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白桦脂酸抑制食管鳞状细胞癌增殖及相关机制的实验研究

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中国药学杂志 2012年第9期47卷 684-688页

作者：李晓颖高献书北京大学第一医院肿瘤放射治疗科北京100034

目的研究抗肿瘤药物白桦脂酸(BA)对人食管鳞癌KYSE170细胞的抑制作用及抗肿瘤作用机制。方法采用不同质量浓度(0、5、10、20、40、60、80、100μg.mL-1)白桦脂酸处理KYSE170细胞,作用不同时间(24、48、72 h)后,噻唑蓝(MTT)法检测KYSE17... 详细信息

目的研究抗肿瘤药物白桦脂酸(BA)对人食管鳞癌KYSE170细胞的抑制作用及抗肿瘤作用机制。方法采用不同质量浓度(0、5、10、20、40、60、80、100μg.mL-1)白桦脂酸处理KYSE170细胞,作用不同时间(24、48、72 h)后,噻唑蓝(MTT)法检测KYSE170细胞生长的短期抑制作用;不同质量浓度(0、5、20、40μg.mL-1)白桦脂酸作用于细胞24 h后以克隆形成实验检测药物对细胞生长的长期抑制作用;不同质量浓度白桦脂酸(10、60、100μg.mL-1)作用KYSE170细胞24、48 h后以流式细胞仪FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡变化,不同质量浓度白桦脂酸(0、10、40μg.mL-1)作用细胞24 h后以流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果噻唑蓝实验显示,不同质量浓度白桦脂酸对KYSE170细胞均有抑制作用,抑制效果呈时间和剂量依赖性,24、48、72 h的IC50分别为(56.81±2.56)、(39.73±2.77)和(29.28±3.05)μg.mL-1;克隆形成结果显示,0、5、20、40μg.mL-1药物作用细胞后,克隆形成率分别为(89.56+5.00)%、(61.00+2.03)%、(31.33+3.51)%和(15.33+2.33)%,随白桦脂酸质量浓度增大而明显降低(P白桦脂酸质量浓度加大和药物作用时间的延长明显增高(P白桦脂酸作用细胞24 h后,随药物质量浓度增大,G1期细胞比例减少,S期细胞比例不断增加,实验组与空白组对比均有统计学差异(P白桦脂酸能抑制人食管鳞癌KYSE170细胞的生长,这一作用可能是通过诱导细胞凋亡、阻滞细胞停留在S期来实现的。

关键词：白桦脂酸食管鳞癌KYSE170细胞细胞凋亡细胞周期

同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的研究

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天津药学 2024年第1期36卷 5-10页

作者：张琛武成洁郭宝林张浩山西药科职业学院山西030031 中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所北京100193 黄冈金贵中药产业发展有限公司湖北438000

目的:简化样品处理及检测条件,建立同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的方法。方法:采用《中国药典》方法、直接加热回流法、超声浓缩法和超声离心法提取酸枣仁中的活性成分,通过同一梯度洗脱程序,利用HPLC-DAD液相检测204 nm和335 n... 详细信息

目的:简化样品处理及检测条件,建立同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量的方法。方法:采用《中国药典》方法、直接加热回流法、超声浓缩法和超声离心法提取酸枣仁中的活性成分,通过同一梯度洗脱程序,利用HPLC-DAD液相检测204 nm和335 nm下5种成分(包括斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B和白桦脂酸)的峰面积,并进行方法学考查以及对9批酸枣仁药材的含量测定。结果:通过比较,超声离心法提取效率最高,速度最快,其结合HPLC-DAD液相检测法的方法学验证结果也符合试验要求,对9批酸枣仁药材进行含量测定,其中有7批符合《中国药典》标准。结论:本文建立的超声离心提取结合HPLC-DAD液相检测法,可以同时快速测定酸枣仁中5种活性成分含量,准确高效,切实可行。

关键词：超声离心法酸枣仁斯皮诺素 6′′′-阿魏酰斯皮诺素酸枣仁皂苷A 酸枣仁皂苷B 白桦脂酸

白桦脂酸通过抗氧化应激作用抑制脂多糖诱导的血管收缩功能损伤

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中国生物化学与分子生物学报 2018年第4期34卷 455-460页

