检索结果-南通市图书馆

盘羊杂交羊SPLUNC1融合蛋白的真核表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

江苏农业科学 2017年第14期45卷 130-133页

作者：高宝德张晓丽刘海燕张彦兵孙延鸣石河子大学生命科学学院新疆石河子832003 石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

为构建盘羊杂交羊SPLUNC1基因的真核表达载体并在巴斯德毕赤酵母中表达,从盘羊杂交羊口腔上颚的上皮细胞中提取总RNA,并反转录成c DNA,以该c DNA为模板采用逆转录PCR(RT-PCR)法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框,并克隆到p PIC9K载体... 详细信息

为构建盘羊杂交羊SPLUNC1基因的真核表达载体并在巴斯德毕赤酵母中表达,从盘羊杂交羊口腔上颚的上皮细胞中提取总RNA,并反转录成c DNA,以该c DNA为模板采用逆转录PCR(RT-PCR)法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框,并克隆到p PIC9K载体中,构建真核表达载体p PIC9K-SPLUNC1,再将重组质粒电转至毕赤酵母GS115中进行表达,表达产物经Ni-NTA琼脂亲和层析纯化,并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Western Blot)方法检测。结果显示,目的基因大小758 bp,重组表达质粒p PIC9K-SPLUNC1经双酶切、PCR及测序鉴定构建成功;表达产物经SDS-PAGE分析,可见大小为25.96 ku的目的条带,且在72 h表达量最大;纯化后经SDS-PAGE和Western Blot分析,可见大小为25.96 ku的目的条带。研究结果表明,利用真核表达系统在体外成功表达并纯化了盘羊杂交羊r SPLUNC1蛋白,为深入研究盘羊杂交羊SPLUNC1蛋白的生物学功能奠定基础。

关键词：盘羊杂交羊短颚、肺及鼻咽上皮细胞克隆1 融合蛋白真核表达

盘羊杂交羊SPLUNC1基因的克隆、表达及特性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

盘羊杂交羊SPLUNC1基因的克隆、表达及特性研究

作者：高宝德石河子大学

学位级别：硕士

盘羊(♂)与巴什拜羊(♀)杂交后代具有体型大、羔羊生长发育快、瘦肉率高的特点,但该杂交羔羊易感染绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)而死亡。短颚、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLU... 详细信息

