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中国临床康复 2005年第27期9卷 109-111页

作者：张宁霞陈慧娟上海中医药大学基础医学院中医基础理论教研室倪力强童瑶上海中医药大学附属普陀医院康复科上海市200062 上海医药情报研究所上海市200063 香港大学中医药学院

目的:探讨束缚应激哮喘大鼠应用疏肝理肺方药后脑海马形态结构的变化。方法:实验于2002-03/2003-01在上海中医药大学国家重点实验室完成。选择SD雄性大鼠56只,随机分为7组,正常组、哮喘组、应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏... 详细信息

目的:探讨束缚应激哮喘大鼠应用疏肝理肺方药后脑海马形态结构的变化。方法:实验于2002-03/2003-01在上海中医药大学国家重点实验室完成。选择SD雄性大鼠56只,随机分为7组,正常组、哮喘组、应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组各8只。正常组和应激组大鼠给予1mL生理盐水腹腔注射,其余各组分别腹腔注射等量抗原液致敏,致敏第8天开始,每日将应激组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠双后肢用绷带立式固定2h给予束缚应激刺激,共进行3周;同时每日分别给予地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠地塞米松(0.75mg/片)1g/(L·kg)、理肺方(麻黄、桂枝、炙甘草、细辛、干姜、半夏、五味子及白芍均9g)28g/(mL·kg)和疏肝理肺方(在理肺方基础上增加柴胡9g及炙枳实9g)36g/(mL·kg)灌胃。在致敏第15天开始,每日给予哮喘组、哮喘应激组、地塞米松组、理肺组和疏肝理肺组大鼠卵蛋白20g/L雾化吸入3min,共雾化2周。造模及治疗结束后,麻醉大鼠抽取腹主动脉血,测定血浆皮质酮水平应用放射免疫法。抽血后,开颅取大鼠脑,采用光镜及透射电镜检测大鼠脑海马的形态结构。结果:56只大鼠全部进入结果分析,无脱失。①各组大鼠血浆皮质酮水平比较:哮喘组和应激组大鼠的血浆皮质酮水平均较正常组显著升高犤(532.48±115.28),(323.32±100.40),(235.27±46.64)μg/L,(P疏肝理肺方组大鼠较哮喘应激组显著降低犤(309.50±46.52),(569.89±72.32)μg/L(P均疏肝理肺方组较理肺组(528.60±130.72)μg/L显著降低(P理肺组大鼠相似脑海马锥体细胞排列不规则,在CA3区可见大量的锥体细胞核固缩。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞排列比较规则,在CA3区核固缩神经元明显减少。③各组大鼠电镜下脑海马形态结构的比较:正常组大鼠脑海马锥体细胞核形态规则,核膜光滑,核异染色质分布均匀,线粒体丰富,嵴排列规则。哮喘应激组和理肺组大鼠相似,脑海马锥体细胞核形态不规则,核异染色质明显增多,胞浆疏松,多数线粒体扩张,出现空泡、嵴排列紊乱。地塞米松组大鼠脑海马锥体细胞形态不规则,细胞器变性。疏肝理肺组大鼠脑海马锥体细胞核形态较规则,核膜光滑,核异染色质分布较均匀,胞浆疏松,线粒体丰富但致密。结论:慢性束缚应激会诱发或加重哮喘,导致哮喘大鼠血浆皮质酮水平升高,从而损伤脑海马神经元形态。疏肝理肺方可以通过抑制应激条件下哮喘大鼠的血浆皮质酮分泌,对脑海马神经元形态起一定的保护作用。

关键词：疏肝理肺方应激哮喘大鼠脑海马

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疏肝理肺方对慢性应激性哮喘大鼠皮质酮及基质金属蛋白酶-9表达的影响

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广东医学 2015年第22期36卷 3454-3456页

作者：郑红易桂生孙天寿胡骏桂林医学院附属医院呼吸内科广西桂林541001

目的探讨不同浓度疏肝理肺方对慢性应激条件下哮喘大鼠皮质酮(CORT)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常组(A组)、应激模型组(B组)、地塞米松组(C组)、疏肝理肺方低浓度组(D组)、疏肝理肺方... 详细信息

