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miR-9-5p调控瞬时受体电位m7对心肌缺血/再灌注大鼠的保护作用

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解剖学报 2022年第2期53卷 246-253页

作者：刘向前周仪梦谢向荣倪进忠杨浩滁州市第一人民医院心血管内科安徽滁州239000 皖南医学院弋矶山医院心血管内科安徽芜湖241001 皖南医学院解剖学教研室安徽芜湖241002

目的探讨miR-9-5p调控瞬时受体电位m7(TRPm7)对心肌缺血/再灌注(mIR)大鼠的作用。方法将32只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-9-5p过表达组及空载体对照组,通过左冠状动脉结扎法建立mIR模型,假手术组不结扎,miR-9-5p过表达组和空载体... 详细信息

目的探讨miR-9-5p调控瞬时受体电位m7(TRPm7)对心肌缺血/再灌注(mIR)大鼠的作用。方法将32只SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-9-5p过表达组及空载体对照组,通过左冠状动脉结扎法建立mIR模型,假手术组不结扎,miR-9-5p过表达组和空载体对照组于模型建立前24 h分别尾静脉注入miR-9-5p agomir和agomir NC。通过HE染色观察各组大鼠心肌损伤情况;Real-time PCR检测各组大鼠心肌组织中miR-9-5p表达水平;酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1β、肌酸激酶同工酶mB(CK-mB)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)、乳酸脱氢酶(LDH)水平以及心肌组织中丙二醛(mDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况;双荧光素酶实验验证miR-9-5p与TRPm7的关系;免疫印迹法检测各组大鼠TRPm7、Bcl-2、Bax、磷酸化核因子κB 65(p-NF-κB p65)、toll样受体4(TLR4)蛋白表达。结果miR-9-5p在大鼠心肌组织中低表达(PmiR-9-5p过表达能够降低CK-mB、cTnI、LDH表达水平,改善大鼠心肌损伤程度;与模型组相比,miR-9-5p过表达组心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达及mDA、IL-6、TNF-α及IL-1β含量均下降,而Bcl-2蛋白表达和SOD含量上升(Pm7为miR-9-5p的靶基因,且miR-9-5p过表达组TRPm7、p-NF-κB p65、TLR4蛋白表达均较模型组降低(PmiR-9-5p通过调控TRPm7抑制心肌缺血再灌注导致的心肌细胞凋亡、氧化应激及炎症反应,并抑制TLR4/NF-κB通路。

关键词：微小RNA-9-5p 瞬时受体电位m7 心肌缺血/再灌注 Toll样受体4/核因子κB信号通路实时定量聚合酶链反应酶联免疫吸附测定免疫印迹法大鼠

低强度聚焦超声通过瞬时受体电位m7促进骨髓间充质干细胞成骨分化

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第三军医大学学报 2018年第16期40卷 1469-1475页

作者：姚欢郑妍李娅莎赵丽杨珂重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所、儿童发育疾病研究教育部重点实验室、儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地、儿科学重庆市重点实验室、重庆市干细胞治疗工程技术研究中心重庆400014

目的探讨瞬时受体电位m7(transient receptor potential melastatin 7,Trpm7)在低强度聚焦超声(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BmSCs)成骨分化中的作用及其机制。方法分离培养小鼠BmSCs,流式细胞检测其特异性表面标志,茜素红和油红O染色检测其分化能力。碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性读数筛选LIPUS作用时间。ALP和茜素红染色观察LIPUS处理后促进成骨分化的能力,q PCR检测Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、骨钙素(osteocalcin,OCN)mRNA水平表达的变化,并检测LIPUS处理后24、48、72 h Trpm7 mRNA水平表达的差异。进一步分为对照组(LIPUS未处理组)、LIPUS处理组、LIPUS+二甲基亚砜(DmSO)组和LIPUS+Trpm7抑制剂2-氨乙基硼酸二苯酯(2-APB)组,ALP活性读数、ALP染色和茜素红染色评价成骨分化能力,Western blot检测Trpm7和OPN、Runx2的蛋白表达。结果体外培养获得BmSCs,与未处理组比较,LIPUS作用2 min组细胞ALP活性读数升高最为明显,LIPUS处理后细胞的ALP染色和茜素红染色明显增强,成骨分化相关基因OPN、OCN、RUNX2 mRNA表达明显增加(Pm7 mRNA表达显著增加(PmSO组明显降低(PmSO组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显增加,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显增强。与LIPUS+DmSO组比较,LIPUS+2-APB组的ALP染色和茜素红染色显示成骨分化明显下降,Trpm7、OPN和Runx2的蛋白表达也明显降低。结论 LIPUS促进BmSCs的成骨分化,并部分通过Trpm7发挥作用。

