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云南省2020年烤烟打顶后花叶型病毒病种类调查

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分子植物育种 2024年第15期22卷 5039-5046页

作者：于海芹黄昌军袁诚曾建敏刘勇云南省烟草农业科学研究院烟草行业烟草生物技术育种重点实验室国家烟草基因工程研究中心昆明650021

近年来,云南省部分烟区烤烟花叶型病毒病危害出现旺长前发病率低、打顶前后发病率快速上升且连片发生等新特点。为了解这些病害的病毒种类及其地理分布,本研究于2020年6月至8月在云南省8个州(市)共17个植烟县(区)采集617个表现为花叶、... 详细信息

近年来,云南省部分烟区烤烟花叶型病毒病危害出现旺长前发病率低、打顶前后发病率快速上升且连片发生等新特点。为了解这些病害的病毒种类及其地理分布,本研究于2020年6月至8月在云南省8个州(市)共17个植烟县(区)采集617个表现为花叶、脉带、蚀纹和叶脉坏死等病毒病典型症状的烟草叶片样品,采用ELISA试剂盒检测烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus, TMV)、马铃薯Y病毒(Potaoto virus Y, PVY)、红辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus, ChiVMV)和烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus, TVBMV)。检出率从高至低的顺序为:TVBMV为52.51%、TMV为50.08%、ChiVMV为41.49%、PVY为14.31%。从整体上看,与往年比较发现,2020年烤烟打顶后花叶型病毒种类分布呈现出以下特点:蚜虫传播的PVY属病毒(PVY, ChiVMV, TVBMV)占优势,TMV占比下降。PVY属3种主要病毒的比例存在较大的地理差异。滇东北(昭通,曲靖北部)传统的马铃薯种植区以TVBMV和PVY为主。PVY抗病品种(‘云烟301’,‘云烟121’)表现经济有效的防治效果。滇中(昆明,玉溪)以ChiVMV和TVBMV为主,二者复合侵染普遍。滇西(大理,保山)以ChiVMV为主。多数取样点烤烟打顶至采烤期TVBMV和ChiVMV上升为优势种类。表现上述危害新特点的县(区)需要开展病毒种类检测,以便针对性制定抗病品种布局和防治措施。

关键词：烤烟打顶花叶型病毒病病毒种类病毒检测

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番茄和辣椒种子携带的病毒种类及其传毒特征

番茄和辣椒种子携带的病毒种类及其传毒特征

作者：熊智琦云南大学

学位级别：硕士

番茄和辣椒是全球蔬菜的大宗作物种类,近年来受病毒病危害严重。随着温室和大棚等设施栽培的普及,病毒病发生为害日益严重。新发病区在没有初侵染源和媒介昆虫的情况下病毒来源不明,而旧发病区苗期和早期发病导致中后期病害爆发流行、... 详细信息