盘羊(♂)与巴什拜羊(♀)杂交后代具有体型大、羔羊生长发育快、瘦肉率高的特点,但该杂交羔羊易感染绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,Mo)而死亡。短颚、肺及鼻咽上皮克隆1(short palate,lung and nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)是新发现的具有宿主防御功能的生物活性物质,是宿主先天性防御肺炎支原体感染的关键基因。目的:本研究通过克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因全长c DNA序列,与盘羊及巴什拜羊SPLUNC1基因进行比较研究,并对盘羊杂交羊SPLUNC1基因进行真核表达,研究重组SPLUNC1蛋白(recombinant short palate,lung and nasal epithelium clone 1,r SPLUNC1)的抑菌作用、对体外培养的Mo生长的影响、对中性粒细胞弹性蛋白酶活性的影响、对呼吸道致病菌感染的淋巴细胞凋亡的影响,并与巴什拜羊r SPLUNC1蛋白的功能比较,为盘羊杂交羊r SPLUNC1的体外功能研究奠定基础。方法:(1)盘羊杂交羊SPLUNC1基因全长c DNA序列的克隆:使用RT-PCR法和RACE法克隆盘羊杂交羊SPLUNC1基因3’端和5’端,测序后拼接获得SPLUNC1基因全长c DNA序列。(2)盘羊杂交羊SPLUNC1基因c DNA全长序列的生物信息学分析:利用在线生物信息学分析工具及生物信息学软件对获得的盘羊杂交羊SPLUNC1基因全长c DNA序列进行核酸序列、编码氨基酸以及蛋白的信号肽、亚细胞定位、高级结构及系统发育分析。(3)盘羊杂交羊r SPLUNC1的真核表达及纯化:根据已克隆出的SPLUNC1基因全长c DNA序列设计特异性表达引物,使用RT-PCR法扩增SPLUNC1基因ORF,构建重组表达质粒p PIC9K-SPLUNC1,将重组表达质粒电击转化至巴斯德毕赤酵母GS115,并利用甲醇对重组菌株GS115/p PIC9K-SPLUNC1诱导表达,SDS-PAGE和Western Blot法检测r SPLUNC1的表达;利用Ni-NTA琼脂亲和层析对真核表达的r SPLUNC1进行纯化。(4)盘羊杂交羊r SPLUNC1的抑菌作用:利用微量肉汤稀释法检测不同浓度盘羊杂交羊r SPLUNC1对大肠杆菌、肺炎链球菌、巴氏杆菌及金黄色葡萄球菌的抑菌作用。(5)盘羊杂交羊r SPLUNC1对Mo生长的影响:利用平板菌落计数法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测盘羊杂交羊r SPLUNC1对体外培养的Mo生长的影响。(6)盘羊杂交羊r SPLUNC1对中性粒细胞弹性蛋白酶活性的影响:利用四肽底物法检测r SPLUNC1对中性粒细胞弹性蛋白酶活性的影响。(7)盘羊杂交羊r SPLUNC1对致病菌感染的淋巴细胞凋亡的影响:利用DNA ladder法和Annexin V-FITC/PI双染法检测r SPLUNC1对致病菌感染的淋巴细胞凋亡的影响。结果与结论:(1)获得1117bp的盘羊杂交羊SPLUNC1基因全长cDNA序列。(2)盘羊杂交羊SPLUNC1基因开放阅读框(ORF)为768bp,编码256个氨基酸,预测该编码蛋白的分子量为26.57KDa,等电点为5.006。生物信息学分析表明SPLUNC1蛋白N端存在20个氨基酸残基的信号肽,具有高疏水性,亚细胞定位在细胞外。氨基酸序列分析表明,盘羊杂交羊SPLUNC1蛋白与巴氏拜羊SPLUNC1蛋白有一处差异。(3)成功构建了盘羊杂交羊SPLUNC1的真核表达载体,并在毕赤酵母成功表达了分子量为25.96KDa的r SPLUNC1。(4)抑菌试验结果表明,浓度在200μg/m L的盘羊杂交羊r SPLUNC1可以极显著抑制(p盘羊杂交羊r SPLUNC1能够显著(p盘羊杂交羊r SPLUNC1在作用4h时,Mo 16S r RNA的拷贝数与对照组相比差异极显著(P盘羊杂交羊r SPLUNC1可以增强NE的活性,且具有剂量效应。(7)DNA ladder法和Annexin V-FITC/PI双染法结果表明盘羊杂交羊r SPLUNC1对致病菌感染的淋巴细胞凋亡无影响。

关键词：盘羊杂交羊短颚、肺及鼻咽上皮克隆1 克隆真核表达体外功能

重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2018年第5期40卷 426-430页

作者：刘海燕王继雪赵宁杨义袁婷孙延鸣石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重... 详细信息

为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,每天150μg/只;A、B组每天气管注射等量的生理盐水作为对照组。采用ELISA方法检测各组羊血清中MO抗体水平以及IL-8、IL-12、IL-13表达水平。结果显示,感染前所有实验羊MO抗体均为阴性,感染后第14 d所有实验羊MO抗体均为阳性;IL-8水平在感染后第14 d^21 d,A、C、D组极显著和显著地低于B组(p盘羊杂交羊具有明显的免疫调节作用。本研究为绵羊支原体肺炎的治疗提供了实验依据。

