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益气解毒方对UC大鼠线粒体结构异常与免疫损伤的调节机制研究

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益气解毒方对UC大鼠线粒体结构异常与免疫损伤的调节机制研究

作者：李文静北京中医药大学

学位级别：硕士

1.研究背景：溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis, UC)是一种以结肠黏膜及黏膜下层形成慢性炎症和溃疡为主要病理特点的消化道疾病。以黏液脓血便、腹泻、腹痛及里急后重为主要临床表现,病程长,发作期与缓解期交替,常反复发作,是中西医学... 详细信息

1.研究背景：溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis, UC)是一种以结肠黏膜及黏膜下层形成慢性炎症和溃疡为主要病理特点的消化道疾病。以黏液脓血便、腹泻、腹痛及里急后重为主要临床表现,病程长,发作期与缓解期交替,常反复发作,是中西医学界研究的重点。现代医学治疗主要选用抗炎修复的方法,在急性期疗效显著,但远期疗效不理想。因此降低复发率,提高治愈率是现代UC研究的重点。中医针对UC脾虚湿热的基本病机,采用益气解毒的方法进行治疗,在临床中取得了良好的疗效。2.研究目的：导师自拟益气解毒方(生黄芪,茯苓,当归,木香,连翘,黄连,蒲公英,焦三仙,炙甘草)在UC临床治疗中,可以提高治愈率、降低复发率,其效用机制、疗效特点、应用规律有待研究。综合分析益气解毒方在UC不同时期的临床疗效和疗效特点,对线粒体结构异常变化及免疫损伤的影响。初步揭示UC脾虚的物质基础和反复发作的病理机制,明确脾虚在UC发病中的作用和益气解毒方的应用规律,从而提高UC抗复发治疗的临床疗效。3.研究方法：本课题以UC大鼠模型为研究对象,采用免疫复合法造模,随机分为正常组、模型组、益气解毒组和美沙拉嗪对照组。除正常组外,在正常饲养的同时分别予以蒸馏水灌胃、益气解毒方灌胃和美沙拉嗪灌胃。分别于药物干预前,及药物干预后2周、6周取材。①观察不同组别的一般情况变化、疾病活动指数(DAI)变化以及病理形态变化;②观察各组大鼠结肠黏膜上皮细胞的超微结构变化,用Flameng评分法评价线粒体结构变化;③硝酸酶还原法测定不同组别血清NO浓度的变化;④免疫组化法测定不同组别TNF-a、ICAM-1表达水平变化。4.研究结果：①不同组别大鼠疾病活动指数(DAI)及病理形态变化造模后,模型组DAI评分显著增高(P益气解毒方和美沙拉嗪在急性期均可以下调DAI评分(P益气解毒方在缓解期的优势明显,DAI评分低于美沙拉嗪组(P益气解毒组急性期抗炎效果不如美沙拉嗪组,但肉芽组织成熟较快,缓解期溃疡明显减小,修复增生明显。②不同组别大鼠结肠黏膜上皮细胞超微结构变化及线粒体Flameng评分变化UC大鼠结肠黏膜上皮细胞超微结构破坏明显,表现为细胞肿胀、表面微绒毛破坏、细胞器减少、线粒体、内质网肿胀及结构破坏。随着时间推移这些现象持续存在但程度有所减轻。美沙拉嗪和益气解毒方在急性期可改善细胞肿胀、微绒毛排列不齐、内质网、线粒体等细胞器被破坏的情况,益气解毒组的超微结构恢复更明显。到缓解期,美沙拉嗪的持续疗效不如益气解毒方,益气解毒组此时细胞的超微结构基本恢复正常,较急性期变化明显,美沙拉嗪较其急性期变化无明显差异。模型组在三个不同时期的评分均显著高于正常组(P益气解毒组和美沙拉嗪组低于模型组(P益气解毒组与正常组的差异缩小(P益气解毒组在缓解期的评分明显低于急性期(P益气解毒组、美沙拉嗪组均低于模型组(P益气解毒组显著低于模型组(P益气解毒组NO水平缓解期显著低于其急性期(P益气解毒组和美沙拉嗪组均降低了TNF-α的表达(P益气解毒组(P益气解毒组下降幅度明显(P益气解毒组和美沙拉嗪组的ICAM-1表达水平下降(P益气解毒组和美沙拉嗪组的ICAM-1表达水平持续下降(P益气解毒组的下降幅度较大,低于美沙拉嗪组(P<0.05)。5.研究结论：①炎症反应、免疫损伤和黏膜细胞超微结构损伤贯穿UC

