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人白介素-12(P40)亚基在巴斯德毕赤酵母中的表达

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中山大学学报（自然科学版） 2001年第2期40卷 72-74,100页

作者：陈新华杨林陈曲侯王珣章龙綮新中山大学生物防治国家重点实验室/生物医药中心广东广州510275 华中师范大学昆虫研究所湖北武汉430079

运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,... 详细信息

运用PCR技术特异性地扩增了人IL 1 2p4 0亚基cDNA的编码区序列 ,得到 94 0bp的扩增片段 ,将其克隆于毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC的ClaⅠ ,XbaⅠ位点 ,构建成重组表达质粒pPICZαC p4 0 .经LiCl2 转化 ,Zeocin抗性筛选 ,得到含多拷贝p4 0基因的酵母工程菌PichiapastorisX 3 3 /p4 0 ,在 φ =0 5%甲醇诱导下 ,p4 0基因得到了分泌型表达 ,培养上清的SDS PAGE及Western blot均显示表达产物相对分子质量约 4 40 0 0 ,与预计大小相符 ,薄层凝胶扫描结果表明 ,分泌型表达蛋白占培养上清总蛋白量质量的 4 7% .

关键词： IL-12 P40亚基表达白介素-12 巴斯德毕赤酵母 PCR技术免疫调节因子

白介素-12在多发伤及合并多器官功能障碍综合征患者外周血中的变化和临床意义

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上海医学 2002年第12期25卷 758-760页

作者：李侠孙志扬刘建军崔世涛武钧刘养洲刘中民同济大学附属东方医院急诊创伤中心上海200120

目的　探讨白介素 (IL) 12在多发伤及合并多器官功能障碍综合征 (MODS)患者外周血中创伤后不同时段的动态变化和临床意义。方法　收集 1998年 8月～ 2 0 0 0年 4月多发伤患者 3 6例 ,根据入院时的创伤严重度评分 (ISS)值 ,将患者分为A... 详细信息

目的　探讨白介素 (IL) 12在多发伤及合并多器官功能障碍综合征 (MODS)患者外周血中创伤后不同时段的动态变化和临床意义。方法　收集 1998年 8月～ 2 0 0 0年 4月多发伤患者 3 6例 ,根据入院时的创伤严重度评分 (ISS)值 ,将患者分为A、B两组 ,ISS 12水平变化进行检测。结果　A、B两组各时段外周血中IL 12水平较对照组高。合并MODS患者外周血中各时段IL 12水平较未合并MODS者高 (P 12参与机体创伤后引起的免疫反应过程 ,外周血中IL

关键词：患者外周血白介素-12 多发伤并发症多器官功能障碍综合征

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白介素-12与变应性鼻炎的研究进展

实用医学杂志 2009年第1期25卷 158-159页

作者：彭华汪建广州军区广州总医院耳鼻喉科 510010

流行病学调查显示变应性疾病的发生率在全球不断攀升。变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）作为一种最常见的变应性疾病已经成为严重影响人类生活的健康问题。AR及其并发疾病对患者的学习、工作及生活造成了严重的影响，并极大地加重了... 详细信息

流行病学调查显示变应性疾病的发生率在全球不断攀升。变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）作为一种最常见的变应性疾病已经成为严重影响人类生活的健康问题。AR及其并发疾病对患者的学习、工作及生活造成了严重的影响，并极大地加重了社会经济负担，尤其让人担忧的是．AR还是哮喘发生的最重要的危险因素。近年来，人们发现白介素-12（interleukin12,IL-12）作为一种Th1型细胞因子，具有广泛的免疫调节作用，在逆转AR发生及发展中有着重要的作用，可能是治疗AR的一种很有潜力的治疗方法。

