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摇床吸附法微量细胞板短期培养快速检测流感病毒

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中国卫生检验杂志 2005年第5期15卷 522-523,541页

作者：胡逢蛟张姝付燕董红军浙江省宁波市疾病预防控制中心浙江宁波315010

目的:为在流感样疫情的调查中能够快速准确地查清流感病原,提高公共卫生突发性应急事件的快速反应能力。方法:摇床吸附微量细胞板短期培养法的荧光抗体染色用于快速检测流感病毒并与常规的病毒分离方法作比较。结果:对83份流感疑似病人... 详细信息

目的:为在流感样疫情的调查中能够快速准确地查清流感病原,提高公共卫生突发性应急事件的快速反应能力。方法:摇床吸附微量细胞板短期培养法的荧光抗体染色用于快速检测流感病毒并与常规的病毒分离方法作比较。结果:对83份流感疑似病人含漱液的快速检测结果与常规的细胞培养法病毒分离结果相比较,在病毒分离阳性的45份标本中,快速检测法也有34份阳性,阳性符合率为75%,敏感性测定达到了能够检测出0 01个血凝单位浓度的流感病毒。结论:微量细胞板荧光染色法检测流感病毒的敏感性要优于一般市售的快速诊断试剂盒。检测时间约在24h内,达到了快速准确的目的。

关键词：流感病毒细胞板微量摇床吸附法快速诊断试剂盒快速反应能力病毒分离方法荧光抗体染色短期培养法细胞培养法快速检测法阳性符合率敏感性测定荧光染色法应急事件公共卫生分离结果检测结果疑似病人检测时间

伴有dic(7;9)的急性淋巴细胞白血病的临床和实验研究

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中华血液学杂志 2005年第8期26卷 485-488页

作者：潘金兰薛永权姜海燕朱永进马力李天宇王勇吴亚芳苏州大学第一附属医院江苏省血液病研究所215006 苏州大学生命科学院无锡市第一人民医院无锡市儿童医院

目的分析具有d ic(7;9)的急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床和实验室特点。方法采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体,用R显带技术进行核型分析;采用bcr/ab l双色探针和间期荧光原位杂交(FISH)技术对其中6例ALL患者进行bcr/ab l重排检... 详细信息

目的分析具有d ic(7;9)的急性淋巴细胞白血病(ALL)的临床和实验室特点。方法采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体,用R显带技术进行核型分析;采用bcr/ab l双色探针和间期荧光原位杂交(FISH)技术对其中6例ALL患者进行bcr/ab l重排检测;分别应用绿色荧光标记的7号和红色荧光标记的9号着丝粒探针,以及由生物素及地高辛分别标记的7号和9号全染色体涂抹探针,对6例ALL患者进行FISH和染色体涂抹分析。结果d ic(7;9)ALL占同期ALL的0.88%;7例患者中2例为单纯d ic(7;9),4例同时伴有t(9;22)和其他染色体异常(初诊白细胞计数>100×109/L),1例伴有其他染色体异常而无t(9;22)(初诊白细胞计数<100×109/L);6例患者有不同程度的肝、脾和淋巴结肿大;进行免疫表型分析的6例患者中5例为B系ALL;双色FISH检则结果示6例患者中3例为bcr/ab l重排阳性,且6例患者衍生染色体着丝粒均为7号和9号着丝粒融合而成,染色体涂抹分析也证实7号和9号染色体之间发生了易位。结论d ic(7;9)是ALL中一种较少见的再现性异常,并有独特的临床和实验室特点。

关键词：急性淋巴细胞白血病骨髓细胞直接法短期培养法制备染色体核型分析

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一种改良的骨髓染色体制备与G显带方法

中华血液学杂志 2005年第10期26卷 631-632页

作者：栾树清刘明珪易诚予陆素贞聂益军江西医学院第一附属医院细胞基因诊断中心南昌330006

目前制备骨髓染色体方法主要有直接法、短期培养法和同步化法.同步化法操作技术要求高、分裂指数低,不易推广[1].随着间期荧光原位杂交技术及比较基因组杂交技术应用于白血病的研究,拓展了染色体分析的范围,提高了识别异常的能力,但因... 详细信息