关键词：溃疡性结肠炎免疫机制线粒体益气解毒

益气解毒法治疗慢性乙型肝炎脾气亏虚型的临床研究

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益气解毒法治疗慢性乙型肝炎脾气亏虚型的临床研究

作者：吴军山东中医药大学

学位级别：硕士

本文对慢性乙型肝炎的病因病机和治疗进行了系统探讨。提出了慢性乙型肝炎的基本病机为正虚邪恋，正虚以脾气亏虚为主，邪恋即疫毒邪气侵袭，据此制定了健脾益气、清热解毒的基本治法，并研制中药复方健脾清肝颗粒。遵照中医辨证理论，... 详细信息

本文对慢性乙型肝炎的病因病机和治疗进行了系统探讨。提出了慢性乙型肝炎的基本病机为正虚邪恋，正虚以脾气亏虚为主，邪恋即疫毒邪气侵袭，据此制定了健脾益气、清热解毒的基本治法，并研制中药复方健脾清肝颗粒。遵照中医辨证理论，从临床方面研究了其对慢性乙型肝炎脾气亏虚型的疗效和初步作用机理。选择慢性乙肝脾气亏虚型患者60例，随机分为治疗组和对照组。结果显示：本方不仅能明显改善症状和体征，而且对ALT和AST有明显改善，临床治疗显效率为53.3％，有效率为30％，无效率为16.7％，总有效率达83.3％。临床观察结果表明，健脾清肝颗粒确实是一首有效方剂。本研究运用传统中医理论并参照现代药理研究，针对慢性乙型肝炎治疗进行机理探讨和疗效观察，深化了中医学对慢性乙肝的系统认识，对指导临床和促进中西医理论的结合具有重要的理论意义和实用价值。

关键词：慢性乙型肝炎脾气亏虚临床研究益气解毒

益气解毒法对荷瘤裸鼠抑瘤作用和抑制胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实验研究

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益气解毒法对荷瘤裸鼠抑瘤作用和抑制胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实...

作者：王方方河南中医学院

学位级别：硕士

目的：通过益气解毒法对荷瘤裸鼠抑瘤作用和抑制胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实验研究，探寻该方法治疗胃癌的作用机制，以期初步为益气解毒法在胃癌治疗中的临床应用提供理论基础和依据。方法：通过体内外实验观察益气解毒法对胃癌的影... 详细信息

