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肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna表达水平与肝外转移及预后的关系

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中国综合临床 2004年第10期20卷 917-918页

作者：聂常富王建国荆晓岳李荣王福利孔凡明新乡医学院第一附属医院普外科河南省卫辉市453100

目的　探讨肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna表达水平与肝外转移及预后的关系。方法　采用realtime PCR(RT PCR)技术 ,定量检测 5 6例肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白mrna的表达水平。结果　5 6例肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna的平均表达水平为 (34... 详细信息

目的　探讨肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna表达水平与肝外转移及预后的关系。方法　采用realtime PCR(RT PCR)技术 ,定量检测 5 6例肝细胞癌患者外周血甲胎蛋白mrna的表达水平。结果　5 6例肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna的平均表达水平为 (346 4 4 .6± 94 90 5 .4 )copies/ μgRNA ,伴有肝外转移的 13例 10 0 %为阳性 ,平均水平为 (1385 6 9.2± 15 94 99.3)copies/ μgRNA。结论　伴有肝外转移的肝癌患者外周血甲胎蛋白mrna呈高水平表达 ,甲胎蛋白mrna可作为诊断肝癌远处转移的重要指标之一。

关键词：肝肿瘤甲胎蛋白mrna 肿瘤转移

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外周血甲胎蛋白mrna的检测及其临床意义

肿瘤研究与临床 2000年第6期12卷 363-366页

作者：曹骥覃柳亮苏建家李瑗杨南武班克臣欧超莫钦国广西肿瘤研究所广西南宁530021

目的 :寻找肝细胞癌微小转移的标志物。方法 :用巢式反转录聚合酶链反应 (Nested- RT- PCR)技术检测 6 5例肝细胞癌、2 1例非肝癌的恶性肿瘤、2 2例慢性乙型肝炎或肝硬化患者及 2 1例健康志愿者外周静脉血中的甲胎蛋白 (AFP) m RNA。结... 详细信息

目的 :寻找肝细胞癌微小转移的标志物。方法 :用巢式反转录聚合酶链反应 (Nested- RT- PCR)技术检测 6 5例肝细胞癌、2 1例非肝癌的恶性肿瘤、2 2例慢性乙型肝炎或肝硬化患者及 2 1例健康志愿者外周静脉血中的甲胎蛋白 (AFP) m RNA。结果 :AFP- m RNA在健康志愿者、非肝癌恶性肿瘤患者外周血中均为阴性 ;在肝细胞癌组外周血中 AFP- m RNA的检出率 (4 4/6 5 ,6 7.7% )明显高于慢性乙型肝炎或肝硬化组 (2 /2 2 ,9.1% ,P<0 .0 1)。AFP- m RNA检出率与临床分期、门静脉癌栓、肝外转移显著相关。在 12例血清 AFP<2 5 μg/L 的肝癌患者血中 ,7例 (5 8.3% )可检出 AFP- m RNA。结论 :AFP- m RNA可作为血循环中有肝癌细胞或肝细胞的标志物 ,在肝癌患者 ,阳性预示有血源性转移的可能 ;并且 AFP- m RNA对血清

关键词：肝细胞癌甲胎蛋白mrna Nested-RT-PCR 诊断

HBsAg阳性甲胎蛋白mrna在肝癌组织中临床意义

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实用诊断与治疗杂志 2006年第10期20卷 746-747页

作者：宁建玲荣成市人民医院山东省264300

目的:探讨甲胎蛋白mrna在HB sA g阳性肝癌组织中表达的临床意义。方法:用巢式逆转录聚合酶链反应检测38例HB-sA g阳性肝细胞癌患者癌组织甲胎蛋白mrna。结果:32例(84.2%)患者癌组织甲胎蛋白mrna呈阳性表达,其外周血甲胎蛋白mR-NA亦为阳... 详细信息

目的:探讨甲胎蛋白mrna在HB sA g阳性肝癌组织中表达的临床意义。方法:用巢式逆转录聚合酶链反应检测38例HB-sA g阳性肝细胞癌患者癌组织甲胎蛋白mrna。结果:32例(84.2%)患者癌组织甲胎蛋白mrna呈阳性表达,其外周血甲胎蛋白mR-NA亦为阳性;而阴性表达的6例(15.8%)其外周血甲胎蛋白mRHA和血清甲胎蛋白亦为阴性。HB sA g阳性癌组织甲胎蛋白mrna阳性率在合并肝硬化组为100%,合并血清甲胎蛋白>25 ug/L组为100%、无合并肝硬化组为57.1%,甲胎蛋白mrna阳性率和血清甲胎蛋白水平均于癌组织甲胎蛋白mrna阳性表达呈正相关。癌组织甲胎蛋白RNA阳性表达与合并肝硬化呈正相关,而与有无门静脉癌栓或肝外转移及癌灶大小无相关性。结论:大多数HB sA g阳性肝细胞癌的甲胎蛋白基因处于活化状态,其外周血甲胎蛋白mrna阳性表达和血清甲胎蛋白水平均与癌组织甲胎蛋白mrna阳性表达有关。

