检索结果-南通市图书馆

番鸭细小病毒NS和VP基因的克隆及序列分析

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中国兽医杂志 2022年第1期58卷 37-42页

作者：戴银胡晓苗赵瑞宏张丹俊潘孝成沈学怀尹磊周学利侯宏艳安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230031

为进一步了解番鸭细小病毒(MDPV)基因的遗传变异特征,本试验采用分段PCR扩增法获得了2个MDPV安徽分离株(AH1901和AH1902)基因组NS和VP全长基因,并与GenBank数据库中的20个水禽细小病毒基因组序列进行了比对。序列分析显示,克隆的MDPV基... 详细信息

为进一步了解番鸭细小病毒(MDPV)基因的遗传变异特征,本试验采用分段PCR扩增法获得了2个MDPV安徽分离株(AH1901和AH1902)基因组NS和VP全长基因,并与GenBank数据库中的20个水禽细小病毒基因组序列进行了比对。序列分析显示,克隆的MDPV基因均包括完整的NS和VP基因,分别为1884 bp和2199 bp,VP基因核苷酸序列变异程度相对较高,而NS基因则较为保守;进化分析显示,安徽分离株AH1901和AH1902位于同一分支,二者与国内分离的MDPV毒株ZJ-JH-2013基因遗传距离最近,可能来源于同一毒株,与MDPV疫苗株P1及国外分离毒株FM基因遗传距离则较远;安徽分离株AH1901和AH1902的NS基因序列同源性为99.8%,VP基因序列一致。两者的NS、VP基因序列与分离株ZJ-JH-2013的同源性最高,与重组型毒株SAAS-SHNH及安徽分离株AH1401同源性也在99.5%以上;与疫苗株P1、国外分离株FM同源性则较低,其中VP基因仅为88.9%、89.3%。本试验结果表明近年国内的MDPV分离株同源性均较高,但仍存在一定程度的基因变异,增加了诊断与防控该病的难度。

关键词：番鸭细小病毒 NS基因 VP基因序列分析

鹅细小病毒、番鸭细小病毒及鸭圆环病毒多重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与临床应用

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中国预防兽医学报 2023年第1期45卷 38-44页

作者：谢守玉刘惠心熊陈勇郑敏施开创韦显凯冯淑萍龙凤梁凤吕思明屈素洁陆文俊尹彦文李军广西动物疫病预防控制中心广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005

为建立鉴别检测鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)及鸭圆环病毒(DuCV)的方法,本研究分别针对GPV、MDPV NS基因与DuCV Rep基因,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时鉴别检测GPV、MDPV及DuCV的TaqMan荧光... 详细信息

为建立鉴别检测鹅细小病毒(GPV)、番鸭细小病毒(MDPV)及鸭圆环病毒(DuCV)的方法,本研究分别针对GPV、MDPV NS基因与DuCV Rep基因,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时鉴别检测GPV、MDPV及DuCV的TaqMan荧光定量PCR方法。利用该方法检测GPV、MDPV、DuCV及禽流感病毒、新城疫病毒、鸭瘟病毒、减蛋综合征病毒、鸭坦布苏病毒、番鸭呼肠孤病毒等主要水禽源病毒,结果显示,该方法仅能扩增出GPV、MDPV及DuCV,与其他主要水禽源病毒均无交叉反应,特异性强;利用该方法检测等体积混合后的GPV、MDPV及DuCV质粒标准品混合物,结果显示,该方法对3种质粒标准品的检测限均为7.5×10^(1)拷贝/μL,普通单一PCR对上述3种质粒标准品混合物的检测限均为7.5×10^(3)拷贝/μL,表明本研究建立方法的敏感性高于普通PCR;该方法组内与组间重复性试验的变异系数均小于2.0%,重复性好。利用该方法与MDPV和GPV双重荧光定量PCR方法及DuCV荧光定量PCR方法同时检测96份临床发病鸭的组织样品,该方法检测结果显示,共检出58份阳性样品,其中GPV检出率为18.75%(18/96),MDPV检出率为4.17%(4/96),DuCV检出率为37.50%(36/96),GPV与DuCV混合感染率为8.33%(8/96),阴性样品38份。与GPV和MDPV双重荧光定量PCR及DuCV荧光定量PCR方法的检测结果均一致,三者的符合率达100%。本研究建立的GPV、MDPV及DuCV多重TaqMan荧光定量PCR方法为临床鉴别检测该3种病原及其流行病学调查提供了特异、敏感、高效的技术手段。

