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甲肝病毒在海泥中存活时间的实验研究

环境与健康杂志 1996年第3期13卷 129-129页

作者：郭润霞冀玲吴联熙黄海云常平中国预防医学科学院环境卫生与卫生工程研究所中国预防医学科学院环境卫生与卫生工程研究所北京100050

鉴于已知病毒进入海洋后只需极短时间便被吸附于海洋悬浮物中并随之沉入海底,而且在沉积物中的存活时间和可检出浓度远高于海水,因此本实验以海泥为对象进行了病毒存活时间的研究。1 材料和方法1.1 样品取渤海湾的底泥2.5kg,海水5L 和滴... 详细信息

鉴于已知病毒进入海洋后只需极短时间便被吸附于海洋悬浮物中并随之沉入海底,而且在沉积物中的存活时间和可检出浓度远高于海水,因此本实验以海泥为对象进行了病毒存活时间的研究。1 材料和方法1.1 样品取渤海湾的底泥2.5kg,海水5L 和滴度,TCID1016ml 的细胞传代甲肝病毒（中国预防医学科学院病毒研究所提供）,经充分混匀后放置室温备用。

关键词：甲肝病毒科学院预防医学存活时间毛蜡海泥

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甲肝病毒的核苷酸变异研究

中国卫生检验杂志 2003年第6期13卷 694-695页

作者：张严峻姚军王晓萌陆烨王炫征浙江大学杭州310000 浙江省疾病预防控制中心温州医学院

〔目的〕揭示甲肝病毒在甲肝疫苗使用多年后的变异情况。〔方法〕用逆转录 (RT)、PCR、套式PCR(nPCR)扩增来自病人血清中的甲肝病毒和甲肝疫苗H2 减毒株的 5’端非编码区中的核苷酸片段。扩增的片段进行核酸序列测定 ,并与甲肝疫苗H2 ... 详细信息

〔目的〕揭示甲肝病毒在甲肝疫苗使用多年后的变异情况。〔方法〕用逆转录 (RT)、PCR、套式PCR(nPCR)扩增来自病人血清中的甲肝病毒和甲肝疫苗H2 减毒株的 5’端非编码区中的核苷酸片段。扩增的片段进行核酸序列测定 ,并与甲肝疫苗H2 减毒株的相应序列进行比较。〔结果〕从 2 2份RT -PCR -nPCR甲肝病人血清中扩增到 3个目的片段 ,经测序比较 ,其中两个扩增片段的序列与甲肝疫苗株的相应序列一致 ,另一扩增片段的序列与甲肝疫苗株的相应序列比较有一个核苷酸的变异。〔结论〕甲肝病毒在甲肝疫苗使用多年后没有变异。

关键词：甲肝病毒核苷酸甲肝疫苗变异 PCR 电泳检测

草莓中诺如病毒和甲肝病毒的多重实时荧光逆转录PCR检测方法的建立

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中国食品卫生杂志 2015年第5期27卷 512-517页

作者：高世光冯华炜林天闻鄂铭于洋麻丽丹丹东出入境检验检疫局辽宁丹东118000

目的建立草莓中诺如病毒GI、诺如病毒GII和甲肝病毒等3种食源性病毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法,并应用于实际样品检测。方法对草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA提取和纯化后,先采用单重实时荧光RT-PCR进行检测,随后进行多重实... 详细信息

目的建立草莓中诺如病毒GI、诺如病毒GII和甲肝病毒等3种食源性病毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法,并应用于实际样品检测。方法对草莓样品进行前处理、病毒富集、病毒RNA提取和纯化后,先采用单重实时荧光RT-PCR进行检测,随后进行多重实时荧光RT-PCR反应条件优化,建立多重实时荧光RT-PCR检测方法并分析其特异性和灵敏度。结果所采用的病毒富集和核酸提取方法可以实现病毒的有效富集和抑制剂的去除,建立的多重实时荧光RT-PCR方法特异性强(100%),对草莓样品中诺如病毒GI、诺如病毒GII和甲肝病毒的检测灵敏度分别为56.2 RT-PCR50/20 g、31.6 RT-PCR50/20 g和31.4 CCID50/20 g。同时对50份样品进行检测,结果均为阴性。结论所建立的检测方法快速、灵敏、特异性强,适用于草莓产品中诺如病毒GI、诺如病毒GII和甲肝病毒的同时检测。