关键词：白介素-12 变应性鼻炎 Th1型细胞因子变应性疾病流行病学调查社会经济负担免疫调节作用人类生活

重组白介素-12治疗小鼠Lewis肺癌的实验研究

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癌症 2006年第9期25卷 1087-1091页

作者：尹晓玲段红彭志平孙世良李少林重庆医科大学核医学教研室重庆400016 重庆市肿瘤医院放疗科重庆400030

背景与目的:白介素-12(interleukin-12,IL-12)是具有抗瘤活性的细胞因子,本研究建立稳定表达小鼠IL-12(murineinterleukin-12,mIL-12)的小鼠Lewis肺癌(Lewislungcarcinoma,LLC)细胞系LLC/mIL-12,评估mIL-12重组质粒及LLC/mIL-12瘤苗治疗小鼠Lewis肺癌移植瘤的疗效。方法:脂质体转染LLC获得LLC/mIL-12瘤苗。于C57BL/6小鼠皮下接种LLC细胞2×106个,成瘤后将小鼠随机分成4组(n=10),第1、4、7天瘤内注射质粒或瘤苗,第14天处死小鼠,观察肿瘤生长曲线、脾细胞中CTL细胞和NK细胞活性以及肿瘤浸润淋巴细胞。结果:LLC/mIL-12瘤苗组和pcDNA3.1(+)-mIL-12质粒组肿瘤体积显著缩小,mIL-12能增强NK细胞和CTL细胞活性,两者均以LLC/mIL-12治疗组更显著,LLC/mIL-12和pcDNA3.1(+)-mIL-12治疗组有大量CD4+、CD8+淋巴细胞浸润。结论:mIL-12基因能增强NK细胞和CTL活性,LLC/mIL-12及pcDNA3.1(+)-mIL-12均能产生抗瘤免疫反应,且前者作用更强。

关键词：白介素-12 基因治疗 Lewis肺癌移植瘤小鼠

白介素-6和白介素-12在HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答中的作用

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中华流行病学杂志 2017年第7期38卷 950-953页

作者：王雪飞史晓红许喜喜杨志清郝海昀张芳王斌温海秀付振东王婷丰淑英汪波王素萍山西医科大学流行病学教研室太原030001 太原市第三人民医院妇产科 030001

目的探讨白介素-6（IL-6）和白介素-12（IL-12）在HBsAg阳性母亲婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫应答中的作用。方法收集91例HBsAg阳性孕妇足月分娩的新生儿并对其随访至12月龄。采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和化学发光免疫试验（C... 详细信息

目的探讨白介素-6（IL-6）和白介素-12（IL-12）在HBsAg阳性母亲婴儿乙型肝炎（乙肝）疫苗免疫应答中的作用。方法收集91例HBsAg阳性孕妇足月分娩的新生儿并对其随访至12月龄。采用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）和化学发光免疫试验（CLIA）检测新生儿及婴儿外周血HBVDNA及HBV血清学标志物；利用ELISA检测新生儿及婴儿外周血IL-6和IL-12的水平。结果91例婴儿中，乙肝疫苗无／弱应答率为35．16％（32／91）。无／弱应答组在新生儿期和婴儿期IL-6水平均低于强应答组，而IL-12水平均高于强应答组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。从新生儿期到婴儿期，无／弱应答组及强应答组的IL-6水平均升高，而IL-12水平均降低，其变化在两组间差异均有统计学意义（均P〈0．01）。进一步分析发现，婴儿抗-HBs水平与新生儿期及婴儿期IL-6呈正相关（^=0．70、0．79，均P〈0．叭），与IL-12呈负相关（n=-0．71、-0．72，均P〈0．01）。从新生儿期到婴儿期，IL-6升高程度与婴儿抗-HBs水平呈正相关（L=-0．74，P〈0．01），IL-12的降低程度与婴儿抗-HBs水平存在负相关（L=-0．42，P〈0．01）。新生儿期和婴儿期IL-6与IL—12间均呈负相关（ri=-0．68、-0．70，均P〈0．01）。结论IL-6可能促进HBsAg阳性母亲婴儿乙肝疫苗免疫应答，而IL-12则可能抑制免疫应答，IL-6与IL-12共同影响HBsAg阳性母亲婴儿对乙肝疫苗的免疫应答。

关键词：白介素-6 白介素-12 乙肝疫苗无/弱应答

黑素瘤细胞培养上清液抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素-12的研究

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临床皮肤科杂志 2006年第12期35卷 766-768页

