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间断性低剂量应用重组人甲状旁腺素（1—34）在骨折愈合早期促Runx2基因的表达

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中华医学杂志 2009年第11期89卷 771-776页

作者：李宁王满宜贺良姜旭吴成爱北京大学第四临床学院(北京积水潭医院)创伤骨科 100035 北京大学第四临床学院(北京积水潭医院)矫形骨科 100035 北京市创伤骨科研究所

目的研究间断性低剂量应用重组人甲状旁腺素（1-34）[rhPTH（1-34）]在骨折愈合的早期过程中与成骨基因Runx2表达的相关性。方法应用2月龄雄性Sprague—Dawley大鼠建立单侧闭合性股骨骨折内固定模型，随机分为甲状旁腺素治疗组和对照组... 详细信息

目的研究间断性低剂量应用重组人甲状旁腺素（1-34）[rhPTH（1-34）]在骨折愈合的早期过程中与成骨基因Runx2表达的相关性。方法应用2月龄雄性Sprague—Dawley大鼠建立单侧闭合性股骨骨折内固定模型，随机分为甲状旁腺素治疗组和对照组，术后分别皮下注射重组人甲状旁腺素（1．34）10μg·k^-1·d^-1或等剂量安慰剂，分别于术后第2、4、7、14和21天取双侧股骨标本，提取组织RNA和蛋白质，分别行实时荧光定量PCR和免疫印迹检测，以检测Runx2的mRNA表达和蛋白质水平。结果甲状旁腺素组较对照组，骨折端Runx2的mRNA表达水平于骨折术后第14、21天有明显升高（分别为2．6倍和3．8倍，P〈0．05），同时骨折端Runx2的蛋白质水平也于术后第14、21天时有明显增加。结论间断性低剂量应用重组人甲状旁腺素（1-34）在骨折愈合的早期过程中，可上调成骨基因Runx2的mRNA表达和蛋白质水平，促进骨折的愈合。

关键词：甲状旁腺激素类骨折愈合成骨细胞基因表达

pcDPG基因治疗甲状旁腺功能减退症的实验研究

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中华医学杂志 2006年第4期86卷 260-265页

作者：温济民钟宇华孙芸黄忠张陵武吴全理曾达才北海市人民医院普外科广西536000 北海市人民医院内分泌科广西536000 北海市人民医院妇产科广西536000

目的构建甲状旁腺激素(PTH)基因的重组真核表达质粒,评价体外转染后PTH基因的表达与生物学活性,同时观察其对甲状旁腺功能减退动物的基因治疗作用。方法(1)从人胚甲状旁腺组织中克隆PTH基因,拓扑法构建其重组真核表达质粒pcDNA3.1-PTH-G... 详细信息

目的构建甲状旁腺激素(PTH)基因的重组真核表达质粒,评价体外转染后PTH基因的表达与生物学活性,同时观察其对甲状旁腺功能减退动物的基因治疗作用。方法(1)从人胚甲状旁腺组织中克隆PTH基因,拓扑法构建其重组真核表达质粒pcDNA3.1-PTH-GFP(pcDPG),并采用酶切、聚合酶链反应(PCR)及DNA测序鉴定;(2)用脂质体转染pcDPG入293细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达并计算转染率,同时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证PTH基因的表达;(3)纯化转染细胞上清中PTH蛋白,进行生物学活性鉴定;(4)建立甲状旁腺功能减退症的家兔模型,将pcDPG质粒以肌肉注射进行分组治疗,监测血钙、磷和PTH值及存活时间,通过形态学观察各器官的病理变化。结果(1)酶切与PCR结果与预期相同,测序结果与文献中序列同源性为99.3%;(2)细胞转染后24h即可见GFP表达,随时间延长而表达增强,48h转染率达38.9%和62.5%,同时RT-PCR见PTH基因表达;(3)纯化的PTH蛋白可对抗甲状旁腺切除小鼠的抽搐症状;(4)模型兔术后第2d血钙(1.71mmol/L±0.09mmol/L,1.73mmol/L±0.03mmol/L,1.75mmol/L±0.03mmol/L,1.65mmol/L±0.04mmol/L)明显低于术前(2.82mmol/L±0.21mmol/L,P甲状旁腺功能减退家兔有较好的疗效,从而为甲状旁腺功能减退症基因治疗的进一步研究奠定了基础。

关键词：甲状旁腺激素类基因疗法基因表达甲状旁腺功能减退症

北京地区汉族年轻妇女钙敏感受体基因多态性分布及其与血钙水平相关性

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中华内科杂志 2007年第1期46卷 43-47页

作者：王鸥孟迅吾邢小平夏维波李梅徐苓周学瀛矫杰胡莹莹刘怀成中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院内分泌科 100730

