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贝莱斯芽孢杆菌对柑橘病原菌皮落青霉的生防初探

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西南农业学报 2022年第11期35卷 2609-2615页

作者：宋波张廷富杨昌鑫文国琴西华师范大学生命科学学院四川南充637000

【目的】探究贝莱斯芽孢杆菌发酵液对柑橘病原菌的生防效果,为柑橘采后真菌病害绿色防控提供科学依据。【方法】通过分生孢子划线法从腐烂发霉的柚子中分离到1株青霉,命名为DYC1-1,根据形态学和分子生物学鉴定该青霉。采用抑菌圈法,通... 详细信息

【目的】探究贝莱斯芽孢杆菌发酵液对柑橘病原菌的生防效果,为柑橘采后真菌病害绿色防控提供科学依据。【方法】通过分生孢子划线法从腐烂发霉的柚子中分离到1株青霉,命名为DYC1-1,根据形态学和分子生物学鉴定该青霉。采用抑菌圈法,通过贝莱斯芽孢杆菌发酵液对病原菌进行抑菌实验。【结果】分离得到1株柑橘病原菌,鉴定显示为皮落青霉(Penicillium crustosum)。将DYC1-1孢子悬液分别接种到柚子和沃柑表皮上,柚子和沃柑均发生病变,同时,从DYC1-1回接发病的果实上可以分离出与接种菌株形态相同的菌株,根据科赫假设验证表明所分离的DYC1-1是引起柑橘采后霉腐的病原菌。贝莱斯芽孢杆菌SB023经PDB培养基发酵5 d后,离心收集上清液并制备成终浓度分别为0%、1%、2%、3%、10%的发酵液,结果显示发酵液对菌株DYC1-1的生长具有一定抑制作用,发酵液浓度为1%、2%和3%的抑菌率分别为8.41%、8.73%和13.7%,发酵液浓度为10%的抑制率可达到37.8%,抑制率随发酵液浓度的升高而升高。镜检结果显示,与正常菌丝相比,发酵液添加组的DYC1-1菌丝有明显的膨大、形变和扭曲,说明贝莱斯芽孢杆菌发酵液中存在诱导真菌菌丝畸变的活性物质。【结论】贝莱斯芽孢杆菌发酵液对DYC1-1菌株的EC_(50)为8.2%。贝莱斯芽孢杆菌发酵液对柑橘病原菌皮落青霉具有一定的防治效果,相较于化学杀菌剂而言,该菌株来源安全、无农残,并且可以随着微生物的生长源源不断的获取。本研究可为开发利用贝莱斯芽孢杆菌作为生防菌剂奠定基础。

关键词：柑橘青霉病皮落青霉致病性贝莱斯芽孢杆菌生物防治

海藻内生真菌杂色曲霉EN-298和皮落青霉EN-311化学成分研究

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海藻内生真菌杂色曲霉EN-298和皮落青霉EN-311化学成分研究

作者：王佳宁中国科学院大学(中国科学院海洋研究所)

学位级别：硕士

本文对采集自山东烟台海域的海藻进行了内生真菌分离、菌株筛选、成分分离与鉴定及单体化合物的生物活性研究。从30余种海藻(包括叉开网翼藻、鸭毛藻、凹顶藻、日本仙菜、角叉菜、松节藻等)中分离得到了30余株内生真菌,采用生物活性筛选... 详细信息

本文对采集自山东烟台海域的海藻进行了内生真菌分离、菌株筛选、成分分离与鉴定及单体化合物的生物活性研究。从30余种海藻(包括叉开网翼藻、鸭毛藻、凹顶藻、日本仙菜、角叉菜、松节藻等)中分离得到了30余株内生真菌,采用生物活性筛选(包括抗真菌、抗细菌、卤虫致死等活性)和化学筛选(薄层层析、高效液相色谱等方法)等方法从中优选得到两株内生真菌,即日本仙菜内生真菌杂色曲霉(Aspergillus versicolor EN-298)和松节藻内生真菌皮落青霉(Penicillium crustosum EN-311)进行了化学成分与生物活性研究。采用PDB培养基对这两株海藻内生真菌EN-298和EN-311进行规模发酵,培养时间为30天,用乙酸乙酯和80%丙酮水分别对发酵液和菌丝体进行萃取。经过HPLC和TLC分析,发现乙酸乙酯提取物和菌丝体提取物成分基本相同,于是将两部分合并。之后采用反相硅胶柱层析、正相硅胶柱层析、凝胶柱层析、制备薄层层析、制备液相等分离方法对得到的粗提物进行分离纯化。从日本仙菜内生真菌EN-298中分离得到15个单体化合物并采用MS、UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC、1H-1H COSY等波谱学方法鉴定了所有单体化合物的结构(AV1-AV15),其中包括3个四降二萜类化合物(AV7-AV9),6个聚酮类化合物(AV1-AV6)。从松节藻内生真菌EN-311中分离得到15个单体化合物并采用MS、UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC、1H-1H COSY等波谱学方法鉴定了所有单体化合物的结构(PC1-PC15),其中包括8个混源萜类化合物(PC1-PC8),有3个混源萜类化合物为新化合物(PC1-PC3)。对分离得到的部分单体化合物进行了生物活性测试,包括抗菌MIC测试、卤虫致死活性测试。其中从松节藻来源内生真菌EN-311分离得到的混源萜类化合物具有较好的卤虫致死活性。PC1、PC2具有非常显著的卤虫致死活性,LD50值分别是1.98和1.56μg/ml。本论文从两株海藻内生真菌中分离得到了30个化合物,其中包括3个混源萜类新化合物,丰富了天然产物的研究内容。

