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短芽孢杆菌RL-2絮凝机理研究

环境工程学报 2007年第6期1卷 39-42页

作者：罗平罗固源左赵宏重庆大学化学化工学院重庆400044 重庆大学城市建设与环境工程学院重庆400045

由编号为RL-2的短芽孢杆菌(Bacillus brevis)产生的生物高分子,经研究发现是一种对高岭土悬液有较高絮凝活性的阴离子型絮凝剂。对絮凝剂的热处理及酶处理表明,其活性成分为多糖;经茚三酮试验,Molish反应,薄层色谱及红外光谱分析表明,... 详细信息

由编号为RL-2的短芽孢杆菌(Bacillus brevis)产生的生物高分子,经研究发现是一种对高岭土悬液有较高絮凝活性的阴离子型絮凝剂。对絮凝剂的热处理及酶处理表明,其活性成分为多糖;经茚三酮试验,Molish反应,薄层色谱及红外光谱分析表明,该絮凝剂为一种阴离子型多糖絮凝剂;ζ电位测定及絮凝剂与高岭土颗粒之间结合键的检测表明,絮凝剂与高岭土颗粒间的结合力为氢键,絮凝过程基于“桥联”机理;絮凝剂和高岭土在絮凝剂的活性部位———多糖中的羟基或羧基以氢键相结合,经架桥作用絮凝沉淀。

关键词：微生物絮凝剂絮凝机理架桥作用短芽孢杆菌

短芽孢杆菌耐碱性木聚糖酶(xylB)的分子生物学研究

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食品与生物技术学报 2009年第1期28卷 86-90页

作者：胡春霞陆平李卫芬许梓荣浙江大学教育部动物分子营养重点实验室浙江杭州310029 绍兴文理学院元培学院生命科学系浙江绍兴312000

根据已发表的环状芽孢杆菌(Bacillus circulan)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)木聚糖酶基因序列设计引物,首次扩增出短芽孢杆菌(Bacillus brevis)中的-β1,4-内切木聚糖酶(以下简称木聚糖酶,E.C.3.***.1.8)基因片段。序列分析表明,该... 详细信息

根据已发表的环状芽孢杆菌(Bacillus circulan)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)木聚糖酶基因序列设计引物,首次扩增出短芽孢杆菌(Bacillus brevis)中的-β1,4-内切木聚糖酶(以下简称木聚糖酶,E.C.3.***.1.8)基因片段。序列分析表明,该基因与已登录的木聚糖酶基因AF490979.1和AF490980.1分别有97%和96%的同源性,与其它芽孢杆菌属的同源性也较高。将此基因片段插入表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,转化大肠杆菌***21(DE3)。重组基因工程菌破碎后进行SDS-PAGE电泳检测,结果表明,IPTG诱导后,木聚糖酶基因在大肠杆菌的胞内获得高效表达,且酶活力最高可达26.14 U/mL。重组木聚糖酶最适温度为50℃,最适pH为9.0。

关键词：木聚糖酶克隆表达大肠杆菌短芽孢杆菌

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短芽孢杆菌固态发酵物成分的GC—MS分析

天然产物研究与开发 2013年第B12期25卷 47-50页

作者：陈晓珍杨涛方冬梅李国友焦威李宇飞顾健黄田钫中国科学院成都生物研究所成都610041

采用气相色谱质谱联用（GC-MS）分析用丙酮从短芽孢杆菌QTM-9固态发酵物中浸提得到的成分，质量分数用面积归一化法计算。结果表明，该菌经固态发酵产生的成分种类较丰富，一共鉴定了69种组分，其主要成分包括烷类、烯烃类、酮类、醇类... 详细信息