作者：周心如白瑶瑶周慧颖严栋李炜鑫钱令波杭州医学院基础医学与法医学院杭州310053

白桦脂酸(betulinic acid,BA)有良好的抗心血管氧化应激损伤作用。然而,BA对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管收缩功能损伤是否具有保护作用,该保护作用是否与抗氧化应激有关,尚不清楚。本研究给予雄性SD大鼠白桦脂酸灌胃(25 mg/... 详细信息

白桦脂酸(betulinic acid,BA)有良好的抗心血管氧化应激损伤作用。然而,BA对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导血管收缩功能损伤是否具有保护作用,该保护作用是否与抗氧化应激有关,尚不清楚。本研究给予雄性SD大鼠白桦脂酸灌胃(25 mg/kg/d,3 d)预处理,于第4 d腹腔注射LPS(10 mg/kg),4 h后麻醉处死,分离血浆及胸主动脉,测定大鼠胸主动脉环收缩性,测定炎症因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及氧化应激指标。结果显示,白桦脂酸明显抑制LPS诱导的血浆及胸主动脉IL-6水平(P白桦脂酸抑制LPS诱导血管收缩功能障碍的机制可能与增加机体SOD活性,抑制氧化应激及i NOS活性有关。

关键词：白桦脂酸脂多糖血管收缩氧化应激

白桦脂酸对人Raji淋巴瘤细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

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中草药 2008年第4期39卷 556-559页

作者：陈子吴秋玲陈燕何静华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所湖北武汉430022

目的研究D类细胞周期蛋白(cyclin D3)在Burkitt淋巴瘤细胞Raji中的表达及白桦脂酸对其的影响。方法MTT法检测细胞增殖活性,Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,RT-PCR法分析白桦脂酸作用于Raji细胞后cyclin D3 ... 详细信息

目的研究D类细胞周期蛋白(cyclin D3)在Burkitt淋巴瘤细胞Raji中的表达及白桦脂酸对其的影响。方法MTT法检测细胞增殖活性,Annexin-V/PI双标法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期分布,RT-PCR法分析白桦脂酸作用于Raji细胞后cyclin D3 mRNA表达的变化,Western blotting法检测细胞内cyclin D3的蛋白表达。结果白桦脂酸对Raji细胞有明显的增殖抑制作用。Annxin-V/PI双标法显示,白桦脂酸诱导细胞凋亡呈剂量依赖性。随着白桦脂酸剂量的加大,凋亡率增高。白桦脂酸作用Raji细胞后主要使细胞周期阻滞于G_0/G_1期,G_0/G_1期细胞比例随白桦脂酸剂量增大而逐渐增高。而S期细胞比例随白桦脂酸剂量增大而逐渐降低。对G_2/M期细胞作用不明显。RT-PCR结果显示白桦脂酸作用于Raji细胞使cyclin D3 mRNA表达减少,并与其剂量呈正相关。Western blotting结果显示白桦脂酸使cyclin D3蛋白表达降低.呈剂量依赖性。结论白桦脂酸抑制Raji细胞增殖并诱导细胞凋亡。可使细胞阻滞于G_0/G_1期,其可通过下调cyclin D3表达而发挥抗肿瘤作用。

关键词：白桦脂酸 Raji细胞细胞凋亡 cyclin D3

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白桦脂酸纳米乳的制备及体外透皮实验研究

中成药 2013年第12期35卷 2638-2643页

作者：邓瑾程凤仪章航宇中国药科大学药学院江苏南京210009

目的优选并制备白桦脂酸纳米乳并考察其理化性质及经皮给药的渗透特性。方法通过白桦脂酸在各种载体中的溶解度试验及伪三元相图的构建筛选纳米乳处方并制备白桦脂酸纳米乳,考察其外观形态、Zeta电位、粒径大小、分布及稳定性。通过透... 详细信息

目的优选并制备白桦脂酸纳米乳并考察其理化性质及经皮给药的渗透特性。方法通过白桦脂酸在各种载体中的溶解度试验及伪三元相图的构建筛选纳米乳处方并制备白桦脂酸纳米乳,考察其外观形态、Zeta电位、粒径大小、分布及稳定性。通过透皮扩散仪考察白桦脂酸纳米乳的体外透皮过程。结果优选的纳米乳处方为Labral M1944 CS∶Cremophor RH 40∶Transcutol HP∶水为20.4%∶22.95%∶7.65%∶49%(w/w),制得的白桦脂酸纳米乳载药量为23.65 mg/mL,平均粒径为33.57 nm,多分散指数(PDI)为0.137,Zeta电位为-15.36 mV。高效液相色谱法测得白桦脂酸纳米乳12 h的累积渗透量为516.61μg/cm2,皮肤滞留量为956.58μg,分别是10%白桦脂酸异丙醇水溶液的3.27及5.05倍。结论白桦脂酸纳米乳稳定性好,可显著促进白桦脂酸的透皮吸收,增加皮肤的滞留量。