关键词：肝细胞癌甲胎蛋白mrna 表面抗原聚合酶链反应肝硬化

肝细胞癌及癌旁组织中白蛋白mrna和甲胎蛋白mrna的表达

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广西医科大学学报 2000年第4期17卷 551-553页

作者：覃柳亮苏建家曹骥李瑗班克臣欧超杨南武莫钦国广西肿瘤研究所病理室普瘤科南宁530021

目的 :检测肝细胞癌及癌旁组织白蛋白 m RNA和甲胎蛋白 m RNA表达 ,为外周血肝细胞癌转移指标提供依据。方法 :用 RT- PCR技术检测 18例肝细胞癌和 13例癌旁肝组织中白蛋白 m RNA和甲胎蛋白 m RNA。结果 :1白蛋白 m RNA在 18例癌及 13... 详细信息

目的 :检测肝细胞癌及癌旁组织白蛋白 m RNA和甲胎蛋白 m RNA表达 ,为外周血肝细胞癌转移指标提供依据。方法 :用 RT- PCR技术检测 18例肝细胞癌和 13例癌旁肝组织中白蛋白 m RNA和甲胎蛋白 m RNA。结果 :1白蛋白 m RNA在 18例癌及 13例癌旁组织中均有高表达 ;2白蛋白 m RNA检出率明显高于第一轮 PCR甲胎蛋白 m RNA(P蛋白 m RNA和甲胎蛋白 m RNA可同时在癌组织中表达。结论 :选择检测白蛋白 m RNA敏感性高 ,可以避免漏检不表达或表达很低的甲胎蛋白 m RNA的肝细胞癌转移。

关键词：肝细胞癌白蛋白mrna 甲胎蛋白mrna 癌旁组织

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肝细胞癌在血中微小转移的检测

中华消化杂志 2002年第9期22卷 543-545页

作者：牛瑞芳杨毅魏熙胤郝继辉黄建英天津医科大学附属肿瘤医院中心实验室 300060

目的　肝细胞癌患者术后复发常是术前不能检出微转移灶或术中瘤细胞释放入血之故。建立早期检出肝细胞癌 (HCC)血中微小转移的方法并评价其临床意义。方法　采用巢式RT PCR检测肝细胞特异白蛋白 (ALB)mrna和甲胎蛋白 (AFP)mrna在HCC患... 详细信息

目的　肝细胞癌患者术后复发常是术前不能检出微转移灶或术中瘤细胞释放入血之故。建立早期检出肝细胞癌 (HCC)血中微小转移的方法并评价其临床意义。方法　采用巢式RT PCR检测肝细胞特异白蛋白 (ALB)mrna和甲胎蛋白 (AFP)mrna在HCC患者外周血有核细胞成分及组织标本中的表达情况。并以肝癌细胞系HepG2 、SMMC772 1,乳腺癌细胞MCF 7作为阳性、阴性对照。结果　在肝组织 ,无论是癌、癌旁还是正常组织 ,ALBmrna的表达均为阳性 (8/8) ;而AFPmrna在癌组织7/8例表达 ,癌旁 5 /8例表达。外周血表达的情况为 :同一组标本ALBmrna的阳性率为 75 .6 % (34 /4 5 ,P mrna的阳性率为 5 7.8% (2 6 /4 5 ,P mrna和AFPmrna的表达分别为 10 0 .0 % ,5 4.2 %和 90 .5 % ,2 9.2 %。结论　在HCC患者外周血有核细胞成分中检测ALBmrna和AFPmrna的表达 ,是预测转移、复发的简捷手段 ,若ALB与AFP二者联合使用。

关键词：肝细胞癌血中微小转移白蛋白mrna 甲胎蛋白mrna RT-PCR 临床意义

荧光定量检测AFP mrna的表达与原发性肝癌的相关性研究

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荧光定量检测AFP mRNA的表达与原发性肝癌的相关性研究