关键词：低强度聚焦超声骨髓间充质干细胞瞬时受体电位m7 成骨分化

瞬时受体电位m7通道与血小板源性生长因子和5-HT促进大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖相关性的研究

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神经药理学报 2012年第3期 15-21页

作者：杲海霞乔晓温敦洁宁董明纲徐志伟张海林河北医科大学药理学教研室辛集市中医院儿科河北医科大学药剂教研室河北北方学院

目的:探讨瞬时受体电位m7通道(transient receptor potential melastatin 7,TRPm7)在血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)诱导的肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASmCs)异常增殖中的作用。方法:利用贴块法和酶解法分离大鼠PASmCs。采用RT-PCR、Western blot和全细胞膜片钳技术观察TRPm7在PASmCs中的功能性表达。利用TRPm7阻断剂2-APB,采用mTT的方法检测TRPm7对PDGF和5-HT诱导的PASmCs异常增殖的作用。结果:RT-PCR、Western blot结果显示,TRPm7在大鼠PASmCs中有mRNA和蛋白表达。利用膜片钳技术检测到TRPm7电流,且PDGF可上调TRPm7内、外向电流。100μmol·L-12-APB可抑制PDGF和5-HT引起的大鼠PASmCs异常增殖。结论:TRPm7可能参与PDGF和5-HT诱导的大鼠PASmCs的增殖,有可能成为肺动脉高压临床治疗的新靶点。

关键词：瞬时受体电位m7 血小板源性生长因子 5-羟色胺肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压

抑制喉癌细胞瞬时受体电位m7表达对细胞生物学行为的影响及其机制

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安徽医科大学学报 2022年第5期57卷 708-713页

作者：王慧敏崔粲王银鑫李艳峰袁东杰卢振民新乡医学院第一附属医院耳鼻喉头颈外科卫辉453100

目的探讨干扰瞬时受体电位m7(TRPm7)对喉癌细胞增殖、凋亡、侵袭等生物学行为的影响及其机制。方法体外培养人喉癌TU212细胞,分别构建3组TRPm7-shRNA(TRPm7-shRNA1、TRPm7-shRNA2、TRPm7-shRNA3组)及阴性对照shRNA-NC(shRNA-NC组)质粒载体,并以脂质体转染法转染TU212细胞,以转染空载体的细胞作为Control组。采用ELISA法检测TU212细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,比色法检测上清液中丙二醛(mDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;使用CCK-8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测敲低TRPm7表达对TU212细胞增殖、侵袭的影响;使用Western blot检测TU212细胞侵袭、凋亡相关蛋白表达。结果转染后,与Control组比较,TRPm7-shRNA1组、TRPm7-shRNA2组和TRPm7-shRNA3组的TRPm7 mRNA和蛋白表达水平均下调(Pm7-shRNA1组下调最多(Pm7-shRNA1组TU212细胞培养上清液中SOD水平降低(PmDA、LDH水平升高(Pmentin蛋白表达下调(P电位降低(Pm7增加喉癌TU212细胞氧化应激水平,抑制TU212细胞增殖、侵袭,并通过线粒体途径诱导其凋亡。

关键词：喉癌瞬时受体电位m7 氧化应激增殖凋亡侵袭

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缺血性脑卒中与瞬时受体电位m7通道的研究进展

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中国临床神经科学 2015年第4期23卷 465-469页

作者：徐莹莹代大伟张黎明哈尔滨医科大学附属第一医院神经内科 150001

缺血性脑卒中是临床上的常见病、多发病,且严重危害人类健康。钙离子和镁离子对缺血性脑卒中的发生、发展有很大的影响。位于细胞膜上的瞬时受体电位(TRP)m7(TRPm7)通道是镁、钙等阳离子的主要离子通道,可能与缺血性脑卒中存在很大的关... 详细信息