关键词：短腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1 盘羊杂交羊绵羊肺炎支原体 ELISA

ISG15蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2013年第11期35卷 925-928页

作者：姜方配沈文鲁海富杨文孙延鸣石河子大学动物科技学院新疆石河子832000

为研究重组绵羊ISG15蛋白(rISG15)对感染绵羊肺炎支原体后的盘羊杂交羊的免疫调节效果,本研究将18只盘羊杂交羊随机分为A、B、C 3个组,6只巴什拜羊为D组,全部人工感染绵羊肺炎支原体(CCU=106),感染5 d后A和D组肌肉每天注射生理盐水作为... 详细信息

为研究重组绵羊ISG15蛋白(rISG15)对感染绵羊肺炎支原体后的盘羊杂交羊的免疫调节效果,本研究将18只盘羊杂交羊随机分为A、B、C 3个组,6只巴什拜羊为D组,全部人工感染绵羊肺炎支原体(CCU=106),感染5 d后A和D组肌肉每天注射生理盐水作为对照组;B和C组每天分别肌肉注射盘羊杂交羊和巴什拜羊的rISG15 200μg/只,并采用荧光定量PCR方法检测试验羊不同时间血液中ISG15、IL-12、IFN-γ的表达水平。结果显示,IFN-γ表达水平在感染第14 d,B组显著高于A、D组(p盘羊杂交羊具有一定的免疫调节效果,为绵羊支原体肺炎防治提供了实验依据。

关键词：盘羊杂交羊 ISG15 肺炎支原体实时荧光定量PCR

巴什拜羊、盘羊杂交羊重组SP-A蛋白对体外培养MO增殖的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2019年第6期41卷 645-648页

作者：赵宁魏春燕王晨豫孙延鸣石河子大学动物科技学院

为研究巴什拜羊和盘羊杂交羊的重组肺表面活性物质相关蛋白A(rSP-A)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)增殖的影响,本研究利用不同浓度(10μg/mL、20μg/mL和40μg/mL)巴什拜羊和盘羊杂交羊的rSP-A添加于MO培养液中进行体外培养,采用平板... 详细信息

为研究巴什拜羊和盘羊杂交羊的重组肺表面活性物质相关蛋白A(rSP-A)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)增殖的影响,本研究利用不同浓度(10μg/mL、20μg/mL和40μg/mL)巴什拜羊和盘羊杂交羊的rSP-A添加于MO培养液中进行体外培养,采用平板菌落计数和荧光定量PCR方法检测其对MO增殖的影响。平板菌落计数结果显示,巴什拜羊的3个rSP-A浓度组菌落数分别比对照组减少了8.35%(p>0.05)、23.04%(p盘羊杂交羊的3个rSP-A浓度组菌落数分别比对照组减少了6.73%(p>0.05)、21.74%(p羊3个rSP-A浓度组16SrRNA基因拷贝数比对照组下降了72.15%(p盘羊杂交羊的3个rSP-A浓度组的MO16SrRNA基因拷贝数比对照组下降了26.26%(p>0.05)、76.62%(p羊和盘羊杂交羊的rSP-A对体外培养的MO具有明显的抑制作用。本研究比较了不同品种羊SP-A蛋白在抗MO感染中的作用,为进一步研究盘羊杂交羊易感MO的分子作用机制奠定基础。

关键词：巴什拜羊盘羊杂交羊肺表面活性物质相关蛋白A 绵羊肺炎支原体平板菌落计数荧光定量PCR

杀菌性/通透性增加蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国预防兽医学报 2015年第6期37卷 481-485页

作者：郭海英沈文陈冬梅陈凯丽高宝德张晓丽孙延鸣石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 石河子大学牛命科学学院新疆石河子832003

为研究重组杀菌性/通透性增加蛋白(r BPI)对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊的细胞因子变化情况,本研究以6只巴什拜羊为A组,12只盘羊杂交羊随机分为B和C两组,全部人工感染MO(ccu=106),感染4 d后C组每天肌肉注射r BPI 150 mg/只,A... 详细信息