作者：吴存造浙江大学

学位级别：硕士

原发性肝癌是一种恶性度高、进展快、预后差的恶性肿瘤。目前能达到长期治愈的唯一希望仍是手术切除或肝移植，然而术后远期效果较差，复发转移率高，据文献报道复发转移率高达50％以上。这可能是因为术前外周血中已有肝癌细胞，或常规... 详细信息

原发性肝癌是一种恶性度高、进展快、预后差的恶性肿瘤。目前能达到长期治愈的唯一希望仍是手术切除或肝移植，然而术后远期效果较差，复发转移率高，据文献报道复发转移率高达50％以上。这可能是因为术前外周血中已有肝癌细胞，或常规检查方法不能发现的微小转移灶，或是不完整的手术切除，或是术中、术后肿瘤细胞的播散。在分子水平上对肝癌的复发转移做出早期诊断，将可能在为患者选择的合适治疗方案，和监测其治疗效果提供很大的帮助，因此如何术前预测或术后预防肝癌的复发转移是当前的研究热点。 AFP基因位于第4对染色体，由14个外显子组成，长17kb(千碱基对)。在胚胎发育期，胎儿肝细胞和卵黄囊基因开放，表达AFP并分泌入血。出生后AFP表达迅速减少，而白蛋白合成增多。最近，在肝细胞肝癌的肿瘤组织AFP mrna已经被发现而非肿瘤组织者没有，这被报道为当肝细胞癌变后，由于甲基化作用使AFP基因重新开放表达AFP。所以，至今血清AFP检测已广泛应用于肝癌的临床诊断，然而，血清AFP检测对预测肝癌是否转移意义不大，目前很多学者致力于检测外周血AFP mrna来间接推测血循环中存在播散的肝肿瘤细胞的研究。本研究采用核酸扩增技术结合荧光标记探针杂交方法(fluorescence quantitative(FQ)PCR combined with nest PCR)对肝癌特异性基因AFP mrna进行定量检测。吴存造 2003年浙江大学硕士学位论文 WuCunZao dssertation for M．M．第一部分：检测原发性肝癌患者外周血单个核细胞 AFP mrna表达的怠义1．目的研究定量检测原发性肝癌患者外周血单个核细胞①BMC）甲胎蛋白AFPmrna表达的意义。2．材料与方法2．l研究对象收集2001～2002年我院收治的原发性肝癌等疾病95例。其中肝细胞肝癌引例，男性 43例，女性 8例，年龄 27～70岁，中位年龄 41岁。经 B超、CT。等影像学和血清AFP恨IA法）检查诊断，经手术切除病理证实39例;转移性肝癌10例，其他肿瘤18例（胃癌6例、胰腺癌3例、直肠癌3例、乳腺癌3例、肺癌3例人慢性肝病患者16例（肝硬化12例，慢性肝炎4例）。2．2方法核酸扩增技术结合荧光标记探针杂交方法3．3 统计学处理采用／检验，所用数据均在 spss刀上处理，u二 0刀5。3．结果 AFP mANA在非肝癌的恶性肿瘤患者无异常表达，在转移性肝癌（20％、2／10）、慢性肝病（6．3％ 1／16）、原发性肝癌（37．3％、19／sl）;AFP mrna的基因拷贝数和肝癌TN M分期【‘］＊静脉癌栓、肝外转移显著相关，而与肿瘤大小及血清AFP值无相关。4．结论巢式FQFCR检测肝癌患者外周血AFP－m叫A异常预示有血源性转移的可能，可作为肝癌的诊断、肿瘤分期和有无肝外转移及愈后的指标。第二部分：荧光定量检测肝癌、癌旁组织及外周血 AFP mrna1．目的：探讨肝癌、癌旁组织及外周血 AFP mANA的表达意义。2．材料与方法：2．1．二研究对象收集 2001年门月～2002年 2月年我院收治手术的原发性肝癌 30例，其中男性26例，女性4例，年龄28～70岁，平均43岁。血清AFP（RIA法）Z20ng — —2一吴存造 2003年浙江大学硕士学位论文 WuCunZao dissertation for M·M·／ml的 ZI例，AFP＜20ng ／ml的 8例。术前定量检测外周血 AFP mrna，全部经手术切除，病理诊断及免疫组化，术后并随访。2．1．2材料术前取静脉血sml送检（按说明书操作详见下）;术中切除少量新鲜肝癌组织、癌

