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番茄和辣椒种子携带的病毒种类及其传毒特征

番茄和辣椒种子携带的病毒种类及其传毒特征

学位级别：硕士

番茄和辣椒是全球蔬菜的大宗作物种类,近年来受病毒病危害严重。随着温室和大棚等设施栽培的普及,病毒病发生为害日益严重。新发病区在没有初侵染源和媒介昆虫的情况下病毒来源不明,而旧发病区苗期和早期发病导致中后期病害爆发流行、... 详细信息

番茄和辣椒是全球蔬菜的大宗作物种类,近年来受病毒病危害严重。随着温室和大棚等设施栽培的普及,病毒病发生为害日益严重。新发病区在没有初侵染源和媒介昆虫的情况下病毒来源不明,而旧发病区苗期和早期发病导致中后期病害爆发流行、新的病毒种类从何而来等问题突出,从病毒病害发生特点推测种子携带病毒传播的可能性较大。针对上述问题,本研究采用酶联免疫吸附测定(ELISA)、病毒分类相关基因的多聚酶链式反应(PCR)扩增、克隆和测序分析,以及透射电子显微镜制样观察等技术,对新发病区(西藏自治区昌都市卡若区)和旧发病区(云南省楚雄州元谋县)温室、大棚和露地栽培的番茄和辣椒病果实种子、部分市售商品种子以及携带病毒种子在隔离条件下种植的苗期和开花期带毒率和发病率开展调查和检测,得到以下研究结果。1.番茄和辣椒种子携带的主要病毒种类:采用番茄和辣椒常见的17种病毒单克隆抗体进行双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)检测,在新发病区番茄病果实种子中检测到朱顶红褪绿环斑病毒(HCRV)、番茄环纹斑点病毒(TZSV)、番茄斑萎病毒(TSWV)、齿兰环斑病毒(ORSV)、马铃薯A病毒(PVA)、马铃薯S病毒(PVS)、芜菁花叶病毒(Tu MV)、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)7种病毒。在旧发病区番茄病果实种子中检测到黄瓜花叶病毒(CMV)、HCRV、TZSV、马铃薯Y病毒(PVY)、PVA、烟草花叶病毒(TMV)、番茄花叶病毒(To MV)、Tu MV、番茄黄化曲叶病毒(TYLCV)9种病毒。新发病区辣椒病果实种子中检测到黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)、CMV、TZSV、TSWV、PVY、TMV、烟草环斑病毒(TRSV)、Tu MV、小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)、TYLCV等10种病毒。旧发病区辣椒病果实种子中检测到CGMMV、CMV、HCRV、TZSV、ORSV、PVA、TYLCV 7种病毒。电镜和RT-PCR扩增克隆测序分析验证:对病果实种子进行超薄切片制样透射电子显微镜观察,新发病区番茄和辣椒种胚细胞中仅发现正番茄斑萎病毒属(Orthotospovirus)病毒粒体,应用该属简并引物进行RT-PCR检测和N基因扩增克隆和测序分析,显示种胚细胞中携带TSWV,旧发病区的番茄和辣椒种胚细胞中仅发现Orthotospovirus病毒粒体,N基因扩增克隆和测序分析,显示种胚细胞中携带TZSV和辣椒黄化环斑病毒(CYRSV)。2.市售商品种子携带的病毒种类:对元谋县市售的番茄和辣椒商品种子采用常见的10种病毒单克隆抗体夹心DAS-ELISA检测。番茄4个品种的种子中,品种1检测到PVY、TSWV、TZSV、TYLCV 4种病毒。品种2检测到PVY、PVA、TSWV、TMV 4种病毒。品种3检测到TSWV、TMV、TYLCV3种病毒。品种4检测到PVY、TSWV、TZSV、TMV4种病毒。3个辣椒品种的种子中,品种1检测到PVY、PVA、TSWV、TMV 4种病毒。品种2检测到PVA、TYLCV2种病毒。品种3检测到PVA、TSWV、TZSV、TMV、TYLCV 4种病毒。因品种不同,病毒种类与带毒率具有明显的差异。3.番茄和辣椒种子携带病毒的传播特征:对携带病毒的种子进行隔离播种种植,采用RT-PCR检测。番茄种子携带TZSV和CYRSV(带毒率分别为17%和37%),苗期TZSV和CYRSV的带毒率分别为27%和40%,开花期TZSV和CYRSV带毒率分别为33%和47%;辣椒种子携带TSWV和CYRSV(带毒率分别为37%和33%),苗期TSWV和CYRSV带毒率分别为40%和33%,开花期TSWV和CYRSV带毒率分别为57%和40%。表明TSWV、TZSV和CYRSV可以通过带毒种子传播,且苗期和开花期的带毒率均高于种子带毒率,而开花期又高于苗期,病毒通过种子传播具有较长的潜伏期。上述研究结果表明,不同方法检测番茄和辣椒病果实种子的病毒种类有差异,可能有的病毒为种子表面携带引起。新发病区番茄和辣椒的病毒病由种子携带病毒形成初侵染源并引起发病。旧发病区番茄和辣椒的病毒病由多途径传播,带病毒种子也是重要的传播途径,是苗期和早期发病的主要原因。其中,TSWV、TZSV和CYRSV在番茄和辣椒种胚细胞中的分布是本研究首次发现,对于种子质量检测与源头防控上述病毒引起的病害具有重要的应用价值。

