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日本基因编辑食品研发最新动向和启示

世界农业 2024年第4期 128-131页

作者：洪志杰农业农村部国际交流服务中心

基因编辑食品,是指应用对生物体内特定目标基因进行精准修饰的生物工程技术开发的食品。基因编辑食品与转基因食品不同,基因编辑食品只是通过基因编辑手段编辑物种本身的基因,不转入其他物种的基因,因此与传统育种方法生产的食品无异。... 详细信息

基因编辑食品,是指应用对生物体内特定目标基因进行精准修饰的生物工程技术开发的食品。基因编辑食品与转基因食品不同,基因编辑食品只是通过基因编辑手段编辑物种本身的基因,不转入其他物种的基因,因此与传统育种方法生产的食品无异。早期的基因工程技术只能将遗传物质随机插入宿主基因组,自从2012年精准的 CRISPR /Cas9基因编辑技术问世以来,全球基因编辑食品行业发展进入快车道。近年来,日本基因编辑技术在农业品种改良、病虫害防治.

关键词：基因编辑生物工程技术转基因食品基因工程技术随机插入传统育种方法目标基因遗传物质

棉花叶肉原生质体分离及目标基因瞬时表达体系的建立

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作物学报 2014年第2期40卷 231-239页

作者：李妮娜丁林云张志远郭旺珍南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/教育部杂交棉创制工程研究中心江苏南京210095

以棉花幼嫩子叶为材料,分析影响棉花叶肉原生质体分离及目标基因转化的主要因素,以棉花叶肉原生质体为受体,建立了稳定、高效的目标基因瞬时表达与鉴定体系。技术体系包括,选择自然生长12 d的棉花幼嫩子叶为材料,混合1.5%纤维素酶、0.4... 详细信息

以棉花幼嫩子叶为材料,分析影响棉花叶肉原生质体分离及目标基因转化的主要因素,以棉花叶肉原生质体为受体,建立了稳定、高效的目标基因瞬时表达与鉴定体系。技术体系包括,选择自然生长12 d的棉花幼嫩子叶为材料,混合1.5%纤维素酶、0.4%离析酶、0.5 mol L–1甘露醇、20 mmol L–1 KCl、20 mmol L–1 MES、0.1 mol L–1 CaCl2和1.0 g L–1 BSA,在28℃黑暗条件下振荡酶解8 h,可游离出浓度达1.0×106 mL–1以上的纯净棉花叶肉原生质体。利用该方法将棉花锌指蛋白基因GhZFP2整合到pJIT166-GFP质粒载体,构建了GhZFP2:GFP融合载体,采用40%PEG-4000介导转化,获得高转化率的棉花叶肉原生质体。对目标基因瞬时表达产物检测表明,GhZFP2蛋白清晰定位在细胞核上。

关键词：棉花原生质体 PEG介导转化目标基因瞬时表达

转基因小麦目标基因通过花粉漂流的可能性研究

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华北农学报 2002年第3期17卷 1-6页

作者：吕爱枝赵和王天宇王海波河北省农林科学院农业物理生理生化研究所植物基因工程中心河北石家庄050051 中国农业科学院作物品种资源研究所北京100081

以去雄小麦为受体 ,在 10m范围内小麦花粉可在任何方向发生有效漂移 (使受体结实 ) ,花粉的最远有效漂移距离可达 80m。以不去雄的小麦、柱穗山羊草和卵穗山羊草为受体时 ,在距花粉源 1m的范围内 ,小麦间的异交率最高为 0 2 4 %、小麦... 详细信息

以去雄小麦为受体 ,在 10m范围内小麦花粉可在任何方向发生有效漂移 (使受体结实 ) ,花粉的最远有效漂移距离可达 80m。以不去雄的小麦、柱穗山羊草和卵穗山羊草为受体时 ,在距花粉源 1m的范围内 ,小麦间的异交率最高为 0 2 4 %、小麦与柱穗山羊草和卵穗山羊草间的异交率分别为 0 2 5 %和 0 ,花粉的最远有效漂移距离可达 2 0m。依照欧盟的标准 ,非转基因小麦即使与转基因品种相邻种植 ,其产品中的转基因成分也不会超标。在麦类近缘野生植物的起源中心及主要分布区 ,释放转基因小麦要特别慎重。

关键词：转基因小麦目标基因花粉可能性有效漂移生态安全性

雌二醇、双酚A和苯并［a］芘对食蚊鱼目标基因表达的影响

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生物学杂志 2015年第5期32卷 19-24页

作者：熊甜甜方展强华南师范大学生命科学学院广东省高等学校生态与环境科学重点实验室广州510631

比较雌二醇(E2)、双酚A(BPA)、苯并[a]芘(B[a]P)和他莫昔芬(TAM)暴露对食蚊鱼(Gambusia affinis)卵黄蛋白原基因(VTGα)、雌激素受体基因(ERα)和细胞色素P4501A基因(CYP4501A)表达的影响。结果显示,低浓度E2单独暴露诱导VTGα和ERα表... 详细信息