关键词：白桦脂酸纳米乳经皮给药黑色素瘤

白桦脂酸在Caco-2细胞中的摄取及转运机制研究

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中药药理与临床 2020年第6期36卷 76-79页

作者：王美慧陈旺帅丽霞詹雁谭镭阮佳邓黎徐超群成都中医药大学成都611137 四川省中医药科学院成都610041 四川大学成都610041

目的:研究白桦脂酸在人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中的摄取与转运机制。方法:建立Caco-2细胞模型并进行验证,液相色谱-质谱联用(LC-MS)测定样品中白桦脂酸含量,同时考察白桦脂酸浓度和转运体抑制剂维拉帕米、丙磺舒对其在Caco-2细胞中... 详细信息

目的:研究白桦脂酸在人结直肠腺癌细胞(Caco-2细胞)中的摄取与转运机制。方法:建立Caco-2细胞模型并进行验证,液相色谱-质谱联用(LC-MS)测定样品中白桦脂酸含量,同时考察白桦脂酸浓度和转运体抑制剂维拉帕米、丙磺舒对其在Caco-2细胞中的摄取及转运的影响。结果:Caco-2细胞模型建立成功,LC-MS可以准确测定样品中白桦脂酸含量,白桦脂酸250、175、100μg/mL组转运实验表观渗透系数Papp(AP→BL)分别为1.40×10^(-7)、1.38×10^(-7)、1.31×10^(-7)cm/s(P>0.05),外排率(ER)均小于1.5;摄取实验单位质量蛋白药物摄取量分别为0.857、0.781、0.661μg/mg(P白桦脂酸跨膜渗透性差,摄取转运机制主要为被动扩散,无明显外排现象,转运体抑制剂维拉帕米、丙磺舒对其摄取转运无明显影响。

关键词： Caco-2细胞白桦脂酸药物摄取表观渗透系数

白桦脂酸对人NK细胞杀伤SW1990胰腺癌细胞影响及机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2015年第1期22卷 34-38页

作者：姚义荣王营刘军权陈复兴周忠海徐州医学院附属医院消化内科江苏徐州221002 中国人民解放军第九七医院中心实验室江苏徐州221004

目的观察中药白桦脂酸对人NK细胞杀伤SW1990胰腺癌细胞的影响,并初步探讨可能机制。方法分离健康人外周血单个核细胞,细胞因子诱导培养NK细胞达实验要求;不同浓度(0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.25、12.5、25、50和100... 详细信息

目的观察中药白桦脂酸对人NK细胞杀伤SW1990胰腺癌细胞的影响,并初步探讨可能机制。方法分离健康人外周血单个核细胞,细胞因子诱导培养NK细胞达实验要求;不同浓度(0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.25、12.5、25、50和100μg/mL)的白桦脂酸分别诱导NK细胞、SW1990胰腺癌细胞48h后,CCK8法检测白桦脂酸对NK细胞增殖的影响;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测白桦脂酸对SW1990胰腺癌细胞株增殖的影响;流式细胞术(flow cymetory,FCM)检测白桦脂酸作用48h后NK细胞颗粒酶B、穿孔素、IFN-γ和CD107a的表达;乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法检测白桦脂酸对NK细胞杀伤SW1990胰腺癌细胞的影响;蛋白质印迹法检测白桦脂酸对NK细胞表达磷酸化的ERK1/2(phosphorylation-ERK1/2,p-ERK1/2)的影响。结果培养10d的NK细胞比例达74.43%。与对照组比较,白桦脂酸在其浓度为0.4、0.8、1.6、3.2、6.25、12.5和25μg/mL时显著促进NK细胞增殖,F=129.476,P白桦脂酸作用NK细胞48h后,与对照组比较均能促进NK细胞对SW1990胰腺癌细胞的杀伤,F=36.451,P白桦脂酸在浓度为0.2和0.8μg/mL时不同程度促进NK细胞颗粒酶B、穿孔素、IFN-γ和CD107a的表达,P白桦脂酸可促进NK细胞表达p-ERK1/2,F=83.708,P白桦脂酸在一定的浓度范围内能够增强NK细胞对SW1990胰腺癌细胞的杀伤作用,其作用机制可能通过促进NK细胞增殖,抑制胰腺癌细胞增殖,激活NK细胞内ERK信号通路,提高NK细胞颗粒酶B、穿孔素、IFN-γ和CD107a的表达。

