检索结果-南通市图书馆

植物生理学报 2023年第11期59卷 2027-2038页

作者：吉军张玉琎肖鑫高燕燕王利琴张静怡张明生贵州大学生命科学学院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室贵阳550025 贵州医科大学药学院贵阳550025

本研究探究了真菌白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养萌发中漆酶在杜鹃兰种皮木质素降解过程中的作用。实验基于白假鬼伞转录组数据,采用生物信息学方法,从白假鬼伞中共鉴定出13个CdLac基因(CdLac1~13)。上述基因编码蛋白质分子质量为46.97~66.... 详细信息

本研究探究了真菌白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养萌发中漆酶在杜鹃兰种皮木质素降解过程中的作用。实验基于白假鬼伞转录组数据,采用生物信息学方法,从白假鬼伞中共鉴定出13个CdLac基因(CdLac1~13)。上述基因编码蛋白质分子质量为46.97~66.25 kDa,均具有真菌漆酶铜离子结合区域的特征序列及4个能够结合催化底物的环形结构,且大多数具有信号肽序列,属于分泌型的胞外蛋白。系统发育分析表明,该基因家族与灰盖鬼伞的同源性较高。与对照相比,白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养6 d后,有7个CdLac基因表达明显上调;共培养12 d后,该真菌中胞外漆酶活性最高。提示白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养互作过程中,白假鬼伞分泌的漆酶对杜鹃兰种皮木质素降解可能发挥了重要作用。

关键词：漆酶 CdLac基因家族白假鬼伞杜鹃兰种子木质素降解

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

贵州毕节地区大型真菌遗传亲缘关系分析及白假鬼伞生物学特性研究

贵州毕节地区大型真菌遗传亲缘关系分析及白假鬼伞生物学特性研究

引用

作者：杨雨贵州大学

学位级别：硕士

大型真菌(fungi)是存在于自然界中、具有大型子实体的一类真菌,而毕节市位于贵州省西北部,因其地势差异显著和气候多样而适于大型真菌的生长,但是关于毕节地区大型真菌的系统调查和资源利用的报告较少。因此,本文通过随机采样法对贵州... 详细信息

