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皮诺敛酸/左旋肉碱降低HepG2细胞脂质的最佳浓度配比研究

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植物研究 2017年第6期37卷 941-946页

作者：杨明非张晶苏雯王鹏张孙东寇萍焦骄杨雨春付玉杰北日本制药株式会社产品研发室东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室哈尔滨150040 广东省珠海市斗门区公立医疗卫生机构管理中心珠海519125 吉林省林业科学院长春130033

针对单一活性成分的减肥降脂效果较差,且容易出现耐药性等问题,本文筛选并优化了皮诺敛酸/左旋肉碱降低Hep G2细胞脂质的最佳浓度配比,为皮诺敛酸降脂产品的开发提供基础数据。通过油酸诱导Hep G2细胞成脂建立体外非酒精性脂肪肝模型。... 详细信息

针对单一活性成分的减肥降脂效果较差,且容易出现耐药性等问题,本文筛选并优化了皮诺敛酸/左旋肉碱降低Hep G2细胞脂质的最佳浓度配比,为皮诺敛酸降脂产品的开发提供基础数据。通过油酸诱导Hep G2细胞成脂建立体外非酒精性脂肪肝模型。采用油红O染色法确定了皮诺敛酸/左旋肉碱降低Hep G2细胞中脂滴的最佳浓度配比。实验结果表明0.5 mmol·L^(-1)油酸诱导Hep G2细胞脂肪变性效果最佳,皮诺敛酸(PLA)最佳降脂浓度为6.25μmol·L^(-1),左旋肉碱(LC)最佳降脂浓度为250μmol·L^(-1),皮诺敛酸/左旋肉碱(PLA/LC)最佳降脂浓度配比为1∶40(μmol·L^(-1)/μmol·L^(-1))。皮诺敛酸/左旋肉碱复配物可以显著降低Hep G2细胞脂质,具有用量少,协同作用效果突出的优点,因此皮诺敛酸/左旋肉碱复配物在开发降脂减肥产品中具有良好的应用前景。

关键词：皮诺敛酸左旋肉碱复配降脂非酒精性脂肪肝

皮诺敛酸对脂多糖诱导小胶质细胞BV2炎性反应作用及机制研究

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中华中医药杂志 2020年第5期35卷 2608-2612页

作者：阚默宋凤媛陈锡俊兰兴成王继凤杨擎李晶李娜林喆长春中医药大学长春130117

目的:探讨皮诺敛酸(PLA)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞BV2炎性反应作用及机制研究。方法:MTT法评价PLA对BV2活力影响;细胞免疫荧光法检测自噬蛋白Beclin1、LC3B表达水平;ELISA法检测BV2上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达影响;分子模拟技... 详细信息

目的:探讨皮诺敛酸(PLA)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞BV2炎性反应作用及机制研究。方法:MTT法评价PLA对BV2活力影响;细胞免疫荧光法检测自噬蛋白Beclin1、LC3B表达水平;ELISA法检测BV2上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α表达影响;分子模拟技术分析PLA与p38MAPK、p65NF-κB蛋白之间的结合能力;Western blot法检测p38MAPK/p65NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果:与模型组比较,PLA各剂量组细胞存活率显著升高(P<0.05,P<0.01),细胞内Beclin1、LC3B蛋白表达显著减少(P<0.05,P<0.01);PLA中、高剂量组细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β含量显著降低(P<0.05);PLA与p38MAPK、p65NF-κB蛋白对接最佳Ki值分别为502.89μmol/L、19.09mmol/L;除PLA中剂量组细胞内p38MAPK蛋白外,其余3组p38MAPK/p65NF-κB蛋白表达水平显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论:PLA对LPS诱导BV2细胞炎症损伤具有保护作用,并抑制BV2细胞的自噬,降低炎症因子表达水平,其机制可能与抑制细胞内p38MAPK/p65NF-κB信号通路相关蛋白表达有关。

关键词：皮诺敛酸脂多糖小胶质细胞BV2 炎症因子自噬炎性反应机制 P38丝裂原活化蛋白激酶/p65核转录因子κB信号通路

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红松籽油中皮诺敛酸富集纯化工艺

林产化学与工业 2020年第6期40卷 23-29页

作者：包三三王希清杨雨春武晓丹赵春建付玉杰东北林业大学化学化工与资源利用学院黑龙江哈尔滨150040 吉林省林业科学研究院吉林长春130031 北京林业大学林学院北京100083

