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新型亚甲蓝病毒灭活套材对血浆成分的质量影响

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中国输血杂志 2015年第8期28卷 876-878页

作者：莫琴黄宇闻张博伍晓菲贾尧王迅钱开诚上海市血液中心上海200051

目的观察使用新型亚甲蓝病毒灭活套材对血浆组分质量指标的影响。方法随机领取100m L/U的新鲜冰冻血浆50U,连接至亚甲蓝病毒灭活套材,溶解内置的冻干亚甲蓝,置病毒灭活箱内照射,照射结束后,通过亚甲蓝白细胞滤器滤除亚甲蓝。分别于照射... 详细信息

目的观察使用新型亚甲蓝病毒灭活套材对血浆组分质量指标的影响。方法随机领取100m L/U的新鲜冰冻血浆50U,连接至亚甲蓝病毒灭活套材,溶解内置的冻干亚甲蓝,置病毒灭活箱内照射,照射结束后,通过亚甲蓝白细胞滤器滤除亚甲蓝。分别于照射前、照射后及过滤后留取样品,置-20℃冰箱保存。检测各样品FⅤ、FⅧ、FⅨ、FⅪ、FⅫ、FIB-C、AT、VWF-Ag、VWF-Rco、F1+2、C3a、C5a、IL-6及IL-8的含量。结果经病毒灭活处理后血浆凝血因子Ⅴ∶C、Ⅷ∶C、Ⅸ∶C、Ⅺ∶C、Ⅻ∶C、FIB-C、VWF-Rco的回收率分别为81.70%、71.55%、81.69%、87.78%、90.93%、71.82%和85.05,AT和VWF-Ag的含量未受影响。F1+2、C3a、C5a、Il-6和IL-8分别下降了9.03%、3.25%、19.01%、20.37%、14.55%。结论使用新型亚甲蓝病毒灭活套材处理后,血浆凝血因子及其他血浆组分影响在可接受范围内,符合国家全血及成分血质量要求以及临床安全输血的需求。

关键词：亚甲蓝病毒灭活凝血因子输血

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动物心包组织病毒灭活工艺及其性能表征

动物心包组织病毒灭活工艺及其性能表征

作者：宋海辉浙江大学

学位级别：硕士

动物源生物材料广泛应用于医疗器械行业,该生物材料来源于野外或饲养动物,经常携带大量病原体,病原体经动物源生物材料制备的医疗器械传播给患者,给患者带来不可预见的风险。近年,国内生物瓣膜上市品种比较丰富,生物瓣膜主要部件为动物... 详细信息

动物源生物材料广泛应用于医疗器械行业,该生物材料来源于野外或饲养动物,经常携带大量病原体,病原体经动物源生物材料制备的医疗器械传播给患者,给患者带来不可预见的风险。近年,国内生物瓣膜上市品种比较丰富,生物瓣膜主要部件为动物心包组织,心包组织前期需经病毒灭活处理。病毒灭活工艺主要采用甲醛、戊二醛浸泡,化学浸泡浓度高,使用时需要清洗,化学残留不确定,储存、使用不方便。本论文针对动物心包组织材料,通过低浓度甲醛原花青素病毒灭活,钴60辐照,彻底清洗化学残留,方便动物源生物材料保存。主要结论如下:（1）通过不同浓度的甲醛原花青素处理动物源生物材料,发现心包组织的病毒滴度量均显著下降。基于《动物源性医疗器械注册技术审查指导原则》等要求,选取猪心包和牛心包作为动物源生物材料进行病毒灭活研究,选择具有代表性的脑心肌炎病毒EMCV（非脂包膜RNA）、猪细小病毒PPV（非脂包膜DNA）、伪狂犬病毒PRV（脂包膜DNA）、疱疹性口炎病毒VSV（脂包膜RNA）为指示病毒。采用不同浓度的甲醛原花青素（0.1%、0.2%、0.4%）分别处理样品12、24和36小时。发现,心包组织经0.1%甲醛原花青素处理36小时后,心包组织中的PRV、VSV、EMCV、PPV病毒滴度量均下降了4.01ogs以上;经0.2%甲醛原花青素处理24小时,心包组织中的PRV、VSV、EMCV、PPV病毒滴度量均下降4.0logs以上。（2）通过不同剂量钴60进一步辐照心包组织,心包组织的病毒滴度进一步下降。在甲醛原花青素处理的基础上,继续采用不同剂量的钴60（12～18KGy、18～25KGy、25～30KGy）辐照处理。当钴60辐照剂量为25～30KGy,心包组织中的PRV、VSV、EMCV、PPV病毒滴度量均下降4.91ogs以上。（3）通过对甲醛原花青素和钴60辐照处理的心包组织进行甲醛残留和生物学测试,发现甲醛残留、细胞毒性、溶血率、皮肤刺激试验和皮肤致敏试验均在可接受范围。采用0.1%甲醛原花青素处理猪、牛心包组织36小时,再经25～30 KGy钴60辐照处理;或采用0.2%甲醛原花青素处理猪、牛心包组织24小时,再经25～30KGy钴60辐照处理,游离甲醛残留分别为36.6±4.6、36.1±1.5、35.5±0.9、52.5±0.8;细胞毒性分别为:77.8%、76.5%、74.6%、77.2%、;溶血率分别为:3.1%、2.2%、4.6%、4.8%;无皮肤刺激反应和皮肤致敏反应。结论:采用0.1%甲醛原花青素处理猪、牛心包组织36小时,再经25～30 KGy钴60辐照处理,或采用0.2%甲醛原花青素处理猪、牛心包组织24小时,再经25～30KGy钴60辐照处理,这种方法均是灭活心包组织中PRV、EMCV、VSV、PPV病毒的有效工艺,同时,处理过的心包组织仍能满足生物医用材料的要求。