大型真菌(fungi)是存在于自然界中、具有大型子实体的一类真菌,而毕节市位于贵州省西北部,因其地势差异显著和气候多样而适于大型真菌的生长,但是关于毕节地区大型真菌的系统调查和资源利用的报告较少。因此,本文通过随机采样法对贵州省毕节部分地区大型真菌进行采样、调查,并基于形态学标记和分子标记技术对采集的菌株进行遗传多样性分析,最后对分布较广的菌株白假鬼伞(Coprinellus disseminatus)(有5个以上的地方都长有此菌)进行生物学特性研究,主要获得以下结果:1)大型真菌采集和分类以实地踏采法对贵州毕节部分地区大型真菌进行生境地调查、拍照和采样,共采集到大型真菌菌株102份,它们主要分布于6种林型内。分别参照《中国·贵州高等真菌原色图鉴》对采集的菌株进行形态鉴定、以ITS(或LSU)保守区序列进行分子鉴定,最终确定所采菌株隶属于2门3纲11目25科39属。其中,以裸脚伞属(Gymnopus)占比最多,约占总数的15.6%,红菇属(Russula)和乳菇属(Lactarius)次之,分别占总数的13.7%,而侧耳属(Pleurotus)、粉褶菌属(Entoloma)及锈革菌属(Hymenochaete)占比最低,为0.9%。2)基于ITS保守区构建系统进化树分析以ITS保守区构建系统进化树发现,菌株0914YY13、0527ZSF9、0527SNJ14和0527SNJ13分别与玫瑰红菇菌(Russula rosea)(MT555414.1)、灰红菇菌(***)(KX963793.1)、菱红菇菌(***)(MW722739.1)和赤黄红菇菌(***)(MK167417.1)的ITS序列同源性均为100%,故认为是同种菌,而菌株1019YY4和0917LB26分别与肺形侧耳菌(Pleurotus pulmonarius)(MN17941.1)和细环柄菇菌(Lepiota clypeolaria)(OL527693.1)的序列同源性为95%和98%,说明菌株1019YY4和0917LB26分别是肺形侧耳(***)和细环柄菇(***)的同属不同种菌株;其中菌株0527YY6与Coprinellus disseminatus(KC771477.1)菌株的ITS序列相似性高达99.53%,且基于ITS保守序列构建系统发育树发现菌株0527YY6与***(KY243924.1)的同源性为100%,则可推测该菌株为白假鬼伞。3)ISSR和RAPD分子标记研究对大型真菌亲缘进化关系从40条ISSR通用引物中筛选获得10条多态性较好、扩增结果稳定的引物。10条ISSR引物在72份大型真菌中共扩增出96个位点,其中多态位点为69个,平均每个引物扩增9.6个位点,平均多态性位点为6.9个;10条引物中有2条引物的多态性比例达到100%,10条引物的平均多态性比例高达71.8%,ISSR标记聚类结果表明菌株的总体相似性为75%,当遗传系数为0.79时,72份菌株被聚为四个类群,其中菌株0914ZSF13和0914WXH9的遗传相似系数最大为90%;从20条RAPD通用引物中筛选获得7条多态性较好、扩增结果稳定的引物。7条RAPD引物在72份大型真菌中共扩增出64个位点,其中多态位点为41个,平均每个引物扩增9.1个位点,平均多态性位点为5.9个;7条引物的平均多态性比例为65%,RAPD标记聚类结果显示菌株的总体相似性为62%,当遗传系数为0.65时,72份菌株被聚为三大类,其中菌株0917LB24与0917ZSF21以及菌株0917ZSF19与0919YY5的遗传相似系数最大为84%;在两种分子标记中,不同引物对同一菌株扩增的DNA遗传图谱存在一定的差异,其中菌株0527YY6(***)在10条ISSR引物中共扩增出84条条带,在7条RAPD引物中共扩增出53条条带,分别扩增出9个和7个位点,多态性条带在7～11之间;且当遗传系数分别为0.89和0.83时被聚为一类,说明菌株之间存在丰富的遗传多样性。4)白假鬼伞菌(***)生物学特性研究对毕节地区分布较广的白假鬼伞(***)进行其生物学特性研究,发现纯化后的白假鬼伞在不同培养基(无碳源培养基,葡萄糖碳源培养基,木聚糖碳源培养基)上菌丝体长势、颜色、疏密程度存在一定差异。生长在不含碳源的培养基上时菌丝总体较稀疏,菌丝从中心到边缘呈松散状态,颜色灰白色,且菌丝体边缘不平展,在以葡萄糖为碳源的培养基上培养时菌丝呈近圆形,中心致密,边缘松散近平展,菌丝呈白色,而以木聚糖为碳源的培养基上长势最好,菌丝洁白色且致密,呈规则圆形,边缘平整。进一步对

关键词：大型真菌分子生物学鉴定亲缘关系分析白假鬼伞生物学特性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

白假鬼伞降解杜鹃兰种皮木质纤维素的作用机理

白假鬼伞降解杜鹃兰种皮木质纤维素的作用机理

引用

作者：吉军贵州大学

学位级别：硕士

杜鹃兰(Cremastra appendiculata（***）Makino)为兰科杜鹃兰属多年生珍稀药用草本植物,其以干燥的假鳞茎入药。自然条件下,杜鹃兰种子萌发率极低,且萌发周期较长。基于前期本课题组筛选了一株促杜鹃兰种子萌发的真菌—白假鬼伞（Coprin... 详细信息