采用油脂乙醇醇解法结合尿素包埋法富集纯化红松籽油中的皮诺敛酸,在考察尿素与红松籽油脂肪酸乙酯质量比、乙醇与尿素比例、包合温度及包合时间等因素对皮诺敛酸乙酯GC含量影响的基础上,通过响应面法优化了尿素包合富集纯化的工艺条件... 详细信息

采用油脂乙醇醇解法结合尿素包埋法富集纯化红松籽油中的皮诺敛酸,在考察尿素与红松籽油脂肪酸乙酯质量比、乙醇与尿素比例、包合温度及包合时间等因素对皮诺敛酸乙酯GC含量影响的基础上,通过响应面法优化了尿素包合富集纯化的工艺条件。研究结果表明:皮诺敛酸乙酯的最佳纯化条件为尿素与红松籽油脂肪酸乙酯质量比3∶1、乙醇与尿素比例6∶1(mL∶g)、包合温度-13℃和包合时间24 h,在此条件下单次尿素包合后,皮诺敛酸乙酯纯度达94.75%,回收率达66.25%,纯度相比传统方法提高107%,回收率提高143%,且尿素在回收实验中表现出较好的重复性,3次包合和回收后皮诺敛酸的平均纯度仍达85.28%。

关键词：红松籽油皮诺敛酸富集纯化尿素包合法油脂醇解法

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红松子油中皮诺敛酸的纯化及降脂活性评价

植物研究 2019年第4期39卷 634-640页

作者：张晶寇萍秦启萍于良赵雪莲王希清杨雨春付玉杰东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室哈尔滨150040 吉林省林业科学院长春130033

以红松子油为原料,采用尿素包合法纯化皮诺敛酸,通过脂肪酸与尿素的比例、尿素与乙醇的比例、包合温度及包合时间等因素对皮诺敛酸含量及产率的影响,优化了尿素包合法的工艺参数,最终确定了皮诺敛酸的最佳纯化条件为:脂肪酸与尿素的比例... 详细信息

以红松子油为原料,采用尿素包合法纯化皮诺敛酸,通过脂肪酸与尿素的比例、尿素与乙醇的比例、包合温度及包合时间等因素对皮诺敛酸含量及产率的影响,优化了尿素包合法的工艺参数,最终确定了皮诺敛酸的最佳纯化条件为:脂肪酸与尿素的比例为1∶6.5(w/w),尿素与90%乙醇的比例为1∶4(w/v),包合温度为-10℃,包合时间12h。在上述条件下,经GC-MS检测获得了纯度为58.3%的皮诺敛酸,回收率为51.8%,经二次尿素包合纯化后可获得纯度为72.5%的皮诺敛酸,回收率为64.7%。为了评估皮诺敛酸的降脂活性,以油酸诱导HepG2细胞成脂,最终确定40μmol·L^-1的皮诺敛酸能显著的降低HepG2细胞内甘油三酯及总胆固醇的水平。

关键词：红松子油皮诺敛酸尿素包合法降脂活性

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大数据分析皮诺敛酸研究现状及发展趋势

食品工业 2023年第3期44卷 239-243页

作者：王静怡王鹏范越李芳菲郭庆启东北林业大学林学院哈尔滨150040 黑龙江省森林食品资源利用重点实验室哈尔滨150040

以2001-2021年中国知网(China National Knowledge Infrastructure, CNKI)和Web of Science (WOS)核心合集数据库中收录的皮诺敛酸相关文献为研究对象,采用知识图谱工具及文献计量分析平台对皮诺敛酸的研究信息进行可视化分析,探讨并预... 详细信息

以2001-2021年中国知网(China National Knowledge Infrastructure, CNKI)和Web of Science (WOS)核心合集数据库中收录的皮诺敛酸相关文献为研究对象,采用知识图谱工具及文献计量分析平台对皮诺敛酸的研究信息进行可视化分析,探讨并预测皮诺敛酸的研究热点及未来发展趋势。结果表明韩国是研究皮诺敛酸最多的国家,以Kim I H、Kim B H、Kim Y为中心的研究团队合作交流密切,形成以高丽大学为中心的主要作者合作平台。国内关于皮诺敛酸的研究发文量最多的作者为付玉杰,机构发文量最多的为东北林业大学;皮诺敛酸的研究热点主要为富集、改性工艺及减肥降脂、抗炎、免疫等功能研究。高纯度皮诺敛酸制备、生理功能机理研究以及其在产品中的应用预测为皮诺敛酸研究的主要趋势。

