检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甲基转移酶在微生物合成天然产物中的应用

生物工程学报 2021年第6期37卷 1869-1886页

作者：张香燕申晓林孙新晓王佳袁其朋北京化工大学生命科学与技术学院

甲基转移酶(Methyltransferases,MTs)普遍存在于所有生物有机体中,通常以S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体催化底物的甲基化反应,在基因的表达调控和许多天然化合物的合成中起着至关重要的作用。近年来,在微生物中异源表达MTs以实现一些重要... 详细信息

甲基转移酶(Methyltransferases,MTs)普遍存在于所有生物有机体中,通常以S-腺苷甲硫氨酸作为甲基供体催化底物的甲基化反应,在基因的表达调控和许多天然化合物的合成中起着至关重要的作用。近年来,在微生物中异源表达MTs以实现一些重要天然产物的生物合成取得了巨大的进步,但迄今为止这方面的研究还没有得到详细和全面的总结。文中综述了MTs在微生物合成苯丙烷类化合物、香料类化合物、激素和抗生素等重要天然产物的最新研究进展,重点阐述了应用代谢工程策略高效合成这些甲基化的天然产物,以及利用MTs拓展天然产物分子多样性的研究进展。最后,探讨了MTs应用于微生物合成天然产物所面临的挑战,并对利用MTs进一步高效生产结构和生物活性多样化的天然产物进行了展望。

关键词：甲基转移酶天然产物代谢工程合成生物学

甲基转移酶SETDB1在口腔癌中的表达及临床意义

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

实用口腔医学杂志 2022年第6期38卷 792-795页

作者：郝妍白相宇霍峰陈喜波承德医学院附属医院口腔科 067000

目的:研究SET结构域分支型1(SETDBl)在口腔癌中的表达及其临床意义。方法:收集口腔癌及对应癌旁组织各47例,qRT-PCR检测组织中SETDBl mRNA相对表达水平,免疫组化法SP和Western blot检测SETDBl蛋白的表达,统计学分析SETDBl与患者临床病... 详细信息

目的:研究SET结构域分支型1(SETDBl)在口腔癌中的表达及其临床意义。方法:收集口腔癌及对应癌旁组织各47例,qRT-PCR检测组织中SETDBl mRNA相对表达水平,免疫组化法SP和Western blot检测SETDBl蛋白的表达,统计学分析SETDBl与患者临床病理特征的相关性。结果:癌组织中SETDBl mRNA相对表达量较癌旁组织显著增高(P转移具有相关性(P0.05)。结论:口腔癌中SETDBl表达水平异常升高并与肿瘤进展密切相关。

关键词：甲基转移酶 SETDB1 口腔癌甲基化

甲基转移酶DNMT3b和SPG20甲基化在肺腺癌中的相关性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤临床 2021年第19期48卷 973-978页

作者：赵宝山邢志君孙光蕊张志民张旭梁宗英承德医学院附属医院胸外科河北省承德市067000

目的:探讨肺腺癌组织中DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)表达与SPG20甲基化水平,分析二者相关性及在肺腺癌发病机制中的临床意义。方法:收集2020年4月至2021年4月于承德医学院附属医院收集的70例肺腺癌和癌旁组织,采用焦磷酸测序检测SPG20基因... 详细信息

目的:探讨肺腺癌组织中DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)表达与SPG20甲基化水平,分析二者相关性及在肺腺癌发病机制中的临床意义。方法:收集2020年4月至2021年4月于承德医学院附属医院收集的70例肺腺癌和癌旁组织,采用焦磷酸测序检测SPG20基因甲基化水平,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SPG20和DNMT3b mRNA的表达,采用免疫组织化学法及Western blot检测SPG20和DNMT3b的蛋白表达。统计分析SPG20甲基化水平与DNMT3b相关性及两者与临床病例特征的相关性。构建DNMT3b下调si-RNA,采用脂质体介导法,将DNMT3b si-RNA、阴性对照si-RNA和空白对照组转染A549细胞。使用RT-qPCR和Wesrern blot检测DNMT3b mRNA和蛋白表达水平,采用焦磷酸测序检测各组SPG20基因甲基化水平。结果:在癌组织和癌旁组织中,SPG20基因甲基化率分别为76.25%±5.74%和13.45%±2.41%,SPG20 mRNA相对表达量为0.18±0.03和1.21±0.17,差异具有统计学意义(均P甲基化和DNMT3b具有相关性(r=0.437,P甲基化和DNMT3b与肿瘤TNM分期、组织分化和淋巴结转移密切相关(P甲基化率明显下降。结论:在肺腺癌病变过程中,DNMT3b与SPG20基因甲基化存在明显的相关性,DNMT3b高表达可能是SPG20基因甲基化前重要的分子事件,在肺腺癌早期病变诊治中具有潜在应用价值。