关键词：番茄辣椒种子携带病毒种类传播特征

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广西甘薯病毒病的病原病毒种类检测

基因组学与应用生物学 2016年第5期35卷 1213-1218页

作者：黄利利 Pham Binhdan 何芳练刘奕君刘义明陈保善廖咏梅广西大学农学院南宁530005 广西防城港市农业技术推广中心防城港538001 广西大学亚热带生物资源保护与利用国家重点实验室南宁530005

甘薯病毒病是广西甘薯的主要病害之一。为明确为害广西甘薯的病毒种类,到广西南宁、玉林、崇左、北海、宜州和桂林等市的甘薯种植区采集疑似甘薯病毒病样品,共采集到127个甘薯样品,用为害甘薯的12种病毒的引物,通过RT-PCR或PCR技术检测... 详细信息

甘薯病毒病是广西甘薯的主要病害之一。为明确为害广西甘薯的病毒种类,到广西南宁、玉林、崇左、北海、宜州和桂林等市的甘薯种植区采集疑似甘薯病毒病样品,共采集到127个甘薯样品,用为害甘薯的12种病毒的引物,通过RT-PCR或PCR技术检测,并对扩增产物进行测序和所获序列的Blast分析。结果表明:为害广西甘薯的病毒种类有11种,包括10种RNA病毒:甘薯羽状斑驳病毒(sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)、甘薯G病毒(sweet potato virus G,SPVG)、甘薯褪绿矮化病毒(sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)、甘薯轻型斑点病毒(sweet potato mild speckling virus,SPMSV)、甘薯C病毒(sweet potato virus C,SPVC)、黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、甘薯褪绿斑病毒(sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)、甘薯脉花叶病毒(sweet potato vein mosaic virus,SPVMV)、甘薯潜隐病毒(sweet potato latent virus,SPLV)、甘薯轻型斑驳病毒(sweet potato mild mottle virus,SPMMV),1种DNA病毒:甘薯卷叶病毒(sweet potato leaf curl virus,SPLCV)。在127份甘薯样品中,有48个样品检测到SPFMV,占37.79%;31个样品检测到SPVG,占24.40%;29个样本检测到SPLCV,占22.83%;27个样本检测到SPCSV,占21.30%,其他被检测到的甘薯病毒占20.00%之下。检测到病毒的88个样品中,有40个样品仅检测到一种病毒,即SPFMV、SPVG、SPCSV、SPMSV、CMV、SPLCV单独侵染。48个样品为2种或2种以上的病毒复合侵染。病毒复合侵染时,甘薯症状表现复杂,有矮化、花叶、皱缩、叶脉突起等症状。其中,检测到SPCSV的甘薯植株,表现出严重的矮化症状。

关键词：甘薯病毒病病毒种类检测

上饶早梨主栽品种病毒种类分析及其茎尖脱毒技术效率比较

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浙江农业学报 2017年第1期29卷 89-100页

作者：尹明华周宇瑶杨星鹏徐玉琴刘郑英舒荣建魏志敏夏华炎洪森荣上饶师范学院生命科学学院江西上饶334001 北京中医药大学人文学院北京100029

对上饶早梨3个主栽品种的病毒种类进行分析,并对其不同茎尖脱毒技术的效率进行比较。结果表明,花厅六月雪和田墩六月雪没有检测到苹果茎痘病毒(ASPV),花厅黄皮消检测到ASPV,田墩六月雪、花厅六月雪和花厅黄皮消均检测到苹果茎沟病毒(AS... 详细信息

对上饶早梨3个主栽品种的病毒种类进行分析,并对其不同茎尖脱毒技术的效率进行比较。结果表明,花厅六月雪和田墩六月雪没有检测到苹果茎痘病毒(ASPV),花厅黄皮消检测到ASPV,田墩六月雪、花厅六月雪和花厅黄皮消均检测到苹果茎沟病毒(ASGV)和苹果锈果类病毒(ASSVd),但均未检测到苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果花叶病毒(Ap MV)。对于上饶早梨3个主栽品种来说,超低温疗法的脱毒效率显著高于常规茎尖培养,在3种超低温疗法脱毒技术中,包埋玻璃化法超低温疗法的脱毒效率最高。SSR荧光标记毛细管电泳检测表明,常规茎尖培养和3种超低温疗法脱毒技术均能保证上饶早梨3个主栽品种的遗传稳定性。该研究有助于上饶早梨种苗病毒病害的检测鉴定和实时监控检疫,同时也可为建立上饶早梨种质资源超低温库和生产无毒苗提供一定的技术支撑。

