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番茄枯萎病致病镰刀菌种类鉴定及优势种群的研究

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植物病理学报 2016年第4期46卷 561-565页

作者：张斌杨晓云陈志谊江苏省农业科学院植物保护研究所南京210014 南京农业大学植物保护学院南京210095

镰刀菌（Fusariumspp．）是真菌的一个重要属，分布极为广泛，是多种重要植物的病原菌。其中，由致病性尖孢镰刀菌（Fusariumoxysporum）侵染引起的植物枯萎病是一种世界性的土传真菌病害。

关键词：尖孢镰刀菌番茄枯萎病致病性优势种群种类鉴定土传真菌病害病原菌世界性

番茄枯萎病拮抗菌KCKB1的分离、鉴定及生防效果

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江苏农业科学 2023年第9期51卷 131-139页

作者：武亚芬向丹梁斌李琳黄玉丹朱晓雪徐良青岛农业大学资源与环境学院山东青岛266109

为筛选获得针对番茄枯萎病的生防菌,从山东寿光设施大棚内番茄根际筛选获得1株细菌菌株KCKB1,通过菌落形态特征观察以及16S rRNA基因序列分析,菌株KCKB1确认为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并对其开展对峙培养、种属鉴定、生长特性... 详细信息

为筛选获得针对番茄枯萎病的生防菌,从山东寿光设施大棚内番茄根际筛选获得1株细菌菌株KCKB1,通过菌落形态特征观察以及16S rRNA基因序列分析,菌株KCKB1确认为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),并对其开展对峙培养、种属鉴定、生长特性研究、抑菌谱检测以及盆栽防效验证。结果表明,菌株KCKB1能有效抑制番茄枯萎病,盆栽防治效果达到61.46%;菌株KCKB1可以提高番茄植株叶片内抗氧化酶(SOD、CAT)以及抑菌物质合成酶(PAL、PPO)的活性,进而提高植株抗病性。同时,菌株KCKB1还具有溶磷、固氮、产铁载体、产ACC脱氨酶、产IAA等促生功能,能明显促进番茄植株的生长。此外,菌株KCKB1对链格孢菌、甘薯长喙壳菌、灰葡萄孢、烟草疫霉菌、尖孢镰刀菌甘薯专化型5种病原菌均具有良好的的抑菌效果。综上,枯草芽孢杆菌菌株KCKB1具有良好的生防潜力与广阔的应用前景,为对番茄枯萎病进行生物防治提供了菌种资源。

关键词：枯草芽孢杆菌番茄枯萎病生物防治促生长特性

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番茄枯萎病病原菌鉴定与拮抗菌筛选

西南农业学报 2013年第3期26卷 1038-1043页

作者：崔萍安慧张楠李芳慧河池学院化学与生命科学系广西宜州546300 内江师范学院生命科学学院四川内江641112

应用组织分离法从发病番茄根部分离番茄枯萎病病原菌并进行致病性测定,根据菌体形态特征、ITS序列同源性分析将病原菌鉴定为镰刀菌属尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。探讨了发病及健康番茄根际栽培基质、大田土及山地贫瘠土壤的微生物... 详细信息

应用组织分离法从发病番茄根部分离番茄枯萎病病原菌并进行致病性测定,根据菌体形态特征、ITS序列同源性分析将病原菌鉴定为镰刀菌属尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。探讨了发病及健康番茄根际栽培基质、大田土及山地贫瘠土壤的微生物数量,采用平板对峙培养法初筛得到77个对番茄枯萎病病原菌有拮抗作用的分离物,进一步复筛得到24个拮抗性能较为稳定的分离物,其中来自山地土的真菌A6、A29、A9、A31、A44、A28拮抗作用较强。山地贫瘠土壤尽管微生物总量较少,但是分离获得的拮抗菌数量最多。

关键词：番茄枯萎病病原菌拮抗微生物鉴定筛选

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番茄枯萎病拮抗菌的筛选及其抑菌效果研究

番茄枯萎病拮抗菌的筛选及其抑菌效果研究

作者：王恩泽东北农业大学

学位级别：硕士

番茄枯萎病是由尖孢镰刀杆菌(Fusarium oxysporum)引起的一种土传性病害,严重影响番茄的产量和品质。目前,对番茄枯萎病的防治仍以化学防治为主,而长期使用化学农药会严重破坏土壤生态环境,高浓度的农药残留甚至会危害人类的健康。在绿... 详细信息