目的了解北京地区汉族年轻妇女钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CASR)基因多态性的分布,探索其与血钙、甲状旁腺素(PTH)水平的相关性。方法分别采用突变分离 PCR 和错配 PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测北京地区202例无亲... 详细信息

目的了解北京地区汉族年轻妇女钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CASR)基因多态性的分布,探索其与血钙、甲状旁腺素(PTH)水平的相关性。方法分别采用突变分离 PCR 和错配 PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)方法检测北京地区202例无亲缘关系的汉族年轻健康妇女(20～35岁)CASR 基因 A986S、G990R 基因型,测定其血钙、经白蛋白校正后的血钙、磷及 PTH 水平,以及肝肾功能等指标。结果 (1)北京地区汉族妇女中存在 CASR 基因 A986S、G990R 多态性,AA、AS 基因型频率分别为95.0%和5.0%,等位基因 A 和 S 的频率分别为97.5%和2.5%;RR、GR 及 GG基因型频率分别为21.3%、51.0%和27.7%,等位基因 R 和 G 的频率分别为46.8%和53.2%。(2)AA、AS 基因型组血钙分别为(2.46±0.09)、(2.45±0.08)mmol/L,经白蛋白校正后的血钙为(2.31±0.10)、(2.30±0.09)mmol/L,血磷为(1.23±0.14)、(1.24±0.11)mmol/L,血 PTH 为(41.6±18.6)、(50.0±25.1)ng/L,上述指标差异无统计学意义。(3)GG、GR 及 RR 组的血钙分别为(2.44±0.10)、(2.46±0.08)及(2.48±0.08)mmol/L,经白蛋白校正后的血钙分别为(2.30±0.10)、(2.32±0.09)及(2.32±0.10)mmol/L,血磷分别为(1.22±0.13)、(1.24±0.15)及(1.20±0.15)mmol/L,血 PTH分别为(37.6±16.0)、(42.1+20.2)及(45.9±18.1)ng/L,各组间血钙、校正后的血钙及 PTH 水平间差异有统计学意义(P 值分别为0.042、0.020及0.014)。结论 (1)北京地区汉族妇女中 CASR 基因A986S、G990R 多态性的分布频率,以 A、G 等位基因频率较高,初步显示其分布与高加索人群不同。(2)在健康人群中 G990R 多态性与血钙、PTH 水平相关,R 等位基因对应较高的血钙和 PTH 水平。未发现 A986S 多态性与血钙、PTH 水平相关。

关键词：钙甲状旁腺激素类钙敏感受体

篮球专业和非篮球专业男性大学生身体不同部位骨密度对比分析

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吉林大学学报（医学版） 2007年第6期33卷 1077-1079页

作者：赵立君李凤丽陈琼邴国强孙茹吉林大学体育学院术科教研室吉林长春130012 吉林大学体育学院理论教研室吉林长春130012

目的：观察长期从事篮球运动对身体不同部位骨密度（BMD）和骨代谢相关生化指标的影响。方法：选择训练年限在10年以上篮球运动员和非体育专业大学生同龄男性志愿者各15名，分别为训练组和非训练组；采用骨密度测定仪和血清放射免疫法... 详细信息

目的：观察长期从事篮球运动对身体不同部位骨密度（BMD）和骨代谢相关生化指标的影响。方法：选择训练年限在10年以上篮球运动员和非体育专业大学生同龄男性志愿者各15名，分别为训练组和非训练组；采用骨密度测定仪和血清放射免疫法测定受试者腰椎、左右髋关节的股骨颈、双侧髋关节、股骨Ward区、双侧前臂的BMD以及血清睾酮（T）、皮质醇（COR）、甲状旁腺素（PTH）、骨钙素（BGP）的变化。结果：训练组腰椎（L2～L4）、右前臂和髋关节股骨颈BMD峰值明显高于非训练组（P〈0．05或P＜0．01）。静息状态下两组T、COR、PTH和BGP差异无显著性（P〉0．05）。结论：长期从事篮球运动能有效地增加身体BMD，但安静状态下对T、COR、PTH和BGP无明显影响。

关键词：运动医学骨密度睾酮氢化可的松甲状旁腺激素类骨钙素

不同钙营养条件下氟中毒大鼠血清甲状旁腺激素的变化

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中国地方病学杂志 2006年第6期25卷 625-628页

作者：于钧孙殿军王伟徐春蓓吴玉石玉霞高彦辉宋丽哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病研究所 150081