关键词：胰腺肿瘤白桦脂酸 SW1990胰腺癌细胞 NK细胞杀伤活性流式细胞术

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白桦脂酸体外抗肿瘤的活性和机制

吉林大学学报（理学版） 2009年第3期47卷 622-627页

作者：王开祥张慧郑克岩田家川由宇润孙可费晓方吉林大学生命科学学院长春130021 辽宁中医药大学药学院辽宁大连116600 吉林大学化学学院长春130021 国家新药沈阳安全评价研究中心沈阳110021

研究白桦脂醇(Betulin)和白桦脂酸(Betulinic Acid,BA)对3种癌细胞株的增殖抑制作用以及白桦脂酸诱导MCF-7细胞毒的分子机制.应用结晶紫染色方法对白桦脂醇和白桦脂酸对肿瘤细胞的生长抑制作用进行筛选;应用RT-PCR技术检测MCF-7细胞p21 ... 详细信息

研究白桦脂醇(Betulin)和白桦脂酸(Betulinic Acid,BA)对3种癌细胞株的增殖抑制作用以及白桦脂酸诱导MCF-7细胞毒的分子机制.应用结晶紫染色方法对白桦脂醇和白桦脂酸对肿瘤细胞的生长抑制作用进行筛选;应用RT-PCR技术检测MCF-7细胞p21 mRNA,p53 mRNA,Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表达.结果表明,白桦脂醇和白桦脂酸有显著抑制肿瘤细胞生长的作用,且有浓度依赖性;白桦脂酸能够诱导MCF-7细胞凋亡,并诱导其p21 mRNA和p53 mRNA表达增高,但对其Bcl-2 mRNA和Bax mRNA的表达无影响.

关键词：白桦脂醇白桦脂酸细胞周期凋亡

白桦脂酸诱导乳腺癌细胞MCF-7凋亡的机制研究

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中药药理与临床 2015年第6期31卷 39-43页

作者：时文波甘为黄雪莲山东电力中心医院济南250000

目的:本试验旨在研究白桦脂酸诱导乳腺癌细胞凋亡的机制。方法:采用细胞凋亡、线粒体膜电位和Caspsase 3活性检测的方法。结果:12 h与6 h白桦脂酸从40μmol/L(0.36±0.03,0.65±0.04)开始可显著降低乳腺癌细胞MCF-7存活率;白桦脂酸使细... 详细信息

目的:本试验旨在研究白桦脂酸诱导乳腺癌细胞凋亡的机制。方法:采用细胞凋亡、线粒体膜电位和Caspsase 3活性检测的方法。结果:12 h与6 h白桦脂酸从40μmol/L(0.36±0.03,0.65±0.04)开始可显著降低乳腺癌细胞MCF-7存活率;白桦脂酸使细胞凋亡率(20μmol/L:0.29±0.09,40μmol/L:0.58±0.10,60μmol/L:0.78±0.13)明显高于其空白对照组(0.03±0.01)。白桦脂酸组细胞线粒体膜电位(20μmol/L:40.59±5.49,40μmol/L:10.90±2.59,60μmol/L:1.49±0.10)明显低于其空白对照组(80.34±3.45)。在白桦脂酸40μmol/L和60μmol/L作用下,乳腺癌细胞核均发生了变化,发生明显的聚缩。白桦脂酸各组Caspase 3活性(20μmol/L:0.34±0.11,40μmol/L:0.63±0.17,60μmol/L:0.70±0.07)明显高于其空白对照组(0.17±0.03)。结论:白桦脂酸可诱导乳腺癌细胞凋亡,降低线粒体膜电位,激活调节下游凋亡相关蛋白caspase-3的活性。

关键词：白桦脂酸乳腺癌细胞凋亡