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病理组织切片染色中的常见问题及对策分析

中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第10期 0006-0008页

作者：谭茜丹常州市第一人民医院病理科江苏常州213000

病理组织切片是一种临床常用的检测技术,其操作步骤十分繁琐,耗时长可,可涉及多个程序。期间任何一个程序有缺失或失误,都会影响到成片质量。因此需要严格把握病理组织切片的各个环节,染色是病理组织切片中十分重要的一个环节,一张高质... 详细信息

病理组织切片是一种临床常用的检测技术,其操作步骤十分繁琐,耗时长可,可涉及多个程序。期间任何一个程序有缺失或失误,都会影响到成片质量。因此需要严格把握病理组织切片的各个环节,染色是病理组织切片中十分重要的一个环节,一张高质量的HE切片直接关系到镜下观察质量及病理医师的主观判断。但染色并不是单一步骤的结果,而是一个多步骤、多因素所决定的检测程序。为了进一步提高染色质量,本次分析病理组织切片染色中的常见问题及对策,为临床病理组织检测提供一定参考。

关键词：病理组织切片染色常见问题对策

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猪附红细胞体感染家兔模型的建立

中国动物传染病学报 2022年

作者：于天韩金成梁喜植王洋李明宣闫宗斌李文学薛书江延边大学农学院

为了建立猪附红细胞体感染家兔模型。将摘除脾脏后的12只家兔随机平均分为3组: A组为模型组，接种2 mL纯化的猪附红细胞体；B组为阴性对照组，接种2 mL猪附红细胞体阴性血液分离物；C组为空白对照组，接种2 mL生理盐水。接种后通过测量... 详细信息

为了建立猪附红细胞体感染家兔模型。将摘除脾脏后的12只家兔随机平均分为3组: A组为模型组，接种2 mL纯化的猪附红细胞体；B组为阴性对照组，接种2 mL猪附红细胞体阴性血液分离物；C组为空白对照组，接种2 mL生理盐水。接种后通过测量体温、体质量、PCR检测、血常规、血液生化指标和病理组织学检验来鉴定猪附红细胞体感染情况。结果显示，A组家兔与B组、C组相比，体温、体质量变化差异显著（P＜0.05）。A组家兔出现了消瘦、被毛杂乱、结膜黄染等临床症状。血常规检测结果显示，A组家兔红细胞总数、平均体积、血红蛋白含量均减少，差异显著（P＜0.05）；血红蛋白、血红蛋白浓度均减少，差异极显著（P＜0.01），提示家兔贫血。血液生化指标检测结果显示，A组家兔尿素、白球比、尿酐比，丙氨酸氨基转移酶均升高，差异显著（P＜0.05）；球蛋白、肌酐、血糖均下降，差异显著（P＜0.05），提示家兔免疫力下降，肝功能和肾功能受损。病理组织学观察结果显示，A组家兔肝脏充血、水肿、肺脏局部有炎性细胞、心肌细胞出血。试验结果表明本研究成功建立了猪附红细胞体感染家兔模型。

关键词：猪附红细胞体家兔血常规病理组织切片模型建立

免疫球蛋白IgY对牙龈卟啉单胞菌诱导的牙周炎大鼠模型的影响

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华东师范大学学报（自然科学版） 2019年第3期 131-137页

作者：王芳许啸晨吴文惠上海健康医学院基础医学院上海201318 上海海洋大学食品学院上海201306 上海美加净日化有限公司上海200333 上海海洋大学海洋科学研究院上海201306

研究了免疫球蛋白(IgY)通过抑制P.gingivalis的生长繁殖治疗实验性大鼠牙周炎的可行性.用医用丝线结扎上颌第二磨牙,并涂抹P.gingivalis的方法建立大鼠牙周炎模型.建模成功的大鼠随机分成对照组、高剂量IgY组和低剂量IgY组,每组8只.给药... 详细信息

研究了免疫球蛋白(IgY)通过抑制P.gingivalis的生长繁殖治疗实验性大鼠牙周炎的可行性.用医用丝线结扎上颌第二磨牙,并涂抹P.gingivalis的方法建立大鼠牙周炎模型.建模成功的大鼠随机分成对照组、高剂量IgY组和低剂量IgY组,每组8只.给药28 d后,测量各组大鼠的牙龈指数(GI),菌斑指数(PI)和探诊出血指数(BOP),以及血液中IL-6和TNF-α含量,并进行X-射线影像和组织学观察.与对照组相比,IgY治疗组GI、PI和BOP指标明显好转,IL-6和TNF-α含量显著降低,X-射线影像可见牙间隙明显缩小,组织学观察牙周纤维排列整齐,极少量炎细胞浸润,牙槽嵴无吸收,牙槽骨骨质增加.特异性IgY能够治疗P.gingivalis诱导的大鼠牙周炎.

