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益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠PLP、Olig1、Olig2蛋白表达的影响

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中国中西医结合杂志 2014年第5期34卷 562-565页

作者：朱文浩高颖娄利霞朱陵群北京中医药大学东直门医院脑病科北京100700 北京中医药大学东直门医院中医内科学教育部重点实验室北京100700

目的研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠蛋白脂质蛋白(PLP)、少突胶质细胞转录因子1(Olig1)、Olig2蛋白表达的影响。方法将40只小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组... 详细信息

目的研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠蛋白脂质蛋白(PLP)、少突胶质细胞转录因子1(Olig1)、Olig2蛋白表达的影响。方法将40只小鼠随机分为正常组、模型组、中药组和西药组,每组各10只;模型组、中药组、西药组每只小鼠上腹部分两点皮下注射抗原乳剂200μL(含PLP139-151 150μg、H37RA 400μg),记为第1天;第1、3天尾静脉注射百日咳杆菌液100μL(含百日咳杆菌0.6×106个);造模后第7天给药,正常组和模型组给予生理盐水0.1mL/10g灌胃,中药组给予益肾达络饮(0.2g生药/10g)灌胃,西药组给予泼尼松药液(0.039mg/10g)灌胃,共干预54天。采用Western blot法测定EAE小鼠脑组织内PLP、Olig1、Olig2的变化。结果与正常组比较,模型组小鼠PLP及Olig2蛋白表达降低(P达均升高(P达均升高(P达水平升高(P益肾达络饮可通过升高EAE小鼠脑组织内Olig1、Olig2的水平促进髓鞘再生。

关键词：益肾达络饮实验性自身免疫性脑脊髓炎髓鞘再生蛋白脂质蛋白少突胶质细胞转录因子1 少突胶质细胞转录因子2

益肾达络饮缓解EAE模型小鼠神经系统炎症的机制研究

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中国药房 2023年第11期34卷 1326-1331页

作者：王响王诗洋吴元丁文婧谢名宗何静文邢天野尚晓玲长春中医药大学基础医学院长春130117

目的研究益肾达络饮抑制β-制动蛋白1(β-arrestin1)表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠炎症因子、环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨益肾达络饮治疗EAE的机制。方法采用随机... 详细信息

目的研究益肾达络饮抑制β-制动蛋白1(β-arrestin1)表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠炎症因子、环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的影响,探讨益肾达络饮治疗EAE的机制。方法采用随机数字表法将60只小鼠分为正常组、模型组、中药组(益肾达络饮20 g/kg)、阳性对照组(醋酸泼尼松3.9 mg/kg)、β-arrestin1 siRNA腺相关病毒(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组10只。除正常组外,其余各组小鼠均制备EAE模型。AAV-β组、AAV-β+中药组小鼠通过尾静脉注射AAV-β干扰β-arrestin1蛋白的表达。造模第8天开始每天灌胃相应药液/生理盐水1次,连续14 d。检测小鼠神经功能评分,观察小鼠脑和脊髓组织的病理形态学变化,检测小鼠血清中炎症因子[白细胞介素2(IL-2)、IL-23、γ干扰素(IFN-γ)]水平,检测小鼠脑和脊髓组织中β-arrestin1、cAMP、PKA、CREB蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组小鼠神经功能评分、血清中炎症因子水平以及脑、脊髓组织中β-arrestin1蛋白表达水平均显著升高(P达水平均显著降低(P达水平均显著降低(P达水平显著升高(P益肾达络饮可能是通过抑制中枢神经系统中β-arrestin1的表达,进而激活cAMP/PKA/CREB信号通路,减轻神经系统炎症,最终缓解EAE的症状。

关键词：益肾达络饮实验性自身免疫性脑脊髓炎 β-制动蛋白1 蛋白激酶A cAMP反应元件结合蛋白炎症因子

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益肾达络饮对MRS2179干预下实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠的影响及机制

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中华中医药杂志 2023年第7期38卷 3086-3092页

作者：王响王诗洋谢名宗何静文张登峰李丹王泰愚尚晓玲长春中医药大学基础医学院长春130117

目的:从P2Y1受体探讨益肾达络饮治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的机制。方法:60只C57BL/6J雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、P2Y1受体拮抗剂(MRS2179)组、中药组、MRS2179+中药组、激素组。除空白组外均制作EAE模型,每日记录各... 详细信息

