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矮地茶挥发油化学成分的研究

中草药 1989年第10期20卷 5-8页

作者：尹鲁生范俊源湖南医科大学

采用毛细管气相色谱和GC-MS-DS联用方法分析了矮地茶挥发油中的化学成分。从分离出的103个色谱峰中鉴定了61种,并测定其相对含量。

关键词：矮地茶挥发油化学成分

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苗药矮地茶的HPLC指纹图谱研究

中药材 2014年第9期37卷 1570-1573页

作者：徐昌艳张丽艳汪毅魏升华覃容贵迟明艳贵阳医学院贵州贵阳550004 贵阳中医学院贵州贵阳550002

目的:建立苗药矮地茶的HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长为250 nm。结果:对10批贵州不同产地样品进行了分析,确定了32个... 详细信息

目的:建立苗药矮地茶的HPLC指纹图谱分析方法。方法:采用HPLC法,Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温35℃,检测波长为250 nm。结果:对10批贵州不同产地样品进行了分析,确定了32个共有峰,构成了矮地茶的HPLC指纹图谱,其中4个共有峰得到指认,分别为没食子酸、岩白菜素、绿原酸、槲皮苷。结论:此方法简便,准确,重复性好,可用于矮地茶的HPLC指纹图谱测定,为今后规范其药材资源及质量评价提供科学依据。

关键词：苗药矮地茶 HPLC指纹图谱

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基于ITS2序列的矮地茶药材基因识别

中药材 2015年第11期38卷 2277-2280页

作者：答国政张秀桥姚辉王志平赵博张超胡志刚湖北中医药大学药学院湖北武汉430065 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 中国中医科学院中药研究所北京100700

目的:采用ITS2序列鉴定从市场上收集的矮地茶药材,为保证矮地茶用药安全提供可靠的基因识别方法。方法:收集矮地茶药材基原物种紫金牛及其混伪品共17个物种56份样品,并从NCBI下载6条相关序列,分析上述物种ITS2序列的种内和种间变异位点... 详细信息

目的:采用ITS2序列鉴定从市场上收集的矮地茶药材,为保证矮地茶用药安全提供可靠的基因识别方法。方法:收集矮地茶药材基原物种紫金牛及其混伪品共17个物种56份样品,并从NCBI下载6条相关序列,分析上述物种ITS2序列的种内和种间变异位点、Kimura 2-parameter(K2P)距离,以邻接(NJ)法构建系统树,建立基于ITS2序列的矮地茶药材DNA条形码鉴定技术方法。同时,从市场上随机收集15份矮地茶药材样品,通过ITS2序列比对和构建系统聚类树判定药材真伪。结果:紫金牛ITS2序列种内K2P距离最大值(0.0059)和平均值(0.0010)均明显小于其与混伪品种间K2P距离最小值(0.0364)和平均值(0.1159),系统NJ树能将紫金牛与混伪品明显区分开;15份矮地茶药材的序列比对和系统NJ树鉴定结果表明,其中13份为正品,2份为混伪品。结论:本研究建立了基于ITS2序列的矮地茶药材DNA条形码鉴定技术方法,为快速检测市场流通的矮地茶药材真伪提供了可借鉴的基因识别方法。

关键词：矮地茶紫金牛 ITS2序列基因识别

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矮地茶药理作用研究

时珍国医国药 2009年第12期20卷 3002-3003页

作者：刘伟林杨东爱余胜民黄琳芸陈少锋郭力城广西壮族自治区食品药品检验所广西南宁530021 广西民族医药研究所广西南宁530001

目的对矮地茶水提取物和醇提取物的抗炎、镇痛作用及急性毒性进行研究。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、醋酸扭体法观察矮地茶的抗炎、镇痛作用;对矮地茶水提物及醇提物的半数致死量(LD50)进行测定,观察其急性毒性。结果矮地茶对二甲... 详细信息

目的对矮地茶水提取物和醇提取物的抗炎、镇痛作用及急性毒性进行研究。方法采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、醋酸扭体法观察矮地茶的抗炎、镇痛作用;对矮地茶水提物及醇提物的半数致死量(LD50)进行测定,观察其急性毒性。结果矮地茶对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显的抑制作用(P矮地茶水提物及醇提物对小鼠灌胃给药的LD50分别为(115.77±10.31)g/kg,95%可信限为(105.92～126.54)g/kg;(94.71±10.13)g/kg,95%可信限为(85.12～105.38)g/kg。结论矮地茶具有一定的抗炎、镇痛作用;矮地茶水提物及醇提取物未出现其它毒性反应。

关键词：矮地茶药理作用急性毒性

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矮地茶的研究进展

贵州农业科学 2009年第11期37卷 79-82页

作者：陈晓文宋良科谢娟西南交通大学生命科学与工程学院四川成都610031 四川同道堂药业有限公司四川成都610030

因矮地茶良好的药用价值和观赏价值,笔者等针对近年来对矮地茶及其同属植物的化学成分、药理作用、抗菌活性以及组织培养、栽培技术的研究,对其进行了系统的分析,认为可为矮地茶的现代药理药效学、成方制剂的研究以及综合利用提供参考。

