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百山祖冷杉

生命世界 1995年第2期 7-7页

百山祖冷杉(Abies beshanzuensis)是中国植物学者吴鸣翔(浙江省庆元县林业科学研究所高级工程师)1976年发表的松科冷杉属新种。常绿乔木,高17米,胸径达80厘米。球果圆柱形,有短梗,长7—12厘米,直径3.5—4厘米,成熟时淡褐色或淡褐黄色。... 详细信息

百山祖冷杉(Abies beshanzuensis)是中国植物学者吴鸣翔(浙江省庆元县林业科学研究所高级工程师)1976年发表的松科冷杉属新种。常绿乔木,高17米,胸径达80厘米。球果圆柱形,有短梗,长7—12厘米,直径3.5—4厘米,成熟时淡褐色或淡褐黄色。5月开花,11月球果成熟。

关键词：百山祖冷杉植物庆元县浙江省成熟中华人民共和国球果冷杉属

百山祖冷杉的ISSR分析优化和遗传多样性初步研究

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2005年第3期31卷 277-282页

作者：哀建国邱英雄余久华陈小荣丁炳扬浙江大学生命科学学院百山祖自然保护区浙江庆元323800 温州师范学院生命与环境科学学院浙江温州325027

以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSRPCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSRPCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为约40ng模板DNA,1.2UTaq酶,... 详细信息

以百山祖冷杉DNA为材料,分析了DNA浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度、Taq酶的含量以及退火温度对ISSRPCR扩增结果的影响,经过优化实验建立了百山祖冷杉ISSRPCR最佳反应体系.25μL的PCR反应液含有的组分和终浓度分别为约40ng模板DNA,1.2UTaq酶,0.4μmol/L引物,1.5mmol/LMgCl2,0.2mmol/LdNTPs,2%去离子甲酰胺.利用优化反应体系从100个ISSR引物中,筛选出了13个稳定性高、重复性好的引物,对40个百山祖冷杉个体材料的DNA进行正式扩增,共扩增得到91条带,其中39条为多态性条带,多态位点百分率(PPB)为42.86%.百山祖冷杉的3个群体遗传多样性比较分析表明,人工辅助授粉产生的实生苗群体(PPB=37.36%)遗传多样性明显高于老树群体(PPB=16.48%)和嫁接苗群体(PPB=20.88%),这说明了人工辅助授粉繁育措施能有效提高百山祖冷杉的遗传变异水平.

关键词： ISSR 优化遗传变异百山祖冷杉

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百山祖冷杉叶片转录组分析

江西农业大学学报 2021年第2期43卷 343-354页

作者：王光炯柳新红许大明吴义松李因刚于明坚张丽芳浙江省林业科学研究院浙江杭州310023 浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300 浙江凤阳山百山祖国家级自然保护区管理局百山祖管理处浙江庆元323800 浙江大学生命与科学学院浙江杭州310058

【目的】百山祖冷杉(Abies beshanzuensis)是我国大陆东南部唯一的一种冷杉属植物,自然分布于浙江省西南部庆元县境内海拔1750 m左右的狭小避风谷地,现仅存3株,为中国的特有植物。百山祖冷杉是国家一级重点保护野生植物,被认为是第四纪... 详细信息