作者：宋宁静王千秋程兴望张晶姜文华崔盘根孙建方曾学思中国医学科学院中国协和医科大学皮肤病研究所江苏南京210042 蚌埠医学院附属医院外科安徽蚌埠233000 南京大学医药生物技术国家重点实验室江苏南京210000

目的:探讨M14黑素瘤细胞培养上清液(melanomaculturesupernatants,MCS)在体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌白介素(IL)-12的影响。方法:将小鼠腹腔巨噬细胞在体外分别以脂多糖(LPS)(10μg/mL)、MCS(100μg/mL)、PD98059(20μmol/L)等单独及共同作用,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清液中巨噬细胞IL-12p40的分泌,用免疫印迹(Westernblot)法分析巨噬细胞细胞外调节蛋白激酶(ERK)44/42/丝裂原激活蛋白酶(MAPK)、p38MAPK和c-Jun氨基末端激酶/应激活化蛋白激酶(JNK/SAPK)蛋白表达。结果:MCS在体外能够显著抑制小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-12p40[(12.82±2.87)ng/mL],且培养上清液中IL-12水平的降低与细胞核磷酸化的ERK44/42蛋白表达增强相一致;此外,经ERK44/42特异性抑制剂PD98059预处理的巨噬细胞其IL-12p40的分泌量却不受MCS抑制[(25.23±4.52)ng/mL,P>0.05]。结论:黑素瘤细胞分泌物通过活化ERKMAPK信号传导通路抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-12。

关键词：黑素瘤细胞巨噬细胞白介素-12 小鼠

小剂量X射线照射对人树突状细胞抗原递呈及白介素-12分泌的影响

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中华放射医学与防护杂志 2012年第3期32卷 225-229页

作者：闫鹏江其生李峰生何蕊王翠兰李晓辽宁医学院第二炮兵总医院研究生培养基地北京100088 中国人民解放军第二炮兵总医院

目的探讨小剂量X射线照射对体外不同培养时间的人外周血树突状细胞（dendriticcell，DC）抗原递呈及白介素-12（IL-12）分泌的影响。方法分离人外周血单个核细胞（PBMC），以人粒-巨细胞集落刺激因子（GM-CSF）及IL-4等诱导分化成DC。... 详细信息

目的探讨小剂量X射线照射对体外不同培养时间的人外周血树突状细胞（dendriticcell，DC）抗原递呈及白介素-12（IL-12）分泌的影响。方法分离人外周血单个核细胞（PBMC），以人粒-巨细胞集落刺激因子（GM-CSF）及IL-4等诱导分化成DC。实验分为3组，A组：DC培养至第2天接受X射线照射；B组：DC培养至第6天接受X射线照射，A、B组受照剂量均为0．05、0．1、0．2和0．5Gy；C组：即对照组，为同期培养的未受x射线照射的DC细胞。各组DC培养至第8天时，以DC致敏T细胞，CCK-8（cellcountingkit-8）法检测混合淋巴细胞反应（mixedlymphocytereaction，MLR），以评估抗原递呈能力；MTT法检测致敏T细胞杀伤人肺腺癌A549细胞；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测DC细胞培养液中IL-12水平。结果0．2、0．5Gy照射后的DC抗原递呈能力，A组显著低于对照组（t=2．79和3．71，P〈0．05），B组显著高于对照组（t=3．60和3．11，P〈0．05）；检测致敏T细胞对人肺腺癌A549细胞的增殖抑制能力，与对照组相比，A组抑制A549增殖能力减弱（t=2．89和2．91，P〈0．05），B组抑制A549增殖能力明显增强（t=2．91和2．82，P〈0．05）；A组IL-12分泌量下降（t=4．44和6．93，P〈0．05），而B组明显上升（t=3．51和4．12，P〈0．05）。结论DC在培养早期阶段接受0．5Gy以下的x射线照射，会降低抗原递呈能力及致敏T细胞杀伤A549能力，在培养阶段的后期给予此剂量照射则会增强。

