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中华泌尿外科杂志 2011年第7期32卷 490-493页

作者：刘保兴彭胜杰刘刚张圣强陈亮王传航中日友好医院男科北京100029 中国铁道建筑总公司北京铁建医院外科 Department of Medicine/Gerontology University of Washington Harborview Medical Center 国家安全生产监督管理总局煤炭总医院泌尿外科

目的构建pEYFP-Cl-Cox7a2表达载体，研究其在小鼠睾丸支持细胞（TM4）中的表达及对细胞色素C氧化酶（COX）活性的影响。方法应用RT—PCR方法从TM4细胞克隆Cox7a2，利用BamHI和EcoRI酶切位点将Cox7a2克隆到pEYFP—C1载体，经酶切、测序... 详细信息

目的构建pEYFP-Cl-Cox7a2表达载体，研究其在小鼠睾丸支持细胞（TM4）中的表达及对细胞色素C氧化酶（COX）活性的影响。方法应用RT—PCR方法从TM4细胞克隆Cox7a2，利用BamHI和EcoRI酶切位点将Cox7a2克隆到pEYFP—C1载体，经酶切、测序及蛋白印迹等技术进行鉴定，并将重组质粒pEYFP—C1-Cox7a2转染TM4细胞后6、12、24、48h，采用分光光度计测定COX活性。结果从TM4细胞克隆到Cox7a2基因完整的编码序列，大小为252bp。构建pEYFP—***7a2表达载体，经酶切、测序鉴定证实克隆正确，转染TM4细胞的效率达70％，融合蛋白表达产物相对分子质量为37000。重组质粒转染后6、12、24、48h时COX活性分别为（0．642±0．051）、（0．542±0．049）、（0．311±0．021）和（0．216±0．010）U／mg，不转染组和转染空载体组分别为（0．714±0．064）、（0．653±0．031）U／mg。与不转染组相比，重组质粒转染后12、24、48h组COX活性显著降低（P〈0．05）。结论重组质粒pEYFP—Cl-Cox7a2载体成功构建。CoxTa2基因对TM4细胞COX活性具有抑制作用，可能对调控COX活性发挥重要作用。

关键词：电子传递复合物iv Cox7a2 pEYFP-C1载体 TM4支持细胞 COX活性

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输入性疖肿型皮肤蝇蛆病一例及致病瘤蝇C0I基因序列分析

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中华皮肤科杂志 2019年第3期52卷 172-175页

作者：张瑾王玉兰滕新栋徐翩飞岳巧云朱可陈晓光山东国际旅行卫生保健中心青岛266071 日照国际旅行卫生保健中心山东日照276800 中山出入境检验检疫局技术中心广东中山528403

报道1例输入性疖肿型皮肤蝇蛆病,并对致病瘤蝇的线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(C0I )基因序列进行分析患者女.33岁.患者于1个月前去非洲加纳和喀麦隆两地.期间未采取任何防蚊措施.且有室外晾晒衣物经历皮肤科检查:左上臂内侧和左侧胸部外... 详细信息

报道1例输入性疖肿型皮肤蝇蛆病,并对致病瘤蝇的线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(C0I )基因序列进行分析患者女.33岁.患者于1个月前去非洲加纳和喀麦隆两地.期间未采取任何防蚊措施.且有室外晾晒衣物经历皮肤科检查:左上臂内侧和左侧胸部外侧各见一疖性隆起,直径1 ~2cm,鲜红色.边缘不规则,触之较硬,皮损表面中央有小孔.形态学观察显示皮损处挤出的虫体疑似为蝇蛆;PCR扩增虫体C0I基因片段获得650 bp左右的产物.测序后经BLAST比对分析显示,该产物与喀麦隆2010年分离的嗜人瘤蝇C0I基因FR719158.I亲缘关系最近.序列相似性为99.84%,在系统进化树上聚集在一起:综合患者的临床特征、旅行史和致病瘤蝇的序列分析结果.确认该病例为嗜人瘤蝇导致的输入性疖肿型皮肤蝇蛆病.