关键词：鹅细小病毒番鸭细小病毒鸭圆环病毒荧光定量PCR 临床应用

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番鸭细小病毒病研究进展

中国动物检疫 2023年第9期40卷 76-81页

作者：赵宗伟马启禄王鹤童李翠萍濮阳县子岸镇农业服务中心河南濮阳457100 安阳市殷都区畜牧服务中心河南安阳455000 平舆县农业综合行政执法大队河南平舆463400 商丘市动物检疫和疫病预防控制中心河南商丘476000

番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(MDPV)引起的,以腹泻、气喘以及胰脏出血、坏死等为主要症状的急性传染病,目前已成为当前危害我国养鸭业高质量发展最为严重的传染病之一。为深入了解MDPV,做好疫病防控,重点对番鸭细小病毒病的病原学、... 详细信息

番鸭细小病毒病是由番鸭细小病毒(MDPV)引起的,以腹泻、气喘以及胰脏出血、坏死等为主要症状的急性传染病,目前已成为当前危害我国养鸭业高质量发展最为严重的传染病之一。为深入了解MDPV,做好疫病防控,重点对番鸭细小病毒病的病原学、流行病学、诊断方法、疫苗研究进展及防控等方面的最新研究成果进行综述,以期为从业者正确认知MDPV提供较为系统的内容,也为番鸭细小病毒病的有效防治提供信息支持。

关键词：番鸭细小病毒病原学流行病学诊断疫苗防控

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番鸭细小病毒诊断方法及中西医治疗措施

新农业 2023年第8期 63-64页

作者：李旋亮盘锦市双台子区动物疫病预防控制中心辽宁盘锦124000

番鸭细小病毒病也称为“三周病”,1~3周龄的番鸭为易感群体。患病雏鸭的周龄越小,临床表现越严重。此病最早发现于福建地区,大量雏番鸭急性发病,造成雏番鸭死亡,给养鸭户带来严重的经济损失。1流行病学番鸭细小病毒能够引发番鸭产生急... 详细信息

番鸭细小病毒病也称为“三周病”,1~3周龄的番鸭为易感群体。患病雏鸭的周龄越小,临床表现越严重。此病最早发现于福建地区,大量雏番鸭急性发病,造成雏番鸭死亡,给养鸭户带来严重的经济损失。1流行病学番鸭细小病毒能够引发番鸭产生急性、败血性传染疾病,细小病毒仅感染雏番鸭,不感染其它禽类或哺乳动物。细小病毒在分类上属于细小病毒科,有空心病毒粒子和实心病毒粒子两种不同类型,无囊膜。

关键词：番鸭细小病毒雏番鸭流行病学病毒粒子中西医治疗败血细小病毒科雏鸭

水禽核糖体蛋白S12与番鸭细小病毒结构蛋白VP1的体外相互作用研究

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黑龙江畜牧兽医 2022年第7期 81-85页

作者：谢鹏宇孙婉姝于天飞李静尹海畅黎明于志丹齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室黑龙江齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学计算机与控制工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

为了探讨水禽核糖体蛋白S12(ribosomal protein S12,RPS12)与番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)结构蛋白VP1之间的相互作用关系,试验根据GenBank中已登录的北京鸭和浙东白鹅RPS12基因序列,人工合成重组质粒pUC57-DRPS12和pUC57-GRPS12,双酶切后回收目的片段,分别插到载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-DRPS12和pGEX-GRPS12。将pGEX-DRPS12、pGEX-GRPS12及含MDPV YL08株VP1基因的重组质粒pET-VP1分别转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达,利用HRP标记的GST或His标签单克隆抗体,通过Western-blot法鉴定重组蛋白,采用GST pull-down法体外检测水禽RPS12蛋白与VP1蛋白的相互作用情况。结果表明:获得的重组蛋白GST-DRPS12、GST-GRPS12和TRX-VP1分子质量分别为41.2,40.3,98.8 ku,浓度为1.32,1.29,0.81 mg/mL;重组蛋白TRX-VP1能够与MDPV YL08株感染的番鸭血清特异性结合,具有较好的反应原性;重组蛋白TRX-VP1可以和GST-DRPS12、GST-GRPS12在体外相互作用。说明MDPV VP1蛋白与水禽RPS12蛋白存在相互作用关系。

关键词：番鸭细小病毒核糖体蛋白S12 结构蛋白原核表达 GST pull-down

番鸭细小病毒和鹅细小病毒二联弱毒细胞苗的研究

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兽医大学学报 2003年第3期23卷 226-228页

作者：陈少莺胡奇林程晓霞李怡英程由铨林天龙福建省农业科学院畜牧兽医研究所福建福州350013

应用适应于番鸭胚成纤维细胞 (MDEFC)上繁殖 ,并产生细胞病变的鹅细小病毒 (GPV)弱毒疫苗株与番鸭细小病毒 (MPV)弱毒疫苗 ,按适当比例混合 ,试制了 MPV- GPV二联弱毒细胞苗 ,并测定了各项免疫指标。结果显示 :试制出的二联苗对 1日龄... 详细信息