目的动态观察不同钙营养条件下过量氟对大鼠血清甲状旁腺激素(PTH)的影响。方法以SD雄性大鼠为实验对象,采用3×2×3析因设计,按体质量随机分为6组:高钙对照组、高钙氟化钠组、常钙对照组、常钙氟化钠组、低钙对照组、低钙氟化钠组。分... 详细信息

目的动态观察不同钙营养条件下过量氟对大鼠血清甲状旁腺激素(PTH)的影响。方法以SD雄性大鼠为实验对象,采用3×2×3析因设计,按体质量随机分为6组:高钙对照组、高钙氟化钠组、常钙对照组、常钙氟化钠组、低钙对照组、低钙氟化钠组。分别饲以含钙量不同的合成饲料,各对照组饮用去离子水,各氟化钠组饮用含氟100 mg／L的去离子水。每8周处死一批大鼠,观察氟斑牙发生情况,用氟离子选择电极法测定血清氟、骨氟,用比色法测定血清钙,用放射免疫方法检测血清PTH水平。结果不同钙营养条件下加氟组大鼠均出现氟中毒;随染氟时间延长,不同钙营养条件下氟中毒大鼠的血清PTH活性升高,尤其高钙和低钙氟中毒大鼠血清PTH活性比常钙对照组显著升高(P<0．05或0．01);在实验初期常钙和高钙氟中毒大鼠血清钙低于其对照组(P<0．01),后期高钙氟中毒大鼠血清钙明显低于其对照组(P<0．05)。结论长期摄入过量氟可使机体血清PTH水平代偿性增高以维持血钙保持在正常范围内;长期摄入过量钙可减少氟在体内的蓄积。

关键词：氟化物中毒钙甲状旁腺激素类

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亚慢性氟中毒影响大鼠骨转换的动态分析

中国地方病学杂志 2005年第3期24卷 288-290页

作者：高彦辉付松波孙辉周令望王宇于钧李颖孙殿军哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心地氟病研究所 150086

目的观察亚慢性氟中毒过程中骨密度及激素水平的变化情况,进一步探讨氟中毒的发病机制。方法将雄性Wistar大鼠按体质量随机分成2组,氟化钠组每日饮用含氟150mg/L的氟化钠水溶液,正常对照组饮用蒸馏水,共饲养6个月,每月处死一批动物,测... 详细信息

目的观察亚慢性氟中毒过程中骨密度及激素水平的变化情况,进一步探讨氟中毒的发病机制。方法将雄性Wistar大鼠按体质量随机分成2组,氟化钠组每日饮用含氟150mg/L的氟化钠水溶液,正常对照组饮用蒸馏水,共饲养6个月,每月处死一批动物,测定血清及骨组织中的含氟量,光镜观察长骨干骺端的骨小梁密度,用放免方法检测血清中甲状旁腺激素(PTH)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)水平。结果成功的复制出了大鼠氟中毒的模型;随着染氟时间的延长,氟化钠组的骨小梁密度同对照组相比明显增加,PTH水平持续维持在高水平,与对照组比较差异有统计学意义,BGP水平从第2个月开始明显高于对照组,但两组的总体趋势均呈明显下降趋势,两组间CT水平未见明显差异。结论高剂量氟可以通过持续影响PTH和BGP水平调控骨转换过程。

关键词：氟化物中毒骨转换甲状旁腺激素类骨钙素亚慢性大鼠

序贯使用降钙素和甲状旁腺激素对骨重建过程作用的实验研究

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中华医学杂志 2001年第14期81卷 836-840页

作者：张凤山党耕町北京大学第三医院骨科 100083

目的　试图通过序贯使用降钙素和甲状旁腺激素分别干预骨重建的吸收期和形成期 ,达到通过干预骨重建全过程来实现骨重建正平衡。方法　将 12只雄性大鼠平均分为对照组和干预组。干预组于实验第 1、2日每日肌肉注射益钙宁 1U/ 10 0g ,于... 详细信息

目的　试图通过序贯使用降钙素和甲状旁腺激素分别干预骨重建的吸收期和形成期 ,达到通过干预骨重建全过程来实现骨重建正平衡。方法　将 12只雄性大鼠平均分为对照组和干预组。干预组于实验第 1、2日每日肌肉注射益钙宁 1U/ 10 0g ,于实验的第 4、5天肌肉注射重组大鼠甲状旁腺激素 (rrPTH) 30 μg/ 10 0g ;对照组同期肌注生理盐水和溶媒。于实验第 6天取腰椎椎体 ,采用骨组织形态计量学的方法定量观察腰椎椎体松质骨骨组织学静态参数的变化 ,采用电镜定性观察各种骨重建表面上细胞的超微形态变化。结果　实验组序贯应用降钙素和甲状旁腺激素后 ,骨小梁成骨细胞表面积相对百分比、类骨质平均厚度、单位成骨细胞骨形成表面的成骨细胞数、骨小梁类骨质相对体积分别为 19 9%± 6 2 %、3 4μm± 0 4μm、37 6个 /mm± 4 6个 /mm、1 8%± 0 6 % ,均大于对照组 ,P 甲状旁腺激素后成骨细胞成骨功能增加。结论　序贯应用降钙素和甲状旁腺激素明显刺激骨形成 ,骨构建形成部位的增加大于骨重建形成部位。

