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乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度单瓶平行检测与多瓶混样检测的对比分析

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国际生物制品学杂志 2021年第2期44卷 87-92页

作者：彭维罗静廖海棠马玉晓刘晓华曾兰义罗明杰吕冰凌刘菊成都生物制品研究所有限责任公司质量检定室 610023 成都生物制品研究所有限责任公司质量保证部 610023

目的比较乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度单瓶平行检测与多瓶混样检测之间的差异性,为进一步完善中国药典中相关技术要求奠定基础。方法1人份和5人份乙型脑炎减毒活疫苗各抽取20批,同一批次疫苗样品随机取样6瓶,3瓶用于病毒基础滴度检测,3... 详细信息

目的比较乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度单瓶平行检测与多瓶混样检测之间的差异性,为进一步完善中国药典中相关技术要求奠定基础。方法1人份和5人份乙型脑炎减毒活疫苗各抽取20批,同一批次疫苗样品随机取样6瓶,3瓶用于病毒基础滴度检测,3瓶用于病毒热稳定性滴度检测。检测方式分别为3瓶单瓶平行检测与3瓶混样检测:单瓶平行检测是从3个单瓶中取样分别检测,所得结果取几何均值;混样检测是从相同的3瓶疫苗中分别取样至适宜的容器中进行混合,再取样进行病毒滴度检测。对采用单瓶平行检测的几何平均滴度值和混样检测滴度值进行配对t检验,判断两者之间的差异是否存在统计学意义。结果两种滴度检测方式得到的疫苗基础滴度值间的t值为0.72,P值为0.48;热稳定性滴度值间的t值为0.34,P值为0.73。两种检测方式的结果差异无统计学意义。结论单瓶平行检测与多瓶混样检测方式的差异无统计学意义,均可用于乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴度的检测。

关键词：脑炎,日本疫苗,减毒单瓶平行检测多瓶混样检测病毒滴度

2019年国产口服轮状病毒活疫苗质量控制中病毒滴度趋势分析

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微生物学免疫学进展 2021年第5期49卷 35-40页

作者：刘艳王成宝国泰姜宝芹杜加亮高加梅于晴川张永石岩梁争论中国食品药品检定研究院肝炎和肠道病毒疫苗室北京102629 兰州生物制品研究所有限责任公司质量保证部甘肃兰州730046

目的对口服轮状病毒活疫苗(oral rotavirus vaccine, ORV)质量控制中的病毒滴度进行趋势分析。方法利用CCID50+ELISA检测国内企业2019年生产的ORV的关键控制指标(病毒滴度),根据检测结果计算均值,建立警戒限(均值■和行动限(均值■,绘... 详细信息

目的对口服轮状病毒活疫苗(oral rotavirus vaccine, ORV)质量控制中的病毒滴度进行趋势分析。方法利用CCID50+ELISA检测国内企业2019年生产的ORV的关键控制指标(病毒滴度),根据检测结果计算均值,建立警戒限(均值■和行动限(均值■,绘制趋势分析图,进行连续性和周期性趋势分析;并将中国食品药品检定研究院(National Institutes for Food and Drug Control, NIFDC)病毒滴度结果与企业病毒滴度结果进行比较。结果病毒滴度趋势分析显示NIFDC检测结果未见超趋势(out of trend, OOT),企业检测结果有1次连续10批以上结果高于平均值,经偏差调查证实生产、质控和检测环节均未发现异常情况,分析原因可能是其中有多批成品来自同一批原液。2019年度和2018年度比较结果显示年度间具有较好的一致性。NIFDC与企业病毒滴度结果显示均检测结果差异没有统计学意义(P=0.082 7,P>0.05);Bland-Altman法统计显示97%批次的检测结果的差值位于2倍标准差(2s)以内。结论对2019年国产ORV病毒滴度的趋势分析反映出该制品的批间一致性以及生产工艺的稳定性良好。

关键词：轮状病毒疫苗质量控制病毒滴度趋势分析

基于叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应的甲型肝炎疫苗病毒滴度快速检测方法

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中国病毒病杂志 2020年第6期10卷 421-425页

作者：卞莲莲王一平孙世洋高帆吴星毛群颖梁争论中国食品药品检定研究院北京102629

目的建立快速检测甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应(PMA-qRT-PCR)方法。方法比较叠氮溴化丙锭(PMA)浓度、光解时间、孵育温度和时间,以及不同灭活方式、pH值和添加剂预处理对PMA-qRT-PCR法检... 详细信息