关键词：矮地茶药用价值观赏价值综合利用

矮地茶HPLC指纹图谱及5个化学成分定量分析

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中药材 2022年第2期45卷 397-400页

作者：何翠薇曾令阳杜成智侯小涛刘同祥邓家刚广西中医药大学广西南宁530200 中央民族大学药学院北京100810 广西-东盟食品检验检测中心广西南宁530025 广西中药医药大学广西中药药效研究重点实验室广西南宁530200

目的:建立矮地茶的HPLC指纹图谱并测定其中5个化学成分含量,为矮地茶药材的质量控制提供实验依据。方法:采用Ultimate XB-C_(18)(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速为0.6 mL/min;检测波长为230 nm... 详细信息

目的:建立矮地茶的HPLC指纹图谱并测定其中5个化学成分含量,为矮地茶药材的质量控制提供实验依据。方法:采用Ultimate XB-C_(18)(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱;以0.1%磷酸溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;流速为0.6 mL/min;检测波长为230 nm;柱温为30℃;进样量为5μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”建立10批矮地茶HPLC指纹图谱,并对其中5个成分进行含量测定。结果:建立了矮地茶HPLC指纹图谱,共标定了14个色谱峰,指认了其中5个成分,矮地茶中没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、槲皮苷、杨梅苷含量分别为0.21~0.61 mg/g、2.85~9.59 mg/g、0.67~1.52 mg/g、0.26~1.01 mg/g、0.51~3.36 mg/g。结论:该研究建立的矮地茶HPLC指纹图谱及5个成分含量测定方法稳定、简便,可为矮地茶质量评价提供参考。

关键词：矮地茶 HPLC指纹图谱多组分定量

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矮地茶化学成分及质量标准提升研究

矮地茶化学成分及质量标准提升研究

作者：曾令阳广西中医药大学

学位级别：硕士

紫金牛科植物因含丰富的抗炎成分而受到国内外学者的广泛关注和研究,国内外学者对紫金牛科植物的根、茎、叶的化学成分进行了分析研究,分离得到香豆素类、黄酮类、皂苷类和生物碱类等多种类型的化合物,其中香豆素类和黄酮类化合物大多... 详细信息

紫金牛科植物因含丰富的抗炎成分而受到国内外学者的广泛关注和研究,国内外学者对紫金牛科植物的根、茎、叶的化学成分进行了分析研究,分离得到香豆素类、黄酮类、皂苷类和生物碱类等多种类型的化合物,其中香豆素类和黄酮类化合物大多具有良好的药理活性。为进一步开发利用紫金牛科植物的药用资源,阐明矮地茶的药效物质基础,本文对紫金牛科植物矮地茶的化学成分和质量控制进行了研究。目的:本研究以不同产地的10个批次矮地茶为研究对象,采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶样品进行化学成分研究,研究其基础化学成分;运用高效液相色谱法,获得10个不同批次矮地茶的指纹图谱信息,建立矮地茶HPLC指纹图谱质量评价方法,运用SPSS21.0分析软件对矮地茶共有峰进行聚类分析和主成分分析;建立同时测定矮地茶中5个化学成分的HPLC含量测定方法,利用该方法对10个批次不同产地的矮地茶中的没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、槲皮苷、杨梅苷等同时进行含量测定。方法:（1）矮地茶化学成分的研究:采用75%甲醇超声提取矮地茶样品粉末。并采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶样品进行化学成分研究,在电喷雾离子源负电子模式下,采用Waters CORTECS UPLC T3色谱柱（2.1mm×100mm,1.6μm）,以0.1%甲酸溶液-乙腈为流动相,流速为0.3 m L/min,柱温:30℃,进样量:1μL。利用一级全扫描质谱得到其化学成分的精确相对分子质量和元素信息,再根据二级全扫描质谱获得碎片离子信息,最终对矮地茶的化学成分进行结构鉴定,以期研究其药效物质基础。（2）矮地茶HPLC指纹图谱的研究:运用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C18（4.6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱）,流速0.6m L/min,检测波长为230nm,进样量5μL,柱温30℃。将得到的10个批次不同产地的矮地茶的HPLC图,导入《中药指纹图谱相似度评价系统》（2012年版本）,建立了10个批次矮地茶的指纹图谱,并进行相似度评价。将各共有峰峰面积导入SSPS21.0统计软件,对其进行聚类分析和主成分分析。（3）矮地茶中5个成分含量测定方法的建立:运用高效液相色谱法,色谱柱为Ultimate XB-C18（4.6mm×250mm,5μm）;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（梯度洗脱）;流速1m L/min;检测波长为270nm,进样量5μL,柱温30℃。结果:（1）采用UPLC-Q-TOF-MS对矮地茶进行基础化学成分研究,鉴定出了16个化学成分,其中有2个香豆素类化合物、6个黄酮类化合物、1个三萜皂苷类成分,1个甾醇类成分、4个苯醌类成分、2个茶多酚类成分,并推测出其可能的裂解途径。（2）研究建立了10个批次不同产地的矮地茶的HPLC指纹图谱。以8号峰（岩白菜素）为参照峰,确认了14个共有峰,其中的5个峰得到了指认,分别为没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、杨梅苷和槲皮苷;并用相似度软件分析,发现10个批次不同产地的矮地茶的相似度在0.903～0.992之间,说明不同产地的矮地茶样品化学成分相似,质量差异不大;通过聚类分析可以把10个批次的矮地茶分为2大类,S3、S6、S7、S9、S10为第一类,S1、S2、S4、S5、S8为第二类;主成分分析结果表明有3个主成分,其累计方差的贡献率为98.62%。（3）建立了同时测定矮地茶中5种活性成分的HPLC含量测定方法,没食子酸、岩白菜素、表儿茶素、杨梅苷、槲皮苷的质量浓度线性范围分别为:0.01584～0.1584、0.3010～3.0100、0.1674～1.6740、0.0360～0.3600、0.0800～0.8000μg,相关系数均大于0.99992;精密度（n=6）、重复性（n=6）、稳定性（24 h,n=6）试验的RSD均小于3%;各成分平均加样回收率分别为:98.66%、100.24%、101.87%、101.38%、100.35%（RSD值在0.63%～2.49%之间）;10个批次不同产地的矮地茶中,上述5个成分的含量分别为:0.205～0.613、2.847～5.590、0.647～1.520、0.256～1.005、0.508～3.360mg。结论:本研究通过高效液相色谱-质谱联用的技术鉴定出矮地茶样品中的16个成分,能够阐明矮地茶的部分化学成分,为其药理作用研究和药效研究提供物质基础依据;运用高效液相色谱法,建立了矮地茶指纹图谱共有模式特征性较强,可用于矮地茶的定性研究,建立的指纹图谱质量评价方法快速简便、稳定可靠,能够有效的应用于矮地茶药材真伪的鉴别;本研究建立了矮地茶的5种化学成分同时含量测定的方法,该方法操作简便、重复性好,可用于矮地茶中5种成分的含量测定。本研究能够为矮地茶的质量控制