关键词：降钙素甲状旁腺激素类骨重建骨质疏松

甲状旁腺激素基因多态性与女性骨量及骨相关生化指标的关系

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中华医学杂志 2006年第6期86卷 376-379页

作者：钟妮张红伍贤平罗湘杭谢辉曹行之单鹏飞刘红皮银珍方团育廖二元中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所

目的探讨正常女性人群甲状旁腺素(PTH)基因多态性与骨量、血清骨相关生化指标的关系。方法用ELISA法测定314名20～80岁(平均年龄43±16岁)血清PTH、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、Ⅰ型胶原羧基末端肽、Ⅰ型胶原氨基末端肽和护骨素及瘦素的浓... 详细信息

目的探讨正常女性人群甲状旁腺素(PTH)基因多态性与骨量、血清骨相关生化指标的关系。方法用ELISA法测定314名20～80岁(平均年龄43±16岁)血清PTH、骨特异性碱性磷酸酶(BAP)、Ⅰ型胶原羧基末端肽、Ⅰ型胶原氨基末端肽和护骨素及瘦素的浓度;对女性志愿者基因组的DNA样品作限制性内切酶BstBI的聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测以确定其基因型(存在BstBI限制性酶切位点用“B”表示,不存在则用“b”表示);DXA测定腰椎正位总体(AP)、仰卧侧位腰椎和股骨颈的骨密度(BMD)。结果(1)健康女性PTH基因BB型(绝经前120例,绝经后118例),Bb型(绝经前37例,绝经后36例)和bb型分布频率分别为75.8%,23.3%和0.9%;等位基因频率为87.5%,12.5%。绝经前妇女PTH基因多态性频率较绝经后妇女无差异。(2)协方差分析显示女性BB和Bb基因型在正侧位腰椎、股骨颈的BMD和血清骨生化指标(PTH、BAP、CTX、NTX、OPC及瘦素)差异无统计学意义;(3)多元逐步回归显示PTH基因多态性对BMD的变异无影响。结论PTH基因多态性与女性骨量及血清骨生化指标不相关。

关键词：甲状旁腺激素类骨密度

甲状旁腺激素对人成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的调控

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第28期12卷 5406-5409页

作者：李继斌谢辉袁凌清罗湘杭中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所湖南省长沙市410911 湖南省双峰县人民医院内分泌科湖南省娄底市417700

背景:甲状旁腺激素是骨代谢的重要调节因子,膜型基质金属蛋白酶1在骨吸收的调控中起重要作用。目的:观察甲状旁腺激素对人成骨样MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的影响。设计、时间及地点:观察对比实验,于2001-03/2002-07在中南大学... 详细信息

背景:甲状旁腺激素是骨代谢的重要调节因子,膜型基质金属蛋白酶1在骨吸收的调控中起重要作用。目的:观察甲状旁腺激素对人成骨样MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的影响。设计、时间及地点:观察对比实验,于2001-03/2002-07在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所实验室完成。材料:人成骨样MG-63细胞株,甲状旁腺激素(1～34)。方法:分别应用1,10,100nmol/L的甲状旁腺激素(1～34)干预MG-63细胞24h;或分别用10nmol/L甲状旁腺激素(1～34)干预MG-63细胞2,6,24,48h。每干预组设3个平行样本,重复3次。主要观察指标:采用Northern杂交法检测膜型基质金属蛋白酶1 mRNA表达水平;Western杂交法检测膜型基质金属蛋白酶1蛋白表达水平。结果:①1,10,100nmol/L的甲状旁腺激素(1～34)对MG-63细胞膜型基质金属蛋白酶1 mRNA及蛋白的表达有抑制作用,呈剂量依赖性(P甲状旁腺激素(1～34)在干预2～48h内对膜型基质金属蛋白酶1 mRNA及蛋白的表达有抑制作用,呈时间依赖性(P甲状旁腺激素具有抑制成骨样细胞膜型基质金属蛋白酶1表达的作用,此可能为甲状旁腺激素诱导骨吸收的作用途径之一。

关键词：甲状旁腺激素类金属蛋白酶类成骨细胞