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中国动物学会第六届全国青年寄生虫学工作者学术讨论会

作者：李晖婷余新炳吴忠道李焱郑亦男周俊梅广州中山医科大学寄生虫学教研室广州中山医科大学寄生虫学教研室广州中山医科大学寄生虫学教研室广州中山医科大学寄生虫学教研室广州中山医科大学寄生虫学教研室广州中山医科大学寄生虫学教研室

＜正＞目的:运用表达序列标签技术（EST方法）,从Sj cDNA文库中分离、监定和测定血吸虫表达基因序列.方法:应用EST方法,从SjcDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序列送入NCBI GenBank进行同源... 详细信息

＜正＞目的:运用表达序列标签技术（EST方法）,从Sj cDNA文库中分离、监定和测定血吸虫表达基因序列.方法:应用EST方法,从SjcDNA文库中随机挑选出单个重组克隆进行PCR直接序列分析,通过互联网将获得的EST序列送入NCBI GenBank进行同源性检索,并对检索结果进行分析.结果:分离了42个SjcDNA克隆,并对18个克隆cDNA插入片段的PCR直接序列

关键词：日本血吸虫(中国大陆株) cDNA文库表达基因表达序列标签 PCR 直接序列分析

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日本血吸虫(中国大陆株)表达基因的分离和EST序列测定

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中国人兽共患病杂志 2000年第1期16卷 3-5页

作者：吴忠道余新炳郑亦男李焱周俊梅中山医科大学寄生虫学教研室广州510089

目的　运用表达序列标签技术（ＥＳＴ方法），从ＳｊｃＤＮＡ文库中分离、鉴定和测定血吸虫表达基因序列。方法　应用ＥＳＴ方法，从ＳｊｃＤＮＡ文库中随机挑选出单个重组克隆进行ＰＣＲ直接序列分析，通过互联网将获得的ＥＳＴ序... 详细信息

目的　运用表达序列标签技术（ＥＳＴ方法），从ＳｊｃＤＮＡ文库中分离、鉴定和测定血吸虫表达基因序列。方法　应用ＥＳＴ方法，从ＳｊｃＤＮＡ文库中随机挑选出单个重组克隆进行ＰＣＲ直接序列分析，通过互联网将获得的ＥＳＴ序列送入ＮＣＢＩＧｅｎＢａｎｋ进行同源性检索，并将发现的未知基因ＥＳＴ序列送入ＮＣＢＩｄｂＥＳＴ以获得ＧｅｎＢａｎｋ进入号。结果　分离了１００个Ｓｊ重组克隆，并已对２５个克隆ｃＤＮＡ插入片段的ＰＣＲ产物进行直接序列分析，获得了２１个ＥＳＴ序列。其中２个ＥＳＴ序列为ＧｅｎＢａｎｋ中已知的血吸虫基因序列，１９个为未知基因序列。这１９个ＥＳＴ序列已被ＮＣＢＩｄｂＥＳＴ和ＧｅｎＢａｎｋ接受并获得了新序列进入号。结论　采用ＥＳＴＰＣＲ直接序列分析方法可大量获得血吸虫表达基因ＥＳＴ序列，为进一步开展日本血吸虫（中国大陆株）表达基因的研究奠定了基础。

关键词：日本血吸虫 PCR 直接序列分析 cDNA文库

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宫颈癌和子宫内膜癌虽然有KRAS突变,但一致缺乏BRAF突变

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世界核心医学期刊文摘（妇产科学分册） 2006年第6期2卷 49-50页

作者： Pappa K.I. Choleza M. Markaki S. 翁梨驹 First Department of Obstetrics and Gynecology Department of Basic Sciences University of Athens School of Medicine 115 27 AthensGreece

Background. Mutational activation of KRAS and BRAF protooncogenes contributes to the development of many hu man cancers. Current research on gynecological cancer and specifically in cervical and endometrial cancer is focused on the mechanisms of their mutational activation. Objectives. In view of the paucity of data on their mutation frequency and the status of BRAF in these two types of gynecological cancer, we performed a systematic molecular study in 114 clinically and histologically well- defined malignant tumors of uterine cervix and endometrium and correlated the mutation status of KRAS and BRAF with the age at diagnosis and with tumor grade, stage or histological type. Methods. Direct sequence analysis of the PCR products of KRAS and BRAF genes was used to screen for known activating mutations. Results. In 67 cases of endometrial cancer, six KRAS mutations (8.9% ) were found, four at codon 12 (5.9% ) and two at codon 13 (2.9% ),while no mutation was detected at codon 61. Most of the mutations occurred in surgical stage I and in the endometrioid adenocarcinoma subtype. We also detected three KRAS point mutations (6.3% ) in the 47 cervical cancer samples, two at codon 12 (4.2% ) and one at codon 13 (2.1% ), while there was no mutation at codon 61. On the contrary,nomutation was identified inBRAF exon 15 for either endometrial or cervical cancer samples at position V600, which represents the most frequently mutated site of BRAF in human cancer. There was no association between KRAS mutations with either histological type, tumor grade or stage. Interestingly, however, KRAS mutation status in endometrial cancer was strongly associated with increased age at diagnosis (P < 0.001). Conclusions. Our data document (a) the absence of BRAF mutations in cervical and endometrial cancer, despite the mutation status of KRAS, (b) suggest that KRAS mutations reflect an early event in endometrial carcinogenesis and (c) imply that BRAF activation is involving alternative pathway

关键词：癌基因突变子宫内膜癌 KRAS 宫颈癌妇科癌症直接序列分析分子学研究相关性分析 PCR产物突变频率

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