应用适应于番鸭胚成纤维细胞 (MDEFC)上繁殖 ,并产生细胞病变的鹅细小病毒 (GPV)弱毒疫苗株与番鸭细小病毒 (MPV)弱毒疫苗 ,按适当比例混合 ,试制了 MPV- GPV二联弱毒细胞苗 ,并测定了各项免疫指标。结果显示 :试制出的二联苗对 1日龄雏番鸭具有良好的安全性和遗传稳定性 ;免疫后 5 d和 7d攻击 GPV强毒 ,保护率分别为 75 %和 1 0 0 % ,同时免疫后 7d血清中 MPV-胶乳凝集抑制 (L PAI)抗体效价均大于 2 1 ,2 1～ 2 8d抗体达高峰 ,有效免疫期超过 6 0 d。疫苗于 - 2 0℃保存期大于 1 2个月。上述结果表明。

关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒二联弱毒细胞苗抗体疫苗

番鸭细小病毒与鹅细小病毒PCR鉴别诊断方法的建立

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中国兽医科学 2007年第6期37卷 469-472页

作者：刘家森姜骞司昌德甘一迪韩凌霞曲连东中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞... 详细信息

根据番鸭细小病毒(MDPV)和鹅细小病毒(GPV)基因组的非同源序列各设计了1对引物MDPVF1/R1和GPVF1/R1,建立了一种PCR方法,用该PCR方法分别对GPV、MDPV、鸭瘟病毒(DPV)、鸭肝炎病毒(DHV)、鸭呼肠孤病毒(DRV)、犬细小病毒(CPV)和猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)的病毒培养物及其核酸进行扩增。结果,引物MDPVF1/R1仅特异性扩增出MDPV的900 bp核酸片段,引物GPVF1/R1仅特异性扩增出GPV的465 bp核酸片段。表明,建立的PCR方法可用于GPV和MDPV的鉴别诊断。

关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒聚合酶链式反应鉴别诊断

番鸭细小病毒和鹅细小病毒广东株VP1基因的克隆与序列分析

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中国预防兽医学报 2004年第4期26卷 245-247,251页

作者：季芳张毓金杨增岐宋长绪西北农林科技大学陕西杨凌712100 广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640

参考GenBank中的MDPVFM株和GPVB株全基因序列 ,设计并合成一对引物 ,分别对MDPVGD株和GPVGD株的结构蛋白基因 (VP1)进行PCR扩增 ,并克隆到pMD18_T载体 ,筛选到重组质粒并测序。通过对MDPVGD株和GPVGD株的VP1基因的核苷酸序列分析 ,这两... 详细信息

参考GenBank中的MDPVFM株和GPVB株全基因序列 ,设计并合成一对引物 ,分别对MDPVGD株和GPVGD株的结构蛋白基因 (VP1)进行PCR扩增 ,并克隆到pMD18_T载体 ,筛选到重组质粒并测序。通过对MDPVGD株和GPVGD株的VP1基因的核苷酸序列分析 ,这两种病毒VP1基因大小均为 2 199bp ,核苷酸序列同源性为 87% ,而位于VP1基因上的VP2至VP3基因起始密码子之间的核苷酸序列的差异较大 ,同源性仅为 6 4 %。另外对MDPVGD株和GPVGD株与各地方毒株的VP1和VP3基因核苷酸序列的同源性比较。

关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒 VP1基因基因克隆序列分析广东株

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番鸭细小病毒弱毒株VP2基因的序列分析

中国兽医科技 2002年第6期32卷 6-10页

作者：娄华白挨泉顾万军贺东升刘福安佛山科技学院动物医学系广东南海528231 华南农业大学动物医学系广东广州510642

将番鸭细小病毒强毒株MDPV Q经番鸭胚传代 ,获得致弱株MDPV 2 6,应用PCR技术扩增MDPV 2 6株的VP2基因片段 ,将扩增后的VP2基因重组到 pMD 18 T质粒载体上 ,并对插入片段进行序列测定 ,将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列分别与MDPV ... 详细信息

将番鸭细小病毒强毒株MDPV Q经番鸭胚传代 ,获得致弱株MDPV 2 6,应用PCR技术扩增MDPV 2 6株的VP2基因片段 ,将扩增后的VP2基因重组到 pMD 18 T质粒载体上 ,并对插入片段进行序列测定 ,将测序结果及由该结果推导的氨基酸序列分别与MDPV Q株及国外已发表的MDPV相应序列进行同源性比较及分析。结果表明 ,MDPV 2 6与强毒株MDPV

关键词：弱毒株 VP2基因番鸭细小病毒序列分析 PCR 同源性