目前制备骨髓染色体方法主要有直接法、短期培养法和同步化法.同步化法操作技术要求高、分裂指数低,不易推广[1].随着间期荧光原位杂交技术及比较基因组杂交技术应用于白血病的研究,拓展了染色体分析的范围,提高了识别异常的能力,但因荧光试剂和检测设备昂贵,尚难广泛应用于临床.我们介绍一种改良的骨髓染色体制备与G显带方法.我们应用该方法对150例恶性血液病患者进行骨髓染色体检查,获得了满意效果.现将具体方法介绍如下。

关键词：骨髓染色体检查染色体制备 G显带改良间期荧光原位杂交技术比较基因组杂交技术恶性血液病患者操作技术要求短期培养法

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九例脑膜瘤细胞遗传学研究

中华医学遗传学杂志 1995年第6期12卷 348-350+387页

作者：季明芳方思鸣唐秉航广东省中山市人民医院ＣＴ室广东省中山市肿瘤研究所同济医科大学生物教研室

采用短期培养法对９例脑膜瘤组织进行细胞遗传学分析，７例获得成功。其中４例干系核型正常，３例干系为２２单体并伴有其它染色体异常，且双微体出现率较高，１例标记染色体发现罕见的均染区。其它常累及的染色体有１、４、１７、１９... 详细信息

采用短期培养法对９例脑膜瘤组织进行细胞遗传学分析，７例获得成功。其中４例干系核型正常，３例干系为２２单体并伴有其它染色体异常，且双微体出现率较高，１例标记染色体发现罕见的均染区。其它常累及的染色体有１、４、１７、１９和２１号。本组染色体分析显示，２２号单体为脑膜瘤最恒定的染色体异常，其缺失与脑膜瘤病因学相关。

关键词：脑膜瘤染色体异常短期培养法

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实体肿瘤瘤组织染色体制作的探讨

肿瘤防治研究 1989年第3期16卷 182-183页

作者：周宏远黄梅高秀坤李世绩丘建春华西医科大学肿瘤研究所

本文用直接制作法和胶元酶处理后短期培养法,比较分析了对实体瘤瘤组织染色体制备的效果。结果发现用胶元酶处理后培养48小时后制片,获得了足够数量,分散良好的中期分裂相,作者认为实体瘤瘤组织染色体制作法的突破。对阐明肿瘤发生的染... 详细信息

本文用直接制作法和胶元酶处理后短期培养法,比较分析了对实体瘤瘤组织染色体制备的效果。结果发现用胶元酶处理后培养48小时后制片,获得了足够数量,分散良好的中期分裂相,作者认为实体瘤瘤组织染色体制作法的突破。对阐明肿瘤发生的染色体机制有着重要作用。

关键词：实体肿瘤组织染色短期培养法染色体制备中期分裂染色体结构异常常规制片活检组织细胞遗传学研究数目畸变

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尿路感染微生物快速鉴定与流行病学分析

尿路感染微生物快速鉴定与流行病学分析

作者：郭敏苏州大学

学位级别：硕士

目的:目前,临床尿路感染治疗主要存在中段尿培养时间长及致病菌多重耐药的难题。为此,本文拟围绕尿路感染微生物快速鉴定及主要病原菌分子流行病学展开研究,以期为临床快速诊断尿路感染、合理用药、避免暴发流行提供理论依据。方法:一... 详细信息