为研究重组杀菌性/通透性增加蛋白(r BPI)对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊的细胞因子变化情况,本研究以6只巴什拜羊为A组,12只盘羊杂交羊随机分为B和C两组,全部人工感染MO(ccu=106),感染4 d后C组每天肌肉注射r BPI 150 mg/只,A和B组注射生理盐水,并采用荧光定量PCR方法及ELISA检测实验羊不同时间外周血中BPI、IL-1β、IL-4及IL-6的表达水平。结果显示,B对照组死亡率为33.3%。BPI的表达水平在感染后第7 d,C组显著低于A和B组(p盘羊杂交羊具有一定的免疫调节作用。

关键词：杀菌通透性增加蛋白绵羊肺炎支原体盘羊杂交羊 ELISA 荧光定量PCR

重组BPI蛋白对感染绵羊支原体肺炎的盘羊杂交羊的免疫调节及治疗效果研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

重组BPI蛋白对感染绵羊支原体肺炎的盘羊杂交羊的免疫调节及治疗...

作者：郭海英石河子大学

学位级别：硕士

目的:本试验以感染绵羊肺炎支原体(MO)的绵羊为疾病模型,使用重组BPI蛋白(r BPI)治疗感染MO的盘羊杂交羊,然后用real-time QPCR与ELISA的方法,测定BPI和相关细胞因子的含量,用血常规方法检测血液各项生理指标,以研究r BPI对感染MO的盘... 详细信息

目的:本试验以感染绵羊肺炎支原体(MO)的绵羊为疾病模型,使用重组BPI蛋白(r BPI)治疗感染MO的盘羊杂交羊,然后用real-time QPCR与ELISA的方法,测定BPI和相关细胞因子的含量,用血常规方法检测血液各项生理指标,以研究r BPI对感染MO的盘羊杂交羊的免疫调节效果。方法:(1)绵羊肺炎支原体的人工感染:将冻存的MO菌种进行复壮培养,测定菌液浓度并稀释到备用浓度106CCU/m L。然后将6只巴什拜羊为A组,12只盘羊杂交羊随机分为B、C组,全部气管内注射绵羊肺炎支原体,每天观察临床症状并测量记录体温。两周后每组随机取3只试验羊的鼻腔分泌物,进行MO的培养与生化鉴定,检测人工感染情况。(2)r BPI对感染MO的盘羊杂交羊的治疗作用:在试验的第4 d,C组杂交羊使用纯化的r BPI对其治疗,150mg/只/天,而A组和B组每天注射生理盐水,继续观察临床症状并记录体温。实验结束后将所有羊解剖观察肺脏病理变化,并制作病理切片进行病理评分,对比各组羊的差别。(3)r BPI对感染MO的盘羊杂交羊的内源BPI m RNA水平的影响:分别在感染前(0 d)、感染后第二天(2 d)、感染后五天(5 d)、一周(7 d)、两周(14 d)、三周(21 d),采血分离嗜中性粒细胞,用real time-QPCR方法检测试验羊BPI m RNA的相对表达水平。(4)r BPI对感染MO的盘羊杂交羊的免疫调节作用:分别在第0 d、1 d、5 d、7 d、14 d、21 d,采血分离血清,用ELISA方法检测试验羊IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α及IFN-γ的含量,比较各组羊细胞因子的表达变化差异。(5)r BPI对感染MO的盘羊杂交羊的血液部分生理指标测定:分别在第0 d、7 d、14 d,采集各组羊的外周血进行血常规检测。结果与结论:(1)鼻腔分泌物用支原体专用培养基培养5d培养液变黄,葡萄糖发酵试验显示培养液由红变黄呈阳性;水解精氨酸试验显示培养液未变色呈阴性;洋地黄皂苷试验显示抑制带>0.3cm为阳性;氯化四氮唑还原实验显示琼脂培养基呈红色;红细胞吸附试验显示菌落表面布满红细胞,溶血试验为β溶血。说明鼻腔分泌物中含有MO,试验羊人工感染成功。(2)A组巴什拜羊在感染后2-3d均表现为食欲减退、体温一过性升高(40-41℃)、呼吸啰音,无死亡病例,剖检后肺表面有轻微出血点;B组杂交羊体温升高(40-41℃)持续较久,有咳嗽、流浆液性鼻涕,甚至严重呼吸啰音及腹泻症状,其中2只死亡,剖检肺表面有不同程度的粉色肉变和肝变,有出血点和出血斑。C组杂交羊起初体温升高、食欲减退、咳嗽症状,剖检肺表面有出血点和出血斑。组织病理学评分结果:A组平均分为9.4,B组平均分19.9,C组平均分为12.8,B组评分显著高于A、C组(P杂交羊在治疗后临床症状及肺部炎症减轻。(3)在第7 d,C组BPI基因的相对表达水平显著低于A、B组(P杂交羊WBC、LYM、LYM%、RBC显著高于巴什拜羊,而MID、MID%、MCHC低于巴什拜羊。注射r BPI后,在第14 d,C组WBC、GRAN(109/L)及GRAN%显著低于B组(P杂交羊的血液生理指标有一定影响。