关键词：心包甲醛-原花青素钴60辐照病毒灭活

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血浆病毒灭活后质量回顾性分析

重庆医学 2010年第15期39卷 2043-2044页

作者：王飞卢舜华叶小演王桂萍古醒辉深圳市血液中心 518035

目的观察新鲜冰冻血浆在亚甲基蓝光化学法病毒灭活后总蛋白、Ⅷ因子和纤维蛋白原含量变化。方法统计2006年3月至2007年2月随机抽检的48份新鲜冰冻血浆和2007年3月至2008年2月抽检的48份病毒灭活滤白新鲜冰冻血浆,经37℃水浴融化后测定... 详细信息

目的观察新鲜冰冻血浆在亚甲基蓝光化学法病毒灭活后总蛋白、Ⅷ因子和纤维蛋白原含量变化。方法统计2006年3月至2007年2月随机抽检的48份新鲜冰冻血浆和2007年3月至2008年2月抽检的48份病毒灭活滤白新鲜冰冻血浆,经37℃水浴融化后测定总蛋白、Ⅷ因子及纤维蛋白原含量,进行统计分析。结果新鲜冰冻血浆经过亚甲基蓝光化学法病毒灭活后Ⅷ因子、纤维蛋白原含量明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论血浆经亚甲基蓝光化学法病毒灭活处理能够提高输血安全性,同时部分血浆成分含量有一定下降。

关键词：亚甲基蓝病毒灭活血浆蛋白凝血因子

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氯溴异氰尿酸对轮状病毒灭活效果初探

中国消毒学杂志 1995年第1期12卷 32-35页

作者：丁丽吴伟李显方煜平李慧南京铁道医学院流行病教研室江苏省卫生防疫站

以酶标法、反向被动血凝法与电镜法对氯溴异氰尿酸灭活轮状病毒的效果进行了检测。经有效成分浓度为８００ｍｇ／Ｌ的氯溴异氰尿酸溶液作用５分钟（２５℃），以酶标法测得Ｐ／Ｎ值为１．５０，血凝法测得作用２０分钟时的灭活率为９８... 详细信息

以酶标法、反向被动血凝法与电镜法对氯溴异氰尿酸灭活轮状病毒的效果进行了检测。经有效成分浓度为８００ｍｇ／Ｌ的氯溴异氰尿酸溶液作用５分钟（２５℃），以酶标法测得Ｐ／Ｎ值为１．５０，血凝法测得作用２０分钟时的灭活率为９８．５２％，电镜下见不到完整的轮状病毒及其残片。

关键词：病毒灭活轮状病毒氯溴异氰尿酸

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噻唑橙光化学法对血浆中病毒灭活作用的研究

中国输血杂志 2011年第12期24卷 1040-1043页

作者：朱家明杨玲玲王卓妍任芙蓉北京市红十字血液中心北京100088

目的探讨噻唑橙(TO)光化学法对血浆中伪狂犬病毒(PRV)和Sindbis病毒的灭活效果。方法配制TO-血浆溶液并测量其吸收光谱,制作照射光源;以PRV和Sindbis病毒为指示病毒,加入血浆以模拟病毒污染血浆;测量病毒灭活动力学曲线;做TO浓度(C)、... 详细信息