目的:目前,临床尿路感染治疗主要存在中段尿培养时间长及致病菌多重耐药的难题。为此,本文拟围绕尿路感染微生物快速鉴定及主要病原菌分子流行病学展开研究,以期为临床快速诊断尿路感染、合理用药、避免暴发流行提供理论依据。方法:一、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time-Of-Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)结合UF1000i、短期培养法在尿路感染微生物快速鉴定中的应用1、标本前处理-差速离心法浓集细菌。2、直接MALDI-TOF MS检测:将前处理后的沉淀直接进行质谱检测,并计算鉴定率。3、短期培养后MALDI-TOF MS检测:将直接质谱鉴定后剩余的沉淀混匀,接种于哥伦比亚血琼脂平板上,孵育5小时后有菌膜生长的进行质谱检测,并记录结果。4、ROC曲线计数细菌阈值:当直接质谱检测鉴定结果、短期培养后质谱检测鉴定结果与中段尿培养结果相符时,利用受试者工作曲线(ROC曲线),计算UF-1000i计数细菌阈值(cut-off)。二、尿路感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的流行病学分析1、微生物鉴定与药敏:利用Phoenix System-100BD自动化微生物学系统与纸片扩散法(K-B法)鉴定微生物与药敏试验。2、耐药表型确证实验:改良Hodge试验和改良碳青霉烯酶灭活试验检测碳青霉烯酶。3、耐药基因的检测:用PCR法,对产碳青霉烯酶菌株进行碳青霉烯酶编码基因和超广谱β-内酰胺酶基因检测,阳性菌株测序。4、分子流行病学分析:利用脉冲场凝胶电泳PFGE分析菌株的同源性。5、全基因组测序:二代测序仪测序。6、ST分型、血清荚膜分型及毒力基因检测:利用多重PCR技术,检测所有收集到的产碳青霉烯酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌。结果:一、MALDI-TOF MS结合UF1000i、短期培养法在尿路感染微生物快速鉴定中的应用1、质谱检测鉴定率:短期培养5小时后,取菌膜质谱检测鉴定率为87.2%,高于直接质谱检测鉴定率的77.1%。2、标本菌落计数对应质谱检测鉴定率:标本的菌落计数越多,则直接质谱检测鉴定率及短期培养后质谱检测鉴定率越高。3、质谱鉴定分值:本实验可以发现:短期培养后质谱检测分值≥1.7(大肠埃希菌≥1.5)的菌株数,明显多于直接质谱检测分值≥1.7(大肠埃希菌≥1.5)的菌株数。4、混合感染:不论是直接质谱检测,还是短期培养后质谱检测,大部分情况下只能鉴定出所占比例较高的菌种,但可信度较高。5、ROC曲线计数细菌阈值:当UF1000i检测细菌数值≥1100/μl时,直接质谱检测容易成功鉴定出菌种。同样,当UF1000i检测细菌数值≥470/μl时,短期培养后质谱检测容易成功鉴定出菌种。二、尿路感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的流行病学分析1、尿液标本中头孢噻肟耐药大肠埃希菌(CTX-R-ECO)检出率55.2%,略高于全国细菌耐药监测网(CARSS)监测数据,头孢噻肟耐药肺炎克雷伯菌(CTX-R-KPN)检出率46.0%,略低于全国细菌耐药监测网监测数据。2、本研究中,尿路感染分离到的耐碳青霉烯酶大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,分别为2株、11株。3、从耐药基因来看,我院产碳青霉烯酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中,产碳青霉烯酶NDM、KPC是主要的耐药机制。产ESBLs大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌,主要是以产CTX、TEM、SHV的菌株为主。4、同源性分析中,PFGE研究结果显示我院尿路感染大肠埃希菌为非克隆性传播。5、全基因组测序显示:4117个功能基因,多种耐药基因,一个完整的强毒力岛。6、ST分型、血清荚膜分型和毒力相关基因检测结果显示:尿路感染肺炎克雷伯菌均为ST11型,血清荚膜分型大多数为KL64型,毒力相关基因检测显示多样化。结论:1、与传统的尿培养相比,本研究中对尿培养标本进行差速离心浓集细菌,通过MALDI-TOF MS结合UF1000i、短期培养法在快速鉴定尿路感染微生物,具有简单快速、成本低、准确率高等优点,可极大提高MALDI-TOF MS技术快速鉴定尿路感染微生物的临床应用价值,对于临床快速诊断尿路感染、合理用药和及时控制尿路感染有着重要的临床意义。2、我院尿路感染大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌:对第三代头孢菌素、单环β-内酰胺类抗生素甚至碳青霉烯类抗生素出现耐药现象,尤其是ESBLs菌株、耐碳青酶烯酶菌株的出现,给临床治疗带来很大困难;与大多数其他城市一样,我院尿路感染CRE菌株主要是肺炎克雷伯菌;尿路感染肺炎克雷伯菌主要以携带blaKPC的克隆型ST11为主;非克隆性传播为尿路感染大肠埃希菌的主要传播方式。