比较雌二醇(E2)、双酚A(BPA)、苯并[a]芘(B[a]P)和他莫昔芬(TAM)暴露对食蚊鱼(Gambusia affinis)卵黄蛋白原基因(VTGα)、雌激素受体基因(ERα)和细胞色素P4501A基因(CYP4501A)表达的影响。结果显示,低浓度E2单独暴露诱导VTGα和ERα表达量显著上调,但高浓度E2极显著抑制VTGα、ERα和CYP4501A表达。高浓度B[a]P明显抑制VTGα表达;B[a]P对ERa表达无明显抑制作用,但致CYP4501A表达量显著上升。BPA显著上调VTGα和ERα的表达,但低浓度BPA致CYP4501A表达显著下降。B[a]P+高浓度E2联合暴露,致VTGα和ERα表达量显著提高,但B[a]P+低浓度E2联合暴露抑制ERα的表达。B[a]P+E2不同浓度组均致CYP4501A表达水平呈极显著上升;B[a]P+E2+TAM联合暴露均致VTGα、ERα和CYP4501A表达量显著或极显著增加。不同浓度组(B[a]P+BPA)均致VTGα、ERα和CYP4501A表达量显著上调;B[a]P+BPA+TAM暴露,VTGα表达量呈极显著下降,相反,均致ERα和CYP4501A的表达量显著增加。单一毒物实验与联合毒物实验的比较表明,ERα和AhR介导的生理过程机制十分复杂,通过这两个途径对外来污染物的调控跟化合物的效应浓度有关,不是单独暴露效应的简单相加或相减。另外还进行E2/BPA+B[a]P+TAM联合暴露实验,来研究TAM对ERα受体途径和AhR受体途径的影响,结果显示TAM对两个途径均有抑制作用。

关键词：内分泌干扰物目标基因单独及联合暴露 mRNA表达食蚊鱼

衰老后PPARγ目标基因表达的改变与胰岛素抵抗的关系

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中国老年学杂志 2004年第4期24卷 327-328页

作者：张秀锦叶平王兆君解放军总医院老年心内科北京100853 解放军海军总医院心内科

目的　观察衰老降低 PPARγ表达的同时是否影响目标基因的表达 ,进而分析这些改变在胰岛素抵抗形成中的意义。方法　用Bergman创立的微小模型技术评价青年鼠 (1 0～ 1 2周龄 )和老年鼠 (2 4月龄 )的胰岛素敏感性 ,采用半定量 RT- PCR法... 详细信息

目的　观察衰老降低 PPARγ表达的同时是否影响目标基因的表达 ,进而分析这些改变在胰岛素抵抗形成中的意义。方法　用Bergman创立的微小模型技术评价青年鼠 (1 0～ 1 2周龄 )和老年鼠 (2 4月龄 )的胰岛素敏感性 ,采用半定量 RT- PCR法检测大网膜脂肪组织 PPARγ目标基因脂细胞特异性脂肪酸结合蛋白 - 2 (adipocyte specific fatty acid binding protein2 ,a P2 )、脂蛋白脂酶 (lipoprotein lipase,LPL)、葡萄糖转运子 -4 (glucose transporter- 4 ,GLUT- 4 )及激素敏感脂酶 (hormone- sensitive lipase,HSL) m RNA的表达水平。结果　与青年鼠组比较 ,老年鼠组存在明显的胰岛素抵抗 (IR)。 IRI:1 1 .49± 6.92对 5.2 8± 1 .94(P目标基因a P2 m RNA(1 .2 5± 0 .0 6对 1 .50± 0 .2 0 ,P=0 .1 3)、LPL m RNA (0 .97± 0 .1 0对 1 .42± 0 .2 1 ,P目标基因表达的改变在一定程度上代表了脂细胞功能随增龄而减退。

关键词：衰老 PPARγ 目标基因胰岛素抵抗基因表达过氧化体增殖物激活型受体

冠心病血瘀证差异基因表达谱的构建及目标基因临床意义研究

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冠心病血瘀证差异基因表达谱的构建及目标基因临床意义研究

第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛

作者：马晓娟殷惠军陈可冀中国中医科学院西苑医院心血管中心

目的:应用寡核苷酸基因芯片技术,构建冠心病血瘀证患者差异基因表达谱,并通过目标基因鉴定,对目标基因的临床意义进行了初步探讨。方法:筛选符合冠心病、血瘀证、健康人人选标准的冠心病血瘀证组、冠心病非血瘀证组、非冠心病血瘀证组... 详细信息