关键词：实时荧光定量检测肝肿瘤甲胎蛋白mrna

Expression and location of α-fetoprotein during rat colon development

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World Journal of Gastroenterology 2009年第14期15卷 1738-1743页

作者： Xiao-Yan Liu Dan Dong Peng Sun Jun Du Luo Gu Ying-Bin Ge Department of Physiology Nanjing Medical University Nanjing 210029 Jiangsu Province China

AIM: To investigate the expression of α-fetoprotein (AFP), a cancer-associated fetal glycoprotein, and its involvement during rat colon development. METHODS: Colons from Sprague-Dawley rat fetuses, young and adult (8 wk old) animals were used in this study. Expression levels of AFP in colons of different development stage were detected by reversetranscriptase PCR (RT-PCR) and Western blotting. To identify the cell location of AFP in the developing rat colons, double-immunofluorescent staining was performed using antibodies to specific cell markers and AFP, respectively. RESULTS: The highest levels of AFP mrna were detected in colons of rats at embryonic day 18.5 (e18.5). Compared to e18.5 d, the AFP expression was significantly decreased during rat development [85% for e20.5, P mrna and conformed to the results of mrna expression. The AFP positive staining was identical to different distribution patterns in fetuses, young and adult animals and positive staining for both AFP and vimentin was overlapped in mesenchymal cells at each stage *** that AFP is localized in the mesenchyme of rat colon from the embryo to the weaning stage by immunofluorescence and presents 72-kDa isoform in the developing rat colons by Western blotting. The dynamic expression of AFP in the various developmental stages of the colon indicates that AFP might be involved in many aspects of colon development.

关键词：甲胎蛋白检测 SD大鼠 Western印迹甲胎蛋白mrna 逆转录聚合酶链反应 blotting 免疫荧光染色发展中国家

原发性肝癌患者外周血中AFPmrna检测的临床意义

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临床肝胆病杂志 2007年第4期23卷 275-277页

作者：张淑文张建东石欣荣卢晋英天津市第三中心医院检验科天津300170

通过定量检测AFPmrna在原发性肝癌(PHC)患者外周血中的表达,探讨AFPmrna作为PHC患者早期诊断和微转移指标的可能性。建立荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR),检测58例外周血AFPmrna的表达量。其中,30例PHC患者中19例AFP≥20ng/m l,23例外... 详细信息

通过定量检测AFPmrna在原发性肝癌(PHC)患者外周血中的表达,探讨AFPmrna作为PHC患者早期诊断和微转移指标的可能性。建立荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR),检测58例外周血AFPmrna的表达量。其中,30例PHC患者中19例AFP≥20ng/m l,23例外周血中AFPmrna有表达;肝癌患者外周血中AFPmrna的基因拷贝数与肝癌患者有肝内外转移有明显相关,而肝炎及健康对照组外周血中AFPmrna均未表达,肝硬化组有一例表达。应用荧光定量PCR检测PHC外周血中AFPmrna表达情况,可以作为早期反映PHC患者外周血中是否存在肝癌细胞和发生微转移的早期灵敏指标。

关键词：原发性肝癌荧光定量聚合酶链式反应甲胎蛋白mrna 外周血

肝细胞癌病人外周血AFP-mrna含量与肝外转移间的关系研究

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重庆医学 2005年第11期34卷 1653-1654页

作者：袁涛邓少丽顾红光第三军医大学大坪医院野战外科研究所肝胆科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所检验科重庆400042

目的定量检测肝细胞癌(HCC)病人外周血AFP-mrna,并探讨其拷贝数与有无肝外转移之间的关系。方法以FQ-PCR方法检测肝癌有肝外转移组(10例)和无肝外转移组(15例)外周血单个核细胞AFP-mrna。结果有肝外转移组拷贝数(4.7×105±36.2)copies/... 详细信息

目的定量检测肝细胞癌(HCC)病人外周血AFP-mrna,并探讨其拷贝数与有无肝外转移之间的关系。方法以FQ-PCR方法检测肝癌有肝外转移组(10例)和无肝外转移组(15例)外周血单个核细胞AFP-mrna。结果有肝外转移组拷贝数(4.7×105±36.2)copies/μg RNA无肝外转移组(3.9×102±25.4)copies/μg RNA,二者之间有明显差异。结论AFP-mrna拷贝数作为判断有无肝外转移有一定的价值。

关键词：肝细胞癌甲胎蛋白mrna 荧光定量PCR