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短双歧杆菌对Aβ;导致的阿尔兹海默症小鼠肠道菌群及代谢物的影响

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食品与发酵工业 2022年第3期48卷 70-77页

作者：朱广素赵建新张灏陈卫王刚江南大学食品学院江苏无锡214122

为分析2株不同来源的短双歧杆菌对脑部微注射Aβ;蛋白导致的阿尔兹海默症小鼠肠道菌群及其代谢物的影响,给小鼠海马区注射Aβ;蛋白建立阿尔兹海默症小鼠模型,连续灌胃6周2株不同来源的短双歧杆菌,收集小鼠粪便,采用Illumina MiSeq高通... 详细信息

为分析2株不同来源的短双歧杆菌对脑部微注射Aβ;蛋白导致的阿尔兹海默症小鼠肠道菌群及其代谢物的影响,给小鼠海马区注射Aβ;蛋白建立阿尔兹海默症小鼠模型,连续灌胃6周2株不同来源的短双歧杆菌,收集小鼠粪便,采用Illumina MiSeq高通量测序技术分析菌群的多样性及物种组成,并采用GC-MS技术检测小鼠粪便中短链脂肪酸的含量。菌群多样性分析发现,Aβ;蛋白注射改变了小鼠的菌群多样性及物种结构,灌胃短双歧杆菌可一定程度上改善菌群紊乱。进一步在属水平和种水平分析各组菌群差异,发现灌胃短双歧杆菌MY显著提高了大鼠肠道中产短链脂肪酸菌Coprococcus spp.、Lactobacillus reuteri和Akkermansia muciniphila的相对丰度,且有效调控了肠道内3种短链脂肪酸的水平。短双歧杆菌MY可能通过调节肠道菌群及其代谢物短链脂肪酸的水平缓解小鼠的认知障碍。

关键词：短双歧杆菌脑肠轴短链脂肪酸阿尔兹海默症肠道菌群

莲子抗性淀粉体外消化的结构变化对短双歧杆菌增殖的影响

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中国食品学报 2022年第8期22卷 69-79页

作者：黄雅萍刘霞杨书捷卢旭缪松邓凯波郑宝东福建农林大学食品科学学院福州350002 中爱国际合作食品物质学与结构设计研究中心福州350002 福建省特种淀粉品质科学与加工技术重点实验室福州350002 爱尔兰农业与食品发展局Teagasc食品研究中心爱尔兰科克999014

抗性淀粉是一类重要的结肠微生物碳源,研究其构效关系,有助于了解其在体内的转化过程。以用微波法和水浴法制备的莲子抗性淀粉(MP-LRS3和WB-LRS3)为原料,通过体外消化,测定其在消化过程中结构的变化,建立与内源性短双歧杆菌的营养互作... 详细信息

抗性淀粉是一类重要的结肠微生物碳源,研究其构效关系,有助于了解其在体内的转化过程。以用微波法和水浴法制备的莲子抗性淀粉(MP-LRS3和WB-LRS3)为原料,通过体外消化,测定其在消化过程中结构的变化,建立与内源性短双歧杆菌的营养互作关系。结果表明:体外消化后MP-LRS3和WB-LRS3的结构均发生改变,其中结晶度显著升高(P短双歧杆菌的促增殖能力均随消化进程逐渐增强,在同一消化阶段前者的促增殖能力更强,这可能与消化环境对莲子抗性淀粉的解聚程度不同造成的结构差异有关。黏附结果与促增殖能力呈正相关,推测黏附水平也受莲子抗性淀粉结构变化的影响,并可能是影响莲子抗性淀粉与短双歧杆菌营养互作关系的重要因素之一。本研究结果可为完善抗性淀粉的体内代谢和益生作用提供理论依据。

关键词：莲子抗性淀粉体外消化结构特性短双歧杆菌增殖

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短双歧杆菌CCFM1067对帕金森病的缓解作用及其机制探究

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短双歧杆菌CCFM1067对帕金森病的缓解作用及其机制探究

