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杂色鲍×盘鲍杂交及亲本自繁群体的AFLP分析

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厦门大学学报（自然科学版） 2009年第6期48卷 884-889页

作者：蔡明夷王志勇柯才焕任鹏王桂忠王艺磊厦门大学海洋与环境学院近海海洋环境科学国家重点实验室福建厦门361005 集美大学水产学院福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室福建厦门361021

应用AFLP技术研究了杂色鲍(SS)、盘鲍(JJ)及其正反交群体(SJ和JS)的遗传关系,并比较了各群体内的遗传多样性.3对选择性引物共扩增出344个位点.双亲自繁群体SS和JJ的AFLP图谱差异很大,平均遗传距离达1.425.因此,AFLP图谱可以用于两物种... 详细信息

应用AFLP技术研究了杂色鲍(SS)、盘鲍(JJ)及其正反交群体(SJ和JS)的遗传关系,并比较了各群体内的遗传多样性.3对选择性引物共扩增出344个位点.双亲自繁群体SS和JJ的AFLP图谱差异很大,平均遗传距离达1.425.因此,AFLP图谱可以用于两物种及其杂交种的种质鉴别.正反交群体SJ与JS的AFLP图谱很接近于母本自繁群体,平均遗传距离分别为0.111(SJ与SS之间)和0.134(JS与JJ之间),而与父本自繁群体则有较大区别,平均遗传距离分别达1.408(SJ与JJ之间)和1.394(JS与SS之间).将4个群体分为SS/SJ和JS/JJ两组,进行三水平的AMOVA分析,结果显示:84.74%遗传变异来源于母本不同的两组之间(SS/SJ组和JS/JJ组之间),12.66%变异存在于群体内个体之间,正反交群体与母本之间的变异仅有2.60%.另一方面,正反交F1群体的多态性位点比例、Nei′s遗传多样度、香农多样性指数均低于母本自繁群体.综合群体内多样性和群体间遗传关系分析结果,杂色鲍与盘鲍正反交F1的遗传物质组成有别于同时含有双亲基因组的实质性杂交,而与母本有着高度的遗传同质性,且遗传多样性水平略低于母本自繁群体.

关键词：杂色鲍盘鲍种间杂交 AFLP

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杂色鲍与盘鲍种间杂交受精率的影响因素

中国水产科学 2006年第2期13卷 230-236页

作者：蔡明夷柯才焕王桂忠王志勇王艺磊厦门大学海洋系海洋环境科学教育部重点实验室集美大学水产生物技术研究所

研究卵子排放后的时间、精子排放后的时间、授精精子浓度、胰蛋白酶、钙离子、pH和水温等因子对杂色鲍(Haiotisdiversicolor,以下简称S)与盘鲍(H.discus discu,以下简称J)种间杂交受精率的影响。结果表明,卵子排放后的时间和授精精子浓... 详细信息

研究卵子排放后的时间、精子排放后的时间、授精精子浓度、胰蛋白酶、钙离子、pH和水温等因子对杂色鲍(Haiotisdiversicolor,以下简称S)与盘鲍(H.discus discu,以下简称J)种间杂交受精率的影响。结果表明,卵子排放后的时间和授精精子浓度是影响杂交受精率两个最重要的因素。与自繁组合相比,正反杂交受精率均较低且下降速度快得多。水温21.5℃时,两亲本自繁对照组中,卵子排放1 h对受精率均无显著影响。而SJ杂交,卵子排放时间2 min时,受精率为55.9%±8.1%,4.7 min时受精率已下降了50%;JS杂交,卵子排放时间为4 min时,受精率为31.5%±9.7%,10 min时受精率下降至4 min时的29.1%。相比之下,精子排放时间对杂交受精率的影响小得多,3 h内对正反交杂交受精率没有显著影响。杂交适宜精子浓度约为母本自繁的100倍,其中SJ杂交适宜授精精子浓度为6.0×106~2.4×107mL-1,JS杂交适宜授精精子浓度为3.8×107~7.5×107mL-1。水温对于杂交受精率也有影响,短时间内将水温控制在26~29℃可以得到较高受精率。其他实验因素,如添加胰蛋白酶、Ca2+或改变授精体系pH对杂交受精率均无正向作用。