关键词：草莓诺如病毒甲肝病毒多重实时荧光RT-PCR 食品安全

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贝类中甲肝病毒提取方法的比较

食品安全质量检测学报 2020年第5期11卷 1573-1579页

作者：王殿夫田卓屈菲朱金艳张宏伟麻丽丹辽东学院丹东118000 大连海关大连116000 庄河市市场监管事务服务中心大连116400 天津海关天津300000 丹东海关丹东118000

目的对贝类甲肝病毒的3种试剂盒提取方法进行比较。方法在贝类样品中添加不同滴度的甲肝减毒疫苗后,采用3种核酸提取法:Roche法、AM1836法、Qiagen74104法。按照其说明书提取模拟样品病毒核酸模板,从抽提效率、抽提核酸的稳定性、抑制... 详细信息

目的对贝类甲肝病毒的3种试剂盒提取方法进行比较。方法在贝类样品中添加不同滴度的甲肝减毒疫苗后,采用3种核酸提取法:Roche法、AM1836法、Qiagen74104法。按照其说明书提取模拟样品病毒核酸模板,从抽提效率、抽提核酸的稳定性、抑制剂去除效率3个方面对提取效果进行比较。结果在抽提核酸稳定性、抑制剂去除效率方面,3种方法结果相同,稳定性的Ct值为24.795~28.651,抑制剂去除效率方面提取的核酸10倍稀释核酸Ct值比未稀释核酸Ct值差值均为2.9~3.2左右(F=26.802,P甲肝病毒提取方面更有优势,可以提高贝类中甲肝病毒检测的灵敏度。

关键词：贝类甲肝病毒试剂盒提取比较

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首次从广西甲肝病人粪便中检出甲肝病毒

广西医学 1991年第3期13卷 206-208页

作者：古绍文梁绍伶葛宪民陈杰王树声广西区卫生防疫站

自Feinstone等人应用免疫电镜(IEM)从甲肝病人急性期粪便中首次发现甲肝病毒(HAV)以来,国内即有人先后从不同地区的甲肝流行中提取到HAV 。但是,尚未见到从广西甲肝病人提取到HAV的报道。为了寻找我区甲肝毒株并进一步开展甲肝的防制工... 详细信息

自Feinstone等人应用免疫电镜(IEM)从甲肝病人急性期粪便中首次发现甲肝病毒(HAV)以来,国内即有人先后从不同地区的甲肝流行中提取到HAV 。但是,尚未见到从广西甲肝病人提取到HAV的报道。为了寻找我区甲肝毒株并进一步开展甲肝的防制工作,我们首次从广西甲肝病人粪便中提取到HAV,经酶联免疫吸附试验(ELISA)及IEM证实。现将结果报告如下。

关键词：甲型肝炎粪便甲肝病毒 ELISA

甲肝IgM抗体诊断试剂盒在甲肝病毒抗原检测中的应用

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标记免疫分析与临床 2004年第3期11卷 173-176页

作者：龙润乡熊秋霞李华宋霞洪超李文忠崔萍芳谢忠平中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所云南昆明650118

将HAVIgM -Ab诊断试剂盒用HAV -Ag标准品调控灵敏度后 ,用于检测HAV -Ag ,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果 ,以选择在甲肝疫苗生产中 ,抗原检测的合适方法。经过调控灵敏度后 ,抗HAVIgM诊断试剂盒完全可以用来检测H... 详细信息

将HAVIgM -Ab诊断试剂盒用HAV -Ag标准品调控灵敏度后 ,用于检测HAV -Ag ,并比较快速检测法和常规过夜法两种检测方法的测定效果 ,以选择在甲肝疫苗生产中 ,抗原检测的合适方法。经过调控灵敏度后 ,抗HAVIgM诊断试剂盒完全可以用来检测HAV -Ag。并可以正确评价HAV -Ag滴度 ,HAV感染性滴度。适用于甲肝疫苗的检定工作。