目的探讨噻唑橙(TO)光化学法对血浆中伪狂犬病毒(PRV)和Sindbis病毒的灭活效果。方法配制TO-血浆溶液并测量其吸收光谱,制作照射光源;以PRV和Sindbis病毒为指示病毒,加入血浆以模拟病毒污染血浆;测量病毒灭活动力学曲线;做TO浓度(C)、光照强度(C)、光照时间(T)三因素三水平正交试验(n=4)以确定最优灭活条件;验证最优条件下裸照、血袋充氧前后的病毒灭活效果。结果 TO-血浆最大吸收峰位于476 nm处;病毒灭活动力学曲线显示:在TO 60μmol/L、光强1.06E-01 ***-1条件下,时间5 min,即可将血浆中绝大多数病毒灭活,此后进入平台期;正交试验显示:血浆中PRV及Sindbis病毒最优灭活条件均为:I=1.33E-01 ***-1,T=20 min,C=80μmol/L。在此条件下,灭活效果为裸照PRV≥6.13 LogTCID50(n=8),Sindbis病毒为(5.86±0.29)LogTCID50(n=8);血袋PRV(5.66±0.29)LogTCID50(n=4),Sindbis病毒(3.88±0.25)LogTCID50(n=4);充氧血袋PRV(6.32±0.55)LogTCID50(n=4),Sindbis病毒(6.00±0.35)LogTCID50(n=4)。结论 TO光化学法可有效灭活血浆中病毒,氧含量的增加可以提高病毒灭活的效果。

关键词：噻唑橙光化学法病毒灭活伪狂犬病毒辛德毕斯病毒

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亚甲蓝光化学法病毒灭活对血浆质量的影响

中国输血杂志 2011年第6期24卷 490-492页

作者：陈镇周肖明星陈湘屏陆伟荣潮州市中心血站广东潮州521000

目的探讨亚甲蓝光化学法(methylene blue photochemistry,MB-P)病毒灭活对不同规格血浆质量的影响,为临床应用病毒灭活血浆提供参考依据。方法测定90份血浆(包含25份100 ml/袋和10份50 ml/袋)病毒灭活前、后的Fib、Ⅴ因子、Ⅷ因子和总... 详细信息

目的探讨亚甲蓝光化学法(methylene blue photochemistry,MB-P)病毒灭活对不同规格血浆质量的影响,为临床应用病毒灭活血浆提供参考依据。方法测定90份血浆(包含25份100 ml/袋和10份50 ml/袋)病毒灭活前、后的Fib、Ⅴ因子、Ⅷ因子和总蛋白含量,PT、APTT的变化情况;同时测定20份病毒灭活血浆(包含10份150 ml/袋和10份200 ml/袋)的有效Fib、Ⅴ因子、Ⅷ因子和总蛋白含量;PT、APTT的变化情况。结果 Fib、Ⅴ因子、Ⅷ因子和APTT灭活前后差异比较:t值分别为10.30、14.09、12.15、5.00,P病毒灭活血浆除Fib和Ⅷ因子有差异(大规格优于小规格)。结论经MB-P病毒灭活的血浆,提高输血安全的同时也造成有效成分一定程度的损失,在临床应用时应在原来的剂量基础上增加约20%的用量,同等输注量尽量减少使用的血浆袋数,有利于达到预期效果,也可减少输血不良反应的发生。

关键词：亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆有效成分

尿胰蛋白酶抑制剂生产中病毒灭活工艺的效果观察

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中国生化药物杂志 2009年第6期30卷 407-409页

作者：周锡鹏马平闫舫许金波军事医学科学院野战输血研究所北京100850

目的验证尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)生产工艺中采用的60℃水浴10 h和乙醇处理3 h的病毒灭活效果。方法将Sindbis病毒、伪狂犬病毒(PRV)和脊髓灰质炎病毒(PV1)3种指示病毒分别加入不同的UTI原料样品中,进行60℃水浴10 h和乙醇处理3 h,处理不... 详细信息