关键词：甲基转移酶 SPG20基因甲基化肺腺癌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

核苷类甲基转移酶抑制剂的研究进展

药学学报 2024年第5期59卷 1126-1150页

作者：张俊杰刘同超熊兵中国科学院上海药物研究所上海201203 中国科学院大学北京100049

S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)作为仅次于ATP第二普遍存在的辅助因子,其主要的功能是作为SAM依赖性甲基转移酶的甲基供体,对DNA、RNA、蛋白质等基本生命物质进行甲基化修饰。此过程构成了表观遗传调控、细胞信号转导和生物代谢循环的重要一环,... 详细信息

S-腺苷-L-蛋氨酸(SAM)作为仅次于ATP第二普遍存在的辅助因子,其主要的功能是作为SAM依赖性甲基转移酶的甲基供体,对DNA、RNA、蛋白质等基本生命物质进行甲基化修饰。此过程构成了表观遗传调控、细胞信号转导和生物代谢循环的重要一环,参与多种疾病的发生与发展,因此,SAM依赖性甲基转移酶已成为药物研发的潜在靶点。最近,许多核苷类分子已经被开发为甲基转移酶的SAM竞争性抑制剂,从而阻断下游的信号通路,达到治疗相关疾病的目的。本文系统性回顾基于SAM结构开展改造的甲基转移酶抑制剂设计策略和研发过程,分析核苷类甲基转移酶抑制剂研发的不足和解决方法,为未来设计靶向甲基转移酶SAM结合位点的核苷类分子提供更多的思路。

关键词：表观遗传学 S-腺苷-L-蛋氨酸甲基转移酶核苷类似物

甲基转移酶set9缺失的斑马鱼低氧耐受能力增强

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

水生生物学报 2021年第5期45卷 951-957页

作者：查荒源于光晴陈小云肖武汉刘兴大连海洋大学水产与生命学院大连116023 中国科学院水生生物研究所武汉430072

为了研究鱼类的甲基转移酶set9[SET domain containing(lysine methyltransferase)9,也称作set7/setd7]在低氧耐受中的功能,以斑马鱼(Danio rerio)作为模式生物,利用CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR associated protein 9)基因编辑技术,在斑马鱼set9基因的第一个外显子上设计了Cas9的靶位点,对其进行基因敲除,获得了缺失8个碱基的set9基因敲除的斑马鱼品系。对受精后3d的斑马鱼幼鱼和3月龄的斑马鱼成鱼进行低氧胁迫处理,比较了野生型及set9基因敲除的斑马鱼的低氧耐受能力;并对低氧胁迫处理后的3月龄的野生型及set9基因敲除的斑马鱼成鱼的脑组织取材、固定并进行TUNEL染色。结果显示:set9基因敲除的斑马鱼与野生型相比,其低氧耐受能力显著增强,脑组织中的细胞凋亡水平显著减少。研究为进一步揭示鱼类甲基转移酶set9在低氧耐受中的功能和分子机制提供了线索,并为培育耐低氧鱼类新品种提供了候选靶标。

关键词：甲基转移酶 set9 基因敲除低氧斑马鱼

拟南芥H3K27甲基转移酶CLF响应环境温度和参与温度形态建成研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

华南农业大学学报 2023年第5期44卷 818-826页

作者：谢文浩李成章俞瑜复旦大学生命科学学院/遗传工程国家重点实验室上海200438

【目的】探索拟南芥H3K27甲基转移酶CURLY LEAF(CLF)在温度形态建成中的作用。【方法】在不同温度条件(22和16℃)下,对拟南芥Arabidopsis野生型Col-0和突变体clf-29进行表型分析和转录组分析,筛选差异表达基因。【结果】在不同温度条件... 详细信息