番茄枯萎病是由尖孢镰刀杆菌(Fusarium oxysporum)引起的一种土传性病害,严重影响番茄的产量和品质。目前,对番茄枯萎病的防治仍以化学防治为主,而长期使用化学农药会严重破坏土壤生态环境,高浓度的农药残留甚至会危害人类的健康。在绿色环保、可持续生产理念被广泛认可的时代,人们越来越多地采用安全、无污染的生物防治措施。蚯蚓粪是有机废弃物经蚯蚓生物处理后排泄出来的颗粒物,除含有大量植物生长所需的营养物质外,还含有大量的有益微生物,是自然界中一座不可多得“菌库”。研究利用蚯蚓粪中的有益微生物进行土传病害防治,得到众多国内外同行的认可,蚯蚓粪资源的利用拓宽了有益微生物生物防治研究的渠道。本研究从蚯蚓粪中筛选出对番茄枯萎病有抑制效果的菌株、明确其分类属性,分析其抑菌机制,同时确定该菌株发酵培养的最佳配方和培养条件。本研究得到的初步结论如下:(1)从蚯蚓粪中共筛选出61株细菌,有42株细菌对番茄枯萎病有抑制效果,其中14株细菌对番茄枯萎病的抑制率大于30%。抑菌效果最好的菌株为第25号菌株(记作DX-25),在平板试验中,它对番茄枯萎病的抑制率达到了66.09%,且抑菌效果稳定。(2)对菌株DX-25进行16S r DNA测序,序列长为1488 bp,在Genbank上进行同源性比较,表明DX-25为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)。(3)DX-25菌株具有良好的广谱性抑菌效果,能有效降低番茄枯萎病的发生。在盆栽条件下,对番茄枯萎病的治疗效果为61.82%,防治效果为70.91%。同时发现,低浓度的DX-25发酵液对番茄种子发芽有促进作用,而高浓度的发酵液对番茄种子发芽具有抑制作用。(4)DX-25可以有效诱导番茄过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)、几丁质酶(CHT)和脂氧合酶(LOX)活性。对PPO、GLU、CHT和LOX酶活性的诱导能力要强于枯萎病菌,对POD、CAT、SOD和PAL酶活性的诱导能力弱于枯萎病菌。DX-25诱导的PPO、GLU和CHT酶活性的反应速度比枯萎病菌快24 h。同时,DX-25和枯萎病共同处理诱导PPO和GLU酶活性有协同增效的作用,其达到显著水平的时间较单接种枯萎病菌分别提前了48 h和24 h。(5)通过优化培养,DX-25对番茄枯萎病的抑制率由初筛的66.09%提升至74.17%。

关键词：拮抗菌番茄枯萎病抑菌率诱导抗性

番茄枯萎病抗病基因I-1的分子标记及种质资源筛选

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番茄枯萎病抗病基因I-1的分子标记及种质资源筛选

作者：李发玲东北农业大学

学位级别：硕士

番茄广泛种植于世界各地,也是我国主要蔬菜作物之一。随着保护地栽培面积的不断扩大以及不合理的耕作方式,番茄病害越来越严重,番茄枯萎病已成为番茄生产上一个重要的限制性因素。实践证明,选育和利用抗病品种是番茄枯萎病的主要防治方... 详细信息