目的建立快速检测甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的叠氮溴化丙锭-定量反转录-聚合酶链式反应(PMA-qRT-PCR)方法。方法比较叠氮溴化丙锭(PMA)浓度、光解时间、孵育温度和时间,以及不同灭活方式、pH值和添加剂预处理对PMA-qRT-PCR法检测的影响;进行线性、平行性、灵敏度、重复性、相关性、特异性和初步适用性研究。结果确定最适反应条件为PMA终浓度50μmol/L,4℃避光孵育30 min,光解30 min,病毒液pH值为1.48~7.43。方法学研究结果显示,该方法特异性良好;线性范围为5.0~8.0 lgCCID50/ml,线性和平行性良好;定量下限为5.0 lgCCID50/ml;重复性变异系数(CV)为2.78%~3.58%;与法定方法检测结果具有显著相关性(相关系数R2=0.698)。初步适用性结果显示,4个实验室使用各自细胞系检测同一样品结果差异无统计学意义(P=0.071~0.997);不同企业生产的疫苗在不同细胞系上检测适用性良好。结论建立了甲型肝炎减毒活疫苗感染性病毒滴度的PMA-qRT-PCR方法,为冻干甲型肝炎减毒活疫苗的效力评价提供了快速检测方法。

关键词：甲型肝炎疫苗叠氮溴化丙锭 PMA PMA-qRT-PCR 病毒滴度快速检测疫苗效力疫苗质量控制

重组腺病毒载体pDC316-hIL--24的构建及病毒滴度测定

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分子影像学杂志 2014年第3期37卷 135-139页

作者：李书华陈婷婷刘谕昆李灏陈艺瑛张雅洁广州医科大学广东广州510182

目的构建重组腺病毒载体pDC316-hIL-24,并测定病毒滴度。方法从HEK293细胞中提取mRNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增hIL-24基因全编码区序列。将测序正确的片段用BglⅡ和HindⅢ双酶切定向插入到pDC316-EGFP穿梭质粒中。构建重组穿梭... 详细信息

目的构建重组腺病毒载体pDC316-hIL-24,并测定病毒滴度。方法从HEK293细胞中提取mRNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增hIL-24基因全编码区序列。将测序正确的片段用BglⅡ和HindⅢ双酶切定向插入到pDC316-EGFP穿梭质粒中。构建重组穿梭质粒pDC316-EGFP-hIL-24,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC316-hIL-24,经HEK293细胞扩增,TCID50法测定重组腺病毒滴度。结果成功构建出表达h IL-24基因的重组腺病毒载体(pDC316-hIL-24),获得了高滴度表达hIL-24基因的重组腺病毒。结论重组腺病毒表达载体(pDC315-hIL-24)的成功构建及重组腺病毒的获得有利于进一步开展肿瘤的转基因治疗研究。

关键词： hIL-24 重组腺病毒载体病毒滴度 pDC316-hIL-24

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提高麻疹减毒活疫苗病毒滴度的研究

微生物学免疫学进展 1996年第2期24卷 32-36页

作者：王亲民李根明卫生部兰州生物制品研究所

病毒滴度是麻疹减毒活疫苗的主要质量指标之一。本文结合生产实际，就有关提高麻疹疫苗病毒滴度的影响因素进行了探讨。试验说明，生产用毒种的质量十分重要，要保证麻疹疫苗的高滴度和生产的稳定，需要建立适合麻疹毒种的培养条件并保... 详细信息

病毒滴度是麻疹减毒活疫苗的主要质量指标之一。本文结合生产实际，就有关提高麻疹疫苗病毒滴度的影响因素进行了探讨。试验说明，生产用毒种的质量十分重要，要保证麻疹疫苗的高滴度和生产的稳定，需要建立适合麻疹毒种的培养条件并保持培养条件一致，从而必须加强生产过程的全面质量管理。

关键词：麻疹疫苗病毒滴度质量控制麻疹

RT-RCR产物固相杂交-酶联显色方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

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浙江省医学科学院学报 2004年第2期15卷 1-4页

作者：钱汶陈悦青洪艳唐彩华周康凤庄昉成陈勇浙江省医学科学院病毒病研究所杭州 310013 生物工程研究所

目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶... 详细信息

目的应用RT-PCR-EIJSA方法检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度。方法应用固相杂交一酶联显色方法，将标记有生物素的寡核苷酸引物所扩增的疫苗病毒基因产物，与微孔反应板上的特异性探针进行快速杂交，通过辣根过氧化物酶标记的链亲和素进行酶联显色，读取光密度值(OD值)，判断结果。应用此法检测了11批甲肝活疫苗滴度。并与常规细胞培养法(CCID50)比较。结果证明本方法与细胞培养法(CCID50)的敏感性相仿，具有简便、快速、特异的优点。结论RT-PCR-EIJSA法有望代替常规细胞培养法应用于甲肝减毒活疫苗病毒滴度的检测。