关键词：免疫球蛋白 IgY 牙周炎动物模型牙周指数 IL-6 TNF-α X射线影像病理组织切片

牛miR-29b影响牛病毒性腹泻病毒感染BALB/c小鼠的作用

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中国兽医学报 2020年第2期40卷 264-271页

作者：田瑞鑫李胜男胡新艳陈俊贞郭妍婷赵新艳李祯董文丽如先古丽李淑娴冉多良姚刚史慧君付强新疆农业大学动物医学学院新疆乌鲁木齐830052

前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增... 详细信息

前期研究发现高表达miR-29b能显著抑制牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)在体外的复制,而miR-29b过表达是否影响BVDV在体内的复制尚未见有报道。研究设计扩增牛pre-miR-29b基因片段的引物,以MDBK基因组为模板,PCR扩增pre-miR-29b并克隆至慢病毒载体pLL3.7。将阳性质粒pLL3.7-pre-miR-29b与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装慢病毒并测定慢病毒滴度,同时包装pLL3.7空质粒的慢病毒作为阴性对照。将4~5周龄BALB/c小鼠随机分成5组,每组6只,连续2次尾静脉注射2.5×107 IU慢病毒悬液pLL3.7-pre-miR-29b或pLL3.7,并于慢病毒注射后96 h通过滴鼻途径攻毒BVDV毒株NADL(1.68×105 TICD50/只),于攻毒后不同时间(0,2,4,10,15 d)处死BALB/c小鼠,采集心脏、肝脏、脾脏、肺脏、小肠和血液,提取总RNA,使用荧光定量RT-PCR检测不同组织中BVDV拷贝数;同时制备病理组织切片观察各组织病变情况。结果显示,成功构建pLL3.7-pre-miR-29b质粒;成功包装pLL3.7-pre-miR-29b和pLL3.7慢病毒;使用荧光定量RT-PCR检测发现,pLL3.7-pre-miR-29b感染能显著性降低BVDV拷贝数;与pLL3.7-pre-miR-29b感染的处理组相比较,pLL3.7感染的对照组中各组织病变情况较为严重。结果表明,BALB/c小鼠体内过表达miR-29b能明显抑制BVDV的复制,减轻BVDV感染造成的病变,为以后研发抗BVDV的有效策略和方法提供了理论依据。

关键词： miR-29b前体慢病毒 BALB/c小鼠病毒载量病理组织切片

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牛源鲍曼不动杆菌的分离鉴定及病原性分析

广西畜牧兽医 2023年第4期39卷 150-153页

作者：李常挺陶立冯威巍梁靖吴翠兰彭昊兰美益李军马春霞广西壮族自治区兽医研究所广西兽医生物技术重点实验室广西南宁530001 广西都安大都华牛农业科技有限公司广西都安530700 钦州澳华进出口贸易有限公司广西钦州535000

鲍曼不动杆菌,又称鲍氏不动杆菌,属于不动杆菌属,革兰氏阴性菌,广泛地存在于土壤和水等自然环境中,也存在于健康人的皮肤、咽、结膜、唾液、胃肠道及阴道分泌物中,是一种条件致病菌,可引起菌血症和肺炎、脑膜炎、腹膜炎、心内膜炎、泌... 详细信息

鲍曼不动杆菌,又称鲍氏不动杆菌,属于不动杆菌属,革兰氏阴性菌,广泛地存在于土壤和水等自然环境中,也存在于健康人的皮肤、咽、结膜、唾液、胃肠道及阴道分泌物中,是一种条件致病菌,可引起菌血症和肺炎、脑膜炎、腹膜炎、心内膜炎、泌尿道以及皮肤感染[1,2]。黄志坚、顾天召等[3,4]人于1996年和1997年对鳜鱼暴发性死亡的病原进行了调查并分离出鲍曼不动杆菌,除水产动物外,国内也有报道大熊猫、仔猪、鸡、鸭和山羊等动物感染鲍曼不动杆菌发病死亡的案例[5-9]。为确定南宁市某牛场病死牛的病因和查找病原,从病死牛的肺细支气管中分离到1株疑似鲍曼不动杆菌。该菌与牛源、人源鲍曼不动杆菌亲缘关系较近。经细菌分离、生化试验、致病性试验、药敏试验、16SrRNA基因鉴定和病理组织切片观察,证实该病牛感染鲍曼不动杆菌并确定有致病性。分离菌液浓度在4×108 CFU/mL时对小鼠的致死率为100%;分离菌仅对测定的恩诺沙星等4种药物高敏,对其他11药物耐药。本病例可为临床防治鲍曼不动杆菌提供参考。