【目的】百山祖冷杉(Abies beshanzuensis)是我国大陆东南部唯一的一种冷杉属植物,自然分布于浙江省西南部庆元县境内海拔1750 m左右的狭小避风谷地,现仅存3株,为中国的特有植物。百山祖冷杉是国家一级重点保护野生植物,被认为是第四纪冰川期冷杉从高纬度的北方向南方迁移的结果,对研究植物区系演变和气候变迁等具有重要科学价值。在百山祖冷杉发现近60年来,针对其所在植物群落的基本特征、生境特征对植物的影响、物种之间的竞争,人工繁殖(扦插、育苗、子代鉴定)、物种鉴定、生境特征对植物的影响、育苗和保护以及植物生长与环境的关系等诸多方面开展了大量的研究,但对百山祖冷杉环境胁迫方面的研究鲜有报道。为了深入了解百山祖冷杉基因信息及功能,逆境胁迫相关通路及关键代谢物,开发微卫星分子标记,采用新一代高通量测序技术平台Illumina Hiseq 2000对百山祖冷杉转录组信息进行分析。【方法】转录组是特定细胞或组织在特定时间或状态下转录出来的所有RNA的集合。通过对转录组的研究可以揭示生物体的基因表达、研究结构变异及发现新基因等。转录组分析的研究方法、研究平台发生着日新月异的变化,同时生物信息学分析的内容也在逐渐完善。RNA-Seq作为一种新的转录组研究手段,利用新一代测序技术能够更为快速、准确地为人们提供更多的生物体转录信息。通过高通量测序平台Illumina Hiseq对百山祖冷杉进行转录组测序,利用Trinity软件对所得到的数据组装形成转录本、对所有转录本进行功能注释,并对SSR位点进行开发。【结果】经测序和分析,共获得7.02 Gb Clean Data,组装得到73103条转录本序列和41228条Unigene。将所得的数据与7大公共数据库进行比对,有27738条Unigene获得注释,占所有Unigene的67.28%。其中注释到Nr数据库的数量最多为27418,在GO数据库得到注释的Unigene有16020条,在KEGG数据库中涉及126条代谢途径。此外通过SSR分析,共得到1794个SSR位点,获得100条SSR引物。【结论】这些转录组测序数据分析扩充了百山祖冷杉的基因资源,将为其遗传背景、基因功能提供基础数据,有助于百山祖冷杉基因的发掘与利用、高效分子遗传标记开发、百山祖冷杉遗传多样性研究及其母树与子代亲缘关系分析,为百山祖冷杉的就地保护和迁地保护措施提供参考依据。这些潜在的多态性SSR的开发为百山祖冷杉遗传多样性分析、图谱构建提供了丰富的候选分子标记。研究进一步完善了百山祖冷杉的基因信息,为百山祖冷杉逆境胁迫研究提供依据。

关键词：百山祖冷杉高通量测序转录组基因注释

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百山祖冷杉插穗生根促进和不定根形成

东北林业大学学报 2006年第5期34卷 47-48页

作者：邵顺流钱华金贞福王彪刘本同柏明娥陈小荣浙江省林业科学研究院杭州310023 日本东京大学浙江省庆元县林业局浙江百山祖自然保护区

研究了百山祖冷杉硬枝插穗生根技术和不定根形成的规律。结果表明:RTN生根促进剂和奈乙酸是促进生根效果最好的两种激素。选取质量分数为0.02%的RTN生根促进剂和奈乙酸对带顶芽和无顶芽插穗处理1.5h,平均生根率分别高达79.2%和70.8%。... 详细信息

研究了百山祖冷杉硬枝插穗生根技术和不定根形成的规律。结果表明:RTN生根促进剂和奈乙酸是促进生根效果最好的两种激素。选取质量分数为0.02%的RTN生根促进剂和奈乙酸对带顶芽和无顶芽插穗处理1.5h,平均生根率分别高达79.2%和70.8%。插穗长度和顶芽有无是影响百山祖冷杉插穗生根率十分重要的内部因素。5cm长插穗虽然生根率显著偏低,但从节约插穗资源的角度考虑,却是一种理想长度。插穗基部解剖观察证实百山祖冷杉没有潜伏根原始体。诱导根原始体和不定根的形成集中在6月下旬至7月。

关键词：百山祖冷杉插穗生根率不定根

百山祖冷杉SSR体系的建立及人工辅助授粉子代的初步鉴定

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浙江农林大学学报 2011年第2期28卷 234-240页

作者：林二培马海泉樊民亮骆文坚黄华宏童再康浙江农林大学亚热带森林培育国家重点实验室培育基地浙江临安311300 浙江省庆元县林业局浙江庆元323800 浙江省林业种苗管理总站浙江杭州310020

应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA,建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析。结果表明:在20.00μL反应体系中,... 详细信息