关键词： RT-RCR产物固相杂交-酶联显色检测甲肝减毒活疫苗病毒滴度

细胞面积与风疹单次病毒收获液病毒滴度关系的探讨

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生物过程 2021年第4期11卷 134-139页

作者：解通郑仲李宏强汪立张思远公殿力北京民海生物科技有限公司北京

目的:探讨细胞面积与风疹单次病毒收获液病毒滴度的关系。方法:使用不同细胞面积接种风疹病毒,制备风疹单次病毒收获液,进行病毒滴定。结果:不同细胞面积制备的风疹单次病毒收获液病毒滴度没有差异。结论:在一定范围内,细胞面积与风疹... 详细信息

目的:探讨细胞面积与风疹单次病毒收获液病毒滴度的关系。方法:使用不同细胞面积接种风疹病毒,制备风疹单次病毒收获液,进行病毒滴定。结果:不同细胞面积制备的风疹单次病毒收获液病毒滴度没有差异。结论:在一定范围内,细胞面积与风疹病毒滴度不存在正比关系。

关键词：细胞面积病毒滴度风疹单次病毒收获液

广州地区无偿献血者HCV基因分型与病毒滴度的相关性研究

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广州地区无偿献血者HCV基因分型与病毒滴度的相关性研究

在牛鼻甲骨细胞上繁殖的牛病毒性腹泻病(BVD)病毒的选择分离物——作为灭活的(BVD)病毒免疫原性因素的病毒滴度和可溶性抗原

中国输血协会第六届输血大会

作者：黄杰庭戎霞熊华平许茹黄珂王敏付涌水广州血液中心

目的探讨丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）6a亚型与病毒滴度的关系。方法从2009年11月～2011年8月收集广州地区无偿献血人群中抗-HCV阳性标本527份,对其进行HCV核酸检测（nucleic acid test,NAT）。对核酸阳性的标本采用罗氏COBAS... 详细信息

目的探讨丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）6a亚型与病毒滴度的关系。方法从2009年11月～2011年8月收集广州地区无偿献血人群中抗-HCV阳性标本527份,对其进行HCV核酸检测（nucleic acid test,NAT）。对核酸阳性的标本采用罗氏COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HCV test进行病毒滴度的定量检测,以及采用NS5B基因扩增和直接测序法进行HCV基因分型的鉴定。对于标本的病毒滴度与基因分型采用SPSS16.0软件进行关联性分析。结果 527份抗-HCV阳性标本中,299份标本成功获得病毒滴度和分型结果。HCV 1型（1a+1b）、2型（2a）、3型（3a+3b）和6型（6a）的比例分别为48.8%,8.7%,12.4%和30.1%。统计分析结果表明,不同基因型之间的病毒滴度存在显著差异（F=6.675,P＜0.01）。HCV 1型和6型的平均滴度分别为6.04,6.15 log10 IU/ml,均高于2型和3型（平均滴度分别为5.66和5.49 log10 IU/ml）。结论 HCV 1b和6a是广东地区无偿献血者人群中流行的主要亚型。HCV 1型（1a+1b）和6型（6a）的病毒滴度显著高于2型和3型。HCV 6a在广东地区的流行和传播可能其较高病毒滴度有关。研究HCV基因分型与病毒滴度的关系的研究有助于广东地区HCV的防控策略以及各亚型治疗方案的制定。

关键词：丙型肝炎病毒病毒滴度基因分型 HCV6a 无偿献血者

来源： cnki会议评论

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中国兽药杂志 1985年第2期 46-51页

作者： A.W.Mcclurkin M.F.Coria 臣惠深美国农业部科学教育管理局

研究了在牛鼻甲骨细胞中生产牛病毒性腹泻病病毒17个分离物的可溶性抗原。不同分离物产生的可溶性抗原的量有相当大的差别。此外,产生最大量可溶性抗原的分离物在犊牛形成的抗体滴度高于仅产生一半可溶性抗原的分离物所形成的抗体滴度。

关键词：分离物 BVD 牛病毒性腹泻病可溶性抗原病毒滴度灭活鼻甲骨细胞