采用气相色谱质谱联用（GC-MS）分析用丙酮从短芽孢杆菌QTM-9固态发酵物中浸提得到的成分，质量分数用面积归一化法计算。结果表明，该菌经固态发酵产生的成分种类较丰富，一共鉴定了69种组分，其主要成分包括烷类、烯烃类、酮类、醇类、酸类、酯类和萜类等，占脂溶性成分的98．65％。分析结果发现，在200℃以上的成分占分析得到的成分总量的78．05％，说明短芽孢杆菌QTM-9固态发酵物的高沸点成分较为丰富。

关键词：短芽孢杆菌固态发酵 GC-MS

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短芽孢杆菌异源表达链霉菌磷脂酶D的研究

短芽孢杆菌异源表达链霉菌磷脂酶D的研究

作者：罗唯一厦门大学

学位级别：硕士

磷脂酶D（PLD,EC 3.***.4.4）能够通过转磷脂酰反应在普通的磷脂中引入功能性极性头部,合成一些具有药用价值的新型生物活性磷脂,但磷脂酶D因价格昂贵、产量低,严重限制了其在工业上的广泛应用。链霉菌PLD由于其最高的转磷脂酰活性在近些... 详细信息

磷脂酶D（PLD,EC 3.***.4.4）能够通过转磷脂酰反应在普通的磷脂中引入功能性极性头部,合成一些具有药用价值的新型生物活性磷脂,但磷脂酶D因价格昂贵、产量低,严重限制了其在工业上的广泛应用。链霉菌PLD由于其最高的转磷脂酰活性在近些年来一直备受关注,很多研究都通过基因工程重组表达来提高链霉菌PLD产量。短芽孢杆菌（Brevibacillus choshinensis）是一种非致病性的革兰氏阳性菌,胞外蛋白分泌能力强,同时几乎不向胞外分泌蛋白酶,有利于目的蛋白的稳定,而且还具有促进蛋白中二硫键形成的因子,利于外源蛋白的折叠,因此本研究选择短芽孢杆菌异源表达链霉菌PLD。首先采用组成型弱启动子P5调控PLD的表达,结果显示短芽孢杆菌能表达链霉菌PLD,但酶活很低（0.026 U/mL）。随后更换组成型强启动子P2,发现存在Mg2+情况下,胞外PLD酶活相较于P5启动子的表达提高了 67倍,达到2 U/mL。在确定启动子后,经过培养基筛选、培养基成分优化和Mg2+胁迫等措施将胞外PLD酶活提高到9.3 U/mL,比产率为0.19 U/mL/h,是原始菌株Streptomyces antibioticus（0.048 U/mL/h）的4倍。另一方面,针对Mg2+胁迫能够明显提高PLD酶活和改善短芽孢杆菌生长状态,对其调控机理进行了研究。通过测定相关基因转录水平和胞内离子浓度变化发现:在无Mg2+存在时,短芽孢杆菌利用强启动子P2在表达PLD时会在胞内积累PLD,到达一定程度后会抑制短芽孢杆菌的生长,同时表达过强会使PLD折叠错误;而Mg2+胁迫能抑制强启动子P2的作用,使PLD基因在生长过程中维持在一个相对低的水平,与短芽孢杆菌的分泌效率相匹配,使PLD在能及时分泌出去的同时也能保证PLD能够充分折叠,从而提高胞外PLD酶活。此外,表达链霉菌PLD会使胞内Ca2+浓度增加,而胞内Ca2+增加会引起一系列不利的生理代谢变化,造成细胞损伤甚至死亡;Mg2+胁迫后会明显降低胞内Ca2+浓度,胞内离子被重新分布,改善了短芽孢杆菌生长状态,有利于进一步表达PLD。本论文通过优化启动子、改变培养基成分及高盐胁迫等措施极大地提高了短芽孢杆菌的PLD产量,为首次在短芽孢杆菌中表达链霉菌PLD的研究。短芽孢杆菌胞外分泌PLD有利于下游的分离纯化,为PLD工业化生产奠定了基础,同时也因其非致病性在制药与食品工业上具有广阔的前景。