关键词： X射线树突状细胞 A549细胞白介素-12

醒脑静注射液对老年脑梗死患者神经功能缺损和血清白介素-12表达的影响

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中国老年学杂志 2012年第24期32卷 5389-5391页

作者：王明乐河南科技大学第一附属医院河南洛阳471003

目的观察醒脑静注射液对老年脑梗死患者的治疗作用及其对神经功能缺损和血清白介素-12(IL-12)的影响。方法选择>60岁的脑梗死患者200例,随机分为两组,观察组100例在常规治疗基础上加用醒脑静注射液治疗,对照组共100例常规治疗。两组患... 详细信息

目的观察醒脑静注射液对老年脑梗死患者的治疗作用及其对神经功能缺损和血清白介素-12(IL-12)的影响。方法选择>60岁的脑梗死患者200例,随机分为两组,观察组100例在常规治疗基础上加用醒脑静注射液治疗,对照组共100例常规治疗。两组患者均于治疗前及治疗后留取静脉血,应用ELISA检测血清中IL-12的表达,观察醒脑静注射液对患者血清中IL-12表达的影响。统计两组疗效及治疗前后进行相应神经功能缺损评定。结果两组在治疗前、治疗后10、30及90 d的NIHSS评分比较差异有统计学意义(P12均较治疗前明显下降,但观察组下降值明显大于对照组(P12的表达,进而调节微环境,临床治疗中可以积极应用。

关键词：老年脑梗死醒脑静注射液神经功能缺损白介素-12

尼古丁对哮喘大鼠树突状细胞髓样分化因子88及白介素-10、白介素-12表达的影响

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免疫学杂志 2011年第1期27卷 28-32页

作者：李毅杜永成许建英山西医科大学第一医院呼吸科太原030001

目的通过研究尼古丁对哮喘大鼠模型树突状细胞(DCs)Toll受体转导途径中重要接头蛋白髓样分化因子88(MyD88)表达影响及其与白介素-10(IL-10)、白介素-12(IL-12)的关系,从细胞水平探讨尼古丁加重哮喘的免疫学机制。方法制备哮喘大鼠模型,... 详细信息

目的通过研究尼古丁对哮喘大鼠模型树突状细胞(DCs)Toll受体转导途径中重要接头蛋白髓样分化因子88(MyD88)表达影响及其与白介素-10(IL-10)、白介素-12(IL-12)的关系,从细胞水平探讨尼古丁加重哮喘的免疫学机制。方法制备哮喘大鼠模型,培养骨髓来源的DCs及脾脏来源的淋巴细胞,实验随机分为4组:对照组、哮喘组、尼古丁组和哮喘加尼古丁组,其中对照组和哮喘组大鼠DCs在培养5 d后在培养液中加入一定体积的PBS继续培养72 h,尼古丁组和哮喘加尼古丁组大鼠DCs在培养5 d后加入质量浓度为400μg/ml尼古丁作用72 h。收集各组细胞及细胞上清,采用酶联免疫吸附双抗体夹心法(ELISA)测定各组IL-10和IL-12的浓度。采用免疫印迹(Western blot)法测定细胞内MyD88的含量。采用MTT法测定DCs刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果①哮喘加尼古丁组和哮喘组大鼠DCs IL-10的表达均高于对照组,IL-12的表达均低于对照组,差异均具有统计学意义(P12的表达均低于哮喘组大鼠,差异均具有统计学意义(P12呈显著的正相关(r=0.644,P12与IL-10的表达呈显著的负相关(r=-0.388,P12的表达与淋巴细胞增殖活性无明显相关性。结论尼古丁可以抑制哮喘大鼠DCs MyD88以及IL-10、IL-12的表达,并降低DCs刺激淋巴细胞的增殖能力。这可能是吸烟加重哮喘的免疫学机制之一。其中MyD88依赖的Toll受体转导途径可能在尼古丁下调IL-12的表达中发挥了一定作用。

关键词：尼古丁白介素-10 白介素-12 髓样分化因子88 树突状细胞