目的探讨不同浓度疏肝理肺方对慢性应激条件下哮喘大鼠皮质酮(CORT)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响。方法 48只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常组(A组)、应激模型组(B组)、地塞米松组(C组)、疏肝理肺方低浓度组(D组)、疏肝理肺方中浓度组(E组)、疏肝理肺方高浓度组(F组),每组8只。除正常组外,余各组采用氢氧化铝-卵清蛋白(OVA)致敏激发哮喘,同时加用慢性不可预见性温和应激法建立慢性应激模型。造模结束后取材,HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA法检测血清CORT的含量,Western blot法测定肺组织MMP-9的表达。结果与A组相比,B组肺组织炎性细胞明显浸润,支气管平滑肌及基底膜增厚,黏膜肿胀,褶皱形成;C组和疏肝理肺方各浓度组上述表现较应激模型组减轻;疏肝理肺方低浓度组和高浓度组上述表现较中浓度组增强。B组CORT和MMP-9表达量较A组明显升高(P疏肝理肺方各浓度组CORT和MMP-9表达量较B组降低(P疏肝理肺方低浓度组和高浓度组CORT和MMP-9表达量较中浓度组升高(P疏肝理肺方可通过抑制血清CORT及肺组织MMP-9的表达,有效缓解慢性应激条件下的哮喘大鼠气道重塑。

关键词：慢性应激哮喘疏肝理肺方皮质酮基质金属蛋白酶-9

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疏肝理肺方对慢性应激条件下哮喘大鼠血清皮质酮及肺组织中TGF-β1/Smad3表达的影响

疏肝理肺方对慢性应激条件下哮喘大鼠血清皮质酮及肺组织中TGF-β...

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作者：孙天寿桂林医学院

学位级别：硕士

目的:依据现代医学心理学应激理论和实验研究方法,结合支气管哮喘的特点,复制慢性应激性哮喘大鼠模型,对慢性应激性哮喘大鼠用疏肝理肺方进行干预,测定血清皮质酮含量及肺组织TGF-β1/Smad3的表达水平变化,探讨疏肝理肺方对慢性应激性... 详细信息

目的:依据现代医学心理学应激理论和实验研究方法,结合支气管哮喘的特点,复制慢性应激性哮喘大鼠模型,对慢性应激性哮喘大鼠用疏肝理肺方进行干预,测定血清皮质酮含量及肺组织TGF-β1/Smad3的表达水平变化,探讨疏肝理肺方对慢性应激性哮喘的作用机制。方法:将40只SD雄性大鼠在正常环境下饲养一周后,采用随机数表法分为4组,即正常对照组、应激哮喘组、地塞米松组、疏肝理肺组。采用卵蛋白皮下注射致敏、气道吸入刺激气道上皮激发,并加用慢性不可预见性温和应激法(CUMS),以复合方法复制慢性应激性哮喘,第15天开始,地塞米松组及疏肝理肺组每天分别以地塞米松及疏肝理肺方灌胃。持续复合刺激8周后,腹主动脉取血,ELISA检测血清皮质酮含量;取左侧肺组织做HE染色和免疫组织化学染色,观察大鼠肺组织炎症细胞浸润情况、测定支气管管腔的内周长、管壁面积,支气管平滑肌面积,定位及半定量测定肺组织中TGF-β1及Smad3的蛋白表达情况;右肺组织用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定肺组织TGF-β1及Smad3的mRNA表达水平。结果:ELISA检测发现应激哮喘组血清皮质酮显著高于正常对照组(P疏肝理肺组较哮喘模型组明显降低(P肺泡及肺间质充斥大量炎症细胞、粘膜层肿胀充血、皱折增多,大鼠支气管壁面积和气道平滑肌面积较正常对照组显著增高(P疏肝理肺组上述炎症症状明显减轻,支气管壁面积和气道平滑肌面积厚度明显减小(P肺组织TGF-β1及Smad3的蛋白表达明显升高(P疏肝理肺组TGF-β1及Smad3的蛋白表达较应激哮喘组显著降低(P肺组织TGF-β1及Smad3的m RNA表达较正常对照组明显升高(P疏肝理肺组TGF-β1及Smad3 mRNA表达显著降低(P疏肝理肺方具有改善慢性应激条件下哮喘大鼠模型气道重塑的作用,此作用可能通过降低血清皮质酮含量,同时减少TGF-β1及Smad3的表达而实现。

关键词：慢性应激哮喘疏肝理肺方皮质酮 TGF-β1 Smad3

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疏肝理肺方对慢性应激性哮喘大鼠皮质酮及MMP-9的表达影响

疏肝理肺方对慢性应激性哮喘大鼠皮质酮及MMP-9的表达影响

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作者：郑红桂林医学院

学位级别：硕士

目的:通过建立慢性应激条件下的哮喘大鼠模型,从分子水平研究不同浓度疏肝理肺方对哮喘大鼠血清皮质酮(CORT)及肺组织MMP-9表达的影响,进一步探索疏肝理肺方控制慢性应激哮喘气道重塑的机制。方法:48只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常... 详细信息

