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中华胃肠外科杂志 2015年第11期18卷 1111-1114页

作者：彭康胜林谋斌蔚青李华光张晨波谢汝婷刘占举同济大学附属第十人民医院消化内科上海200072 同济大学附属第十人民医院病理科上海200072 同济大学附属第十人民医院转化医学中心上海200072 同济大学附属杨浦医院胃肠外科上海交通大学附属瑞金医院普通外科

目的研究RIPK4相对拷贝数与经过奥沙利铂化疗的Ⅲ期结直肠癌患者预后的关系。方法州实时定量PCR方法检测行根治性手术加奥沙利铂辅助化疗的139例Ⅲ期结直肠癌石蜡组织标本的RIPK4相对拷贝数。以所有检测病例RIPK4相对拷贝数的第3个四分... 详细信息

目的研究RIPK4相对拷贝数与经过奥沙利铂化疗的Ⅲ期结直肠癌患者预后的关系。方法州实时定量PCR方法检测行根治性手术加奥沙利铂辅助化疗的139例Ⅲ期结直肠癌石蜡组织标本的RIPK4相对拷贝数。以所有检测病例RIPK4相对拷贝数的第3个四分位数作为界值，将患者分为高RIPK4组（35例）和低RIPK4组（104例）。比较两组患者总生存时间（OS）及无复发生存时间（RFS），并按肿瘤部位进行分层预后分析。结果全组病例中位随访时间为49（4～98）月，高R1PK4组患者中位OS较低RIPK4组有所缩短，但差异无统计学意义（43．0月比53．5月；P=0．074）；两组患者RFS的差异亦无统计学意义（P=0．352）。在结肠癌患者中，高RIPK4组的中位OS较低RIPK4组明显缩短（31．5月比56．5月：P=0．015），但两组RFS的差异则无统计学意义（P=0．135）。在直肠癌患者中，两组患者OS和RFS的差异均无统计学意义（P=0．981，P=0．738）。多因素预后分析显示．RIPK4相对拷贝数是经奥沙利铂化疗的Ⅲ期结肠癌患者OS的独立预后因素（HR=2．903，95％CI：1．275～6．610）。结论RIPK4相对拷贝数与经过奥沙利铂化疗的Ⅲ期结肠癌患者的总生存期显著相关，有可能成为结肠癌患者奥沙利铂化疗的一种预测标记物。

关键词：结直肠肿瘤基因,RIPK4 相对拷贝数预后

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FCGR3B基因相对拷贝数和狼疮肾炎的相关性研究

FCGR3B基因相对拷贝数和狼疮肾炎的相关性研究

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作者：杨艳荣山西医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨Fcγ受体3B的编码基因FCGR3B的相对拷贝数与狼疮肾炎(LN)的发病及临床、病理活动程度之间的关系。方法:选择北大医院肾内科经肾活检证实的LN患者202例及地域匹配的正常对照146例。采用荧光定量PCR,相对定量法检测FCGR3B基因的... 详细信息

目的:探讨Fcγ受体3B的编码基因FCGR3B的相对拷贝数与狼疮肾炎(LN)的发病及临床、病理活动程度之间的关系。方法:选择北大医院肾内科经肾活检证实的LN患者202例及地域匹配的正常对照146例。采用荧光定量PCR,相对定量法检测FCGR3B基因的相对拷贝数。收集患者的年龄、性别、血压、肾穿时的蛋白尿、血肌酐、血小板、白细胞计数、C3、血IgG等临床指标,建立完整的病例资料数据库。LN患者病理分型包括为Ⅱ型、Ⅲ型、Ⅳ型和Ⅴ型。对190例有临床资料的患者的狼疮活动程度行SLE-DAI评分,并对其中123例可以进行病理评分的患者行肾脏病理改变的活动指数(activity index ,AI)和慢性化指数(chronicity index ,CI)的评分。利用SPSS13.0软件分析结果,探讨FCGR3B基因相对拷贝数和LN的发病及临床、病理活动程度之间的关系。结果:①LN组和对照组之间FCGR3B基因相对拷贝数的分布无统计学差异(P=0.627)。②按性别分层后LN组和对照组FCGR3B基因相对拷贝数在男性组和女性组的分布均无统计学差异(P=0.558,P=0.062)。③将LN组按病理活动度分层后相互比较发现:活动亚组(病理分型为Ⅲ型+Ⅳ型)和非活动亚组(病理分型为Ⅱ型+Ⅴ型)之间FCGR3B基因相对拷贝数无统计学差异(P=0.511)。④按SLE-DAI评分≤10分和>10分分层后发现:FCGR3B基因相对拷贝数的分布无统计学差异(P=0.996)。⑤按病理活动指数(AI)相对拷贝数的分布无统计学差异(P=0.058)。⑥按病理慢性化指数(CI)相对拷贝数的分布无统计学差异(P=0.401)。结论:FCGR3B基因相对拷贝数与LN的发病及临床、病理活动程度无关。