关键词：矮地茶化学成分指纹图谱含量测定液质联用

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矮地茶种质资源与主要止咳—抗炎组分的研究

矮地茶种质资源与主要止咳—抗炎组分的研究

作者：谢娟西南交通大学

学位级别：硕士

目的:以矮地茶的种质资源调查与整理为基础,对矮地茶的资源分布、分类地位、解剖学特性、药材性状、止咳化痰组分进行研究,探索其种质形态与止咳化痰不同组分的相关关系,为优良种质的筛选和药材质量控制的完善提供参考,为临床用药和进... 详细信息

目的:以矮地茶的种质资源调查与整理为基础,对矮地茶的资源分布、分类地位、解剖学特性、药材性状、止咳化痰组分进行研究,探索其种质形态与止咳化痰不同组分的相关关系,为优良种质的筛选和药材质量控制的完善提供参考,为临床用药和进一步研究矮地茶的药效学奠定基础。方法:以文献查阅-整理-植物调查法,拟确定矮地茶传统药用功效与岩白菜素、山奈酚、槲皮素等止咳化痰组分的相关性,运用植物学、植物解剖学、中药鉴定学知识与实验技术对矮地茶进行分类学处理与鉴定,结合天然药物化学、仪器分析、药物分析等学科的知识与实验技术,用TLC、IR定性分析不同种质的主要化学组分,用HPLC法测定矮地茶不同种质不同药用部位中岩白菜素、山奈酚、槲皮素的含量并进行色谱条件优化。结果:矮地茶为我国多民族较常用的传统止咳化痰药物之一,分布较广,在自然状况下产生了不同的种质,这些不同种质在形态上可以区别,但在细胞组织结构上无明显差异。TLC、HPLC实验结果均表明矮地茶不同种质都含有岩白菜素、山奈酚、槲皮素,而蔓性斜升型种质的岩白菜素含量高于直立型种质,山奈酚、槲皮素含量之和低于直立型种质。矮地茶不同种质的叶中三种组分均高于茎,而采用IR法在鉴定矮地茶不同种质时有一定的参考价值。结论:矮地茶止咳化痰功效与岩白菜素、山奈酚、槲皮素等紧密相关,其含量不同,作用效果有一定差异,而不同种质的矮地茶用于活血、利湿应与山奈酚、槲皮素、没食子酸含量有关。因此矮地茶不同种质从所含单体化合物角度分析,如以止咳为主,化痰（抗炎）为辅,蔓性斜升型优于直立型;如以抗炎为主,止咳为辅,直立型优于蔓性斜升型。从另一角度分析止咳化痰功效,矮地茶叶中止咳化痰组分远高于茎,明显优于全株入药,既可减少用药量又可缩短再生周期,有利于资源的循环利用和种质的保存。但种质的划分如锯齿和细锯齿的合理性有待进一步研究。

关键词：矮地茶种质功效止咳化痰组分含量测定