关键词：皮诺敛酸 CiteSpace 可视化分析研究现状发展趋势

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皮诺敛酸抑制小鼠营养性肥胖作用研究

营养学报 2009年第4期31卷 405-406页

作者：孙宇张泽生崔翠翠天津科技大学食品工程与生物技术学院天津300457

研究表明松籽油中特有的皮诺敛酸（pinolenic acid，all-cis-5，9，12，18：3）能够调节血脂异常，在美国已有以其为主要功能成分的减肥食品出售。本研究探讨其减肥作用。

关键词：皮诺敛酸肥胖

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皮诺敛酸纯化方法及其生理功能研究进展

食品工业科技 2020年第20期41卷 356-360页

作者：董欣睿包怡红东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040

皮诺敛酸是裸子植物松科种子中所特有的多不饱和脂肪酸,其占松子油总脂肪酸的14%~19%。目前关于皮诺敛酸的纯化方法主要有尿素包合法、溶剂分馏法、酶法等。皮诺敛酸具有多种生理功能,如降脂、抑制食欲、抗炎、抑制癌症转移等,可被用于... 详细信息

皮诺敛酸是裸子植物松科种子中所特有的多不饱和脂肪酸,其占松子油总脂肪酸的14%~19%。目前关于皮诺敛酸的纯化方法主要有尿素包合法、溶剂分馏法、酶法等。皮诺敛酸具有多种生理功能,如降脂、抑制食欲、抗炎、抑制癌症转移等,可被用于功能食品添加剂及保健品的制备。本文综述了皮诺敛酸的纯化方法及其生理功能,以期为后续皮诺敛酸的开发利用提供参考。

关键词：皮诺敛酸纯化方法生理功能应用

皮诺敛酸对油酸诱导HepG2细胞脂质积累的抑制作用研究

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皮诺敛酸对油酸诱导HepG2细胞脂质积累的抑制作用研究

作者：张晶东北林业大学

学位级别：硕士

红松籽油是从红松种籽中提取的一种天然油脂,其中含有丰富的亚油酸,油酸和皮诺敛酸等不饱和脂肪酸,其生物活性极其丰富,其中的皮诺敛酸是松籽油中特有的18个碳的不饱和脂肪酸。本文首次研究了皮诺敛酸抑制油酸诱导HepG2细胞中脂质积累... 详细信息