目的：通过益气解毒法对荷瘤裸鼠抑瘤作用和抑制胃癌细胞增殖及诱导凋亡的实验研究，探寻该方法治疗胃癌的作用机制，以期初步为益气解毒法在胃癌治疗中的临床应用提供理论基础和依据。方法：通过体内外实验观察益气解毒法对胃癌的影响及作用。体外实验将基于益气解毒理论组方的中药进行水提醇沉法工艺制备，制成稳定剂型;体外培养人胃癌细胞株SGC-7901、MGC-803，采用MTT检测法对胃癌细胞株进行药物敏感性检测，根据48h预实验得出胃癌细胞半数抑制浓度IC50，从而确定中药高、中、低剂量组的浓度;通过在倒置相差显微镜下观察细胞形态与细胞活性，应用酶联免疫检测仪测定细胞吸光度OD值，得出细胞抑制率;通过细胞免疫荧光技术来观察细胞内部CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3三种蛋白在不同药物浓度影响下的表达;从细胞水平观察益气解毒法对胃癌细胞增殖、凋亡的影响。体内实验通过构建裸小鼠胃原位移植瘤模型，观察益气解毒法对裸小鼠胃原位移植瘤瘤重及荷瘤小鼠体重的影响，并应用免疫组化、Westernblot技术，从分子水平观察益气解毒法对裸小鼠胃原位移植瘤内细胞增殖、凋亡相关蛋白CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3表达的影响。结果：体外实验，（1）MTT实验中，实验组与对照组相比差异有统计学意义，P＜0.05，说明益气解毒法对胃癌细胞SGC-7901、MGC-803均有细胞毒作用;中药剂量浓度的高低与胃癌细胞凋亡呈正相关，即中药剂量越高对胃癌细胞的抑制增殖作用越强，细胞的活力越差;（2）免疫荧光实验中，在益气解毒方高、中、低剂量的影响下，CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3三种蛋白在胃癌细胞SGC-7901、MGC-803中的表达与对照组相比差异显著，P＜0.05;其中Caspase-3在益气解毒方药物影响下阳性表达率增高，均高于对照组;而CyclinD1、bcl-2在益气解毒方药物干预作用下阳性表达率降低，且均低于对照组。体内试验，（1）通过对荷瘤裸小鼠体重及瘤重的统计，发现中药实验组的瘤重低于NS对照组，且差异有统计学意义，P＜0.05;（2）在免疫组化和Westernblot实验中，CyclinD1、Bcl-2在中药高、中剂量组的表达量明显低于对照组，Caspase-3在中药高、中剂量组的表达量明显高于对照组，且差异都具有统计学意义，P＜0.05。结论：益气解毒方中药与胃癌细胞凋亡密切相关，该方药对胃癌细胞生长增殖具有抑制作用，抑制作用与给药浓度成正比。中药对来源不同、分化程度不同的胃癌细胞株药物敏感性不同，抑瘤作用与抑制胃癌细胞增殖活性正相关。CyclinD1、Bcl-2、Caspase-3的表达与胃癌的进展与转移密切相关，其中CyclinD1、bcl-2的表达与胃癌细胞的增殖呈正相关，Caspase-3的表达与胃癌细胞的凋亡呈正相关。通过运用益气解毒法对胃癌细胞株及对荷瘤裸鼠进行MTT实验、免疫荧光实验、免疫组化实验及Westernblot实验等研究得出，益气解毒法对胃癌细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，对荷瘤裸鼠具有抑瘤作用。

关键词：胃癌益气解毒 CyclinD1 Bcl-2 Caspase-3

基于益气解毒理论运用感毒清咽痛方治疗感冒咽痛（气虚邪犯证）的临床研究

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基于益气解毒理论运用感毒清咽痛方治疗感冒咽痛（气虚邪犯证）的...

作者：郭静成都中医药大学

学位级别：硕士

目的:通过观察感毒清咽痛方治疗普通感冒(气虚邪犯证)的临床疗效,尤其是对咽痛、咽干及咽部体征的改善情况,以此评价感毒清咽痛方治疗感冒咽痛(气虚邪犯证)的有效性及安全性。方法:采用随机对照试验方法,将从成都市金牛区驷马桥社区中... 详细信息

目的:通过观察感毒清咽痛方治疗普通感冒(气虚邪犯证)的临床疗效,尤其是对咽痛、咽干及咽部体征的改善情况,以此评价感毒清咽痛方治疗感冒咽痛(气虚邪犯证)的有效性及安全性。方法:采用随机对照试验方法,将从成都市金牛区驷马桥社区中心医院门诊收集并符合纳入条件的60例患者,随机分为试验组30例、对照组30例。试验组采用感毒清咽痛方(黄芪、射干、板蓝根、牛蒡子)口服,每日3次。对照组采用复方氨酚烷胺胶囊(商品名:仁和可立克),每次1粒,每日2次。两组用药疗程均为3天。观察两组患者用药后的临床疗效,进而探讨正虚感毒和普通感冒的相关性。结果:1.基线情况:两组患者年龄、性别、病情程度比较差异均无统计学意义,两组间基线资料具有可比性。2.中医症状积分:(1)在改善咽部症状及体征方面,两组治疗前后组内比较,症状积分均明显减少(P0.05)。5.两组治疗后普通感冒复发情况比较:试验组复发率为14.29%,对照组的复发率为50%,两组比较,试验组复发率明显低于对照组(P益气解毒法的治疗原则,开拓了中医药治疗外感疾病的临床研究新思路,符合临床实际,且具有创新性。2.基于益气解毒理论的感毒清咽痛方具有扶正祛邪,益气解毒,清热利咽的功效,可以有效改善普通感冒的症状,尤其是对咽痛、咽干、咽部体征、倦怠乏力、少气懒言症状的临床疗效显著。3.感毒清咽痛方疗效稳定,安全性高,复发率低,具有较好的临床应用价值及普及应用的前景,值得进一步深入研究推广。