番茄广泛种植于世界各地,也是我国主要蔬菜作物之一。随着保护地栽培面积的不断扩大以及不合理的耕作方式,番茄病害越来越严重,番茄枯萎病已成为番茄生产上一个重要的限制性因素。实践证明,选育和利用抗病品种是番茄枯萎病的主要防治方法。但常规育种耗时长,而利用分子标记技术对番茄枯萎病抗病基因进行标记,可以准确、快速的提高育种效率。本研究采用分子标记技术,在DNA水平上研究番茄抗枯萎病基因,建立番茄AFP和SSR分子标记技术体系,筛选与番茄枯萎病抗病基因I-1紧密连锁的AFP标记和SSR标记,并应用该技术体系初步验证对枯萎病具有抗性的番茄材料。为实现分子标记辅助选择育种及进一步克隆该抗病基因奠定基础,进而培育出含有抗病基因的番茄材料,增加番茄本身对枯萎病的抵抗力,从根本上解决问题。本研究的主要研究成果如下: 1.本试验以番茄枯萎病抗病品种05045与感病品种051451为亲本配制杂交组合,得到F代、F代。采用浸根法结合注射法进行抗病性鉴定,建立了抗感基因池。经鉴定,F代均表现为抗病,F代群体表现实际分离比为2.91:1,经χ2检测符合显性单基因的遗传规律。 2.以05045、051451以及05045×051451的F群体中的348个单株为材料,利用AFP和SSR两种方法,获得四个与番茄枯萎病抗病基因I-1连锁的AFP标记和两个SSR标记,分别是E41M60-D、E41M62-C、E86M36-B、E32M44-E和SSR108、SSR276,与抗病基因I-1的连锁遗传距离分别为4.7cM、5.3cM、8.9cM、11.5cM和6.1cM、9.3cM。 3.利用获得的AFP标记E41M60-D,以东北农业大学园艺系番茄课题组提供的80份番茄材料为试验材料,结合人工接种鉴定,进行AFP标记检测,二者鉴定结果吻合率达92.5%。从而明确了本研究中所获AFP标记的应用价值,这一结果为分子育种及进一步的基因克隆奠定了基础。

关键词：番茄番茄枯萎病分子标记

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番茄枯萎病生防菌的筛选及防病机理初探

番茄枯萎病生防菌的筛选及防病机理初探

作者：郭慧河南农业大学

学位级别：硕士

近年来,我国番茄产业持续稳步发展,栽培面积和总产量稳居世界首位,在农产品供应、农民增收和农村经济繁荣方面发挥了重要作用。然而,在现代农业生产实际中,农业设施具有高度集约化、高复种指数等特点。尤其是番茄栽培过程中,设施内常年... 详细信息

近年来,我国番茄产业持续稳步发展,栽培面积和总产量稳居世界首位,在农产品供应、农民增收和农村经济繁荣方面发挥了重要作用。然而,在现代农业生产实际中,农业设施具有高度集约化、高复种指数等特点。尤其是番茄栽培过程中,设施内常年相对密闭的高温高湿环境,会造成设施土壤次生盐渍化、微生物区系失衡、病虫害积累等一系列连作障碍问题。由尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum ***,FOL)引起的番茄枯萎病是番茄生产过程中最为严重的土传病害之一,使得番茄的品质和产量下降,给全球的番茄产业带来了重大的经济损失。所以,高效、绿色、环保、可持续发展的生物防治成为国内外的研究热点。本研究通过平板对峙和盆栽试验,筛选出对番茄枯萎病防效最佳的生防菌菌株—多粘类芽孢杆菌NSY50,分析了 NSY50对枯萎病胁迫下番茄幼苗生长、光合作用及病情指数的影响,通过转录组学测序方法初步探究NSY50增强番茄抗病性的机理,主要研究内容和结果如下:1.从28株潜在生防菌中筛选出14株对番茄枯萎病具有较好拮抗效果的菌株,经16S rDNA序列分析鉴定为皮尔瑞俄类芽孢杆菌(Paenibacillus peoriae)、土地类芽孢杆菌(Paenibaciterrae)、多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)、马氏类芽孢杆菌(Paenibacillus maysiensis)、贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、巴西类芽孢杆菌(Paenibacillus brasilensis)和胶冻样类芽孢杆菌(Paenibacillus kribbensis),进一步盆栽试验发现,多粘类芽孢杆菌NSY50生防效果最好,高达64.44%。2.与对照Control相比,番茄幼苗的株高、干鲜重和根体积在枯萎病菌胁迫下显著降低,番茄幼苗光合作用受到抑制。预接种NSY50后显著提高了枯萎病菌胁迫下番茄幼苗的株高、干鲜重和根体积,提升了病菌胁迫下植株光合能力,使番茄叶片的净光合效率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、胞间CO2浓度(Ci)、气孔导度(Gs)和叶绿素含量显著提高,分别提高了41.98%、81.77%、42.61%、257.14%和78.25%。多粘类芽孢杆菌NSY50能有效缓解枯萎病菌对番茄幼苗生长的抑制作用。3.通过转录组学分析发现,接种NSY50后,明显改变了番茄植株对枯萎病菌在基因转录调控水平的应答,番茄植株中PR、PAL等防御相关基因的表达量显著提高,同时,蔗糖代谢、生物碱生物合成和萜烯生物合成也有显著提升,对减轻FOL侵染造成的损害和增强番茄幼苗抗病性等方面具有积极作用。筛选到33个NAC转录因子响应NSY50或FOL处理,其中SlNAP1(Solyc05g007770.3)被NSY50+FOL诱导强烈表达,显著高于FOL处理。通过基因沉默试验表明,转录因子SlNAP1在多粘类芽孢杆菌NSY50诱导番茄增强枯萎病抗性中发挥着重要作用。综上所述,本研究筛选到一个对番茄枯萎病有较好防治效果的生防菌,该菌显著增强了番茄植株对枯萎病的抗性,降低了番茄枯萎病的病情指数,提高了番茄植株的生长指标和光合能力,通过转录组分析发现一个新的转录因子SlNAP1在NSY50增强番茄植株对枯萎病抗性中发挥着重要作用。本研究结果为探究NSY50增强番茄抗性的作用机理提供了试验基础,并对开发有效防治番茄枯萎病的生物药剂具有重要参考价值。

