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电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌Gasdermin D、半胱氨酸蛋白酶-1及白细胞介素-1β表达的影响

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针刺研究 2022年第5期47卷 443-448页

作者：夏雪峰刘雨晨卢圣锋白桦徐森磊孙珂吴嘉宏顾一煌张宏如南京中医药大学针灸推拿学院·养生康复学院南京210023 南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京210023 南京中医药大学中医学院·中西医结合学院南京210023

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨电针预处理减轻MIRI损伤的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、假手... 详细信息

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨电针预处理减轻MIRI损伤的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、电针组,每组10只。电针组电针大鼠双侧“内关”,每次20 min,每日1次,连续3 d。采用冠状动脉左前降支结扎法复制MIRI大鼠模型。采用超声心动图观察造模4 h后大鼠左心室射血分数(LVEF)以评估心功能;TTC染色法观察大鼠心肌梗死面积;免疫组织化学法观察大鼠心肌组织中GSDMD表达情况;Western blot法检测心肌组织GSDMD、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。结果:与空白组相比,假手术组心肌组织GSDMD表达升高(P电针组大鼠术后4 h时LVEF升高(P电针预处理可能通过下调Caspase-1蛋白的表达,降低心肌细胞焦亡水平,从而改善MIRI损伤。

关键词：心肌缺血再灌注损伤电针预处理焦亡 Gasdermin D 半胱氨酸蛋白酶-1

电针预处理通过下调瞬时受体电位阳离子通道蛋白6抑制肾小管上皮细胞凋亡

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针刺研究 2022年第3期47卷 209-215页

作者：李丹陈泽斌郑洲殷妮娜湖北中医药大学临床技能实训中心武汉430065 湖北中医药大学基础医学院武汉430065

目的:观察电针预处理对链脲佐菌素(STZ)诱导的高血糖小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨电针预处理对高血糖小鼠肾损伤的保护机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组及假电针组,每组20只。模型组、电针组及假电针组小鼠... 详细信息

目的:观察电针预处理对链脲佐菌素(STZ)诱导的高血糖小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨电针预处理对高血糖小鼠肾损伤的保护机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组及假电针组,每组20只。模型组、电针组及假电针组小鼠连续5 d腹腔注射STZ(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))复制高血糖模型。电针组小鼠在造模前取“足三里”“肾俞”行电针预处理7 d,30 min/次,假电针组取相同穴位针刺透皮不通电。各组小鼠在造模完成3 d后,尾静脉采血测量禁食6 h后血糖值;HE染色法观察肾组织损伤程度;TUNEL染色法观察肾小管上皮细胞凋亡;Western blot法及免疫组织化学法检测肾组织中瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)表达及相关凋亡蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组血糖、肾小管上皮细胞凋亡比例及肾脏TRPC6、Caspase-3、Bax表达明显升高(P电针组比较,电针组血糖、肾小管上皮凋亡细胞比例及肾脏TRPC6、Caspase-3、Bax表达下降(P电针组则相对较轻。结论:电针预处理可抑制血糖升高,减少肾小管上皮细胞凋亡,其可能机制是下调TRPC6的表达以减少钙内流,使得Bcl-2/Bax比值升高,Caspase-3表达减少。

关键词：电针预处理高血糖瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 肾小管凋亡

电针预处理通过沉默信息调节因子3/锰超氧化物歧化酶通路对2型糖尿病大鼠肾脏损伤及氧化应激的影响

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针刺研究 2022年第9期47卷 793-800,820页

作者：王昆秀梁凤霞吴松陈松罗志辉韩永丽陈佳陈贝陈子琴张艳琳周婷顾骁磊湖北中医药大学针灸骨伤学院武汉430061

目的:观察电针预处理对2型糖尿病大鼠肾脏的保护效应和对沉默信息调节因子3(Sirt3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)表达的影响,探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、电针+抑制剂组、抑制剂组,每组10只。除对照组... 详细信息