目的:应用寡核苷酸基因芯片技术,构建冠心病血瘀证患者差异基因表达谱,并通过目标基因鉴定,对目标基因的临床意义进行了初步探讨。方法:筛选符合冠心病、血瘀证、健康人人选标准的冠心病血瘀证组、冠心病非血瘀证组、非冠心病血瘀证组和健康对照组各8例为芯片实验的研究对象。留取静脉血,分离白细胞,抽提 RNA,经质控芯片对样本质量进行检测后,与 Affymetrix U133 Plus 2.0芯片进行杂交。通过扫描和软件分析,筛选冠心病、血瘀证相关差异基因,构建冠心病血瘀证差异基因表达谱,并进一步对差异基因进行基因本体和通路分析。结合疾病病理生理和文献研究确定目标基因,使用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法对目标基因进行鉴定。筛选冠心病血瘀证患者30例和健康对照者40例(标准同上),采用 ELISA 法验证目标基因 IL-8的临床相关性。结果:通过差异基因筛选,与冠心病相关的差异基因共有107个,其中上调48个,下调59 个;与血瘀证相关的差异基因共有48个,其中上调26个,下调22个。冠心病相关差异基因中分子功能和生物学途径涉及炎症免疫反应的有14个,占13.1%;通路显著性分析发现,冠心病相关有意义通路共15个,其中有4个涉及炎症和免疫反应。血瘀证相关差异基因中分子功能和生物学途径与炎症免疫反应相关的有5个,占10.45;通路显著性分析,发现血瘀证相关有意义通路共10 个,其中有5个涉及炎症和免疫反应。目标基因 RT-PCR 结果的差异倍数与基因芯片检测结果不完全相同,但变化方向均一致,证明基因芯片结果准确可靠。冠心病血瘀证组血清 IL-8浓度为 83.21±34.33pg/m,健康对照组血清 IL-8浓度为63.34±36.36pg/m,冠心病血瘀证组血清 IL-8 水平显著高于健康对照组(P目标基因 IL-8与冠心病血瘀证密切相关。

关键词：冠心病血瘀证差异基因表达谱目标基因

来源： cnki会议评论

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递减杂交法分离和筛选目标基因

国外医学（遗传学分册） 1990年第3期13卷 113-116页

作者：魏建军郭亦寿 Hodes ME 山东医科大学

本文介绍新近发展起来的递减杂交技术,它是依据两种不同组织或相同组织但有某些基因表达的差异,选择性地分离和筛选组织中特异表达的mRNA。递减杂交有几种不同的技术途径,但都包含三个基本环节:(1)杂交DNA或RNA的选择;(2)杂交条件的选择... 详细信息

本文介绍新近发展起来的递减杂交技术,它是依据两种不同组织或相同组织但有某些基因表达的差异,选择性地分离和筛选组织中特异表达的mRNA。递减杂交有几种不同的技术途径,但都包含三个基本环节:(1)杂交DNA或RNA的选择;(2)杂交条件的选择和(3)杂交后DNA的分离和筛选。递减杂交可用于基因组中大片段DNA缺失的筛选,而目前主要用于筛选脑功能区域特异表达mRNA和mRNA缺陷研究。它的优点在于,利用mRNA表达差异,直接去筛选未知的目标基因,而且可以通过建立杂交后的cDNA文库,获得一组组织特异表达的候选基因,为进一步深入研究该组织的遗传组成提供有用的信息,它已被脑分子生物学家应用和发展,它的技术仍在不断的完善中。

关键词：递减杂交法目标基因分离筛选

CT纹理技术及目标基因检测鉴别甲状腺结节良恶性的可行性分析

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中国医疗设备 2019年第S1期34卷 141-142页

作者：徐泽国王曙初李林汤恩华敖斌湖北省武汉市黄陂区人民医院

目的探讨甲状腺良恶性结节实施CT纹理技术及目标基因鉴别检测的可行性。方法对本院20例甲状腺结节患者(2019年1月到2019年6月间)均实施CT纹理技术及目标基因表达分析,分析诊断结果。结果恶性结节中熵值与良性结节对比更高(P<0.05)。CT... 详细信息

目的探讨甲状腺良恶性结节实施CT纹理技术及目标基因鉴别检测的可行性。方法对本院20例甲状腺结节患者(2019年1月到2019年6月间)均实施CT纹理技术及目标基因表达分析,分析诊断结果。结果恶性结节中熵值与良性结节对比更高(P目标基因联合诊断对甲状腺结节诊断敏感性、特异性、准确性最高,分别为90.0%、94.4%、92.9%。结论甲状腺良恶性结节实施CT纹理技术及目标基因联合诊断效果更好。

关键词：甲状腺良恶性结节 CT纹理技术目标基因鉴别

互补配对的Alu RNA介导增强子-启动子互作

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科学通报 2023年第24期68卷 3115-3116页

作者：周兵中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室北京100101

真核细胞中的时空特异性基因表达依赖于空间邻近的增强子与靶标基因启动子之间的相互作用.然而,增强子通常远离目标基因数万乃至数十万碱基对,长距离调控的机制一直困扰着研究者^([1]).近年来,Hi-C等邻近染色质互作捕获与测序技术的发... 详细信息

真核细胞中的时空特异性基因表达依赖于空间邻近的增强子与靶标基因启动子之间的相互作用.然而,增强子通常远离目标基因数万乃至数十万碱基对,长距离调控的机制一直困扰着研究者^([1]).近年来,Hi-C等邻近染色质互作捕获与测序技术的发展揭示了染色质的层次结构组织方式,提示远距离的基因组调控区域可以通过折叠成环的方式拉近增强子与基因启动子的空间距离^([2~4]).

关键词：层次结构测序技术增强子碱基对目标基因基因表达空间邻近染色质