关键词：生防菌番茄枯萎病防治效果转录组 Paenibacillius polymyxa NSY50 SlNAP1

娄彻氏链霉菌SR-1102对番茄枯萎病的防效及根际微生物的影响

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江苏农业学报 2020年第5期36卷 1133-1138页

作者：刘琴徐健祁建杭刘怀阿李传明韩光杰徐彬陆玉荣孙俊江苏里下河地区农业科学研究所江苏扬州225007 扬州绿源生物化工有限公司江苏扬州225008

为明确娄彻氏链霉菌对番茄枯萎病的防效及根际微生物类群的影响,采用室内盆栽灌根法测定娄彻氏链霉菌SR-1102菌株对番茄枯萎病病菌的防治效果,分析SR-1102对番茄根围、根表土壤及根系微生物类群、数量的影响。结果表明,SR-110250倍液、... 详细信息

为明确娄彻氏链霉菌对番茄枯萎病的防效及根际微生物类群的影响,采用室内盆栽灌根法测定娄彻氏链霉菌SR-1102菌株对番茄枯萎病病菌的防治效果,分析SR-1102对番茄根围、根表土壤及根系微生物类群、数量的影响。结果表明,SR-110250倍液、100倍液灌根处理对番茄枯萎病的防治效果达69.10%~72.84%。SR-1102能促进番茄根际微生物的增长,根围、根表微生物数量较对照分别增加0.6倍和2.1倍以上。根际土壤微生物增殖以细菌、放线菌为主,而真菌增殖受到抑制,根围、根表真菌数量较对照减少了24.9%~42.2%。SR-1102灌根处理可显著改变番茄根际微生物类群结构,根围、根表的放线菌/真菌、细菌/真菌较对照分别提高了7.8~9.0倍和2.8~3.5倍。定殖试验结果进一步表明,SR-1102在番茄根围、根表和根系都能定殖,根表定殖率较高,不同浓度SR-1102处理的定殖率达69.05%~75.57%。

关键词：娄彻氏链霉菌番茄枯萎病防效微生物类群

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抗性砧木嫁接提高番茄枯萎病抗性机理研究

西北植物学报 2024年

作者：卢盼玲玄立杰张红梅田守波何锴张辉上海设施园艺技术重点实验室上海市农业科学院园艺所上海交通大学农业与生物学院上海市嘉定区农业技术推广服务中心

【目的】探讨抗性砧木嫁接提高番茄枯萎病抗性的生理机制,为应用嫁接提高番茄枯萎病抗性提供理论依据。【方法】以番茄抗病材料‘FR’为砧木,感病材料‘AC’为接穗,进行感病自根嫁接(自根苗)和感病抗性砧木嫁接(嫁接苗),测定尖孢镰刀菌... 详细信息