目的:观察电针预处理对2型糖尿病大鼠肾脏的保护效应和对沉默信息调节因子3(Sirt3)、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)表达的影响,探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、电针组、电针+抑制剂组、抑制剂组,每组10只。除对照组外,各组大鼠均予高糖高脂饮食联合链脲佐菌素复制2型糖尿病模型。造模前,电针组、电针+抑制剂组给予电针“足三里”“关元”“丰隆”“中脘”,15 min/次,隔日1次,共8周;电针+抑制剂组、抑制剂组给予腹腔注射Sirt3抑制剂3-TYP(50 mg/kg),隔日1次,共3次。测量大鼠双肾质量及体质量,计算肾脏指数;ELISA法检测尿微量白蛋白(ALB)、24 h尿液中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和肾脏组织活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;紫外分光光度法检测肾脏组织线粒体呼吸链酶复合物(RCCⅠ—RCCⅣ)活性;HE染色法、Masson染色法和透射电镜观察肾脏病理变化;Western blot法和荧光定量PCR法检测肾脏Sirt3、MnSOD蛋白和mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组尿ALB含量及肾脏指数、肾脏组织ROS活性、24 h尿液中8-OHdG含量和肾脏胶原容积分数(CVF)升高(P电针组尿ALB含量及肾脏指数、肾脏组织ROS活性、24 h尿8-OHdG含量和肾脏CVF降低(P电针+抑制剂组RCCⅡ活性、肾脏组织MnSOD mRNA表达水平均升高(P电针组比较,电针+抑制剂组和抑制剂组尿ALB、肾脏指数、肾脏组织ROS、24 h尿液中8-OHdG及CVF升高(P电针+抑制剂组比较,抑制剂组尿ALB、24 h尿液中8-OHdG含量及肾脏CVF升高(P电针组和电针+抑制剂组肾脏损伤不同程度减轻。结论:电针预处理能减轻糖尿病所导致的肾脏损伤,其机制可能与促进Sirt3、MnSOD的表达,改善肾脏氧化应激有关。

关键词： 2型糖尿病肾脏损伤电针预处理氧化应激沉默信息调节因子3

电针预处理对脂多糖诱导的脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织中血管紧张素转化酶2、血管紧张素(1-7)的影响

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针刺研究 2022年第8期47卷 684-689页

作者：刘心月苏景超张新芳项水英乙春梅王玉文王彩云刘自兵安徽中医药大学针灸推拿学院针灸经络研究所合肥230038 安徽中医药大学中西医结合学院合肥230038 安徽中医药大学研究生院合肥230038

目的:观察电针“足三里”预处理对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠炎性反应、血管紧张素转化酶2(ACE2)及血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]的影响,探讨电针对脓毒症ALI的预防作用和可能机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常组... 详细信息

目的:观察电针“足三里”预处理对脂多糖(LPS)诱导的脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠炎性反应、血管紧张素转化酶2(ACE2)及血管紧张素(1-7)[Ang(1-7)]的影响,探讨电针对脓毒症ALI的预防作用和可能机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组,每组10只。采用腹腔注射LPS(5 mg/kg)复制脓毒症ALI大鼠模型。电针组予双侧“足三里”穴电针预处理,每日1次,每次30 min,连续1周后造模。造模3 h后采用小动物呼吸功能检测仪检测大鼠肺功能;ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中Ang(1-7)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;计算肺湿/干重比(W/D);HE染色法观察大鼠肺组织病理变化;Western blot法、实时荧光定量PCR法检测肺组织中ACE2、线粒体组装受体(MasR)蛋白和mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组肺组织可见明显肺间质水肿、肺泡间隔增厚;用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV0.1)、第0.3秒用力呼气量(FEV0.3)、FEV0.1占FVC之比(FEV0.1/FVC),FEV0.3占FVC之比(FEV0.3/FVC)均显著降低(P电针组肺间质水肿及肺泡间隔厚度均有改善;FVC、FEV0.1、FEV0.3、FEV0.1/FVC及FEV0.3/FVC均显著升高(P电针“足三里”穴预处理对LPS诱导的脓毒症ALI大鼠具有抗炎、降低肺水肿和对肺功能保护的作用,其机制可能与电针通过上调ACE2和MasR的表达及Ang(1-7)的含量从而抑制炎性反应有关。