关键词： HAV 诊断试剂盒滴度甲肝病毒抗原检测 IgM抗体甲肝疫苗正确评价常规方法

RT-Nested PCR检测贝类中甲肝病毒的研究

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检验检疫学刊 2007年第S1期19卷 53-55页

作者：饶红陈广全付溥博冯骞汪琦北京出入境检验检疫局北京100026

[目的]建立灵敏的贝类中甲肝病毒检测方法[方法]由于贝类中HAV污染水平低并存在PCR抑制剂,普通RT-PCR方法检测贝类中甲肝病毒的灵敏度低。本文建立了使用RT-NestedPCR进行贝类中甲肝病毒检测的方法。[结果]此法的检测灵敏度达0.5个TCID5... 详细信息

[目的]建立灵敏的贝类中甲肝病毒检测方法[方法]由于贝类中HAV污染水平低并存在PCR抑制剂,普通RT-PCR方法检测贝类中甲肝病毒的灵敏度低。本文建立了使用RT-NestedPCR进行贝类中甲肝病毒检测的方法。[结果]此法的检测灵敏度达0.5个TCID50/1.5g样品,与普通RT-PCR相比,灵敏度提高了100倍。

关键词：检测甲肝病毒贝 RT-Nested PCR

SYB GRreenⅠ实时PCR检测甲肝病毒方法的建立与初步应用

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中国卫生检验杂志 2007年第7期17卷 1183-1185页

作者：朱兆奎张曦滕峥邵俊杰赵百慧卢伟上海市疾病预防控制中心上海200336

目的:建立一种快速、特异的SYBR GreenⅠ实时PCR方法检测甲肝病毒。方法:对SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲肝病毒方法的反应条件、反应体系进行优化,同时与传统RT-PCR方法进行灵敏度比较,提高该方法的特异性、灵敏性。并用该方法对甲肝病毒... 详细信息

目的:建立一种快速、特异的SYBR GreenⅠ实时PCR方法检测甲肝病毒。方法:对SYBR GreenⅠ实时PCR检测甲肝病毒方法的反应条件、反应体系进行优化,同时与传统RT-PCR方法进行灵敏度比较,提高该方法的特异性、灵敏性。并用该方法对甲肝病毒毒株、脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒(1～6型)毒株、贝类水产品标本进行检测。结果:SYBR GreenⅠ实时PCR与传统RT-PCR检测甲肝病毒方法的灵敏度无明显区别,但检测时间缩短了1/2。该方法能特异检测出甲肝病毒,不能扩增脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒(1～6型)毒株,对农贸市场40份贝类水产品进行甲肝病毒核酸检测,检出3份。结论:建立的SYBR GreenⅠ实时PCR方法用于甲肝病毒检测具有特异、灵敏、快速等优点,可用于甲肝的病原学监测。

关键词：甲肝病毒实时PCR SYBR GreenⅠ

不同RT-PCR扩增试剂盒检测甲肝病毒效果评价

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中国口岸科学技术 2020年第7期2卷 43-52页

作者：齐欣曲世超田卓麻丽丹崔妍徐文英王煜大连海关技术中心大连116001 丹东海关丹东118001

讨论评价ABI公司、天根公司和Roche公司扩增试剂盒用于检测食品中甲肝病毒结果的差异,为甲肝病毒扩增检测提供便捷、准确的技术参考。在食品样品中添加盔甲病毒作为病毒富集的过程质控,甲肝减毒疫苗作为阳性对照。根据一步法RT-PCR检测... 详细信息

讨论评价ABI公司、天根公司和Roche公司扩增试剂盒用于检测食品中甲肝病毒结果的差异,为甲肝病毒扩增检测提供便捷、准确的技术参考。在食品样品中添加盔甲病毒作为病毒富集的过程质控,甲肝减毒疫苗作为阳性对照。根据一步法RT-PCR检测人工污染样品的Ct值对三种扩增试剂盒的扩增效率、特异性和灵敏度进行评价和数据分析。ABI公司扩增试剂盒扩增效率最高(EFF%:91.584),灵敏度最高(0.314CCID50/μL),三种扩增试剂盒均具有良好的特异性。采用盔甲病毒作为过程控制病毒进行食品中甲肝病毒的检测,为甲肝病毒的质量控制提供分析依据。ABI公司扩增试剂盒在总体性能上优于其他两个厂家,更适用于各级实验室甲肝病毒的日常检测工作,为一线检测工作提供最佳的扩增方案及质量控制措施。

关键词：扩增试剂盒甲肝病毒盔甲病毒评价