关键词：尿路感染 MALDI-TOFMS 短期培养法 CRE 基因组测序

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胃癌的细胞遗传学研究现状

赣南医学院学报 1993年第2期13卷 99-101页

作者：夏建川张建华赣南医学院生物教研室赣南医学院生化教研室

尽管在胃癌中,已经发现一些细胞遗传学异常,但是有关恒定的区域异常很少报道。主要问题是对胃癌的细胞遗传学研究太少,造成这种情况的原因是对原发性胃癌的细胞遗传学研究存在许多技术上的困难,很难获得可分析的核型。其次是在研究方法... 详细信息

尽管在胃癌中,已经发现一些细胞遗传学异常,但是有关恒定的区域异常很少报道。主要问题是对胃癌的细胞遗传学研究太少,造成这种情况的原因是对原发性胃癌的细胞遗传学研究存在许多技术上的困难,很难获得可分析的核型。其次是在研究方法上的不同。

关键词：细胞遗传学研究细胞遗传学异常染色体形态实体瘤显带区域异常短期培养法大网膜转移灶纤维平滑肌瘤胸腹水渗出液

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培养时间及血清浓度对绒毛制备染色体的影响

中国生育健康杂志 1992年第1期11卷 34-35,46页

作者：杨巧芝四川省计划生育科研所组胚遗传室

任何组织或细胞制备染色体,确定其最佳培养时间及血清浓度是至关重要的。绒毛组织也不例外。至今有关绒毛组织的培养时间及血清浓度方面的研究甚少,国内尚未见报道。为此我们开展了这方面的研究。

关键词：血清浓度绒毛组织细胞滋养层产前诊断蜕膜组织培养瓶低温保存显带血清组短期培养法

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血液病的等臂染色体

国外医学.遗传学分册 1988年第1期 46-47页

作者：杨莉玲

本文报道了9例恶性血液病所观察到的i(7q)、i(11q)、i(17q)和i(21q)等臂染色体。作者认为等臂染色体的存在,在恶性变中可能起一定作用。本研究取9例白血病患者的骨髓、淋巴结和胸水细胞为材料,以直接法或短期培养法进行常规和G显带染... 详细信息

本文报道了9例恶性血液病所观察到的i(7q)、i(11q)、i(17q)和i(21q)等臂染色体。作者认为等臂染色体的存在,在恶性变中可能起一定作用。本研究取9例白血病患者的骨髓、淋巴结和胸水细胞为材料,以直接法或短期培养法进行常规和G显带染色体制备,根据ISCN鉴别染色体并进行病例分类;白血病和异常粒细胞综合征按FAB标准;非何杰金氏淋巴瘤按专业方案;何杰金氏病按Lukes-Rye分类;恶性淋巴肿瘤的临床分期按Ann-Arbor分类。结果:例1、2、5和6均有i(7q)染色体标记。例1诊断为获得性特发性铁粒幼细胞性贫血(AISA),例2为急性粒细胞

关键词：等臂染色体染色体制备短期培养法胸水细胞显带标记染色体 Arbor 性粒细胞异常染色体双着丝粒染色体