关键词：海藻内生真菌杂色曲霉皮落青霉次级代谢产物卤虫致死活性

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果胶酶皮落青霉的分离纯化及其特性

云南化工 1993年第1期20卷 7-10页

作者：倪鸿静云南省商业科学技术研究所昆明650000

用凝胶过滤和离子交换层析方法从皮落青雷液态发酵得的粗酶液中分离获得纯的多聚半乳糖醛酸酶(PG),并测定了它的重要物理、化学及生物化学特性。分析证明,所制备的PG为纯品,其酶活力比精酶增加50％。

关键词：皮落青霉果胶酶分离纯化

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土传病害生防菌的分离筛选及鉴定

中国农学通报 2014年第29期30卷 8-14页

作者：陈丽园詹凯鲁恒星戚仁德安徽省农业科学研究院畜牧兽医研究所合肥230031 安徽省农业科学院植物保护研究所合肥230031

为了使蛋鸡粪有机肥兼有防治作物土传病害的多功能性。实验从安徽省农科院实验田及蛋鸡养殖场等环境中共分离出170株真菌,首先将分离菌与辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici)进行平板对峙实验,再通过复筛选出7株菌,同时对该7株菌进行抑... 详细信息

为了使蛋鸡粪有机肥兼有防治作物土传病害的多功能性。实验从安徽省农科院实验田及蛋鸡养殖场等环境中共分离出170株真菌,首先将分离菌与辣椒炭疽病(Colletotrichum capsici)进行平板对峙实验,再通过复筛选出7株菌,同时对该7株菌进行抑菌谱、耐温实验和蛋鸡粪肥中增殖实验,效果较好的菌株最终进行分子生物学鉴定。结果表明:筛选出的菌株中编号为TCC53对油菜菌核病和麦纹枯的抑菌率分别可达90.4%、82.3%,TCC157对辣椒炭疽病和辣椒疫霉的抑菌率分别可达88.6%、71.2%,同时该两株菌均可在40℃以上生长。通过分子生物学鉴定得出TCC53和TCC157分别为棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)和皮落青霉(Penicillium crustosum)。皮落青霉和棘孢曲霉均为环境中常见真菌,生长快、不具有致病性,将其添加至蛋鸡粪有机肥中有望提高作物的抗病效果又可改善土壤结构的微生物肥料。

关键词：蛋鸡粪生防有机肥棘孢曲霉皮落青霉

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果胶酶液态深层发酵在云南大学通过鉴定

云南大学学报(自然科学版) 1988年第1期 82-82页

作者：翟应田《云南大学学报》编辑部

1987年10月29日,果胶酶液态深层发酵成果通过了由云南大学科研处及泸州市科委主持的鉴定。果胶酶用于果汁、果酒的加工和制造,可以提高出汁率和产品质量,加快滤速,缩短生产周期,降低成本。在全世界食品酶制剂中,果胶酶的产值约占四分... 详细信息

1987年10月29日,果胶酶液态深层发酵成果通过了由云南大学科研处及泸州市科委主持的鉴定。果胶酶用于果汁、果酒的加工和制造,可以提高出汁率和产品质量,加快滤速,缩短生产周期,降低成本。在全世界食品酶制剂中,果胶酶的产值约占四分之一。过去国内果胶酶通常采用固态法进行生产,并且多为粗制品,粮耗高、质量低、批量

关键词：果胶酶液态深层发酵皮落青霉云南