作者：李田甜江南大学

学位级别：硕士

帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)是一种由多种因素引起的复杂神经退行性疾病。到目前为止,还没有可以预防或治愈帕金森病的方法。尽管如此,开发预防和治愈帕金森病的治疗方法仍是重中之重。随着肠道菌群的发展,越来越多的证据表明帕... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s Disease,PD)是一种由多种因素引起的复杂神经退行性疾病。到目前为止,还没有可以预防或治愈帕金森病的方法。尽管如此,开发预防和治愈帕金森病的治疗方法仍是重中之重。随着肠道菌群的发展,越来越多的证据表明帕金森病的发病机制极大可能是起源于肠道。因此,肠道菌群是缓解和治疗帕金森病的潜在靶点。双歧杆菌作为益生菌及肠道核心菌属,对维持肠道健康及稳态至关重要,深入探究双歧杆菌对帕金森病的缓解作用具有很大的临床价值。以“微生物群-肠-脑轴”为机制调控帕金森病等神经退行性疾病的发展已是热点研究问题,同时为开发靶向肠道菌群干预缓解帕金森病的膳食补充剂提供了理论依据。基于上述研究背景,本文首先通过体外细胞实验初步得到具有神经保护作用潜力的短双歧杆菌CCFM1067;然后通过动物实验探究短双歧杆菌CCFM1067对帕金森病小鼠的缓解效果及作用机制;最后,通过动物实验评价具有神经保护作用的益生元复配短双歧杆菌CCFM1067干预对帕金森病的缓解效果。主要研究结果如下:以6种共60株双歧杆菌为研究对象,利用脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导BV2小胶质细胞建立体外神经炎症细胞模型,通过测定60株双歧杆菌对LPS诱导的BV2细胞上清中NO的生成量的影响,初步得到6株能够显著抑制LPS诱导的BV2细胞上清中NO生成量的双歧杆菌,分别为D1、D3、C5、C7、A2和Y1;进一步测定以上6株双歧杆菌对LPS刺激后BV2细胞抗氧化应激通路基因表达水平以及细胞炎症因子表达水平的影响。结果表明,短双歧杆菌D3对LPS诱导的BV2细胞氧化应激反应和炎症反应具有较好的抑制能力,具有神经保护作用潜力。因此,后续实验以短双歧杆菌D3(CCFM1067)为主要研究菌株。基于1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrathydropyridine,MPTP)诱导建立帕金森病小鼠模型,体内探究短双歧杆菌CCFM1067干预对帕金森病小鼠的缓解作用。结果表明,短双歧杆菌CCFM1067干预能够显著缓解帕金森病小鼠的运动功能障碍,包括小鼠的运动敏捷性、平衡性和协调性;同时能够缓解帕金森病小鼠神经病理变化、抑制神经胶质反应、提高神经营养因子的含量和提高纹状体神经递质水平,达到神经保护作用;进一步研究表明,该菌还具有抑制帕金森病小鼠氧化应激反应、缓解帕金森病小鼠的神经炎症和结肠炎症,并减轻血脑屏障和肠屏障的损伤的能力。从粪便短链脂肪酸、肠道菌群和粪便代谢物三个角度对短双歧杆菌CCFM1067缓解帕金森病的机制进行探究。粪便短链脂肪酸分析结果表明,短双歧杆菌CCFM1067干预能够显著提高MPTP诱导的帕金森病小鼠粪便短链脂肪酸的含量,主要包括提高乙酸、丁酸、异丁酸和异戊酸的含量。菌群分析结果表明,短双歧杆菌CCFM1067干预可以缓解帕金森病小鼠微生物群落丰富度的降低和肠道微生物组成的异常变化,降低MPTP诱导的帕金森病小鼠肠道致病菌Escherichia-Shigella的丰度,提高有益菌Bifidobacterium和Akkermansia的丰度。粪便代谢组分析表明,与造模组小鼠相比,短双歧杆菌CCFM1067干预后帕金森病小鼠的粪便代谢物吲哚丙烯酸相对含量提高14.96倍、葵酸相对含量提高1.95倍、N-乙酰组胺相对含量降低4.95倍,差异代谢物所涉及的嘌呤代谢、牛磺酸和亚牛磺酸代谢以及精氨酸生物合成相关通路被显著富集。最后,基于MPTP诱导的帕金森病小鼠模型,评价不同合生元组合对帕金森病小鼠的缓解效果。结果表明:岩藻多糖+短双歧杆菌CCFM1067合生元干预组在缓解帕金森病小鼠的运动功能障碍、改善帕金森病病理变化、抑制神经胶质反应性、提高纹状体神经递质水平和降低中脑活性氧的水平方面表现出比单独摄入短双歧杆菌CCFM1067更好的效果;而低聚果糖+短双歧杆菌CCFM1067合生元干预组在提高脑源性神经营养因子水平,缓解神经炎症和结肠炎症方面效果较好;低聚半乳糖+短双歧杆菌CCFM1067合生元干预组在各项指标上无突出表现。非靶向代谢组分析表明,岩藻多糖+短双歧杆菌CCFM1067组干预使氨酰-t RNA、苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸的生物合成代谢通路被显著富集;与造模组小鼠相比,岩藻多糖+短双歧杆菌CCFM1067组干预使粪便差异代谢物苯丙氨酸的相对含量提高了3.10倍,酪氨酸的相对含量提高了3.16倍。苯丙氨酸和酪氨酸是其发挥缓解帕金森病作用的潜在标志物。