应用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法提取百山祖冷杉Abies beshanzuensis叶片DNA,建立百山祖冷杉简单重复序列(SSR)反应体系。在体系建立过程中,采用单因素法分别对影响聚合酶链反应(PCR)的因素进行分析。结果表明:在20.00μL反应体系中,模板DNA用量、镁离子(Mg2+)浓度、三磷酸鸟嘌呤脱氧核苷酸(dNTPs)浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量分别是60 ng,3.75 mmol·L-1,0.15 mmol·L-1,0.40μmol·L-1,16.67 nkat(1.0 U)时结果最好。随机挑取其中1对引物扩增的多态性片段进行克隆测序,序列经比对后得到的一致性值达到94%,表明其他杉科植物的SSR引物可以在百山祖冷杉中应用。通过引物筛选,得到15对引物可在百山祖冷杉中扩增得到多态性条带,其中4对引物扩增得到的部分片段在百山祖冷杉和日本冷杉Abies firma间有明显区别。这些结果表明,利用SSR分子标记技术能够用于百山祖冷杉人工辅助授粉子代的初步鉴定。

关键词：林木育种学 SSR标记反应体系百山祖冷杉

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百山祖冷杉枝叶主要营养元素特征分析

浙江林业科技 2010年第3期30卷 1-5页

作者：刘亚群骆文坚张飞英张东北韩素芳樊民亮陈小荣汪和木陈必新邵顺流夏龙娟浙江省林业科学研究院浙江省森林资源生物与化学利用重点实验室浙江杭州310023 浙江省林业种苗管理总站浙江杭州310020 浙江省庆元县实验林场浙江庆元323800 浙江百山祖自然保护区浙江庆元323800 浙江省庆元县林权管理中心浙江庆元323800

应用原子吸收光谱法测定了百山祖冷杉枝和针叶中K、Na、Cu、Ca、Zn、Fe、Mg、Mn 8种营养元素的含量,结果表明,百山祖冷杉枝和针叶中均含有所测的K、Cu、Ca、Zn、Fe、Mg、Mn等元素,但未检出Na元素;其含量为Ca〉K〉Mg〉Zn〉Fe〉Mn〉Cu〉N... 详细信息

应用原子吸收光谱法测定了百山祖冷杉枝和针叶中K、Na、Cu、Ca、Zn、Fe、Mg、Mn 8种营养元素的含量,结果表明,百山祖冷杉枝和针叶中均含有所测的K、Cu、Ca、Zn、Fe、Mg、Mn等元素,但未检出Na元素;其含量为Ca〉K〉Mg〉Zn〉Fe〉Mn〉Cu〉Na。与大多数植物体正常生长发育的元素含量范围值相比较,百山祖冷杉枝和针叶中K含量分别为2 967.68~5 585.95、4 036.13~5 194.30 mg/kg,均低于临界值,针叶中Cu含量2.58~4.70 mg/kg,略低于一般植物水平,枝部Zn、Mn含量及针叶Mn含量则均处于较高水平。

关键词：百山祖冷杉营养元素含量

百山祖冷杉枝叶营养元素含量与适生立地土壤养分关系分析

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浙江林业科技 2012年第2期32卷 1-5页

作者：刘亚群韩素芳张飞英夏龙娟张东北樊民亮汪和木邵顺流浙江省林业科学研究院浙江省森林资源生物与化学利用重点实验室浙江杭州310023 浙江省庆元县试验林场浙江庆元323800 浙江省林业种苗管理总站浙江杭州310020

研究了百山祖冷杉（Abies beshanzuensis）分布区适生立地表层土壤养分及其与百山祖冷杉枝叶营养元素含量的相关性。结果表明，土壤pH5．11～6．42，土壤有机质含量、全氮含量、速效磷含量、速效钾含量分别为119．0750g／kg、2．1962g... 详细信息

研究了百山祖冷杉（Abies beshanzuensis）分布区适生立地表层土壤养分及其与百山祖冷杉枝叶营养元素含量的相关性。结果表明，土壤pH5．11～6．42，土壤有机质含量、全氮含量、速效磷含量、速效钾含量分别为119．0750g／kg、2．1962g／kg、15．0163mg，kg、136．2152mg／kg；百山祖冷杉对土壤N、P、K富集能力均较高，而对微量元素富集能力较弱，且枝部和针叶均未检出Na元素；较高的土壤N含量，可相应显著提高百山祖冷杉叶N、K含量水平，较高的土壤P含量，则显著抑制百山祖冷杉叶对K和枝对N的积累水平，较高的土壤Cu含量显著降低了Cu元素在叶器官中的积累，而显著增加了枝条中Cu和Zn的积累水平，较高的土壤Fe含量则显著促进了针叶中Fe元素和枝中Fe、Mn元素的积累水平。