番茄和辣椒是全球蔬菜的大宗作物种类,近年来受病毒病危害严重。随着温室和大棚等设施栽培的普及,病毒病发生为害日益严重。新发病区在没有初侵染源和媒介昆虫的情况下病毒来源不明,而旧发病区苗期和早期发病导致中后期病害爆发流行、新的病毒种类从何而来等问题突出,从病毒病害发生特点推测种子携带病毒传播的可能性较大。针对上述问题,本研究采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、病毒分类相关基因的多聚酶链式反应(PCR)扩增、克隆和测序分析,以及透射电子显微镜制样观察等技术,对新发病区(西藏自治区昌都市卡若区)和旧发病区(云南省楚雄州元谋县)温室、大棚和露地栽培的番茄和辣椒病果实种子、部分市售商品种子以及携带病毒种子在隔离条件下种植的苗期和开花期带毒率和发病率开展调查和检测,得到以下研究结果。1.番茄和辣椒种子携带的主要病毒种类:采用番茄和辣椒常见的17种病毒单克隆抗体进行双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测,在新发病区番茄病果实种子中检测到朱顶红褪绿环斑病毒(HCRV)、番茄环纹斑点病毒(TZSV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、齿兰环斑病毒(ORSV)、马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯S病毒(PVS)、芜菁花叶病毒(Tu MV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)7种病毒。在旧发病区番茄病果实种子中检测到黄瓜花叶病毒(CMV)、HCRV、TZSV、马铃薯Y病毒(PVY)、PVA、烟草花叶病毒(TMV)、番茄花叶病毒(To MV)、Tu MV、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)9种病毒。新发病区辣椒病果实种子中检测到黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)、CMV、TZSV、TSWV、PVY、TMV、烟草环斑病毒(TRSV)、Tu MV、小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)、TYLCV等10种病毒。旧发病区辣椒病果实种子中检测到CGMMV、CMV、HCRV、TZSV、ORSV、PVA、TYLCV 7种病毒。电镜和RT-PCR扩增克隆测序分析验证:对病果实种子进行超薄切片制样透射电子显微镜观察,新发病区番茄和辣椒种胚细胞中仅发现正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒粒体,应用该属简并引物进行RT-PCR检测和N基因扩增克隆和测序分析,显示种胚细胞中携带TSWV,旧发病区的番茄和辣椒种胚细胞中仅发现Orthotospovirus病毒粒体,N基因扩增克隆和测序分析,显示种胚细胞中携带TZSV和辣椒黄化环斑病毒(CYRSV)。2.市售商品种子携带的病毒种类:对元谋县市售的番茄和辣椒商品种子采用常见的10种病毒单克隆抗体夹心DAS-ELISA检测。番茄4个品种的种子中,品种1检测到PVY、TSWV、TZSV、TYLCV 4种病毒。品种2检测到PVY、PVA、TSWV、TMV 4种病毒。品种3检测到TSWV、TMV、TYLCV3种病毒。品种4检测到PVY、TSWV、TZSV、TMV4种病毒。3个辣椒品种的种子中,品种1检测到PVY、PVA、TSWV、TMV 4种病毒。品种2检测到PVA、TYLCV2种病毒。品种3检测到PVA、TSWV、TZSV、TMV、TYLCV 4种病毒。因品种不同,病毒种类与带毒率具有明显的差异。3.番茄和辣椒种子携带病毒的传播特征:对携带病毒的种子进行隔离播种种植,采用RT-PCR检测。番茄种子携带TZSV和CYRSV(带毒率分别为17%和37%),苗期TZSV和CYRSV的带毒率分别为27%和40%,开花期TZSV和CYRSV带毒率分别为33%和47%;辣椒种子携带TSWV和CYRSV(带毒率分别为37%和33%),苗期TSWV和CYRSV带毒率分别为40%和33%,开花期TSWV和CYRSV带毒率分别为57%和40%。表明TSWV、TZSV和CYRSV可以通过带毒种子传播,且苗期和开花期的带毒率均高于种子带毒率,而开花期又高于苗期,病毒通过种子传播具有较长的潜伏期。上述研究结果表明,不同方法检测番茄和辣椒病果实种子的病毒种类有差异,可能有的病毒为种子表面携带引起。新发病区番茄和辣椒的病毒病由种子携带病毒形成初侵染源并引起发病。旧发病区番茄和辣椒的病毒病由多途径传播,带病毒种子也是重要的传播途径,是苗期和早期发病的主要原因。其中,TSWV、TZSV和CYRSV在番茄和辣椒种胚细胞中的分布是本研究首次发现,对于种子质量检测与源头防控上述病毒引起的病害具有重要的应用价值。

关键词：番茄辣椒种子携带病毒种类传播特征

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广西甘薯病毒病的病原病毒种类检测

基因组学与应用生物学 2016年第5期35卷 1213-1218页

作者：黄利利 Pham Binhdan 何芳练刘奕君刘义明陈保善廖咏梅广西大学农学院南宁530005 广西防城港市农业技术推广中心防城港538001 广西大学亚热带生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530005

甘薯病毒病是广西甘薯的主要病害之一。为明确为害广西甘薯的病毒种类,到广西南宁、玉林、崇左、北海、宜州和桂林等市的甘薯种植区采集疑似甘薯病毒病样品,共采集到127个甘薯样品,用为害甘薯的12种病毒的引物,通过RT-PCR或PCR技术检测... 详细信息