关键词：短双歧杆菌帕金森病微生物-肠-脑轴益生菌合生元

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短双歧杆菌微胶囊制备工艺优化及其特性分析

短双歧杆菌微胶囊制备工艺优化及其特性分析

作者：黄学成内蒙古农业大学

学位级别：硕士

双歧杆菌广泛存在于人和动物的消化系统中,是人体健康肠道的优势菌群之一,具有降胆固醇、抑制肿瘤、调节免疫、延缓衰老和调节肠道菌群组成等多种益生功效。然而,部分双歧杆菌因对胃酸等不良环境敏感,在经由胃和小肠上部后,其生存能力... 详细信息

双歧杆菌广泛存在于人和动物的消化系统中,是人体健康肠道的优势菌群之一,具有降胆固醇、抑制肿瘤、调节免疫、延缓衰老和调节肠道菌群组成等多种益生功效。然而,部分双歧杆菌因对胃酸等不良环境敏感,在经由胃和小肠上部后,其生存能力会急剧减弱,致使进入肠道的微生物数量和活力明显减少,难以较好的发挥益生功效。利用微胶囊包埋技术可对双歧杆菌起到较好的保护作用,增强其对外界不良环境的抵抗力,控制其释放时间和释放位置,降低其在贮藏运输中的损失,提高菌株存活率,并且延长货架期。本文以从健康婴儿粪便中分离出来的短双歧杆菌BX-18 JZ为研究对象,以海藻酸钠和大豆分离蛋白为复合壁材,通过微胶囊造粒仪B-390制备短双歧杆菌微胶囊,通过优化海藻酸钠浓度、大豆分离蛋白浓度、氯化钙浓度、固化时间、芯壁比等因素确定其最佳制备工艺,观察其形态,评价其抗真空冷冻干燥性、耐酸性、肠溶性、人工模拟胃肠液的耐受性和贮藏稳定性等特性,为工业上微胶囊技术的开发提供一定的数据支持。主要结果如下:通过单因素试验和正交试验得到短双歧杆菌BX-18 JZ微胶囊的最佳制备工艺参数为:海藻酸钠浓度1.8%、大豆分离蛋白浓度2.5%、氯化钙浓度1.5%、固化时间为40 min、芯壁比为1∶1。由此工艺所制备的微胶囊,包埋率达90.76%。按照最佳工艺所制备的短双歧杆菌微胶囊,形态呈圆形,表面褶皱,孔隙较少,无黏连或拖尾等现象。经真空冷冻干燥后,短双歧杆菌微胶囊的存活率可达97.64%,较未包埋组提高了27.97%。经人工模拟胃液处理2 h后,存活率可达83.58%,较未包埋组提高了33.20%。在人工模拟肠液中处理60 min后,菌体释放完全。经人工模拟胃肠液处理后菌株存活率达75.21%,显著高于未包埋组(37.25%)。短双歧杆菌微胶囊在4℃贮藏28 d后,菌株存活率达66.67%,活菌数达5.1×10CFU/m L;将其置于25℃条件下贮藏28 d,活菌数仍可达9.0×10CFU/m L;当贮藏温度增加至37℃后,包埋组活菌数显著高于未包埋组,达6.95×10CFU/m L。表明短双歧杆菌BX-18 JZ经包埋后可提高其贮藏稳定性。本课题采用微胶囊造粒仪B-390制备短双歧杆菌复合微胶囊,制备条件温和、包埋率较高,可为工业上复合壁材微胶囊的制备及开发提供一定的数据支持。