【目的】探索拟南芥H3K27甲基转移酶CURLY LEAF(CLF)在温度形态建成中的作用。【方法】在不同温度条件(22和16℃)下,对拟南芥Arabidopsis野生型Col-0和突变体clf-29进行表型分析和转录组分析,筛选差异表达基因。【结果】在不同温度条件下,clf-29表现出显著的表型差异,相较于22℃,16℃时clf-29和Col-0的表型差异更小。转录组分析发现CLF的缺失会导致大量基因表达差异,并将其分为4种类型(仅在Col-0显著上调、下调,仅在clf-29突变体显著上调、下调),包含96个温度响应基因。【结论】拟南芥表观遗传调控因子CLF响应环境温度,并参与温度形态建成。

关键词：拟南芥甲基转移酶 H3K27me3 温度形态建成

镉暴露大鼠肾脏m^(6)A甲基转移酶的表达及其与微小RNA-21和转化生长因子-β1的关系

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

环境与职业医学 2022年第8期39卷 902-907页

作者：杨倩张祎凡韩致超刘如洁李宇星申炜垌梁宇芬张佳晨李双婧周涵雷立健山西医科大学公共卫生学院流行病学教研室山西太原030001

[背景]环境污染物会导致机体N6-甲基腺苷(m^(6)A)水平发生变化,但镉介导肾脏m^(6)A水平如何变化及肾损伤分子机制还需进一步研究。[目的]探索镉暴露大鼠肾脏m^(6)A修饰、(去)甲基转移酶与微小RNA-21(miR-21)和转化生长因子-β1(TGF-β1... 详细信息

[背景]环境污染物会导致机体N6-甲基腺苷(m^(6)A)水平发生变化,但镉介导肾脏m^(6)A水平如何变化及肾损伤分子机制还需进一步研究。[目的]探索镉暴露大鼠肾脏m^(6)A修饰、(去)甲基转移酶与微小RNA-21(miR-21)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平的关系。[方法]24只SPF级雄性SD大鼠随机分为4组,每组6只,分别皮下注射2.0、1.0、0.5 mg·kg^(–1)氯化镉溶液和等体积生理盐水2周,每周7 d。采用酶联免疫吸附试验检测大鼠尿液中N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(UNAG)和尿白蛋白(UALB)、肾脏TGF-β1和m^(6)A修饰水平。采用脲酶法测定大鼠血浆尿素氮(BUN)水平。分别采用硫代巴比妥酸法、水溶性四唑盐法和比色法检测肾脏氧化应激指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平。采用逆转录聚合酶链反应测定肾组织纤维化因子TGF-β1 mRNA和m^(6)A(去)甲基转移酶水平。采用荧光定量聚合酶链反应检测肾组织miR-21的表达水平。[结果]2周染毒结束后,2.0、1.0 mg·kg^(–1)氯化镉组的大鼠体重减轻,2.0 mg·kg^(–1)氯化镉组肾脏系数、BUN、UNAG及TGF-β1的mRNA和蛋白水平均升高(P甲基转移酶METTL3、METTL14、Wilms肿瘤1-相关蛋白(WTAP)及miR-21表达水平在2.0、1.0 mg·kg^(–1)氯化镉组升高,与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示m^(6)A修饰水平与SOD(r=−0.4489)和GSH-Px(r=−0.4874)呈负相关(P<0.05),METTL3与MDA呈负相关(r=−0.5158,P<0.05),而FTO与GSH-Px之间具有正相关关系(r=0.4802,P<0.05)。此外,miR-21与METTL3(r=0.7491)、METTL14(r=0.6157)和WTAP(r=0.6660)表达水平呈正相关(均P<0.05),TGF-β1与METTL3表达水平也具有正相关关系(r=0.5025,P<0.05),但与FTO呈负相关关系(r=−0.5634,P<0.05)。[结论]镉可致大鼠肾脏组织m^(6)A修饰和METTL3、METTL14、WTAP及miR-21表达水平上调,提示m^(6)A和miR-21可能与镉诱导的肾纤维化有关。

关键词：镉肾 N6-甲基腺苷转化生长因子-β1 微小RNA-21 甲基转移酶去甲基转移酶

东方蜜蜂微孢子虫类甲基转移酶样蛋白5基因NcMettl5的克隆、分子特性与表达模式

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

菌物学报 2023年第5期42卷 1102-1113页

作者：孙明会钱加珺李琪明张天泽张佳欣赵浩东张奎昊朱乐冉陈田陈大福付中民郭睿福建农林大学动物科学学院(蜂学学院) 福建福州350002 福建农林大学蜂疗研究所福建福州350002