目的:从P2Y1受体探讨益肾达络饮治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的机制。方法:60只C57BL/6J雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、P2Y1受体拮抗剂(MRS2179)组、中药组、MRS2179+中药组、激素组。除空白组外均制作EAE模型,每日记录各组小鼠的体质量与神经功能评分。造模第4天,MRS2179组与MRS2179+中药组腹腔注射MRS2179,造模第8天开始给予相应药物连续干预14 d取材。HE染色观察各组小鼠脑与脊髓的病理改变;ELISA测定各组小鼠血清中白介素(IL)-6、IL-17、IL-23、γ干扰素(IFN-γ)的浓度;Western Blot检测各组小鼠脑及脊髓中P2Y1、细胞外信号调节激酶(ERK)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)蛋白的表达变化。结果:益肾达络饮可以减缓EAE小鼠体质量下降,降低神经功能评分,缓解脑与脊髓中的炎性浸润。与空白组比较,模型组血清中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ浓度显著升高,脑与脊髓中P2Y1、ERK、GFAP、PKA表达显著升高,GDNF、CREB、PKC表达显著降低(P益肾达络饮的作用机制可能是通过影响中枢神经系统中的P2Y1受体活性,抑制神经炎症反应,抑制GFAP分泌,影响PKA/PKC平衡,促进GDNF的生成,从而抑制星形胶质细胞过度活化、缓解炎症、促进神经修复,缓解EAE的疾病状态。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎 P2Y1 益肾达络饮 MRS2179 神经胶质细胞源性神经营养因子胶质纤维酸性蛋白蛋白激酶A 蛋白激酶C

益肾达络饮抑制β-arrestin1对多发性硬化小鼠Th17/Treg细胞的影响

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中华中医药杂志 2022年第5期37卷 2893-2897页

作者：王响丁文婧谢名宗王忠敏何静文任嘉彦尚晓玲长春中医药大学长春130117

目的:从β-arrestin1基因探讨益肾达络饮治疗多发性硬化(MS)的作用机制。方法:72只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组、β-arrestin1基因沉默(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组12只。除空白组外,其余组均制作EAE模... 详细信息

目的:从β-arrestin1基因探讨益肾达络饮治疗多发性硬化(MS)的作用机制。方法:72只雌性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、中药组、西药组、β-arrestin1基因沉默(AAV-β)组、AAV-β+中药组,每组12只。除空白组外,其余组均制作EAE模型。造模第8天,空白组、模型组、AAV-β组予0.9%氯化钠溶液灌胃,中药组、AAV-β+中药组予益肾达络饮干预,西药组予醋酸泼尼松治疗,共治疗2周。每天对小鼠进行神经功能评分,治疗结束后HE染色观察脑、脊髓组织的病理变化,流式细胞术分析脾脏Th17/Treg细胞比例,ELISA法检测血清中IL-6、IL-17、IL-27、IL-35的浓度变化。结果:与模型组比较,各干预组从第15天开始神经功能评分显著降低(P益肾达络饮可减轻中枢神经系统炎性细胞浸润。与模型组比较,其他各组Th17细胞数量显著减少(P益肾达络饮治疗EAE的机制可能与抑制β-arrestin1表达,影响细胞因子的分泌,调节Th17/Treg细胞失衡有关。

关键词： β-arrestin1 多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎 Th17/Treg细胞平衡白细胞介素益肾达络饮中枢神经系统自身免疫性疾病 CD_(4)^(+)T细胞

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠丝裂原和应激激活蛋白酶1表达的影响

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中国老年学杂志 2014年第13期34卷 3668-3670页

作者：胡亚男刘爱东公培刚郭江燕张家颖尚晓玲长春中医药大学吉林长春130117 吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学实验中心

目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正... 详细信息

目的通过分析丝裂原和应激激活蛋白激酶1(MSK1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的表达情况探讨中药复方益肾达络饮保护小鼠损伤脑组织的机制。方法利用蛋白印迹技术,检测小鼠脑组织中MSK1、CREB的含量。结果脑组织中MSK1表达显示,正常组和中药组、激素组、抑制剂组均有显著性差异(均P达显示:中药组CREB的表达与其余各组相比均显著升高(P益肾达络饮治疗EAE与MSK1升高有关,p38MAPK信号通路下游因子MSK1表达与其底物CREB表达呈相同态势。

关键词： EAE 多发性硬化益肾达络饮 MSK1

益肾达络饮对DPCPX干预下EAE小鼠H3K9ac、H4K5ac表达的影响

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中国中医基础医学杂志 2023年第10期29卷 1634-1639页

作者：王响谢名宗何静文丁文婧尚晓玲长春中医药大学长春130117

目的观察益肾达络饮在腺苷A1受体(adenosine A1 receptor,A1AR)抑制剂1,3-二丙-8-环戊黄嘌呤(8-cyclopentyl-1,3-dipropylxanthine,DPCPX)干预下对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的治疗作用及对组蛋白H3第9位赖氨酸乙酰化(histone H3 lysine residue 9 acetylation,H3K9ac)、组蛋白H4第5位赖氨酸乙酰化(histone H4 lysine residue 5 acetylation,H4K5ac)的影响。方法将60只C57BL/6J雌性小鼠随机平均分成6组。除正常对照组外,其余组均制作EAE模型。从造模第8天开始,模型组、DPCPX组予0.9%氯化钠溶液灌胃,西药组予醋酸泼尼松混悬液灌胃,中药组、DPCPX+中药组予益肾达络饮药液灌胃,连续给药14 d。每日记录各组小鼠的神经功能评分,运用Western Blot检测各组小鼠脑及脊髓中A1AR、H3K9ac、H4K5ac的表达水平,免疫组化观察脑及脊髓中H3K9ac、H4K5ac的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组最高平均神经功能评分与第21天评分均显著升高(P达量显著升高(P达量显著升高(P达量显著升高(P达量显著降低(P益肾达络饮可能通过活化A1AR,抑制组蛋白H3、H4的乙酰化水平,调节EAE小鼠的表观遗传修饰,从而降低EAE小鼠的神经功能评分。