关键词：微胶囊短双歧杆菌微胶囊造粒仪海藻酸钠大豆分离蛋白

携带HPV16 E7 shRNA和IL-12基因的重组短双歧杆菌抗小鼠宫颈癌移植瘤的疗效和安全性

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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第4期29卷 301-307页

作者：得丽扎尔·热合曼卡得了亚·哈依沙尔王中香刘丹李轶杰新疆生物资源基因工程重点实验室新疆大学生命科学与技术学院生物技术系新疆乌鲁木齐830046

目的:评价口服携带HPV16 E7 shRNA和IL-12基因的重组短双歧杆菌在小鼠体内抗宫颈癌移植瘤的效果。方法:将p MG36e-E7 shRNA、pMG36e-mIL-12D质粒分别转化短双歧杆菌,经筛选鉴定并扩增获得携带HPV16 E7 shRNA和IL-12基因的重组短双歧杆... 详细信息

目的:评价口服携带HPV16 E7 shRNA和IL-12基因的重组短双歧杆菌在小鼠体内抗宫颈癌移植瘤的效果。方法:将p MG36e-E7 shRNA、pMG36e-mIL-12D质粒分别转化短双歧杆菌,经筛选鉴定并扩增获得携带HPV16 E7 shRNA和IL-12基因的重组短双歧杆菌。通过小鼠皮下宫颈癌细胞移植建立荷瘤小鼠模型。口服重组短双歧杆菌1、7 d后,检测小鼠主要器官(心、肝、脾、肺、肾)和肿瘤组织匀浆液或血清在PYG培养基中形成的菌落数量,评价短双歧杆菌的肿瘤靶向性,以小鼠体内肿瘤生长曲线评估重组短双歧杆菌的抗肿瘤效果,通过主要器官切片H-E染色和检测荷瘤小鼠血清相关细胞因子水平评价口服重组短双歧杆菌的安全性。结果:成功制备重组短双歧杆菌和宫颈癌TC-1细胞移植瘤小鼠。7 d后,移植瘤组织匀浆液和血清的菌落数量证实短双歧杆菌具有靶向体内瘤组织的定殖能力,口服重组短双歧杆菌明显抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长(P双歧杆菌的肿瘤抑制率与单独使用的并无显著差异,治疗后未见对荷瘤小鼠主要器官的损伤和血清中IL-12及IFN-γ的水平明显变化。结论:短双歧杆菌可用作靶向肿瘤的治疗性基因分子递送载体,其对宫颈癌移植瘤的疗效明显且安全可控。

关键词：短双歧杆菌宫颈癌 HPV16 shRNA IL-12 抗肿瘤

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响应曲面法优化短双歧杆菌Bifidobacterium breve A04培养基

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食品科学 2006年第3期27卷 114-119页

作者：刘子宇李平兰刘慧徐杰靳志强中国农业大学食品科学与营养工程学院北京100083 北京农学院食品科学系北京102206

本文通过响应曲面法(RSM)达到优化双歧杆菌培养基组分的目的。以TPYG培养基为基础培养基,采用FFD(factionalfactorialdesign)实验设计法,筛选出三种最佳生长强化因子葡萄糖、酵母粉和初始pH值;通过快速登高法摸索出生长强化因子的最佳... 详细信息