关键词：上饶早梨主栽品种病毒种类茎尖超低温疗法脱毒

广西西瓜甜瓜病毒种类及主要病毒遗传多样性研究

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广西西瓜甜瓜病毒种类及主要病毒遗传多样性研究

作者：杨世安广西大学

学位级别：硕士

病毒病害是西瓜和甜瓜的一类重要病害,本研究通过血清学和分子生物学方法对广西西甜瓜病毒种类进行检测鉴定,并对3种主要病毒进行了序列测定和遗传多样性分析,建立同步检测3种病毒方法,为进一步探明病毒病发生流行规律和提高防控水平奠... 详细信息

病毒病害是西瓜和甜瓜的一类重要病害,本研究通过血清学和分子生物学方法对广西西甜瓜病毒种类进行检测鉴定,并对3种主要病毒进行了序列测定和遗传多样性分析,建立同步检测3种病毒方法,为进一步探明病毒病发生流行规律和提高防控水平奠定基础。研究结果显示,广西西瓜上至少有7种病毒,分别是:黄瓜花叶病毒(CMV)、烟草花叶病毒(TMV)、西瓜花叶病毒(WMV)、南瓜花叶病毒(SqMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)、小西葫芦黄化花叶病毒(ZYMV)、番木瓜环斑病毒(PRSV),其中优势病毒是ZYMV和PRSV,在检出病毒中所占比例分别为41.9%、22.8%;甜瓜上至少有9种病毒,即CMV、TMV、WWV、CGMMV、ZYMV、PRSV以及瓜类褪绿黄化病毒(CCYV)、甜瓜黄斑病毒(MYSV)和甜瓜坏死斑点病毒(MNSV)。ZYMV是露地薄皮甜瓜检出率(18.3%)最高的病毒。CCYV和MYSV是大棚甜瓜上的主要病毒,检出率分别为43.1%、40.5%。广西甜瓜上首次检测发现瓜类坏死斑点病毒(MNSV)。统计发现西瓜上有7种复合侵染类型,甜瓜上有9种复合侵染类型。对3种主要RNA病毒基因组进行序列测定与分析发现:CCYV广西分离物基因组序列与GenBank已登录RNA1核苷酸序列同源性高达99.5%-100%,RNA2核苷酸序列同源性高达99.6%-100%;基于全长序列及CP基因系统进化树分析表明,CCYV各分离物聚在一个分支上;MYSV广西分离物SRNA近全长核苷酸序列与GenBank已登录序列同源性高达94.9%-99.8%。基于S RNA全长核苷酸序列和N基因系统进化树分析表明,MYSV中国大陆分离物聚在一支,与西班牙酸浆分离物亲缘关系较近。MNSV广西分离物近全长核苷酸序列与GenBank已登录序列同源性74.4%-93.8%,各开放阅读框氨基酸序列同源性高达93.0%-100%(除日本两个西瓜分离物)。比对分析发现3’UTR包含一段与瓜类蚜传黄化病毒(CABYV)3’UTR相似性达90%的序列,其功能与分离物MNSV-N是否一致有待研究。系统进化树分析MNSV广西分离物单独成一支,亲缘关系与欧美分离物组最近。本研究还建立了 3种主要病毒(CCYV、MYSV和MNSV)一步多重RT-PCR检测方法,为开展病害流行规律和复合侵染研究提供了更加经济便捷的方法。

关键词：西瓜甜瓜病毒种类遗传多样性

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陕西省烟草主要病毒病种类及植物带毒的检测

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2013年第1期41卷 78-84页

作者：李金岭罗晶牛小义成巨龙陈德鑫安德荣西北农林科技大学植物保护学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 陕西省烟草研究所陕西西安710000 中国烟草总公司青州烟草研究所山东青岛266001

【目的】明确陕西省烟区烟草主要病毒病种类及烟田周围携带病毒植物的种类及带毒情况。【方法】采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),对从安康、宝鸡、商洛、延安、咸阳、汉中和铜川烟区采集感染病毒病的167... 详细信息

