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皮诺敛酸乙酯生理活性及其耐存储纳米乳制备工艺研究

皮诺敛酸乙酯生理活性及其耐存储纳米乳制备工艺研究

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作者：张铭泽吉林农业大学

学位级别：硕士

松籽也被称为松仁(Pine kernel),是松属(Pinus L)植物可食用的种子。我国松籽资源丰富,广泛分布于我国东北以及西北地区。而皮诺敛酸是一种红松籽油中特有的多不饱和脂肪酸。目前大量研究已经证实皮诺敛酸具有显著的减肥、降脂、降血糖... 详细信息

松籽也被称为松仁(Pine kernel),是松属(Pinus L)植物可食用的种子。我国松籽资源丰富,广泛分布于我国东北以及西北地区。而皮诺敛酸是一种红松籽油中特有的多不饱和脂肪酸。目前大量研究已经证实皮诺敛酸具有显著的减肥、降脂、降血糖、抗癌等功效,作为保健食品和药品的开发潜质巨大。但目前仅有国外少数国家开发出了以皮诺敛酸为原料的保健食品,国内对皮诺敛酸的产品开发尚处于空白阶段。如何从松籽中得到高纯度的皮诺敛酸,并合理开发出具有保健功效且性状稳定的皮诺敛酸产品已成为松籽高值化利用的重要课题。基于以上研究背景,本研究以松籽为原材料,利用亚临界萃取技术优化松籽油提取工艺;其次,利用离子交联结合分子蒸馏得到高纯度皮诺敛酸;将所得皮诺敛酸进行乙酯化工艺研究;在此基础上通过动物试验评价皮诺敛酸乙酯的减肥、降血脂作用;最后将通过电磁搅拌器搅拌的方法将皮诺敛酸乙酯制备成纳米乳。具体研究内容如下:1、对皮诺敛酸提取和纯化工艺的优化研究。首先采用亚临界流体及夹带剂萃取松籽中的游离脂肪酸,选取加压压力,提取温度,时间进行单因素试验。由单因素分析结果结合Box-Behnken试验确定了松籽中脂肪酸最佳提取工艺为:1 kg松籽中加入5 L无水乙醇和5 L丙烷,在加压压力2 MPa,提取时间2.5 h,温度60°C的条件下提取脂肪酸,提取出的脂肪酸中皮诺敛酸含量可以达到17.67%。采用离子交联结合分子蒸馏的方法得到高纯度的皮诺敛酸,向反应釜中依次加入10 g氯化亚铜、100 g尿素和1 L无水乙醇并搅拌均匀,30°C加入200 g含有皮诺敛酸的脂肪酸,保持1 h,将温度降低至5°C,经离心后取出液相,水洗、真空脱溶后经分子蒸馏得到高含量的皮诺敛酸产品,经检测皮诺敛酸含量可达85.25%。采用皮诺敛酸:尿素:无水乙醇比例1:6:18进行包合,萃取并脱水后测得皮诺敛酸乙酯含量为98%。2、皮诺敛酸乙酯的减肥功效研究。使用自制肥胖饲料喂养小鼠4周进行造模,分别给予低、中、高剂量组以及阳性对照组50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg的皮诺敛酸乙酯以及100 mg/kg的奥利司他后。皮诺敛酸乙酯的减肥结果显示:与模型组相比,中、高剂量组体重出现显著或极显著下降,血脂指标显示,中、高剂量组的TC、TG和LDL-C含量均显著或极显著(P皮诺敛酸乙酯低剂量组SOD活性显著上升(P皮诺敛酸乙酯的降血脂作用研究。使用自制高脂饲料喂养小鼠4周,造模成功后对低、中、高剂量组分别给予4周50 mg/kg·d、100 mg/kg·d、200 mg/kg·d的皮诺敛酸乙酯后,处死小鼠,并留取血清,测出高血脂小鼠的TC、TG、LDL-C、HDL-C含量,将小鼠肝脏经HE染色后制成切片。结果表明:与模型组相比,皮诺敛酸乙酯高剂量组的TC、TG和LDL-C含量均出现极显著降低(P皮诺敛酸乙酯中剂量组小鼠血清中的TG、TC、LDL-C浓度显著降低(P皮诺敛酸乙酯低剂量组小鼠血清中的TG、TC浓度显著降低(P皮诺敛酸乙酯具有良好的降脂功效。4、皮诺敛酸乙酯纳米乳的制备工艺优化研究。分别使用混匀静置法和紫外光谱法选择皮诺敛酸乙酯纳米乳的表面活性剂与助表面活性剂,将皮诺敛酸乙酯制成纳米乳后测得皮诺敛酸纳米乳的体外抗氧化作用。结果显示:皮诺敛酸乙酯纳米乳的最佳配方:皮诺敛酸乙酯8.79%、Tween-80 26.38%、丙三醇8.79%、纯化水56.03%。在磁力搅拌器充分搅拌混匀,制备的皮诺敛酸乙酯纳米乳略呈现出淡蓝色乳光且外观较为澄清,证明该乳化配方形状稳定。对制得的皮诺敛酸乙酯纳米乳的体外抗氧化活性进行研究,发现皮诺敛酸乙酯有良好的O·自由基清楚能力、·OH自由基清楚能力、DPPH自由基清除能力,对纳米乳的粒径以及Zeta电位进行分析,纳米乳电位均在-30 m V范围内,且粒径在615～955 nm范围内,表明皮诺敛酸乙酯纳米乳具有良好的稳定性。

关键词：皮诺敛酸皮诺敛酸乙酯减肥降脂纳米乳

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