关键词：益气解毒感毒清咽痛方普通感冒咽痛气虚邪犯证

益气解毒方药干预致病菌入侵后肠上皮细胞自噬基因miR130a/ATG16L1的表达

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广州中医药大学学报 2019年第12期36卷 1980-1987页

作者：樊冬梅索娜刘洁明任宝琦广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州市番禺区何贤纪念医院消化科广东广州510006 广州中医药大学广东广州510006 广东省中医院广东广州510021

【目的】基于致病菌入侵肠上皮细胞后自噬基因miR130a/ATG16L1表达的变化,探讨益气解毒方药预防炎症性肠病(IBD)复发的可能机制。【方法】通过建立福氏志贺菌GIM1.539感染体外肠上皮细胞HCT116模型,转染miR130a模拟体及反义模拟体,接受... 详细信息

【目的】基于致病菌入侵肠上皮细胞后自噬基因miR130a/ATG16L1表达的变化,探讨益气解毒方药预防炎症性肠病(IBD)复发的可能机制。【方法】通过建立福氏志贺菌GIM1.539感染体外肠上皮细胞HCT116模型,转染miR130a模拟体及反义模拟体,接受大鼠益气解毒方药含药血清干预。对比不同干预方式和不同转染方案下自噬基因ATG16L1蛋白含量及基因表达水平、LC3蛋白含量和miR130a基因表达水平。【结果】与同组无药血清干预方式比较,益气解毒方含药血清干预方式下各组ATG16L1蛋白含量、基因表达水平与LC3蛋白含量均升高(P益气解毒方药可能通过抑制自噬相关miR130a的表达,上调自噬相关基因ATG16L1的表达而维持肠上皮细胞自噬,有助于胞内致病菌清除从而有效防治炎症性肠病复发。

关键词：炎症性肠病益气解毒肠上皮细胞自噬

益气解毒中药复方对急性辐射损伤小鼠全血细胞的动态防护作用研究

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河北中医药学报 2016年第4期31卷 1-6页

作者：王天琪王安王磊李盼飞徐文慧朱晓燃孟令华常金圆胡素敏北京中医药大学基础医学院北京100029

目的:研究以益气解毒为主的中药复方对急性辐射损伤(ARI)小鼠全血细胞的动态防护作用。方法:50只Balb/c小鼠随机分为5组,每组10只,空白和模型组灌胃去离子水,安多霖组和中药高、低剂量组分别灌胃各自的药液、中药复方水煎液,给药两周。... 详细信息

目的:研究以益气解毒为主的中药复方对急性辐射损伤(ARI)小鼠全血细胞的动态防护作用。方法:50只Balb/c小鼠随机分为5组,每组10只,空白和模型组灌胃去离子水,安多霖组和中药高、低剂量组分别灌胃各自的药液、中药复方水煎液,给药两周。两周后,除空白组外,其他各组小鼠进行5.5 Gy60Coγ射线全身一次性照射。分别于照射后第1、7、21、35 d检测小鼠外周血白细胞、淋巴细胞、红细胞、血红蛋白和血小板,并观察照后各组小鼠的生存情况,记录、计算照后各组小鼠的死亡率、生存率。结果:照射各组外周血白细胞、淋巴细胞和血小板均在照后1、7 d大幅度降低,在照后21 d和35 d均缓慢恢复;与同批次模型组比较,中药复方低剂量组白细胞、淋巴细胞和血小板均回升程度明显。照射各组红细胞和血红蛋白均在照后1、7、21 d逐渐降低,至照后35 d,各照射组均有所回升,而与模型组比较,中药复方低剂量组红细胞和血红蛋白恢复速度较快。照后35 d内,模型组、安多霖组和高剂量组分别死亡8、7、5只,而中药复方低剂量组小鼠在全程无死亡现象。结论:益气解毒中药复方可以缩短照后小鼠全血细胞各项指标的恢复时间,对全血细胞具有较好的防护效果,且降低ARI小鼠的死亡率。