【目的】探讨抗性砧木嫁接提高番茄枯萎病抗性的生理机制,为应用嫁接提高番茄枯萎病抗性提供理论依据。【方法】以番茄抗病材料‘FR’为砧木,感病材料‘AC’为接穗,进行感病自根嫁接(自根苗)和感病抗性砧木嫁接(嫁接苗),测定尖孢镰刀菌侵染后2类嫁接苗的发病情况、光合作用、抗氧化酶活性、激素含量及相关基因表达量。【结果】番茄嫁接苗枯萎病病情指数和发病率比自根苗分别显著降低95.6%和90.7%。在尖孢镰刀菌侵染后,嫁接苗的净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、最大光化学效率等光合荧光参数,茉莉酸含量和茉莉酸信号抑制因子的表达量显著高于自根苗,其SOD、POD、CAT和APX活性显著低于自根苗,水杨酸和氨基环丙烷羧酸含量与自根苗没有显著差异,但水杨酸和乙烯信号通路上的基因表达量均高于自根苗。【结论】番茄抗病砧木嫁接主要通过提高叶片光合效率、调节抗氧酶活性和信号转导获得系统抗性的方式显著提高植株对枯萎病的抗性。

关键词：番茄枯萎病嫁接尖孢镰刀菌光合作用抗氧化酶激素转录组

拟康宁木霉T-51菌株对番茄枯萎病的生物防治及其机理研究

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西北植物学报 2022年第6期42卷 974-982页

作者：王前程张迎迎戴陶宇尤佳琪郭世荣朱为民南京农业大学园艺学院南京210014 上海市农业科学院园艺研究所上海市设施园艺重点实验室上海201403

尖孢镰刀菌是番茄枯萎病的致病菌,该研究利用拟康宁木霉T-51菌株对尖孢镰刀菌展开对峙培养试验、防治最适温度、酸碱度筛选试验及生物防治效果试验,并测定防治试验中番茄幼苗叶片的生理生化指标和水杨酸、茉莉酸合成和信号途径关键基因... 详细信息

尖孢镰刀菌是番茄枯萎病的致病菌,该研究利用拟康宁木霉T-51菌株对尖孢镰刀菌展开对峙培养试验、防治最适温度、酸碱度筛选试验及生物防治效果试验,并测定防治试验中番茄幼苗叶片的生理生化指标和水杨酸、茉莉酸合成和信号途径关键基因表达量,探讨T-51菌株的生物防治机理。结果表明:(1)T-51菌株可显著抑制对峙培养中尖孢镰刀菌生长;随着环境温度和pH的增加,T-51菌株对尖孢镰刀菌的抑制率先升后降,并且在20℃、pH 7环境下效果最佳。(2)T-51菌株和尖孢镰刀菌混合孢子液处理番茄幼苗植株无明显的感病症状,植株生长状态与清水对照组无显著差异,枯萎病发病率和病情指数比单施尖孢镰刀菌孢子液处理显著大幅度降低,相对防效为87.5%。(3)与单施尖孢镰刀菌孢子液处理相比,混合孢子液处理番茄幼苗叶片的叶绿素荧光参数最大光化学效率、光化学淬灭系数和表观光合电子传递速率,以及抗氧化酶SOD、POD、CAT活性均显著增加,而非光化学淬灭系数和过氧化氢含量均显著降低。(4)与单施尖孢镰刀菌孢子液处理相比,混合孢子液处理番茄幼苗叶片的内源水杨酸(SA)显著降低,而茉莉酸(JA)含量显著升高,同时SA信号通路上的PR1和TGA2基因表达量均显著下调,JA合成基因LoxD的表达量显著上调。研究认为,拟康宁木霉T-51菌株对尖孢镰刀菌有显著的防治效果,并在20℃、pH 7环境下防治效果最佳;T-51菌株可能通过抑制尖孢镰刀菌侵染,增强番茄叶片抗氧化酶活性,提高叶片光合效率,以及调控水杨酸和茉莉酸合成和信号途径关键基因表达,调节内源水杨酸和茉莉酸含量,进而提高番茄植株的枯萎病抗病性。研究结果为番茄抗枯萎病提供了生防途径的理论依据。

关键词：拟康宁木霉T-51 尖孢镰刀菌番茄枯萎病生物防治