关键词：病理组织切片病死牛细支气管动物感染条件致病菌心内膜炎生化试验病原性

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猫皮肤肥大细胞瘤的诊断与治疗

现代农业科技 2022年第4期 192-195页

作者：吴俊杜友卫池州职业技术学院安徽池州247000 合肥恒幸动物医院安徽合肥230000

猫肥大细胞瘤是猫常见的肿瘤,分为皮肤型与内脏型。皮肤型肥大细胞瘤又分为肥大细胞型与组织细胞型,临床表现为皮肤出现结节、溃疡性病变,且易复发。本病主要通过临床、组织细胞学检查确诊,但肿瘤分级及预后情况还需通过组织病理切片判... 详细信息

猫肥大细胞瘤是猫常见的肿瘤,分为皮肤型与内脏型。皮肤型肥大细胞瘤又分为肥大细胞型与组织细胞型,临床表现为皮肤出现结节、溃疡性病变,且易复发。本病主要通过临床、组织细胞学检查确诊,但肿瘤分级及预后情况还需通过组织病理切片判断。本文以宠物医院的一例猫皮肤型肥大细胞瘤为例,就该病例的临床诊断、实验室诊断、病理组织切片进行叙述,并针对治疗方法及临床用药提出建议,以期为猫皮肤肥大细胞瘤的诊疗提供一定参考。

关键词：猫肥大细胞瘤皮肤型组织细胞学检查病理组织切片手术切除

免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2024年第4期 0141-0144页

作者：赵小莉江苏省苏州市张家港市第一人民医院江苏苏州215600

探讨免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值。方法选取采集的标本70例,时间2020年1月~2023年2月,所分对照组(35例)传统方法制作,观察组(35例)免疫组化技术,对比效果。结果观察组病理组织切片的制作优良率、检测的确诊率,相比对... 详细信息

探讨免疫组化技术在制作病理组织切片中的应用价值。方法选取采集的标本70例,时间2020年1月~2023年2月,所分对照组(35例)传统方法制作,观察组(35例)免疫组化技术,对比效果。结果观察组病理组织切片的制作优良率、检测的确诊率,相比对照组有统计学意义(P病理组织切片制作中,免疫组化技术,能改善质量,提高诊断准确性。

关键词：病理组织切片制作免疫组化技术

4种试剂盒提取病理组织切片中裂头蚴DNA效果的比较

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中国人兽共患病学报 2018年第7期34卷 635-638,642页

作者：蒙兴慧陈艳李金福胡月刘巧霞刘鉴贵州省教育厅贵州医科大学现代病原生物学特色重点实验室贵阳550004

目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物... 详细信息

目的筛选一种快速、简单、高效、价格合理的从病理组织切片中提取猬裂头蚴DNA的试剂盒。方法用4种不同的试剂盒提取病理组织切片(含虫白片/HE染色片)中裂头蚴DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率、提取时间、提取价格及PCR产物的亮度,评价4种市售商品试剂盒提取DNA的效果。结果 4种试剂盒提取裂头蚴有虫组织白片DNA的结果:试剂盒1提取DNA的浓度、纯度及提取率最高,提取成本也最高且耗时较短;试剂盒2的提取效果与试剂盒1相近,提取成本较低且时间最短;试剂盒3的提取效果介于试剂盒2与试剂盒4之间,成本最低但时间长达26h;试剂盒4提取效果最低,PCR产物条带也最暗,提取成本较低但耗时较长。4种试剂盒提取HE染色片DNA的结果:试剂盒1与试剂盒2提取的效果相近,两者成本较高耗时较短,试剂盒3与试剂盒4的提取效果相近,两者成本低耗时长,试剂盒3与试剂盒4的提取效果均低于试剂盒1和试剂盒2的提取效果。结论 4种商品试剂盒均能满足裂头蚴感染有虫组织的DNA提取,其中试剂盒2更适用于快速提取。