关键词：杂色鲍盘鲍种间杂交受精率

盘鲍原肌球蛋白基因的克隆、表达及其免疫原性鉴定

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水产科技情报 2012年第4期39卷 163-167页

作者：龚礼财邬玉兰李小龙魏鹏飞李荔刘志刚深圳大学医学院广东深圳518000 深圳大学生命科学学院广东深圳518000

为获得具有过敏原活性的重组盘鲍TM进行了试验。克隆盘鲍原肌球蛋白(tropomyosin,TM)基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行了鉴定。从盘鲍肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆盘鲍中原肌球蛋白基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引... 详细信息

为获得具有过敏原活性的重组盘鲍TM进行了试验。克隆盘鲍原肌球蛋白(tropomyosin,TM)基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行了鉴定。从盘鲍肌肉中提取总RNA,RT-PCR克隆盘鲍中原肌球蛋白基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增盘鲍TM的开放阅读框,与pET-28a载体连接并转化入大肠杆菌Escherichia.coli BL21(DE3),诱导表达后,Ni2+亲和层析柱纯化重组蛋白,West-ern-blot检测其免疫学活性。经序列测定,该基因由855个碱基组成,编码284个氨基酸。SDS-PAGE检测该重组蛋白在大肠杆菌中高效表达38 kD的目的蛋白,且重组蛋白具有良好的IgE结合活性。

关键词：盘鲍过敏原原肌球蛋白克隆表达

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杂色鲍♀×盘鲍♂杂交受精的细胞学研究

厦门大学学报（自然科学版） 2007年第2期46卷 239-243页

作者：蔡明夷柯才焕游伟伟王桂忠王志勇王艺磊厦门大学海洋学系近海海洋环境科学国家重点实验室(厦门大学)福建厦门361005 集美大学水产生物技术研究所福建厦门361021

应用组织学方法,研究了杂色鲍♀×盘鲍♂种间杂交受精过程的核相变化,结果表明杂色鲍♀×盘鲍♂种间杂交受精主要表现出两性融合的特点.盘鲍精子进入杂色鲍卵子,9 min后中心粒发育为星光;精子头部逐渐膨大、液化形成雄性原核,39 min后... 详细信息

应用组织学方法,研究了杂色鲍♀×盘鲍♂种间杂交受精过程的核相变化,结果表明杂色鲍♀×盘鲍♂种间杂交受精主要表现出两性融合的特点.盘鲍精子进入杂色鲍卵子,9 min后中心粒发育为星光;精子头部逐渐膨大、液化形成雄性原核,39 min后与雌性原核会合,而后融合.约3.2%的受精卵中观察到1个受精卵中同时存在3个即将融合的原核,这可能是多精入卵或卵子染色体组自发加倍的结果.42 min后开始第1次有丝分裂,此时在极个别发育卵中发现固缩的染色质小体、微核、或分离不同步的染色体.

关键词：种间杂交受精细胞学杂色鲍盘鲍雌核发育

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杂色鲍与皱纹盘鲍、盘鲍杂交的初步研究

海洋科学 2000年第11期24卷 39-41页

作者：柯才焕田越周时强李复雪厦门大学海洋系

于1998～1999年在福建厦门和东山两地养殖场 ,对我国主要养殖鲍即杂色鲍与皱纹盘鲍、盘鲍进行杂交试验。结果表明 ,皱♂×杂♀的受精率为3.5%～15.0 % ,平均7.6 %。皱♀×杂♂的受精率为1.5%～4.0% ,平均2.8 %。杂交成功的受精卵的胚胎... 详细信息

于1998～1999年在福建厦门和东山两地养殖场 ,对我国主要养殖鲍即杂色鲍与皱纹盘鲍、盘鲍进行杂交试验。结果表明 ,皱♂×杂♀的受精率为3.5%～15.0 % ,平均7.6 %。皱♀×杂♂的受精率为1.5%～4.0% ,平均2.8 %。杂交成功的受精卵的胚胎和幼体发育均正常。杂色鲍×盘鲍杂交组合的受精率明显高于杂色鲍×皱纹盘鲍 ,无论哪个组合杂色鲍作为雌性亲本的杂交受精率均比反交大大提高。