目的:通过建立慢性应激条件下的哮喘大鼠模型,从分子水平研究不同浓度疏肝理肺方对哮喘大鼠血清皮质酮(CORT)及肺组织MMP-9表达的影响,进一步探索疏肝理肺方控制慢性应激哮喘气道重塑的机制。方法:48只健康雌性SD大鼠随机分为6组:正常组(A组)、应激模型组(B组)、地塞米松组(C组)、疏肝理肺方低浓度组(D组)、疏肝理肺方中浓度组(E组)、疏肝理肺方高浓度组(F组),每组8只。除正常组外,余各组采用氢氧化铝-卵清蛋白(OVA)致敏激发哮喘,同时加用慢性不可预见性温和应激法建立慢性应激模型。造模结束后取材,HE染色观察肺组织病理学改变,ELISA法检测血清CORT的含量,Western blot法测定肺组织MMP-9的表达。结果:与A组相比,B组肺组织炎性细胞明显浸润,支气管平滑肌及基底膜增厚,粘膜肿胀,褶皱形成,与A组相比,B组支气管壁面积和气道平滑肌面积显著增高(P疏肝理肺方各浓度组上述表现较应激模型组减轻;疏肝理肺方低浓度组和高浓度组上述表现较中浓度组增强。B组CORT和MMP-9表达量较A组明显升高(P疏肝理肺方可通过抑制血清CORT及肺组织MMP-9的表达,有效缓解慢性应激条件下的哮喘大鼠气道重塑。

关键词：慢性应激哮喘疏肝理肺方皮质酮 MMP-9

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疏肝理肺方对肝郁证支气管哮喘大鼠的尿液代谢组学影响

疏肝理肺方对肝郁证支气管哮喘大鼠的尿液代谢组学影响

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作者：张志桂林医学院

学位级别：硕士

目的:在建立肝郁证支气管哮喘模型的基础上,应用代谢组学方法确定肝郁证哮喘的差异性代谢物,通过比对差异性代谢物变化多少,探究疏肝理肺方干预肝郁证支气管哮喘的代谢组学机制,同时说明方剂治疗的中医药优势。方法:采用公认的卵蛋白致... 详细信息

目的:在建立肝郁证支气管哮喘模型的基础上,应用代谢组学方法确定肝郁证哮喘的差异性代谢物,通过比对差异性代谢物变化多少,探究疏肝理肺方干预肝郁证支气管哮喘的代谢组学机制,同时说明方剂治疗的中医药优势。方法:采用公认的卵蛋白致敏法+慢性不可预见性应激建立肝郁证支气管哮喘模型,适应性饲养70只雄性Wistar大鼠,随机分为正常组(A组)、支气管哮喘模型组(B组)、支气管哮喘肝郁证模型组(C组)、大鼠支气管哮喘肝郁证模型组+高剂量治疗组(D组)、大鼠支气管哮喘肝郁证模型组+中剂量治疗组(E组)、大鼠支气管哮喘肝郁证模型组+低剂量治疗组(F组),支气管哮喘肝郁证模型组+地塞米松对照组(G组)每组10只。造模期间观察各组行为、形态变化及记录体重变化及糖水消耗量,停止造模后A、B、C组每日2ml/只生理盐水灌胃;D组、E组、F组分别予8.37mg/100g、5.58mg/100g、2.79mg/100g疏肝理肺复方灌胃,G组每日0.1mg/100g地塞米松灌胃连续5d。收集给药前各组模型12h尿液及给药后第1、3、5天尿液,并预处理后应用LC-MS/MS技术进行检测分析,并通过PCA主成分分析和非监督的偏最小二乘判别分析OPLS-DA进行有监督的数据分析,筛选出差异性代谢物,并通过比对差异性代谢物的途径变化多少,探究疏肝理肺方及地塞米松干预肝郁证支气管哮喘的代谢组学机制,同时说明疏肝理肺方的中医药优势。结果:通过对筛选出的10种差异性代谢物分析发现,高剂量组与肝郁证哮喘组相比,其中组氨酸、丝氨酸、马尿酸含量降低,肌酸酐、半胱氨酸、谷氨酸、柠檬酸、乙酰乙酸、亮氨酸/异亮氨酸含量升高,其差异均有统计学意义(P疏肝理肺方可以在不同程度的对紊乱代谢物向正常方向调节,高剂量治疗组不但可以影响大多数代谢性标志物,而且回调趋势最明显,明显优于其他剂量治疗组,表明疏肝理肺方可能参与调节肝郁证哮喘模型的能量代谢、氨基酸代谢、脂肪代谢等多种代谢途径,从而对机体多个系统产生影响。

关键词：肝郁证哮喘模型疏肝理肺方代谢组学慢性不可预见性应激

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