关键词：电针预处理脓毒症急性肺损伤足三里血管紧张素转化酶2 血管紧张素(1-7)

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针刺研究 2023年第1期48卷 71-76页

作者：宁甲齐罗见生郭玉红陈梦洁炎茹玉周瑞玲丁玲玲首都医科大学附属北京中医医院麻醉科北京100010 首都医科大学附属北京中医医院急诊科北京100010

目的:探讨电针预处理对呼吸机相关性肺损伤(VILI)小鼠炎性反应及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法:C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组及非经非穴组,每组8只。采用高潮气量机械通气建立VILI小... 详细信息

目的:探讨电针预处理对呼吸机相关性肺损伤(VILI)小鼠炎性反应及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的影响。方法:C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、电针组及非经非穴组,每组8只。采用高潮气量机械通气建立VILI小鼠模型。电针组和非经非穴组于机械通气前电针“足三里”“肺俞”或非经非穴点,每次30 min,每日1次,治疗5 d。采集动脉血行血气分析,采用BCA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白含量,采用ELISA法检测BALF中白细胞介素(IL)-1β和IL-18含量,计算肺组织湿干重比(W/D),HE染色观察肺组织病理情况并评定肺组织损伤评分,Western blot法检测肺组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸水解酶-1(Caspase-1)蛋白表达水平。结果:与假手术组相比,模型组小鼠动脉血氧分压(PaO2)、氧合指数(OI)降低(P电针组PaO2、OI升高(P电针预处理可以减轻高潮气量机械通气引起的肺组织结构破坏,改善肺组织氧合功能,减轻炎性反应,其机制可能与降低肺组织NLPR3炎性小体相关蛋白的表达,减少炎性小体活化,从而减轻炎性反应有关。

关键词：呼吸机相关性肺损伤电针预处理核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 炎性反应

电针预处理对促排卵大鼠子宫组织核心时钟基因Bmal1表达节律的影响

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针刺研究 2024年

作者：朱钱刘静玉郝赛楠王照弦夏良君沈洁程洁李茜夏有兵南京中医药大学针药结合教育部重点实验室南京中医药大学针灸推拿学院.养生康复学院徐州医科大学

目的：观察电针预处理对促排卵大鼠子宫组织中时钟基因Bmal1表达节律的影响，探讨电针预处理提高促排卵大鼠植入期子宫内膜容受性的作用机制。方法：将72只雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、模型组和预电针组，每组24只。除正... 详细信息