甘薯病毒病是广西甘薯的主要病害之一。为明确为害广西甘薯的病毒种类,到广西南宁、玉林、崇左、北海、宜州和桂林等市的甘薯种植区采集疑似甘薯病毒病样品,共采集到127个甘薯样品,用为害甘薯的12种病毒的引物,通过RT-PCR或PCR技术检测,并对扩增产物进行测序和所获序列的Blast分析。结果表明:为害广西甘薯的病毒种类有11种,包括10种RNA病毒:甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)、甘薯G病毒(sweet potato virus G,SPVG)、甘薯褪绿矮化病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)、甘薯轻型斑点病毒(sweet potato mild speckling virus,SPMSV)、甘薯C病毒(sweet potato virus C,SPVC)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、甘薯褪绿斑病毒(sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)、甘薯脉花叶病毒(sweet potato vein mosaic virus,SPVMV)、甘薯潜隐病毒(sweet potato latent virus,SPLV)、甘薯轻型斑驳病毒(sweet potato mild mottle virus,SPMMV),1种DNA病毒:甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV)。在127份甘薯样品中,有48个样品检测到SPFMV,占37.79%;31个样品检测到SPVG,占24.40%;29个样本检测到SPLCV,占22.83%;27个样本检测到SPCSV,占21.30%,其他被检测到的甘薯病毒占20.00%之下。检测到病毒的88个样品中,有40个样品仅检测到一种病毒,即SPFMV、SPVG、SPCSV、SPMSV、CMV、SPLCV单独侵染。48个样品为2种或2种以上的病毒复合侵染。病毒复合侵染时,甘薯症状表现复杂,有矮化、花叶、皱缩、叶脉突起等症状。其中,检测到SPCSV的甘薯植株,表现出严重的矮化症状。

关键词：甘薯病毒病病毒种类检测

上饶早梨主栽品种病毒种类分析及其茎尖脱毒技术效率比较

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浙江农业学报 2017年第1期29卷 89-100页

作者：尹明华周宇瑶杨星鹏徐玉琴刘郑英舒荣建魏志敏夏华炎洪森荣上饶师范学院生命科学学院江西上饶334001 北京中医药大学人文学院北京100029

对上饶早梨3个主栽品种的病毒种类进行分析,并对其不同茎尖脱毒技术的效率进行比较。结果表明,花厅六月雪和田墩六月雪没有检测到苹果茎痘病毒(ASPV),花厅黄皮消检测到ASPV,田墩六月雪、花厅六月雪和花厅黄皮消均检测到苹果茎沟病毒(AS... 详细信息

对上饶早梨3个主栽品种的病毒种类进行分析,并对其不同茎尖脱毒技术的效率进行比较。结果表明,花厅六月雪和田墩六月雪没有检测到苹果茎痘病毒(ASPV),花厅黄皮消检测到ASPV,田墩六月雪、花厅六月雪和花厅黄皮消均检测到苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果锈果类病毒(ASSVd),但均未检测到苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果花叶病毒(Ap MV)。对于上饶早梨3个主栽品种来说,超低温疗法的脱毒效率显著高于常规茎尖培养,在3种超低温疗法脱毒技术中,包埋玻璃化法超低温疗法的脱毒效率最高。SSR荧光标记毛细管电泳检测表明,常规茎尖培养和3种超低温疗法脱毒技术均能保证上饶早梨3个主栽品种的遗传稳定性。该研究有助于上饶早梨种苗病毒病害的检测鉴定和实时监控检疫,同时也可为建立上饶早梨种质资源超低温库和生产无毒苗提供一定的技术支撑。

关键词：上饶早梨主栽品种病毒种类茎尖超低温疗法脱毒

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宏病毒组测序检测豆蚜田间种群病毒种类

华北农学报 2023年第3期38卷 191-198页

作者：朴君靳道然朴敬爱季英华孙枫李硕辽宁师范大学生命科学学院辽宁大连116081 江苏省农业科学院植物保护研究所江苏南京210014

为探究蚜虫体内携带的病毒种类,采集江苏地区豆蚜田间种群,鉴定种类后,提取豆蚜总RNA,以片段化的mRNA为模板构建测序文库,利用宏病毒组测序技术检测分析豆蚜体内的病毒种类,并对获得的2个新病毒进行检测鉴定。结果显示,测序数据经拼接... 详细信息