关键词：皮下蝇蛆病蝇科电子传递复合物iv 疖肿型皮肤蝇蛆病嗜人瘤蝇

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小分子干扰RNA抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中的硫氧还蛋白-2对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚单位1、细胞色素C氧化酶I表达的影响

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中华围产医学杂志 2010年第2期13卷 128-133页

作者：蔡成常立文李文斌陈燕单瑞艳刘伟潘睿华中科技大学同济医学院附属同济医院儿科武汉430030

目的探讨小分子干扰RNA（small interference RNA，siRNA）抑制高氧暴露下人肺腺癌A549细胞中硫氧还蛋白-2（thioredoxin-2，Trx-2）对还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide，NADH）脱氢酶亚单位1（NADHdehydrogenase subunit1，NDl）及细胞色素c氧化酶I（eytochrome C oxidase I，COXI）表达的影响。方法体外传代培养A549细胞系，将Trx-2序列特异性的SiRNA转染A549细胞，随机分为无干扰空气组、无干扰高氧组、干扰后空气组与干扰后高氧组。分别于高氧或空气暴露12、24、48h提取A549细胞总RNA和蛋白。采用逆转录一聚合酶链反应技术测定Trx-2、ND1和COX I mRNA水平的表达，Western印迹技术检测Trx-2蛋白的表达。结果（1）序列特异性SiRNA可显著抑制Trx-2表达。（2）无干扰高氧组24hTrx-2mRNA水平为0．7799±0．1249，显著高于无干扰空气组（0．4424±0．1140）（P〈0．05）。干扰后高氧组24hTrx-2mRNA水平为0．2774±0．0174、48h为0．2587±0．0069，均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组（P〈0．05）。（3）无干扰高氧组24hND1 mRNA水平为0．6609±0．0368，显著低于无干扰空气组（0．8898±0．1049）（P〈0．05）。干扰后高氧组12hND1 mRNA水平为0．8848±0．0135，显著高于干扰后空气组（P〈0．05）。干扰后高氧组48hND1 mRNA水平为0．3808土0．0937，均显著低于干扰后空气组和无干扰高氧组（P〈0．05）。（4）无干扰高氧组12hCox 1 mRNA水平为1．7313±0．4331、24h为2．1929±0．6722、48h为2．0754±0．2584，均显著高于无干扰空气组（P〈0．05）。结论ND1、COXI参与高氧肺损伤发生发展过程，Trx-2对高氧肺损伤线粒体起重要的保护作用。

关键词： RNA 小分子干扰硫氧还蛋白质类 NADH脱氢酶电子传递复合物iv 高氧症肺疾病

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脑室内移植嗅成鞘细胞改善大鼠阿尔茨海默病的症状

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老年医学与保健 2009年第5期15卷 286-289,299页

作者：姚柏春孙天敏李聪王金勇李勇王配军李文春郧阳医学院基础医学研究所湖北十堰442000 郧阳医学院图书馆不详郧阳医学院2006级护理本科

目的探讨嗅成鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）脑室内注射对大鼠阿尔茨海默病的影响。方法sD大鼠双侧海马注射ABl．40，建立AD大鼠模型。实验动物分为四组：正常对照组、AD模型组、OECs移植组、MCSF注射组，每组10只。体外... 详细信息

目的探讨嗅成鞘细胞（olfactory ensheathing cells，OECs）脑室内注射对大鼠阿尔茨海默病的影响。方法sD大鼠双侧海马注射ABl．40，建立AD大鼠模型。实验动物分为四组：正常对照组、AD模型组、OECs移植组、MCSF注射组，每组10只。体外原代培养嗅成鞘细胞并将其移植至AD大鼠侧脑室。运用行为学测试、组织化学、原位杂交结合图像分析以及电镜等技术，观察、比较各组大鼠学习记忆能力、海马CA1区线粒体细胞色素氧化酶（cytochrome oxidase，COX）活性、细胞色素氧化酶Ⅱ型亚基（COⅡ）mRNA表达、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）阳性神经元数，以及CA1区神经元线粒体超微结构等指标的变化。结果与正常对照组比较，AD模型组大鼠空间学习记忆能力、海马CA1区线粒体COX活性及CO II mRNA表达、NOS阳性神经元数明显降低或减少俨〈0．05），线粒体数肇减少，结构不清、肿胀、空泡样变、嵴断裂；嗅成鞘细胞移植明显上调上述指标俨〈0．05），并对神经元线粒体超微结构有明显的保护作用。结论嗅成鞘细胞移植通过改善AD大鼠学习记忆能力、提高海马COX活性和CO1ImRNA、NOS阳性神经元表达以及保护神经元线粒体等作用，对大鼠阿尔茨海默病具有明显的治疗作用。

关键词：阿尔茨海默病电子传递复合物iv 一氧化氮合酶线粒体嗅神经移植

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