关键词：链霉菌PLD 短芽孢杆菌盐胁迫培养基优化胞内离子变化

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短芽孢杆菌PB1对聚乙烯的降解

山东农业大学学报（自然科学版） 2023年第6期54卷 858-864页

作者：肖梦杰王怡霏王桂端赵欣罗海龙朱利霞周口师范学院生命科学与农学学院河南周口466001

为寻求一种环境友好的方法治理聚乙烯污染,以聚乙烯为唯一碳源的无机盐培养基,从长期覆盖聚乙烯地膜的农田土壤中筛选出一株聚乙烯降解细菌PB1。PB1菌落呈圆形、边缘整齐、表面湿润,革兰氏阳性,杆状。16S rDNA基因序列比对发现菌株PB1... 详细信息

为寻求一种环境友好的方法治理聚乙烯污染,以聚乙烯为唯一碳源的无机盐培养基,从长期覆盖聚乙烯地膜的农田土壤中筛选出一株聚乙烯降解细菌PB1。PB1菌落呈圆形、边缘整齐、表面湿润,革兰氏阳性,杆状。16S rDNA基因序列比对发现菌株PB1与多株短芽孢杆菌属细菌同源性高于99%,从而初步判定菌株PB1为短芽孢杆菌(Brevibacillus sp.)。将PB1与聚乙烯共培育35 d后,聚乙烯膜片失重率为3.05%,同时培养液中菌液浓度(OD600)总体呈上升趋势;扫描电镜观察发现降解后聚乙烯膜片表面出现明显的坑洞和凹痕,并且有丝状裂痕产生;傅立叶红外变换光谱仪观察发现聚乙烯结构中引入了活性官能团醚键,漆酶和锰过氧化物酶活力在35 d时分别为0.125 IU·mL^(-1)和0.126 IU·mL^(-1)。印证了菌株PB1是一株高效聚乙烯降解菌株,研究结果丰富了聚乙烯降解菌的菌种资源,为进一步研究聚乙烯的生物降解奠定基础。

关键词：短芽孢杆菌聚乙烯降解

一种马尾松菌根辅助细菌--短芽孢杆菌的筛选及鉴定

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林业科学 2015年第5期51卷 159-164页

作者：李倩吴小芹叶建仁南京林业大学南方现代林业协同创新中心南京林业大学林学院南京210037

【目的】菌根辅助细菌与菌根真菌是林木根际重要的微生物菌群,为探讨二者互作关系,采集马尾松人工林中有外生菌根真菌彩色豆马勃子实体的菌根根际土壤,对分离获得的74株细菌进行菌根辅助细菌的筛选。【方法】通过干皿对抗法筛选获得1株... 详细信息

【目的】菌根辅助细菌与菌根真菌是林木根际重要的微生物菌群,为探讨二者互作关系,采集马尾松人工林中有外生菌根真菌彩色豆马勃子实体的菌根根际土壤,对分离获得的74株细菌进行菌根辅助细菌的筛选。【方法】通过干皿对抗法筛选获得1株能高效促进外生菌根真菌彩色豆马勃(Pt2)和红绒盖牛肝菌(Xc)生长的菌根辅助细菌MPt17。【结果】MPt17菌株对Pt2和Xc菌丝生长的平均增长率分别为48.6%和25.0%,其胞外代谢产物对Pt2和Xc菌丝生长也有明显的促进作用,平均增长率分别为129.6%和29.5%,该菌株的胞外代谢产物对Pt2和Xc的生物量也有相一致的影响,生物量增长率分别为124.2%和34.2%。盆栽试验结果表明,双接种Pt2-MPt17处理、双接种Xc-MPt17处理、单接种Pt2、单接种Xc和单接种MPt17较未接种处理的马尾松苗高分别提高78.0%,68.2%,32.7%,39.2%和53.4%,地径分别提高46.3%,57.5%,17.5%,23.8%和25.0%。由此可以确定MPt17既是菌根辅助细菌又是根际促生细菌。通过对MPt17菌株的菌落形态观察、BIOLOG细菌自动鉴定仪鉴定及16Sr DNA序列测定,初步鉴定该菌株为短芽孢杆菌(Brevibacillus reuszeri),在Gen Bank数据库中的登录号为KF891383。【结论】MPt17菌株与外生菌根真菌Pt2和Xc双接种马尾松幼苗对苗木的生长都具有明显的促进作用,而且MPt17菌株单接种马尾松幼苗也能在一定程度上促进苗木的生长。通过外生菌根真菌(EMF)-菌根辅助细菌(MHB)-植物三者互作机制进行植物生长研究的方法,对类似研究具有重要意义。