关键词：益肾达络饮多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎腺苷A1受体组蛋白乙酰化

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎p38MAPK信号转导通路的影响

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中华中医药杂志 2011年第2期26卷 267-270页

作者：高颖关东升娄丽霞朱陵群北京中医药大学东直门医院北京100700 河南中医学院郑州450003

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预EAE的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制。方法:采用免疫蛋白质印迹法、免疫组化法测定EAE小鼠CNS中... 详细信息

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导通路在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用,观察中药复方益肾达络饮干预EAE的疗效,探讨益肾达络饮治疗EAE的作用机制。方法:采用免疫蛋白质印迹法、免疫组化法测定EAE小鼠CNS中p38、p-p38蛋白表达的变化。结果:益肾达络饮能降低EAE的复发率(P达水平明显降低(P益肾达络饮能降低EAE的复发率,有效改善EAE小鼠神经功能损伤;中药益肾达络饮干预EAE的作用机制与对p38MAPK信号通路的调节密切相关。

关键词：多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎 p38丝裂原活化蛋白激酶益肾达络饮

益肾达络饮对EAE小鼠乙酰化组蛋白H3的影响及机制探讨

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时珍国医国药 2022年第12期33卷 2844-2847页

作者：王响丁文婧谢名宗何静文尚晓玲长春中医药大学基础医学院吉林长春130117

目的探讨益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠乙酰化组蛋白H3的影响及机制。方法 60只C57BL/6雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、中药组、激素组、MRS2179(P2Y1受体拮抗剂)组、MRS2179+中药组。分别给予不同药物干预。... 详细信息

目的探讨益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠乙酰化组蛋白H3的影响及机制。方法 60只C57BL/6雌性小鼠随机分成6组:空白组、模型组、中药组、激素组、MRS2179(P2Y1受体拮抗剂)组、MRS2179+中药组。分别给予不同药物干预。每日记录各组小鼠的体重及神经功能评分,运用免疫蛋白印迹法(WB)测定小鼠脑及脊髓中P2Y1的表达含量,运用WB及免疫组织化学染色法(IHC)检测小鼠脑及脊髓中乙酰化组蛋白H3的表达水平。结果神经功能评分的变化情况:中药组、MRS2179+中药组与激素组低于模型组与MRS2179组。各组小鼠中枢神经系统(CNS)中P2Y1的表达情况:模型组高于空白组、MRS2179组、中药组、MRS2179+中药组与激素组。乙酰化组蛋白H3的表达情况:模型组高于空白组、中药组、MRS2179+中药组、MRS2179组与激素组。差异具有统计学意义。结论益肾达络饮可通过抑制P2Y1的表达,降低乙酰化组蛋白H3的表达水平,从而降低神经功能评分,缓解EAE的疾病状态。

关键词：多发性硬化 EAE H3 P2Y1 益肾达络饮

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠细胞外信号调剂激酶1/2通路的影响

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中华中医药杂志 2016年第2期31卷 704-707页

作者：朱文浩高颖刘璐淄博市中医医院山东淄博255300 北京中医药大学东直门医院北京100700 首都医科大学附属北京中医医院北京100010

目的:研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠ERK1/2通路的影响。方法:将60只雌性SJL小鼠随机分为5组,即正常组、模型组、中药组、西药组和PD98059组,每组各12只。模型组、中药组、西药组和PD98059组分两点皮下注射抗原乳剂... 详细信息

目的:研究益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠ERK1/2通路的影响。方法:将60只雌性SJL小鼠随机分为5组,即正常组、模型组、中药组、西药组和PD98059组,每组各12只。模型组、中药组、西药组和PD98059组分两点皮下注射抗原乳剂共200μL(含PLP139-151 150μg、H37Ra 400μg);分别在造模第1天、第3天再给予每只小鼠尾静脉注射百日咳杆菌液100μL(含百日咳杆菌0.6×106个)。造模第7天给予相应药物治疗,共干预15d,免疫后每天记录各组小鼠的神经功能评分。用Western blot法测定EAE小鼠脑组织内Ras、p-c-Raf、c-Raf、p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2和ERK1/2的表达。结果:与模型组比较,中药组、西药组和PD98059组EAE小鼠第21天的神经功能评分显著降低(P达水平显著高于正常组(P达水平显著低于模型组(P达水平无显著差异。结论:益肾达络饮可通过降低p-MEK1/2和p-ERK1/2的表达抑制ERK1/2通路的激活,从而降低EAE小鼠的神经功能评分,延迟发病时间,但益肾达络饮抑制ERK1/2通路后引起的下游生物学效应尚不明确,需进一步研究。

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎益肾达络饮细胞外信号调节激酶1/2