目的验证尿胰蛋白酶抑制剂(UTI)生产工艺中采用的60℃水浴10 h和乙醇处理3 h的病毒灭活效果。方法将Sindbis病毒、伪狂犬病毒(PRV)和脊髓灰质炎病毒(PV1)3种指示病毒分别加入不同的UTI原料样品中,进行60℃水浴10 h和乙醇处理3 h,处理不同时间后分别取样,用微量细胞病变法检测不同时间段样品中的病毒残留滴度。结果60℃水浴10 h可灭活(6.503±0.102)LgTCID50/mL的Sindbis病毒,灭活(6.42±0.158)LgTCID50/mL的PRV以及(6.587±0.061)LgTCID50/mL的PV1。乙醇处理3 h后可灭活(5.88±0.204)LgTCID50/mL的Sindbis病毒,灭活(6.378±0.268)LgTCID50/mL的PRV以及(5.963±0.118)LgTCID50/mL的PV1。经两种方法处理后的样品加入细胞经3代盲传均未见细胞病变(CPE)出现。结论UTI生产工艺中采用的60℃水浴10 h和乙醇处理3 h均可灭活所验证的3种指示病毒,灭活效果>6.0 LgTCID50/mL。

关键词：病毒灭活尿胰蛋白酶抑制剂 60℃水浴乙醇

1年保存期内病毒灭活新鲜血浆中凝血因子的质量调查

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中国输血杂志 2012年第12期25卷 1288-1291页

作者：柏则蓉葛健民梁启忠李长清杨春晖边国慧盐城市中心血站江苏盐城224005 中国医学科学院北京协和医学院输血研究所

目的探讨亚甲蓝光化学法(MB-P)灭活处理新鲜血浆后对1年保存期内部分凝血因子活性的影响。方法随机抽取30(人)份全血(400 ml/份),按照标准操作规程将每份制备成新鲜血浆和病毒灭活新鲜血浆(100ml/份),分成未灭活组和灭活组,分别检测保... 详细信息

目的探讨亚甲蓝光化学法(MB-P)灭活处理新鲜血浆后对1年保存期内部分凝血因子活性的影响。方法随机抽取30(人)份全血(400 ml/份),按照标准操作规程将每份制备成新鲜血浆和病毒灭活新鲜血浆(100ml/份),分成未灭活组和灭活组,分别检测保存0(制备期灭活组相比,灭活组除FⅦ∶C含量无明显变化外,其他6种凝血因子含量在保存期内均明显下降(尤其FⅧ∶C和Fg下降最为明显);0、6、8、10、12个月保存时间的FⅧ∶C含量(%)分别为灭活前58.7±20.1、59.6±34.0、52.0±35.3、57.5±34.7、54.1±31.2和灭活后45.8±13.9、49.3±23.5、44.6±21.7、49.7±22.9、43.9±20.7(均为P灭活前225.3±72.3、277.9±64.2、272.3±74.9、262.6±70.8、287.55±83.0)和灭活后188.8±54.7、205.8±54.0、205.8±54.0、220.2±66.7、202.2±56.8(均为P病毒灭活处理后,1年冰冻保存期内起7种凝血因子含量相对稳定;MB-P对凝血因子活性造成了一定损伤(尤其是Fg和FⅧ∶C),但除FⅧ∶C外,其他凝血因子含量在可接受的范围内。

关键词：病毒灭活亚甲蓝光化学新鲜血浆血浆保存凝血因子

核黄素光化学法病毒灭活对新鲜血浆活性影响的探讨

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中国输血杂志 2016年第9期29卷 918-919页

作者：高志峰胡丽华陈凤花华中科技大学同济医学院附属协和医院输血科湖北武汉430022

目的探讨核黄素光化学法病毒灭活对新鲜血浆活性的影响,为临床合理应用病毒灭活血浆提供理论参考依据。方法收集血液中心提供的健康献血者新鲜血浆样本100份。以核黄素光化学法对100份新鲜血浆进行病毒灭活,分别检测100份血浆样本在病... 详细信息

目的探讨核黄素光化学法病毒灭活对新鲜血浆活性的影响,为临床合理应用病毒灭活血浆提供理论参考依据。方法收集血液中心提供的健康献血者新鲜血浆样本100份。以核黄素光化学法对100份新鲜血浆进行病毒灭活,分别检测100份血浆样本在病毒灭活处理前后的APTT、FIB、总蛋白(Tg)和FⅧ含量。将数据进行对比分析。结果新鲜血浆在核黄素光化学法病毒灭活后与未作病毒灭活处理相比较,APTT时间延长14.93s,差异有统计学意义(P0.05);FⅧ含量减少0.26 IU/m L,差异有统计学意义(P病毒灭活在灭活病毒、提高输血安全的同时导致血浆中活性成分有一定程度降低,临床上在应用灭活血浆时应注意适当增加血浆用量以提高血浆输注疗效。

关键词：核黄素光化学法病毒灭活血浆疗效