为探究蚜虫体内携带的病毒种类,采集江苏地区豆蚜田间种群,鉴定种类后,提取豆蚜总RNA,以片段化的mRNA为模板构建测序文库,利用宏病毒组测序技术检测分析豆蚜体内的病毒种类,并对获得的2个新病毒进行检测鉴定。结果显示,测序数据经拼接、比对和分类注释,最终共得到病毒序列177条,与24种病毒序列一致或同源性较高,包括5种植物病毒(属于5个病毒科)和19种昆虫病毒(涉及9个科和6种暂未分类病毒);对植物病毒中测序丰度最高的种类进行基因检测,获得序列经Blast比对,与其同源性较高的病毒均来自细胞质弹状病毒属,并且它们具有相同的保守区,确定该病毒为一种新的细胞质弹状病毒,暂命名为Aphis craccivoraassociated rhabdovirus(AcARV);基于病毒L蛋白系统进化分析显示,AcARV与水稻条纹花叶病毒(RSMV)构成最小分支,说明这2种病毒在进化上最为近缘;鉴定的多数昆虫病毒种类在蚜虫中鲜有报道;通过RT-PCR和蛋白免疫印迹在豆蚜体内均检测出昆虫病毒(HiPV)衣壳蛋白VP1,证实了HiPV对豆蚜的感染,这是首次在蚜虫体内发现HiPV,HiPV豆蚜分离物VP1基因与日本、江苏灰飞虱分离物核苷酸同源性分别为95.5%,99.0%。研究结果表明,豆蚜体内携带多种植物病毒,并含有一种新的弹状病毒AcARV,同时,豆蚜体内昆虫病毒种类非常丰富,HiPV可感染蚜虫。

关键词：豆蚜病毒种类宏病毒组测序细胞质弹状病毒 HiPV病毒

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’99世博会植物病毒种类的调查与鉴定初报

植物检疫 2000年第3期14卷 132-134页

作者：孔宝华蔡红陈海如魏正蒋小龙沐咏民唐慧刘进元云南农业大学省植病重点实验室昆明650201 云南出入境检验检疫局清华大学生物系

采用ELISA、EM和生物侵染实验 ,对世博会监管的植物样品进行了病毒种类的调查与鉴定。

关键词：世博会植物病毒调查 ELISA EM 侵染病毒种类

广西西瓜甜瓜病毒种类及主要病毒遗传多样性研究

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广西西瓜甜瓜病毒种类及主要病毒遗传多样性研究

作者：杨世安广西大学

学位级别：硕士

病毒病害是西瓜和甜瓜的一类重要病害,本研究通过血清学和分子生物学方法对广西西甜瓜病毒种类进行检测鉴定,并对3种主要病毒进行了序列测定和遗传多样性分析,建立同步检测3种病毒方法,为进一步探明病毒病发生流行规律和提高防控水平奠... 详细信息