缺血性脑卒中是临床上的常见病、多发病,且严重危害人类健康。钙离子和镁离子对缺血性脑卒中的发生、发展有很大的影响。位于细胞膜上的瞬时受体电位(TRP)m7(TRPm7)通道是镁、钙等阳离子的主要离子通道,可能与缺血性脑卒中存在很大的关联。TRPm7通道的研究将为缺血性脑卒中脑损伤的治疗及预防提供新靶点。

关键词：脑卒中钙离子镁离子瞬时受体电位m7

皮质酮对大鼠心肌细胞糖皮质激素应答激酶-1和瞬时受体电位m7基因表达的调控机制研究

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黑龙江医学 2022年第23期46卷 2821-2824页

作者：郭自景刘立灿黄思颖贺雨晴李文谭斌湘南学院药学院湖南郴州423000 “心脑血管天然药物研究”湖南省高校重点实验室湖南郴州423000

目的:探讨糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(mR)在皮质酮对大鼠心肌细胞(H9c2)基因表达中的作用。方法:将H9c2细胞分为四组:对照组、小剂量皮质酮组、中剂量皮质酮组和大剂量皮质酮组,分别在培养基中加入终浓度为0.01μm、1μm和10μ... 详细信息

目的:探讨糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(mR)在皮质酮对大鼠心肌细胞(H9c2)基因表达中的作用。方法:将H9c2细胞分为四组:对照组、小剂量皮质酮组、中剂量皮质酮组和大剂量皮质酮组,分别在培养基中加入终浓度为0.01μm、1μm和10μm的皮质酮培养72 h后,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)技术检测GR、mR、血清和糖皮质激素应答激酶-1 (SGK1)和瞬时受体电位m7 (TRPm7)的表达;将H9c2细胞分为四组:米非司酮组、共处理组1、共处理组2和共处理组3,分别在培养基中加入浓度为10μm米非司酮、10μm米非司酮和0.1μm皮质酮、10μm米非司酮和1μm皮质酮、10μm米非司酮和10μm皮质酮培养72 h,检测上述基因表达情况。结果:与对照组相比,皮质酮组GR、mR和SGK1表达均显著升高且具有剂量依赖性,小剂量皮质酮对TRPm7表达无影响,而中剂量和大剂量皮质酮可显著增加TRPm7的表达;与米非司酮组相比,共处理组1、共处理组2和共处理组3对SGK1的表达均无显著影响,而共处理组2和共处理组3可显著增加TRPm7的表达。结论:mR可能参与了皮质酮对H9c2细胞TRPm7基因的调控,而GR可能参与了皮质酮对H9c2细胞SGK1的表达。

关键词：皮质酮米非司酮心肌细胞瞬时受体电位m7 血清和糖皮质激素应答激酶-1

基于调控外泌体释放的电针对慢传输型便秘大鼠结肠组织TRPm7-PI3K/Akt通路的影响

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中国中医药信息杂志 2022年第12期29卷 98-103页

作者：匡泓俊杨腊媛袁楠袁杨阳杨钰涛钟峰湖南中医药大学第一附属医院湖南长沙410007

目的观察抑制血清外泌体释放对电针调节慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织TRPm7-PI3K/Akt信号通路的影响,探讨电针治疗STC的作用机制。方法50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、药物组和电针+GW4869组,每组10只。除对照组外,采用盐... 详细信息

目的观察抑制血清外泌体释放对电针调节慢传输型便秘(STC)大鼠结肠组织TRPm7-PI3K/Akt信号通路的影响,探讨电针治疗STC的作用机制。方法50只SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、药物组和电针+GW4869组,每组10只。除对照组外,采用盐酸洛哌丁胺混悬液灌胃7 d制备STC大鼠模型,成模后分别予电针或药物干预2周,电针+GW4869组在电针基础上隔日腹腔注射GW4869混悬液。采用超速离心法提取血清外泌体,电镜观察外泌体形态;检测大鼠24 h排便量;Western blot检测结肠组织瞬时受体电位m7(TRPm7)、磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt蛋白表达;RT-PCR检测结肠组织TRPm7、PI3K、Akt mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠第14、21日24 h排便量明显减少(Pm7、PI3K、Akt蛋白和mRNA表达及p-Akt/Akt比值明显降低(Pm7、PI3K、Akt蛋白和mRNA表达及p-Akt/Akt比值明显升高(Pm7、PI3K、Akt蛋白和mRNA表达及p-Akt/Akt比值明显降低(Pm7-PI3K/Akt信号通路,改善STC大鼠排便情况。