杜鹃兰(Cremastra appendiculata（***）Makino)为兰科杜鹃兰属多年生珍稀药用草本植物,其以干燥的假鳞茎入药。自然条件下,杜鹃兰种子萌发率极低,且萌发周期较长。基于前期本课题组筛选了一株促杜鹃兰种子萌发的真菌—白假鬼伞（Coprinellus disseminatus）,该菌能够很好的促进杜鹃兰种子萌发,且萌发率达到71%左右,其可能是种皮抑制了胚的发育,严重影响了种胚的透气性与营养物质的吸收。然而,白假鬼伞明显促进杜鹃兰种子萌发,可能是真菌可分泌相关木质纤维素降解酶系降解种皮木质纤维素,从而打破了种子萌发的物理屏障,同时增强杜鹃兰种子种胚的吸水及透气性,有利于种子吸收水分和营养物质。本研究为杜鹃兰与白假鬼伞共生过程中种胚的发育奠定基础。主要研究结果如下:（1）首先通过白假鬼伞进行发酵培养降解外源木质素的实验,验证了该白假鬼伞分泌相关酶能够降解外源木质素。测定共培养0 d、6 d、12 d的种子半纤维素、木质素含量,以0 d种子为对照,共培养6 d、12 d种子木质素与半纤维素含量都下降,共培养12 d时种子木质素含量减少更快,达到显著性差异。本研究对共培养0 d～15 d种子进行树脂切片,观察共培养12 d后种子种皮几乎消失不见,种胚细胞增殖变大,种子细胞有大量的菌丝侵入,共培养13 d以后种皮消失。通过对共培养不同时期的培养基胞外木质纤维素酶活的测定,发现漆酶、纤维素酶以及木聚糖酶活性在共培养12 d时较高。综上所述,共培养12 d是白假鬼伞对杜鹃兰种子种皮木质纤维素作用的最佳培养时间。（2）利用愈创木酚法和羧甲基纤维素钠法定性验证白假鬼伞漆酶与纤维素酶与木聚糖酶的能力,并以白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养12 d木质纤维素降解酶条件的优化。白假鬼伞可以使愈创木酚培养基变成红棕色,羧甲基纤维素钠培养基褪色,说明白假鬼伞具有产生漆酶与纤维素酶的能力。通过白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养12 d胞外培养基的酶活测定,先进行单因素产酶较适宜条件培养基筛选,最后进行营养因素的正交实验,筛选出产酶活的较适宜条件:20 g·L麦芽糖、2 g·L蛋白胨、1 g·LMg以及培养基p H=6,蒸馏水定容至1 L。（3）本研究根据上述正交实验优化出白假鬼伞产酶较适宜条件下,将白假鬼伞与杜鹃兰种子共培养12 d。基于白假鬼伞转录组数据,筛选白假鬼伞相关木质纤维素降解酶基因,对筛选出的真菌木质纤维素降解酶基因进行实时荧光定量PCR以及种子木质素、半纤维素含量的测定,探究白假鬼伞相关的木质纤维素酶基因对种皮木质纤维素降解的影响。结果表明:与对照组相比,有1个乙二醛氧化酶基因、2个纤维素酶基因、1个染料脱色氧化酶基因、1个过氧化氢酶基因、1个葡萄糖氧化酶基因以及5个漆酶基因表达上调。测定杜鹃兰种子木质素与半纤维素含量:木质素含量显著下降,与其相关的木质素降解酶基因表达明显上调,达到显著性差异,这与生理测定的结果相一致;木聚糖酶基因表达差异不显著,半纤维素含量也下降,统计学上未达到显著性差异,与生理测定的结果也相一致;2个纤维素酶基因表达上调。说明白假鬼伞在杜鹃兰种子共培养过程中可以分泌相关木质纤维素酶降解杜鹃兰种子种皮木质纤维素。

关键词：白假鬼伞杜鹃兰种子共培养木质纤维素降解酶木质纤维素降解

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

杜鹃兰种子共生萌发影响因子与试管苗驯化条件研究

杜鹃兰种子共生萌发影响因子与试管苗驯化条件研究

引用

作者：张玉琎贵州大学

学位级别：硕士

本研究以人工授粉所得杜鹃兰（Cremastra appendiculata）种子和促萌发真菌白假鬼伞（Coprinellus disseminatus）为实验材料。首先对白假鬼伞的培养条件进行优化,并通过对种子与真菌共培养的基础培养基类型、培养基组分以及培养室的温... 详细信息