关键词：百山祖冷杉土壤营养元素相关关系

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百山祖冷杉种子的人工育苗试验

安徽农业科学 2010年第22期38卷 12038-12039,12098页

作者：吴友贵饶龙兵陈德良周荣飞叶珍林浙江百山祖国家级自然保护区管理处浙江庆元323800 中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江富阳311400

[目的]掌握百山祖冷杉种子繁育技术。[方法]分别以2006的2008年采收的百山祖冷杉种子为材料,于2007和2009年采用不同方法进行育苗试验,研究了百山祖冷杉的种子繁育技术。[结果]出苗时间为4月初至4月下旬。苗床覆盖狼衣处理出苗最早,搭... 详细信息

[目的]掌握百山祖冷杉种子繁育技术。[方法]分别以2006的2008年采收的百山祖冷杉种子为材料,于2007和2009年采用不同方法进行育苗试验,研究了百山祖冷杉的种子繁育技术。[结果]出苗时间为4月初至4月下旬。苗床覆盖狼衣处理出苗最早,搭低棚和撒播在嫁接树下次之,苗床裸露和模拟原生树生境最迟。2007年嫁接树底下的种子发芽率高于苗圃地。2009年的种子发芽率依次为:人工苗圃地直接狼衣覆盖>人工苗圃无遮阴>原始林下去除枯枝落叶>原始林下自然生长。遮阴、裸露、嫁接树底下、模拟原生树生境去除枯枝落叶的当年苗高无差异。苗床遮阴的当年保存率较高,嫁接树底下次之,苗床裸露和模拟原生树生境去除枯枝落叶的最低。[结论]该研究为百山祖冷杉的扩大繁殖提供了技术支持。

关键词：百山祖冷杉种子育苗

百山祖冷杉苗木对不同海拔高度和高温胁迫的生理响应及转录组分析

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百山祖冷杉苗木对不同海拔高度和高温胁迫的生理响应及转录组分析

作者：庞振浙江理工大学

学位级别：硕士

百山祖冷杉(Abies beshanzuensis ***)属于松科冷杉属物种,野外仅剩3株野生成年植株,被列为极度濒危的12个物种之一。虽然先前保护区的工作人员已尝试将其进行近地和迁地保护,但苗木生长状况普遍较差,存活率低。此外,随着全球变暖加剧,... 详细信息