【目的】明确陕西省烟区烟草主要病毒病种类及烟田周围携带病毒植物的种类及带毒情况。【方法】采用酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),对从安康、宝鸡、商洛、延安、咸阳、汉中和铜川烟区采集感染病毒病的167个烟草样品以及烟田周边7科23种植物的279个植物样品进行了检测。【结果】从感染病毒烟草样品中检测到烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus,TEV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV)5种病毒。其中CMV的侵染最普遍,总检出率达74.34%;PVY、TMV、TEV、TVBMV的总检出率分别为58.16%,47.29%,21.59%和18.87%。在156个烟草阳性样品中,有28个样品受CMV、TMV、PVY或TVBMV单独侵染,其检出率分别为4.78%,10.09%,1.66%和1.18%,未检测出TEV单独侵染;其余样品均受2种以上病毒复合侵染,总检出率为82.05%。烟田周边279个植物样品中,176个植物样品被检测出携带有包括TMV、CMV和PVY等在内的烟草病毒,病毒检出率占63.08%。毒源植物样品中病毒检出率最高的植物为刺儿菜,其病毒检出率高达92.86%,其次为番茄、茄子、辣椒、蚕豆,其病毒检出率分别为90.91%,87.50%,86.67和78.57%。【结论】CMV取代TMV和TEV已成为当前陕西烟区的优势毒种,PVY检出率在部分烟区有明显上升的趋势。田间烟草病毒复合侵染现象严重,值得高度重视。烟田周围植物是烟草病毒病防治的重要考虑因素。

关键词：烟草病毒种类毒源植物酶联免疫吸附法陕西省

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重庆秋番茄的病毒种类及分布

重庆秋番茄的病毒种类及分布

中国园艺学会2018年学术年会

作者：汝学娟罗佳郑阳潘光辉重庆市农业科学院

为了解重庆秋番茄病毒病的发生情况,利用特异引物采用PCR法检测重庆6个区县的秋番茄样品,共检测出13种病毒,黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、南方番茄病毒(Southern tomato virus,STV)、番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf ... 详细信息

为了解重庆秋番茄病毒病的发生情况,利用特异引物采用PCR法检测重庆6个区县的秋番茄样品,共检测出13种病毒,黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、南方番茄病毒(Southern tomato virus,STV)、番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curl virus,TYLCV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVH)、番茄环纹斑

关键词：番茄重庆秋季病毒种类分布

来源： cnki会议评论

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我国玉米病毒病的种类和病毒鉴定技术

玉米科学 2010年第6期18卷 127-132页

作者：张爱红陈丹田兰芝邸垫平路银贵苗洪芹河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心河北保定071000

世界上已报道的玉米病毒病有40余种,我国发生并已报道的有5种,分别为玉米粗缩病、玉米矮花叶病、玉米条纹矮缩病、玉米红叶病和玉米鼠耳病。概述了我国发生的5种玉米病毒病的发生概况、分布、危害以及病毒鉴定技术。

关键词：玉米病毒病病毒种类鉴定技术

妊娠期子宫体检感染病毒种类、HR-HPV载量及预后评估

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海南医学 2020年第14期31卷 1840-1843页

作者：库瑛饶亦良胡蝶万桃香武穴市第一人民医院妇产科湖北武穴435400

目的探讨妊娠期妇女子宫体检感染病毒种类、高危型人乳头病毒(HR-HPV)载量及预后情况,为其临床诊疗提供参考。方法选取2017年6月至2019年6月在武穴市第一人民医院妇产科进行子宫体检的218例妊娠期妇女为研究对象。根据第二代杂交捕获法(... 详细信息

目的探讨妊娠期妇女子宫体检感染病毒种类、高危型人乳头病毒(HR-HPV)载量及预后情况,为其临床诊疗提供参考。方法选取2017年6月至2019年6月在武穴市第一人民医院妇产科进行子宫体检的218例妊娠期妇女为研究对象。根据第二代杂交捕获法(HC-2)检测结果,将所有妇女分为正常组(31例)、低度鳞状上皮内瘤变(LSIL)组(58例)、高度鳞状上皮内瘤变(HSIL)组(84例)和宫颈癌组(45例)。比较四组妊娠期妇女HR-HPV感染种类、载量及其预后情况。结果正常组妊娠期妇女的感染类型主要为HPV-31、HPV-33、HPV-35,LSIL组、HSIL组和宫颈癌组妊娠期妇女的感染类型主要为HPV-16、HPV-18;LSIL组、HSIL组和宫颈癌组妊娠期妇女的单一感染率和多重感染率明显高于正常组,且宫颈癌组的单一感染率明显高于LSIL组、HSIL组,HSIL组的单一感染率明显高于LSIL组,宫颈癌组的多重感染率明显高于LSIL组,差异均有统计学意义(P种类及载量越多;且HR-HPV感染率及载量越高,其预后情况越差,检测妊娠期妇女HR-HPV感染种类及载量对其早期诊断、治疗及预后具有重要意义。

关键词：妊娠期高危型人乳头病毒宫颈上皮内瘤变宫颈癌病毒种类病毒载量预后

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为害广东冬种马铃薯主要病毒种类的初步鉴定

为害广东冬种马铃薯主要病毒种类的初步鉴定