红松籽油是从红松种籽中提取的一种天然油脂,其中含有丰富的亚油酸,油酸和皮诺敛酸等不饱和脂肪酸,其生物活性极其丰富,其中的皮诺敛酸是松籽油中特有的18个碳的不饱和脂肪酸。本文首次研究了皮诺敛酸抑制油酸诱导HepG2细胞中脂质积累及其初步分子机制。此外左旋肉碱是从红色肉类中提取出的一种类维生素,对减肥及脂肪的消耗有显著的作用。为达到最佳的降脂效果,本论文研究了皮诺敛酸/左旋肉碱复配物的最佳降脂浓度配比。本文主要研究成果如下:1.皮诺敛酸具有抑制HepG2细胞脂质累积作用。MTT实验结果表明0.5 mM油酸对HepG2及L02细胞的生存率没有显著的抑制作用,油红O染色结果表明,0.5 mM油酸处理HepG2细胞24h时,细胞内产生大量的脂滴。因此,采用0.5mM油酸培养HepG2细胞24 h,成功诱导HepG2细胞成脂。MTT实验表明皮诺敛酸处理HepG2及L02细胞12h时,其细胞生存率较高,40μM浓度以下的皮诺敛酸对HepG2及L02细胞均无显著的抑制作用。皮诺敛酸(10、15、20、25 μM)预处理12 h后,HepG2细胞内脂滴量、甘油三酯和总胆固醇含量显著降低(与模型组相比),表明皮诺敛酸具有抑制细胞脂质累积的作用。2.皮诺敛酸可通过调节氧化应激途径改善油酸诱导的HepG2细胞脂质积累。采用含有皮诺敛酸(10,15,20,25 μM)和生理盐水空白对照的培养基孵育HepG2细胞12 h,然后用0.5 mM油酸处理细胞24 h。皮诺敛酸预处理后,HepG2细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的表达具有显著的提升,而脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的水平显著的降低。此外,皮诺敛酸能显著的阻滞油酸引起的细胞内活性氧(ROS)产生,同时,促进细胞内Nrf2和血红素氧化酶-1(HO-1)蛋白水平的表达(同油酸组比较)。以上结果表明皮诺敛酸能够通过抑制氧化应激损伤途径降低细胞脂质的积累。3.皮诺敛酸通过调节AMPK/SIRT1通路抑制HepG2细胞脂质积累。Western blot实验结果表明,同空白对照相比,油酸处理组明显的增加了 HepG2细胞中脂肪酸合成酶(FASN)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP1c)及硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)的水平,而皮诺敛酸(10,15,20,25 μM)预处理组其蛋白水平显著低于油酸处理组,并呈现剂量依赖性。AMPK、SIRT1蛋白水平的变化与脂肪酸氧化有密切的关系。经油酸处理HepG2细胞后,AMPK磷酸化水平被抑制,蛋白活性受到破坏,转录沉默信息调节因子(SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达量也被降低。而皮诺敛酸预处理的HepG2细胞内AMPK磷酸化水平得到一定程度的恢复,SIRT1和PPARα蛋白的水平同样得到了回升。采用AMPK的抑制剂compound C处理细胞,结果表明AMPK磷酸化水平被抑制,同时SIRT1和PPARα蛋白表达也受到抑制,说明皮诺敛酸可以激活AMPK/SIRT1信号通路抑制细胞脂质累积。4.皮诺敛酸/左旋肉碱复配物可有效降低HepG2细胞中脂质的积累。分别采用含50%皮诺敛酸的松籽油或左旋肉碱,处理HepG2细胞12 h,MTT实验结果表明25 μM以下的皮诺敛酸对细胞生长无显著的抑制作用,同时500 μM以下的左旋肉碱对细胞生长也无显著的抑制作用。油红O染色结果表明,皮诺敛酸抑制脂质积累的最适浓度是6.25 μM,左旋肉碱抑制脂质积累的最适浓度是250 μM。皮诺敛酸/左旋肉碱复配物抑制脂质积累的最适浓度配比为是1 μM皮诺敛酸复配40 μM左旋肉碱。说明皮诺敛酸与左旋肉碱复配物在降低HepG2细胞脂质积累中具有用量少,作用效果显著的特点。综上所述,皮诺敛酸预处理可抑制脂质过氧化作用,也可以降低FASN、SREBP1c及SCD1等促进脂肪合成的蛋白,抑制脂肪的积累。同时皮诺敛酸可以激活AMPK的磷酸化,以及其下游的SIRT1/PPARα信号通路,促进脂质的分解,达到降脂的功效。此外,优化出皮诺敛酸/左旋肉碱复配物的最佳降脂比例,为研制减肥降脂的高端产品提供了一定科学依据。

关键词：皮诺敛酸肥胖降脂 AMPK 复配

尿素包合法富集压榨松籽油中皮诺敛酸工艺优化

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食品与机械 2018年第8期34卷 183-188页

作者：刘志鑫刘志彬张根生岳晓霞杨慧铎许春明哈尔滨商业大学食品工程学院黑龙江哈尔滨150076

以压榨松籽油为原料,研究乙醇浓度、脂肪酸与尿素比、脂肪酸与乙醇比、包合时间、包合温度及包合次数对松籽油中皮诺敛酸的影响。在单因素试验的基础上,以皮诺敛酸含量和损失率的综合分为响应值,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,... 详细信息

以压榨松籽油为原料,研究乙醇浓度、脂肪酸与尿素比、脂肪酸与乙醇比、包合时间、包合温度及包合次数对松籽油中皮诺敛酸的影响。在单因素试验的基础上,以皮诺敛酸含量和损失率的综合分为响应值,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,进行优化试验设计,并建立皮诺敛酸的尿素包合回归模型。研究表明:脂肪酸:尿素=1:2. 88(g/g),脂肪酸:乙醇=1:7. 98 (g/mL),包合时间23. 44 h,包合温度4. 18℃,该条件下对皮诺敛酸进行二次包合,含量可由一次包合的39. 27%提高到53. 36%,皮诺敛酸损失率为17. 24%,综合分值为0. 954 3,综合评价指标最高。

关键词：皮诺敛酸松籽油尿素包合十八碳三烯酸