关键词：杀菌通透性增加蛋白绵羊肺炎支原体盘羊杂交羊巴什拜羊荧光实时定量PCR 酶联免疫吸附试验细胞因子

重组SPLUNC1蛋白对人工感染MO的盘羊杂交羊免疫调节作用研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

重组SPLUNC1蛋白对人工感染MO的盘羊杂交羊免疫调节作用研究

作者：刘海燕石河子大学

学位级别：硕士

目的:本试验首先人工感染绵羊肺炎支原体(MO)得到绵羊肺炎支原体病例,然后用巴什拜羊和盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白治疗感染MO的盘羊杂交羊,再用ELISA和real-time q PCR的方法,测定IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-12和IL-13细胞因子的血清... 详细信息

目的:本试验首先人工感染绵羊肺炎支原体(MO)得到绵羊肺炎支原体病例,然后用巴什拜羊和盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白治疗感染MO的盘羊杂交羊,再用ELISA和real-time q PCR的方法,测定IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-12和IL-13细胞因子的血清含量和口腔后上腭(咽喉部)上皮组织中SPLUNC1 m RNA的表达水平,以研究重组SPLUNC1蛋白对盘羊杂交羊的免疫调节和治疗效果。方法:(1)SPLUNC1基因的表达和蛋白的纯化:利用课题组已构建好的巴什拜羊和盘羊杂交羊重组GS115/p PIC9K-SPLUNC1巴斯德毕赤酵母阳性克隆菌株,甲醇诱导表达96 h,采用Phenyl sepharose FF树脂进行疏水层析纯化,SDS-PAGE方法检测表达和纯化结果。(2)重组SPLUNC1蛋白对感染MO的盘羊杂交羊相关细胞因子的调节作用:6只巴什拜羊为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,全部人工感染MO,每天观察临床症状并记录体温,两周后用ELISA试剂盒检测MO抗体,以验证是否感染MO。从感染第5 d开始,C、D组分别气管注射巴什拜羊和盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,150μg/只,每天1次,A、B组气管注射等量生理盐水。分别在第0 d、2 d、5 d、7 d、14 d和21 d采集全部羊的颈静脉血,分离血清,用ELISA方法检测血清中IL-5、IL-6、IL-8、IL-9、IL-12和IL-13的浓度。(3)重组SPLUNC1蛋白对感染MO的盘羊杂交羊的内源SPLUNC1 m RNA水平的影响:在感染前(第0 d)和感染后(第5 d)和治疗后(第21 d),刮取口腔后上腭(咽喉部)上皮组织样品,用real time-q PCR方法检测SPLUNC1 m RNA的表达水平。(4)重组SPLUNC1蛋白对感染MO的盘羊杂交羊的治疗作用:对C、D组连续气管注射巴什拜羊和盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,至第21 d,每天测量体温,观察临床症状,试验结束后剖检试验羊,观察肺部变化并照相,取肺组织制作病理切片,采用支原体肺炎组织病理学评分系统,对全部试验羊肺组织病理切片进行病理学评分,评价重组SPLUNC1蛋白的治疗效果。结果:(1)甲醇诱导表达重组GS115/p PIC9K-SPLUNC1巴斯德毕赤酵母阳性克隆株,收集96 h上清液,SDS-PAGE电泳显示有目的条带。重组SPLUNC1蛋白纯化后,SDS-PAGE电泳显示出巴什拜羊25.53 k Da和盘羊杂交羊25.96 k Da的单一目的条带。(2)人工感染MO两周后,所有试验羊MO抗体ELISA检测结果均为阳性,说明全部羊感染了MO。各试验组相关细胞因子变化如下:A组IL-5水平在感染后第141 d极显著低于B组(P羊的SPLUNC1 m RNA水平均升高,C、D组在治疗后SPLUNC1 m RNA水平极显著高于B组(P羊2 d体温一过性增高(401℃),之后体温逐步恢复正常,剖检肺组织有出血点;B组体温升高明显(412℃),严重咳嗽、腹泻,剖检发现肺表面有结节和肝变;C组经巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白治疗后咳嗽、腹泻等症状缓解,剖检发现肺表面有出血点和出血斑;D组注射盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白后,其临床症状减轻,剖检发现肺部有出血斑。各组试验羊肺组织病理评分结果分别为,A组8.8分,B组18.7分,C组13.