关键词：益气解毒中药复方安多霖急性辐射损伤全血细胞小鼠动态防护

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益气解毒抗肿瘤

中老年保健 2018年第7期 13-15页

作者：郝迎旭范振佳壹图中日医院中西医结合肿瘤科

目前，恶性肿瘤已成为严重威胁人类健康的常见病及高发病。最新的统计数据显示．我国每年新发癌症患者约430万例．死亡约280万例．肺癌、胃癌、食管癌、肝癌、结直肠癌及女性乳腺癌的发病率名列前茅。肿瘤患者往往病情重、症状多、痛苦... 详细信息

目前，恶性肿瘤已成为严重威胁人类健康的常见病及高发病。最新的统计数据显示．我国每年新发癌症患者约430万例．死亡约280万例．肺癌、胃癌、食管癌、肝癌、结直肠癌及女性乳腺癌的发病率名列前茅。肿瘤患者往往病情重、症状多、痛苦大、疗效差、生存期短，生活质量差，因此人们常常谈”癌”色变。那么，面对肿瘤，有什么方法可以有效地对抗它、减轻痛苦、提高生存质量并延长寿命呢？

关键词：抗肿瘤益气解毒女性乳腺癌人类健康恶性肿瘤癌症患者数据显示结直肠癌

益气解毒方对体外培养小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用

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吉林中医药 2014年第8期34卷 832-834页

作者：王微马立斌尚云龙董燕飞李洪禹葛学萍孟令玉韩泽华王冰梅长春中医药大学基础医学院生理教研室长春130117 长春中医药大学临床医学院长春130117 长春中医药大学药学院长春130117

目的 MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用。方法大鼠灌胃制备益气解毒复方中药含药血清,作用于体外培养的小鼠肝癌H22细胞,采用MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对细胞生长的抑制作用。结果高剂量血... 详细信息

目的 MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对小鼠肝癌H22细胞生长的抑制作用。方法大鼠灌胃制备益气解毒复方中药含药血清,作用于体外培养的小鼠肝癌H22细胞,采用MTT法观察益气解毒中药复方含药血清对细胞生长的抑制作用。结果高剂量血清组与对照血清组之间的吸光度差异有显著统计学意义(P益气解毒中药复方含药血清对小鼠肝癌H22细胞生长具有较好的抑制作用。

关键词：肝癌益气解毒含药血清 H22细胞生长抑制率小鼠

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益气解毒方治疗口腔扁平苔藓的临床效果

中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第8期 116-119页

作者：顾景辉北京市第一中西医结合医院北京100026

研究益气解毒方在口腔扁平苔藓中的治疗效果。方法选择我院2019年3月至2021年3月诊治的24例患者作为研究对象,采用随机分组的方式将其分为观察组和对照组,各10例,其中对照组采用西药治疗,观察组在基础上应用益气解毒方治疗,分析治疗效... 详细信息

研究益气解毒方在口腔扁平苔藓中的治疗效果。方法选择我院2019年3月至2021年3月诊治的24例患者作为研究对象,采用随机分组的方式将其分为观察组和对照组,各10例,其中对照组采用西药治疗,观察组在基础上应用益气解毒方治疗,分析治疗效果。结果经治疗后,观察组的临床治疗效果、疼痛评分均优于对照组(P益气解毒中药在口腔扁平苔藓的治疗中,效果显著,安全性较高,值得借鉴。

关键词：中医药益气解毒口腔扁平苔藓