关键词：马尾松外生菌根真菌菌根辅助细菌短芽孢杆菌

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具有分泌蛋白能力的短芽孢杆菌的筛选及鉴定

微生物学报 2002年第6期42卷 693-699页

作者：彭清忠张惟材朱厚础军事医学科学院生物工程研究所北京100071

短芽孢杆菌 (Bacillusbrevis)具有分泌蛋白能力强和胞外蛋白酶活性低的特性 ,是分泌表达外源蛋白较理想的宿主。为获得分泌表达系统较理想的宿主菌 ,建立了短芽孢杆菌高效筛选模型 ,从 80 0余株细菌中筛得 8株具有高蛋白分泌能力且没有... 详细信息

短芽孢杆菌 (Bacillusbrevis)具有分泌蛋白能力强和胞外蛋白酶活性低的特性 ,是分泌表达外源蛋白较理想的宿主。为获得分泌表达系统较理想的宿主菌 ,建立了短芽孢杆菌高效筛选模型 ,从 80 0余株细菌中筛得 8株具有高蛋白分泌能力且没有胞外蛋白酶活性的候选菌。经多相分类学初步鉴定其中

关键词：筛选鉴定蛋白分泌短芽孢杆菌

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短芽孢杆菌的转化方法

吉首大学学报（自然科学版） 2004年第4期25卷 35-38页

作者：彭清忠彭清静张惟材朱厚础吉首大学资源与环境科学学院湖南吉首416000 军事医学科学院生物工程研究所北京100071

采用Tris-PEG法、电击转化法和TSS方法对5株野生短芽孢杆菌进行了转化.其中,Tris-PEG法转化短芽孢杆菌50和735,电击转化短芽孢杆菌50取得成功,转化率为102个转化子/μgDNA.

关键词：短芽孢杆菌电击转化 PEG DNA 野生转化方法转化率

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短芽孢杆菌RL-2的絮凝性能研究

工业用水与废水 2006年第4期37卷 61-63页

作者：罗平罗固源左赵宏重庆大学化学化工学院重庆400044 重庆大学城市建设与环境工程学院重庆400044

从重庆城南污水处理厂活性污泥中筛选出一株高效胞外絮凝剂产生菌RL-2,初步鉴定为短芽孢杆菌(Bacillusbrevis)。该菌株可产生多糖类絮凝剂。RL-2絮凝高岭土悬浊液的影响因素研究结果表明:CaCl2是微生物絮凝剂RL-2的良好助凝剂,当Ca2+存... 详细信息

从重庆城南污水处理厂活性污泥中筛选出一株高效胞外絮凝剂产生菌RL-2,初步鉴定为短芽孢杆菌(Bacillusbrevis)。该菌株可产生多糖类絮凝剂。RL-2絮凝高岭土悬浊液的影响因素研究结果表明:CaCl2是微生物絮凝剂RL-2的良好助凝剂,当Ca2+存在时,絮凝剂的投加量为5～20mL/L,pH值在3～9范围内,该微生物絮凝剂可有效絮凝高岭土悬浊液,其絮凝率高达98.4%;同时,RL-2对多种固体悬浊液有明显的净化效果。

关键词：微生物絮凝剂短芽孢杆菌