目的：观察电针预处理对促排卵大鼠子宫组织中时钟基因Bmal1表达节律的影响，探讨电针预处理提高促排卵大鼠植入期子宫内膜容受性的作用机制。方法：将72只雌性SD大鼠按随机数字表法分为3组：正常组、模型组和预电针组，每组24只。除正常组外，其余2组大鼠腹腔注射孕马血清促性腺激素48 h后腹腔注射人绒毛促性腺激素制备促排卵模型。预电针组选取“关元”“三阴交”，于造模前两个动情周期每日21:00电针干预，每次15 min，直至造模结束；正常组与模型组予以相同麻醉固定。正常组大鼠动情期与输精管结扎雄鼠合笼，其余两组造模结束当日合笼。3组大鼠于合笼成功后第5天04:00起每隔4 h每批每组4只进行取材，共分6批。HE染色观察子宫内膜厚度、腺体、血管数目及组织形态变化；ELISA检测血清雌二醇(E2)与孕酮(Pg)含量；实时荧光定量PCR检测子宫核心时钟基因Bmal1和子宫内膜容受性因子同源框基因(HoxA10)、白血病抑制因子(LIF)的mRNA表达；Western blot法检测子宫HoxA10、LIF蛋白表达。结果：与正常组相比，模型组子宫内膜厚度变薄(P＜0.01)，腺体和血管的数量显著减少(P＜0.01，P＜0.05)；子宫Bmal1节律表达峰值和谷值的表达时点与正常组相反；血清E2、Pg含量显著提高(P＜0.01，P＜0.05)；内膜容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01，P＜0.05)。与模型组相比，预电针组子宫内膜厚度、腺体和血管的数量均显著增加(P＜0.05)；子宫Bmal1节律表达的峰谷值回调到与正常组接近，其表达水平也有所增加，其中ZT12时点三组的表达差异最为显著；血清Pg含量显著降低(P＜0.05)；容受性因子HoxA10和LIF的mRNA和蛋白水平升高(P＜0.01，P＜0.05)。结论：电针预处理能够改善种植窗口期子宫内膜容受性，其机制可能是调节子宫组织时钟基因Bmal1的节律表达，纠正促排导致的时钟基因节律紊乱。

关键词：电针预处理激素促排昼夜节律时钟基因 Bmal1

电针预处理对心肌缺血/再灌注损伤大鼠线粒体活性氧介导的细胞凋亡的影响

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针刺研究 2020年第12期45卷 961-967页

作者：张小蕾黄伟杨琪琪向丽莉薛艺璇林依梦姜功道湖北中医药大学针灸骨伤学院/针灸治未病湖北省协同创新中心武汉430061 湖北省中医院针灸科武汉430061

目的:探讨电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的保护作用及其对线粒体活性氧(ROS)的作用机制。方法:将80只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、再灌注组和电针组,每组20只。正常组、假手术组、再灌注组均给予捆绑,电... 详细信息

目的:探讨电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠的保护作用及其对线粒体活性氧(ROS)的作用机制。方法:将80只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、再灌注组和电针组,每组20只。正常组、假手术组、再灌注组均给予捆绑,电针组给予电针预处理,均20 min/次,1次/d,共7 d。第8天正常组麻醉50 min后、假手术组开胸暴露心脏50 min后、再灌注组及电针组开胸缺血20 min再灌注30 min后取材。根据心电图STⅡ段变化,判断MIRI模型是否成功;采用室性心律失常(VA)评分评价心律失常情况;采用ELISA法检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;采用DHE染色法检测心肌组织中ROS含量;采用实时荧光定量PCR法检测心肌组织中细胞色素C(Cyt-C)、半胱天冬酶9(Caspase-9)、半胱天冬酶3(Caspase-3)基因表达水平。结果:正常组与假手术组在各项指标上差异均无统计学意义(P>0.05);与假手术组比较,再灌注组的VA评分、血清CK-MB含量、心肌ROS含量及Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达均明显升高(P电针组VA评分、血清CK-MB含量、心肌ROS含量及Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3 mRNA表达均明显下降(P电针预处理对MIRI大鼠的保护作用可能是基于调控ROS介导的凋亡通路产生的。

关键词：心肌缺血再灌注损伤电针预处理肌酸激酶同工酶活性氧细胞色素C 半胱天冬酶9 半胱天冬酶3

电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠小脑顶核GABAA受体及交感神经活动的影响

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中国针灸 2023年第6期43卷 669-678页

作者：王帅亚舒琪陈翩翩张帆周翔王茜伊周杰魏霞胡玲余情蔡荣林安徽中医药大学针灸推拿学院合肥230012 安徽省中医药科学院针灸经络研究所合肥230038 新安医学教育部重点实验室安徽合肥230038

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心功能、交感神经活动及心肌损伤相关指标、小脑顶核(FN)γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)的影响,探讨电针预处理改善MIRI的神经调节机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型... 详细信息