关键词：杂交受精率杂色鲍皱纹盘鲍盘鲍

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西氏鲍与盘鲍杂交育苗的初步研究

厦门大学学报（自然科学版） 2006年第5期45卷 602-605页

作者：骆轩游伟伟柯才焕杨建新吴捷厦门大学海洋与环境学院福建厦门361005 福建连江捷丰海珍品养殖基地福建连江350515

于2005年11月～12月利用从日本引进的西氏鲍与盘鲍进行了杂交育苗实验，获得西氏鲍♀×盘鲍♂、盘鲍♀×西氏鲍♂、西氏鲍♀×西氏鲍♂和盘鲍♀×盘鲍♂4个组合的F1代．对西氏鲍和盘鲍的卵径以及4个组合的受精率、孵化率、胚胎发育速度... 详细信息

于2005年11月～12月利用从日本引进的西氏鲍与盘鲍进行了杂交育苗实验，获得西氏鲍♀×盘鲍♂、盘鲍♀×西氏鲍♂、西氏鲍♀×西氏鲍♂和盘鲍♀×盘鲍♂4个组合的F1代．对西氏鲍和盘鲍的卵径以及4个组合的受精率、孵化率、胚胎发育速度、子代早期阶段的生长速度以及存活率进行比较，结果表明：西氏鲍和盘鲍的卵黄径并无明显差异，而二者的卵膜径差异显著，西氏鲍♀×盘鲍♂的受精率为19．1％～65．3％，孵化率为76．3％～84．8％．盘鲍♀×西氏鲍♂的受精率为22．3％～82．7％，孵化率为77．1％～85．2％．在水温19．0℃、盐度30的条件下，杂交组合比自繁组合的胚胎发育速度明显滞后，在鲍苗生长的早期阶段（12、20、30、60d），各组合生长速度差异不显著（P〉0．05），但从100d后，杂交子代的生长速度快于盘鲍和西氏鲍的自繁子代，其中以西氏鲍♀×盘鲍♂的生长速度最快，与其它组合相比差异显著（P〈0．05），表现出一定的杂种优势．但是，在180d内，杂交组合和自繁组合稚鲍的存活率差异不显著（P〉0．05）．

关键词：西氏鲍盘鲍种间杂交

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盘鲍雌核发育多倍体诱导的研究

盘鲍雌核发育多倍体诱导的研究

作者：顾勇杰集美大学

学位级别：硕士

鲍养殖业在渔业生产中具有重要的地位。但在鲍养殖过程中，由于长期的近亲繁殖，及其他不正确的繁育技术路线和不良环境的负选择，导致了鲍的种质严重退化。因此，要使鲍养殖业得到稳步发展，有必要进行鲍种质的纯合。研究如何改良和优... 详细信息

鲍养殖业在渔业生产中具有重要的地位。但在鲍养殖过程中，由于长期的近亲繁殖，及其他不正确的繁育技术路线和不良环境的负选择，导致了鲍的种质严重退化。因此，要使鲍养殖业得到稳步发展，有必要进行鲍种质的纯合。研究如何改良和优化鲍种质，提高其经济价值，在科学和生产上都具有重要的意义。本文根据人工雌核发育原理及多倍体诱导原理开展盘鲍雌核发育多倍体诱导试验，并结合多倍体鲍在胚胎发育期间显微学观察以及养成期间生长率和存活率的统计与分析，探讨鲍雌核发育多倍体诱导方法的优点与不足。采用不同浓度的乙烯脲失活杂色鲍精子的遗传物质，确定其最佳处理浓度和处理时间。采用细胞松弛素B(以下简称CB)对用遗传物质失活的杂色鲍精子和盘鲍卵子授精的受精卵排放第一极体或第二极体时，进行不同持续时间处理诱导其多倍体。试验结果表明，在水温24.8℃下，作为失活杂色鲍精子遗传物质的乙烯脲浓度为0.5‰和处理时间为10min是比较适宜的;用遗传物质失活的杂色鲍精子与盘鲍卵子授精，在授精后10min，用浓度为1.0mg·dm的CB持续处理受精卵24min，其表观三倍体率达65%以上，表观四倍体率达5%左右;在稚鲍的倍性检查中，雌核发育多倍体占总多倍体数的80%,杂交多倍体占总数的20%。盘鲍异源雌核发育的三倍体率达到93%，四倍体率为3%左右。研究通过盘鲍多倍体与二倍体月平均壳长和体重对比试验发现，多倍体鲍具有明显的生长优势，结果表明：苗种经12个月人工养成后，试验组三倍体群体的平均壳长和体重分别达到5.59cm和16.49g，对照组仅平均壳长和体重仅为3.89cm和9.05g。试验对比相同温度和水交换量条件下多倍体鲍和二倍体鲍死亡率：相同控温条件下，盘鲍三倍体与盘鲍二倍体死亡率几乎没有差别;而在水交换量试验中盘鲍三倍体与二倍体相比两者死亡率相差15%左右，说明三倍体具有更高的抗逆性。纵观全年稚鲍的平均成活率，盘鲍三倍体试验组为72.38%，对照组为60.97%。使用1L的锥形瓶和24m水泥池培育幼虫，用显微镜持续观察其胚胎发育情况，并记录雌核发育多倍体鲍受精卵分裂时期畸形个体的状态;对担轮幼虫时期畸形个体进行显微拍照。结果表明：雌核发育多倍体鲍受精卵在分裂过程中部分个体出现不均等分裂现象;而胚胎发育至担轮幼虫阶段，出现畸形形态幼虫。通常这些畸形的个体不能继续发育，有极少数个体即使可以发育到下一阶段，但也不会长时间存活。