百山祖冷杉(Abies beshanzuensis ***)属于松科冷杉属物种,野外仅剩3株野生成年植株,被列为极度濒危的12个物种之一。虽然先前保护区的工作人员已尝试将其进行近地和迁地保护,但苗木生长状况普遍较差,存活率低。此外,随着全球变暖加剧,频繁和极端的高温天气将对百山祖冷杉的生存产生巨大威胁,且将其迁往低海拔进行近地和迁地保护时也将面临低海拔带来的高温胁迫。因此,亟需对百山祖冷杉苗木响应海拔和高温的生理及分子机制进行研究,从而为其应对气候变化和往低海拔进行近地及迁地保护提供理论依据。本研究通过对不同海拔高度和不同程度高温胁迫下百山祖冷杉苗木叶片的各项生理指标的测定及转录组测序,分析其响应海拔梯度和高温胁迫的生理及分子机制。主要研究结果如下:1、移植于海拔1550 m、1300 m和1000 m处的百山祖冷杉苗木叶片形态无显著差异;移植于海拔750m处的百山祖冷杉苗木叶片轻微发黄;移植于海拔450 m处的百山祖冷杉苗木叶片大部分叶片呈黄褐色,出现灼烧现象。百山祖冷杉苗木叶片的Yield、ETR、q P、和Fv/Fm值均随着海拔高度的下降而降低;NPQ值在海拔700 m～1550 m内随着海拔的降低而升高,但是在海拔450 m处最低。叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素含量和叶绿素a/b值随着海拔的下降而显著降低。脯氨酸、可溶性糖和可溶性蛋白含量随着海拔的降低显著升高。丙二醛含量在海拔700m～1550 m内随着海拔的降低而显著升高,但是在海拔450 m处最低。超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶活性随着海拔的降低先升高后下降,三种酶的活性均在海拔1000 m处最高。因此,海拔降低不利于百山祖冷杉苗木的生长,1000m的海拔高度可能是百山祖冷杉苗木能够生存的海拔下限。2、轻度高温胁迫(30℃/25℃)对百山祖冷杉苗木叶片形态、叶绿素荧光参数和叶绿素含量无显著影响。在中度高温胁迫(35℃/30℃)和重度高温胁迫(40℃/35℃)下,百山祖冷杉苗木叶片分别在第9天和第3天出现损伤现象,重度高温胁迫(40℃/35℃)第12天时,几乎所有叶片全部变为黄褐色。在中度高温胁迫(35℃/30℃)和重度高温胁迫(40℃/35℃)下,百山祖冷杉苗木叶片的Yield、ETR、q P、Fv/Fm值和叶绿素含量随胁迫时间的延长显著下降;NPQ值在中度高温胁迫(35℃/30℃)下随着胁迫时间的延长显著增加,在重度高温胁迫(40℃/35℃)下则显著降低。轻度高温胁迫(30℃/25℃)对百山祖冷杉苗木叶片的丙二醛含量无明显影响,中度高温胁迫(35℃/30℃)下,丙二醛含量随着胁迫时间的延长显著增加;重度高温胁迫(40℃/35℃)下,丙二醛含量随着胁迫时间的延长先上升后下降,在第6天时达到最大值。轻度高温胁迫(30℃/25℃)和中度高温胁迫(35℃/30℃)下,随着胁迫时间的延长,百山祖冷杉苗木叶片中的渗透调节物质含量和抗氧化酶活性显著增加。在重度高温胁迫(40℃/35℃)下,随着胁迫时间的延长,百山祖冷杉苗木叶片中的脯氨酸含量显著增加,可溶性糖和可溶性蛋白含量先升高后降低且均在第9天达到最大值;超氧化物歧化酶和过氧化物酶活性先升高后降低,过氧化氢酶活性先降低后升高然后再降低,三种酶的活性均在第6天达到最大值。因此,百山祖冷杉苗木对短期30℃的高温具有耐受性,不耐35℃的高温,40℃高温在极短时间内就会对其造成不可逆损伤。3、对移植至不同海拔高度的百山祖冷杉苗木叶片进行无参转录组测序,共获得41260条Unigene。Unigene的蛋白质数据库注释结果显示,NR数据库注释到的Unigene最多(24029条),KEGG数据库注释到的Unigene最少(16436条)。将不同海拔处理组之间进行两两比较,在450 m vs 1000 m、450 m vs 1550 m和1000m vs 1550 m三个比较组中分别鉴定出3819、5207和1010个差异表达基因(DEGs)。DEGs的KEGG代谢途径分析结果表明,植物-病原菌相互作用、内质网中的蛋白质加工、植物激素信号转导和MAPK信号通路-植物等在百山祖冷杉苗木响应低海拔胁迫时发挥主要作用,而移栽至中海拔的百山祖冷杉苗木则能够通过能量代谢以及次生产物的产生和积累来响应环境的改变。此外,在三个比较组中鉴别出的与光合作用有关的DEGs的表达被抑制;编码热激蛋白的DEGs则几乎全部上调,且超过一半属于HSP20家族(s HSPs),表明s HSPs在百山祖冷杉苗木应对低海拔环境胁迫中发挥更重要的作用。此外,NOG注释结果表明,编码热激蛋白的DEGs大多是受热诱导产生的,推测高温是海拔降低所造成的环境胁迫中最主要的因素。4、对不同温度处理下的百山祖冷杉苗木叶片进行无参转录组测序,共获得45758条Unigen

关键词：百山祖冷杉海拔高温胁迫生理指标转录组