本文通过响应曲面法(RSM)达到优化双歧杆菌培养基组分的目的。以TPYG培养基为基础培养基,采用FFD(factionalfactorialdesign)实验设计法,筛选出三种最佳生长强化因子葡萄糖、酵母粉和初始pH值;通过快速登高法摸索出生长强化因子的最佳浓度范围为:葡萄糖5.0g/L,酵母膏3.01g/L以及初始pH6.0;利用旋转中心组分设计法(RCD)和响应曲面法(RSM)确定关键组分的最佳浓度并进行了验证。最终优化培养基组分为葡萄糖5.194g/L,酵母膏2.829g/L,低聚果糖2g/L,西红柿汁50ml,肝浸液5g/L,Tween801ml,半胱氨酸盐酸盐0.3g/L,pH6.463。最终优化出的培养基获得的菌体干重达到4.462g/L,比优化前3.16g/L提高了1.43倍。

关键词：短双歧杆菌增殖培养基响应曲面法

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复合低聚糖对短双歧杆菌增殖作用的初步研究

食品工业科技 2005年第7期26卷 102-103,106页

作者：肖仔君陈惠音杨汝德韶关学院食品工程系广东韶关512005 华南理工大学食品与生物工程学院广东广州510640

以低聚异麦芽糖、低聚木糖及低聚异麦芽糖/低聚木糖(7:3)为碳源,在厌氧条件下增殖短双歧杆菌。研究表明,低聚异麦芽糖、低聚木糖及复合低聚糖对短双歧杆菌有明显的增殖作用,其最佳增殖浓度均为1.0%,且复合低聚糖之间没有协同效应。

关键词：低聚异麦芽糖低聚木糖短双歧杆菌增殖

分离自母婴粪便及母乳的短双歧杆菌耐药性研究

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中国乳品工业 2024年第3期52卷 21-24,50页

作者：钟智马昕玮路镜达陈永福内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室呼和浩特010018

短双歧杆菌是人体肠道中常见的一种双歧杆菌,因其具有诸多益生特性被广泛关注,但是对其抗生素耐药性方面的研究严重不足。本研究以23株分离自母婴粪便及母乳的短双歧杆菌为研究对象,测定了菌株对14种常见抗生素的耐药性。研究发现,实验... 详细信息

短双歧杆菌是人体肠道中常见的一种双歧杆菌,因其具有诸多益生特性被广泛关注,但是对其抗生素耐药性方面的研究严重不足。本研究以23株分离自母婴粪便及母乳的短双歧杆菌为研究对象,测定了菌株对14种常见抗生素的耐药性。研究发现,实验菌株对12种抗生素存在不同程度的耐药性,仅对氨苄西林和利奈唑胺敏感。全部实验菌株均对氯霉素、环丙沙星、卡那霉素、四环素、庆大霉素和新霉素具有耐药性。进一步分析发现,分离自L家庭母亲粪便的菌株对利福平、克林霉素和链霉素的耐药率显著高于婴儿粪便和母乳分离株。短双歧杆菌的耐药表型差异较大,即使是分离自同一个家庭和个体的菌株其耐药表型也不相同。研究为短双歧杆菌的安全性评价和应用提供了基础数据。

关键词：短双歧杆菌耐药性母婴母乳安全性

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短双歧杆菌增殖培养基的优化研究

广州食品工业科技 2004年第B11期20卷 8-10页

作者：陈惠音肖仔君杨汝德华南理工大学食品与生物工程学院，广州510640 韶关学院食品系，韶关512000

本研究针对短双歧杆菌的营养需要，采用正交实验设计优化增殖培养基，结果表明，酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素，最佳的优化培养基配比是：酵母膏0．9％，胰蛋白胨0．6％，大豆蛋白胨0．6％，葡萄糖0．6％，双歧因子0.2％，生长因... 详细信息

本研究针对短双歧杆菌的营养需要，采用正交实验设计优化增殖培养基，结果表明，酵母膏是短双歧杆菌的显著影响因素，最佳的优化培养基配比是：酵母膏0．9％，胰蛋白胨0．6％，大豆蛋白胨0．6％，葡萄糖0．6％，双歧因子0.2％，生长因子10％。用经优化的增殖培养基配方测定短双歧杆菌的生长曲线及其pH的变化，确定该菌增殖培养的最适终止时间约为18h，此时平板菌落计数的菌数可高达1．5×10^10cfu／ml。

关键词：短双歧杆菌菌落计数生长因子葡萄糖终止菌数优化培养双歧因子大豆蛋白优化研究