病毒病害是西瓜和甜瓜的一类重要病害,本研究通过血清学和分子生物学方法对广西西甜瓜病毒种类进行检测鉴定,并对3种主要病毒进行了序列测定和遗传多样性分析,建立同步检测3种病毒方法,为进一步探明病毒病发生流行规律和提高防控水平奠定基础。研究结果显示,广西西瓜上至少有7种病毒,分别是:黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)、西瓜花叶病毒(WMV)、南瓜花叶病毒(SqMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)、小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)、番木瓜环斑病毒(PRSV),其中优势病毒是ZYMV和PRSV,在检出病毒中所占比例分别为41.9%、22.8%;甜瓜上至少有9种病毒,即CMV、TMV、WWV、CGMMV、ZYMV、PRSV以及瓜类褪绿黄化病毒(CCYV)、甜瓜黄斑病毒(MYSV)和甜瓜坏死斑点病毒(MNSV)。ZYMV是露地薄皮甜瓜检出率(18.3%)最高的病毒。CCYV和MYSV是大棚甜瓜上的主要病毒,检出率分别为43.1%、40.5%。广西甜瓜上首次检测发现瓜类坏死斑点病毒(MNSV)。统计发现西瓜上有7种复合侵染类型,甜瓜上有9种复合侵染类型。对3种主要RNA病毒基因组进行序列测定与分析发现:CCYV广西分离物基因组序列与GenBank已登录RNA1核苷酸序列同源性高达99.5%-100%,RNA2核苷酸序列同源性高达99.6%-100%;基于全长序列及CP基因系统进化树分析表明,CCYV各分离物聚在一个分支上;MYSV广西分离物SRNA近全长核苷酸序列与GenBank已登录序列同源性高达94.9%-99.8%。基于S RNA全长核苷酸序列和N基因系统进化树分析表明,MYSV中国大陆分离物聚在一支,与西班牙酸浆分离物亲缘关系较近。MNSV广西分离物近全长核苷酸序列与GenBank已登录序列同源性74.4%-93.8%,各开放阅读框氨基酸序列同源性高达93.0%-100%(除日本两个西瓜分离物)。比对分析发现3'UTR包含一段与瓜类蚜传黄化病毒(CABYV)3'UTR相似性达90%的序列,其功能与分离物MNSV-N是否一致有待研究。系统进化树分析MNSV广西分离物单独成一支,亲缘关系与欧美分离物组最近。本研究还建立了 3种主要病毒(CCYV、MYSV和MNSV)一步多重RT-PCR检测方法,为开展病害流行规律和复合侵染研究提供了更加经济便捷的方法。

关键词：西瓜甜瓜病毒种类遗传多样性

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德阳地区晒烟病毒种类及发生规律研究

中国烟草学报 1994年第2期2卷 34-40页

作者：姚革庹治华四川省农科院植保所四川省烟叶公司

病毒病在德阳晒烟上每隔１—２年大发生一次，造成重大经济损失。１９８９—１９９１年，采用ＥＬＩＳＡ等手段，鉴定了该地区晒烟病毒标样７２２个。结果表明，烟草普通花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、马铃薯病毒Ｙ（Ｐ... 详细信息

病毒病在德阳晒烟上每隔１—２年大发生一次，造成重大经济损失。１９８９—１９９１年，采用ＥＬＩＳＡ等手段，鉴定了该地区晒烟病毒标样７２２个。结果表明，烟草普通花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）、马铃薯病毒Ｙ（ＰＶＹ）是晒烟上的３种主要病毒。在不同年份或同一年份的不同时期，这３种病毒发生的比例各不相同。重病年以蚜传的ＣＭＶ、ＰＶＹ为主。烟草病毒病流行与否与２、３月的气温及雨日关系密切。调查了该地区的毒源植物，提出了以治蚜避蚜、提高烟株抗病力为中心的综合防治措施，取得了明显的防治效果。

关键词：晒烟病毒种类发生规律防治

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中国植物病毒种类

植物检疫 1984年第1期 13-28+62页

作者：张成良胡伟贞张作芳宋淑敏陈京王洋由雪娟赵瑞生

1928—1983年公开发表的植物病毒调查研究论文和全国、部分省、市、自治区植物病理学会及有关专业学术讨论会论文、摘要资料表明:到目前为止,已报道的我国植物病毒79种,类病毒4种,类立克次氏体(RLO)1种,类菌原体(MLO)所致病害18种。79... 详细信息

1928—1983年公开发表的植物病毒调查研究论文和全国、部分省、市、自治区植物病理学会及有关专业学术讨论会论文、摘要资料表明:到目前为止,已报道的我国植物病毒79种,类病毒4种,类立克次氏体(RLO)1种,类菌原体(MLO)所致病害18种。79种病毒中只有30种是经过生物学、电镜观察形态、制备了抗血清并进行血清学鉴定工作的,仅占已报道病毒的37.9%,其余49种病毒只是作了生物鉴定和电镜观察。此79种病毒中有45种属于16个病毒组,另34种属于尚未列入分类组群的病毒。

关键词：病原形态病毒粒体作物症状特点中华人民共和国病毒种类