关键词：猬裂头蚴 DNA提取病理组织切片商品试剂盒

猪伪狂犬病病毒安徽株的分离鉴定及对小鼠致病性研究

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猪伪狂犬病病毒安徽株的分离鉴定及对小鼠致病性研究

作者：何赞赞安徽农业大学

学位级别：硕士

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性、热性传染病。猪是PRV的主要自然宿主和传播者,各生长阶段的猪均可感PR,临床上以新生仔猪发生神经症状和腹泻为主;母猪出... 详细信息

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种家畜和野生动物共患的一种急性、热性传染病。猪是PRV的主要自然宿主和传播者,各生长阶段的猪均可感PR,临床上以新生仔猪发生神经症状和腹泻为主;母猪出现繁殖障碍、流产、产死胎和呼吸道症状;成年猪呈隐性感染,生长迟缓,长期带毒。20世纪90年代以来,随着PR基因缺失疫苗(Bartha-K61株)的引入并广泛使用,PR在我国大部分地区得到有效控制。然而,自2011年起至2015年底,除个别地区外,我国各地均有PR暴发的报道,给养猪业造成了严重的经济损失。研究表明,目前在我国流行的PRV已出现了变异,不仅表现在毒株毒力的增强,而且对Bartha-K61弱毒疫苗提供的免疫保护有限。因此,了解和掌握不同地区PRV分离株的特性(致病性、抗原性等),对于有效防控PR意义显著。本研究利用PCR技术、细胞接种试验、病毒空斑纯化试验、透射电子显微镜观察、间接免疫荧光试验(IFA)、兔体接种试验、病毒滴度测定(TCID50)等方法,对安徽不同地区发病猪场中出现高热、呼吸道症状、神经症状、繁殖障碍、致命性脑炎等疑似PRV感染的病猪,采集病料进行病原检测及PRV分离鉴定,并以小鼠为实验动物模型,进行PRV安徽分离株的LD50测定、病理组织学观察、各脏器组织中病毒载量检测。旨在获得安徽地区PRV流行毒株,了解安徽猪群中PRV的感染情况及PRV安徽株的毒力特征,从而为深入研究PRV安徽分离株的抗原性奠定基础,为安徽地区PR的有效防控提供科学依据。结果显示,来自安徽不同地区发病猪场的13份病料组织仅PRV核酸检测阳性,将处理后的病料组织研磨液接种Vero细胞,传至第六代后13株病毒均可使细胞在12h内稳定地出现聚集、圆缩、融合、脱落等典型细胞病变。分离的病毒进行空斑纯化,细胞培养至1周左右通过结晶紫染色可见明显的、直径约5mm左右、未染上色的、近圆形空斑。纯化浓缩后的病毒液在透射电子显微镜下可呈球形、直径约180nm左右、与疱疹病毒相似的粒子结构。13株病毒感染Vero细胞后,在荧光显微镜下均出现明显的绿色荧光反应。将病毒液接种成兔,兔子出现奇痒、局部被毛脱落、角弓反张等典型PR临床症状后死亡。13株分离的病毒均为PRV。采用Reed-Muench法检测病毒滴度,13株PRV的TCID50在1 0-3.12/0.1mL～10-6.459/0.1mL 之间。13 株 PRV 对小鼠的 LD50 为102 569TCID50～105.167TCID50;其中第 10 株(AH1802)、第 11 株(AH1803)的LD50分别为 102.569TCID50、102 833TCID50,第 3 株(AH1603)、第 7株(AH1703)的LD50均为105.167TCID50。临床剖检可见攻毒组小鼠肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脑等部位均有不同程度的出血、肿大,对照组无异常;病理组织学显示13株PRV感染小鼠后引起各组织脏器病变因不同毒株而有差异,其中第10株(AH1802 J组)、第11株(AH1803 K组)引起脑、肺脏、肝脏、脾脏、肾脏的病变较其他毒株严重,且病毒的载量也较高,与其他毒株之间差异显著(p<0.05)。结果表明,本研究成功分离鉴定了 13株PRV安徽株,13株PRV安徽分离株对实验兔和小鼠均具有较强的致死性,但各分离毒株之间对小鼠的致病力存在明显差异,其中源自滁州的AH1802、宿州的AH1803两株PRV毒力最强。不同地区或不同地域PRV分离株毒力存在差异,这可能与毒株本身发生变异相关。

关键词：猪伪狂犬病病毒分离鉴定半数致死量病理组织切片病毒载量