本研究以人工授粉所得杜鹃兰（Cremastra appendiculata）种子和促萌发真菌白假鬼伞（Coprinellus disseminatus）为实验材料。首先对白假鬼伞的培养条件进行优化,并通过对种子与真菌共培养的基础培养基类型、培养基组分以及培养室的温度和光照等的筛选,初步明确白假鬼伞与杜鹃兰种子共生互作促进种子萌发的影响因子,再利用正交实验优化各项培养条件,最终确定促萌发真菌与杜鹃兰种子共生萌发的适宜条件。同时,通过对杜鹃兰种子与白假鬼伞共生培养得到的原球茎进行成苗条件筛选、试管苗驯化条件优化,进而为构建杜鹃兰种苗生产有效技术提供依据。主要研究结果如下:1.以促萌发真菌白假鬼伞菌株为实验材料进行培养条件的优化,并将菌落直径、菌丝鲜重作为主要的测定指标,在不同培养温度、光周期、初始p H值、氮源、碳源等方面进行了一系列的单因素实验,得到的结论是:适宜的培养温度为25℃,光照条件为暗培养,碳氮源分别为麦芽糖和蛋白胨,p H值为7.0左右;在单因素实验的基础上对白假鬼伞的适宜培养基组分进行探讨,发现白假鬼伞的适宜培养基配方为马铃薯200g·L+麦芽糖20 g·L+蛋白胨2 g·L+琼脂15 g·L。2.以杜鹃兰种子与白假鬼伞为材料进行共培养实验,设定杜鹃兰种子总萌发率及原球茎发育率为测定指标,采取单因素实验探究不同基础培养基、碳源、氮源、p H值、光周期、光照强度、温度等因素对白假鬼伞与杜鹃兰种子共生互作的影响,再设计三因素（p H值、麦芽糖浓度、蛋白胨浓度）三水平的正交实验对共生萌发培养基进行优化,结果表明:适宜培养基配方为OMA培养基+纤维素10 g·L+琼脂8 g·L,p H值为6.0,适宜的培养室温度和光照分别为20℃、暗培养,以此构建杜鹃兰种子共生萌发的适宜培养体系。3.以杜鹃兰种子与白假鬼伞共生培养得到的原球茎为研究对象,探寻在不同的基础培养基和抗生素种类及用量下,对其生长发育的调控效果,结果显示:以1/4MS+头孢霉素200 mg·L为基础培养基时原球茎的增殖系数相对较高,并以此进行正交实验,明确蔗糖、NAA、6-BA浓度对成苗过程的影响,由此得到培养基组分的最佳组合为1/4MS+头孢霉素200 mg?L+活性炭0.5 g?L+蔗糖20 g?L+NAA 0.2 mg?L+6-BA 1.5mg?L+琼脂5.5 g?L。4.以前期建立杜鹃兰体外培养体系得到的大量杜鹃兰试管苗为实验材料,从不同混合驯化基质、施水频率以及外加不同培养方式获得的白假鬼伞真菌三个层面,初步探究对杜鹃兰试管苗适应外界环境、正常生长发育的影响因素。本研究表明:杜鹃兰试管苗的成活率与基质的通气孔隙度显著相关,而配方为腐殖质+椰糠+珍珠岩=1:1:1的混合基质适于试管苗的驯化移栽;适宜的施水频率为每3 d施水一次,每次喷施使基质相对含水量达到40%左右,水分过高或过低都不利于试管苗的生长;在外加真菌与试管苗共同驯化培养的实验中,发现在试管苗驯化阶段外加白假鬼伞并没有显著地提高其株高、鲜重、根长等形态指标。

关键词：杜鹃兰白假鬼伞共生萌发试管苗驯化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：