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心功能、交感神经活动及心肌损伤相关指标、小脑顶核(FN)γ-氨基丁酸A受体(GABAA受体)的影响,探讨电针预处理改善MIRI的神经调节机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、激动剂组、激动剂+电针组,每组12只。采用冠状动脉左前降支结扎法制备MIRI模型。电针组和激动剂+电针组于双侧“神门”“通里”行电针干预,连续波,频率2 Hz,电流强度1 mA,每次30 min,每天1次,连续干预7 d后制备模型;激动剂组于造模前连续7 d于FN注射GABAA受体激动剂麝香酮(1 g/L),每次150μL,每天1次;激动剂+电针组在每次电针前30 min于FN注射麝香酮。通过PowerLab标准Ⅱ导联采集各组大鼠心电图数据,分析ST段位移值及心率变异性(HRV);ELISA法检测血清去甲肾上腺素(NE)、肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量;TTC染色法检测大鼠心肌梗死面积;HE染色法观察大鼠心肌组织形态;免疫组化法和实时荧光定量PCR法检测大鼠FN GABAA受体阳性表达及mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠ST段位移值、HRV低频和高频比值(LF/HF比值)升高(P电针组大鼠ST段位移值、LF/HF比值降低(P电针组比较,激动剂组及激动剂+电针组ST段位移值、LF/HF比值升高(P电针预处理可改善MIRI大鼠心肌损伤,其机制与抑制FN GABAA受体表达从而改善交感神经兴奋性有关。

关键词：心肌缺血再灌注损伤电针预处理神经机制小脑顶核 GABAA受体

电针预处理对脓毒症急性肺损伤大鼠肺组织中 NEK7- NLRP3炎症小体激活的影响

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南京中医药大学学报 2023年第5期39卷 467-473页

作者：张玉洁徐淑文刘文美张新芳项水英江传玮王媛刘自兵安徽中医药大学研究生院安徽合肥230038 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230038 安徽中医药大学针灸推拿学院安徽合肥230038

目的观察电针预处理“足三里”穴和“尺泽”穴对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中NEK7-NLRP3炎症小体激活的影响,探讨电针预处理在脓毒症ALI中发挥的保护效应及可能机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、电针预处理+对照组、模型组、电... 详细信息

目的观察电针预处理“足三里”穴和“尺泽”穴对脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中NEK7-NLRP3炎症小体激活的影响,探讨电针预处理在脓毒症ALI中发挥的保护效应及可能机制。方法将SD大鼠随机分为对照组、电针预处理+对照组、模型组、电针预处理+模型组,每组10只。各模型组采用腹腔注射脂多糖(LPS)的方法建立脓毒症ALI大鼠模型。各电针预处理组于LPS造模前1周进行连续7 d电针预处理,疏密波,频率4 Hz/20 Hz,强度1~2 mA,持续30 min。检测各组大鼠肺功能;HE染色法观察大鼠肺组织病理学变化;测定大鼠肺组织湿/干质量比值(W/D);ELISA法检测大鼠血浆及肺组织中炎症因子IL-1β、IL-18含量;免疫荧光观察大鼠肺组织中ASC蛋白阳性表达;Western blot法检测大鼠肺组织中NEK7、NLRP3、Caspase-1及IL-1β蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠用力肺活量(FVC)、第0.1秒用力呼气量(FEV_(0.1))、第0.3秒用力呼气量(FEV_(0.3))、FEV_(0.1)/FVC、FEV_(0.3)/FVC均显著降低(P电针预处理+模型组大鼠FVC、FEV_(0.1)、FEV_(0.3)、FEV_(0.1)/FVC、FEV_(0.3)/FVC均明显升高(P电针预处理可以减轻肺部炎性反应,改善肺功能,其机制与电针抑制脓毒症ALI大鼠肺组织中NEK7-NLRP3炎症小体激活相关。

关键词：电针预处理脓毒症急性肺损伤 NEK7 NLRP3炎症小体