关键词：短腭、肺及鼻咽上皮克隆1蛋白绵羊肺炎支原体盘羊杂交羊细胞因子病理评分

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

绵羊肺炎支原体感染羊细胞因子的动态变化

畜牧与兽医 2015年第8期47卷 1-4页

作者：郭海英王明哲陈冬梅陈凯丽张晓丽高宝德孙延鸣石河子大学动物科技学院新疆石河子832003 石河子大学生命科学学院新疆石河子832003

为检测绵羊在感染绵羊肺炎支原体（MO）前后细胞因子的含量变化情况，将6只巴什拜羊和6只盘羊杂交羊人工感染MO，在感染前后分别采集静脉血，分离血清，用ELISA方法检测IL-1β、TNF—α、IL-8、IL-10及IFN-γ含量。结果显示：两组羊在... 详细信息

为检测绵羊在感染绵羊肺炎支原体（MO）前后细胞因子的含量变化情况，将6只巴什拜羊和6只盘羊杂交羊人工感染MO，在感染前后分别采集静脉血，分离血清，用ELISA方法检测IL-1β、TNF—α、IL-8、IL-10及IFN-γ含量。结果显示：两组羊在感染后IL-1β浓度均升高，第21天巴什拜羊的IL-1β含量降低，且显著低于杂交羊（P〈0．05）；感染后两组的TNF—α含量逐渐升高，第14～21天巴什拜羊TNF-α含量开始下降，且第14天显著低于杂交羊（P〈0．05），第21天极显著低于杂交羊（P〈0．01）；感染后第14和21天，巴什拜羊的IL-8含量开始下降，而杂交羊则继续升高，且杂交羊IL-8含量均极显著高于巴什拜羊（P〈0．01）；两组羊的IL-10含量在第5天达到最高，且杂交羊极显著高于巴什拜羊（P〈0．01），而第14和21天巴什拜羊显著（P〈0．05）和极显著（P〈0．01）高于杂交羊；感染后两组羊的IFN-1含量逐渐升高，第14～21天，巴什拜羊的IFN-γ含量开始下降，而杂交羊则继续升高，第14和21天巴什拜羊显著（P〈0．05）和极显著（P〈0．01）低于杂交羊。结果提示：绵羊感染MO前后细胞因子变化明显，巴什拜羊和杂交羊细胞因子变化也有差异，这对研究支原体肺炎发病机理及免疫治疗有指导意义。

关键词：绵羊肺炎支原体盘羊杂交羊巴什拜羊细胞因子 ELISA