关键词：狼疮肾炎 FCGR3B基因相对拷贝数相对定量探针

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基于纳米磁珠与化学发光技术检测广西巴马小型猪PERV的研究

基于纳米磁珠与化学发光技术检测广西巴马小型猪PERV的研究

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作者：杨淏文广西大学

学位级别：硕士

为解决人源器官严重短缺的问题,人们希望利用动物器官进行异种移植。经多方考虑,人们选择猪作为最合适的供体。而猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus, PERV)普遍存在于各类猪种中,且能够感染人类细胞,引起了人们的高度... 详细信息

为解决人源器官严重短缺的问题,人们希望利用动物器官进行异种移植。经多方考虑,人们选择猪作为最合适的供体。而猪内源性反转录病毒(Porcine endogenous retrovirus, PERV)普遍存在于各类猪种中,且能够感染人类细胞,引起了人们的高度重视。广西巴马小型猪具有体型小、遗传稳定、遗传背景清晰等优点,是异种移植的良好供体。为开发巴马小型猪种资源,筛选PERV低拷贝猪,为异种移植提供安全可靠的猪源器官,本研究利用纳米磁珠(magnetic nanoparticles, MNPs)与化学发光(chemiluminescence, CL)技术,建立了一种基于纳米磁珠与化学发光的PERV检测方法,并应用该方法进行了广西巴马小型猪PERV前病毒的检测研究,主要内容包括：1、纳米磁珠的制备及其在血液DNA提取中的应用采用溶剂热法制备出Fe304纳米磁珠,在其表面进行Si02包覆,得到Fe3O4@SiO2复合磁珠,并进行氨基化及羧基化修饰,获得羧基功能化纳米磁珠(CMNPs)。经透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)表征,粒径分析,化学基团的傅立叶变换红外光谱(FT-IR)测定,以及振动样品磁强计(VSM)分析得出：该磁珠形貌良好、粒径均匀、磁性好且为超顺磁性。另外,所制备的Fe3O4@SiO2磁珠能够很好地应用于巴马小型猪的血液基因组DNA的提取。2、基于纳米磁珠与化学发光的PERV检测方法的建立与优化利用CMNPs作为固相载体,分别以pol、env-A、env-B与env-C片段为目标分子,经过生物素标记PCR扩增、固相杂交反应、SA-ALP孵育、加入AMPPD发光的步骤,建立了一种PERV及PERV-A、 PERV-B、PERV-C三种亚型的化学发光检测法。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高。经过条件优化得到最优检测体系为：1mM的SA修饰浓度,10μM的探针修饰浓度,55℃(PERV)、54℃(PERV-A)、50℃(PERV-B)、56℃(PERV-C)的杂交温度,30min的杂交时间。3、广西巴马小型猪PERV相对拷贝数的化学发光检测建立了GAPDH化学发光检测法,结合上述建立的PERV及其亚型的化学发光检测法,进行了PERV及其三种亚型前病毒在20头广西巴马小型猪基因组中的相对拷贝数的检测与分析。结果表明,PERV的相对拷贝数在0.94±0.10至6.79±0.59之间,PERV-A的相对拷贝数在1.01士0.13至7.26±0.64之间,PERV-B的相对拷贝数为0.74±0.08至6.13±0.65之间,PERV-C的相对拷贝数在0.05±0.01至0.44±0.12之间。说明在该20头巴马小型猪的基因组中,PERV前病毒拷贝数各不相同,PERV-C亚型前病毒拷贝数极少。应用上述建立的方法,有助于筛选低拷贝PERV的巴马小型猪,为异种移植提供合适的供体,同时为培育PERV低拷贝猪奠定基础。

关键词：纳米磁珠化学发光广西巴马小型猪猪内源性反转录病毒相对拷贝数

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