关键词：盘鲍异源雌核发育多倍体生长存活胚胎发育

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皱纹盘鲍与盘鲍杂交效果分析

水产科学 2005年第8期24卷 1-3页

作者：孙振兴常林瑞宋志乐烟台师范学院生命科学学院山东烟台264025 烟台市芝罘区渔业技术推广站山东烟台264002

从杂种优势的角度对皱纹盘鲍♀与盘鲍♂杂交子一代的经济性状进行分析.结果表明,4月龄杂交鲍子一代(F1)活体重比皱纹盘鲍增加36.87%,软体部干重增加33.21%,总干重增加29.20%,其它性状也显著优于皱纹盘鲍.杂交鲍F1的壳长、壳宽、活体重... 详细信息

从杂种优势的角度对皱纹盘鲍♀与盘鲍♂杂交子一代的经济性状进行分析.结果表明,4月龄杂交鲍子一代(F1)活体重比皱纹盘鲍增加36.87%,软体部干重增加33.21%,总干重增加29.20%,其它性状也显著优于皱纹盘鲍.杂交鲍F1的壳长、壳宽、活体重、软体部干重和总干重等主要性状的变异系数为12.94%～44.51%,其中软体部干重的变异系数最大,壳长的变异系数最小;且杂交鲍各性状的变异系数均大于皱纹盘鲍.杂交鲍子一代的变异有助于定向选择,提高杂交育种的效果.

关键词：皱纹盘鲍盘鲍杂交杂种优势

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皱纹盘鲍与盘鲍杂交技术的研究

水产科学 2014年第10期33卷 654-657页

作者：赵春暖严正凛集美大学水产学院福建厦门361021

采用皱纹盘鲍大连群体与盘鲍日本群体进行杂交育苗试验和鲍苗种生产。结果表明,皱纹盘鲍和盘鲍正、反交组合的受精率和孵化率均低于两亲本自交组,而其苗种成活率高于两亲本自交组(提高达20%以上);皱纹盘鲍和盘鲍的正、反交组合鲍苗的生... 详细信息

采用皱纹盘鲍大连群体与盘鲍日本群体进行杂交育苗试验和鲍苗种生产。结果表明,皱纹盘鲍和盘鲍正、反交组合的受精率和孵化率均低于两亲本自交组,而其苗种成活率高于两亲本自交组(提高达20%以上);皱纹盘鲍和盘鲍的正、反交组合鲍苗的生长情况是,其平均壳长明显高于两亲本自交组鲍苗的平均壳长,最长达2.01cm;皱纹盘鲍与盘鲍作为亲本进行鲍苗种生产,经160d培育,共培育出鲍苗种2020.75万只(平均壳长2.01cm),鲍出苗量平均4345.7只/m2。通过鲍种内杂交的育种方法,可以达到改良和优化鲍种质的目的。

关键词：皱纹盘鲍盘鲍杂交育种受精率孵化率成活率