关键词：电针慢传输型便秘瞬时受体电位m7 PI3K/Akt信号通路外泌体

宫颈癌组织TUFT1、TRPm7表达及临床意义

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东南大学学报（医学版） 2024年第5期43卷 777-781页

作者：陈曦蓝岚南京医科大学第四附属医院妇产科江苏南京210000

目的:探讨宫颈癌组织釉丛蛋白1(TUFT1)、瞬时受体电位m7(TRPm7)的表达及临床意义。方法:收集本院2019年1月至2021年1月间住院手术的110例宫颈癌患者术中切除的宫颈癌组织标本及癌旁组织标本,免疫组化法检测TUFT1、TRPm7的表达;Kaplan-me... 详细信息

目的:探讨宫颈癌组织釉丛蛋白1(TUFT1)、瞬时受体电位m7(TRPm7)的表达及临床意义。方法:收集本院2019年1月至2021年1月间住院手术的110例宫颈癌患者术中切除的宫颈癌组织标本及癌旁组织标本,免疫组化法检测TUFT1、TRPm7的表达;Kaplan-meier法分析TUFT1、TRPm7表达水平与预后的关系;Spearman相关分析TUFT1、TRPm7表达的相关性;Cox回归分析患者预后的影响因素。结果:宫颈癌组织较癌旁组织中TUFT1、TRPm7阳性率均增加(Pm、国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅱ+Ⅲ期的患者TUFT1、TRPm7表达阳性率高于中高分化、肿瘤直径m、FIGO分期Ⅰ期患者(Pm7的表达水平呈正相关(r=0.445,P78.57%,22/28)(χ^(2)=4.679,P=0.031);TRPm7阳性表达患者3年生存率(40.98%,25/61)低于TRPm7阴性表达患者(83.67%,41/49)(χ^(2)=19.290,Pm7是宫颈癌患者死亡的危险因素(Pm7在宫颈癌组织中高表达,二者与患者3年预后有密切联系,可能成为预后判断的重要生物指标。

关键词：宫颈癌釉丛蛋白1 瞬时受体电位m7 预后临床意义

CT冠脉成像联合血清ImA、TRPm7在缺血性心肌病诊断中的应用价值

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中国CT和mRI杂志 2023年第8期21卷 57-59页

作者：庄琰赵森张进任文妍杜森河南大学第一附属医院影像科河南开封475000

目的分析CT冠脉成像(CTA)联合血清缺血修饰白蛋白(ImA)、瞬时受体电位m7(TRPm7)在缺血性心肌病(ICm)诊断中的应用价值。方法收集2021年2月-2022年2月在我院治疗的ICm患者146例即为ICm组,根据纽约心脏病学会(NYHA)分级分为轻度组45例、... 详细信息

目的分析CT冠脉成像(CTA)联合血清缺血修饰白蛋白(ImA)、瞬时受体电位m7(TRPm7)在缺血性心肌病(ICm)诊断中的应用价值。方法收集2021年2月-2022年2月在我院治疗的ICm患者146例即为ICm组,根据纽约心脏病学会(NYHA)分级分为轻度组45例、中度组54例、重度组47例,入院后行CTA检查;同期选择本院正常体检健康者140例作为对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ImA、TRPm7的表达水平;采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清ImA、TRPm7水平对ICm的诊断价值。采用四格表评估CTA联合血清ImA、TRPm7水平对ICm的诊断效能。结果与对照组相比,ICm组患者血清ImA、TRPm7水平较高(PmA、TRPm7表达水平显著高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(Pm组患者血清中ImA的表达水平与TRPm7呈正相关关系(PmA、TRPm7水平联合诊断的AUC高于ImA、TRPm7单独诊断的AUC值(PmA、TRPm7诊断ICm的准确度为92.18%,其敏感度为98.38%,特异性为38.58%,其中三者联合诊断敏感度高于CTA、ImA、TRPm7单独诊断的敏感度(Pm患者血清中ImA、TRPm7表达水平升高,CTA联合ImA、TRPm7可明显提高ICm诊断的价值。

关键词：缺血性心肌病 CT冠脉成像缺血修饰白蛋白瞬时受体电位m7

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