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物中分布广泛、含量丰富且作用关键的一类RNA修饰。东方蜜蜂微孢子虫Nosemaceranae专性侵染成年蜜蜂导致微孢子病,给养蜂业造成很大损失。本研究对东方蜜蜂微孢子虫的甲基转移酶样蛋白5(Met... 详细信息

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)是真核生物中分布广泛、含量丰富且作用关键的一类RNA修饰。东方蜜蜂微孢子虫Nosemaceranae专性侵染成年蜜蜂导致微孢子病,给养蜂业造成很大损失。本研究对东方蜜蜂微孢子虫的甲基转移酶样蛋白5(Methyltransferase-likeprotein5,Mettl5)基因NcMettl5进行克隆,通过生物信息学预测NcMettl5蛋白的理化性质和分子特性,并通过RT-qPCR检测NcMettl5在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂过程的相对表达量,以期丰富NcMettl5的信息,并为探究东方蜜蜂微孢子侵染中NcMettl5的功能及调控机制提供基础。结果表明,扩增出约600bp的目的片段,与GenBank数据库收录的预测出的NcMettl5序列一致;NcMettl5的分子量约为22.64kDa,分子式为C_(1039)H_(1645)N_(269)O_(284)S_(6),理论等电点是9.37,脂溶系数是98.98,不稳定系数为13.96;包含196个氨基酸和20个磷酸化位点;平均亲水系数为-0.230,不含典型的跨膜结构域和信号肽,可同时定位于细胞骨架、细胞质和细胞核、细胞核、线粒体和过氧化物酶体;NcMettl5含有1个超家族结构域:AdoMet_MTases superfamily;东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫Nosema bombycis CQ1和颗粒病微孢子虫Nosema granulosis的Mettl5均含有7个相同的保守基序,序列一致性较高,且进化距离较近;NcMettl5在东方蜜蜂微孢子虫接种后1–4 d的意大利蜜蜂工蜂中肠内均有表达;相较于接种后1d(1daypostinoculation,1dpi),NcMettl5的表达量在2 dpi和3dpi下调但差异不显著(P>0.05),在4dpi显著下调(P<0.05)。研究结果表明成功克隆到东方蜜蜂微孢子虫的NcMettl5基因,明确了NcMettl5蛋白的分子特性,并揭示NcMettl5可能为亲水性蛋白、非跨膜蛋白和胞内蛋白,Nosema属的东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫和颗粒病微孢子虫的Mettl5蛋白具有较高的保守性,NcMettl5在东方蜜蜂微孢子虫增殖周期内真实表达且总体呈持续下降的表达趋势。

关键词：微孢子虫东方蜜蜂微孢子虫 RNA甲基化 N6-甲基腺苷甲基转移酶侵染增殖

甲基转移酶基因OsARM调节水稻中莠去津降解效应的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甲基转移酶基因OsARM调节水稻中莠去津降解效应的研究

作者：张爱萍南京农业大学

学位级别：硕士

莠去津(Atrazine)被列为第二大最常用的农业除草剂,广泛用于控制农业中的阔叶杂草和草类杂草。它在环境中具有较高的持久性,结构稳定,较难自然降解,因此,莠去津的残留带来较多严重的环境和健康问题。许多作物如水稻、小麦等在污染土壤... 详细信息

莠去津(Atrazine)被列为第二大最常用的农业除草剂,广泛用于控制农业中的阔叶杂草和草类杂草。它在环境中具有较高的持久性,结构稳定,较难自然降解,因此,莠去津的残留带来较多严重的环境和健康问题。许多作物如水稻、小麦等在污染土壤中对莠去津有较高的吸收和积累。为此,人们开始越来越关注农作物及环境中莠去津去除机理及环境效应的研究。甲基转移酶(methyltransferase,MTs)是一类将甲基从S-腺苷-L-甲硫氨酸(SAM)转移到各种次生代谢产物末端的酶,生成各种甲基化衍生物,改变其分子活性,在植物中主要调节植物生长发育和代谢。本文针对我们以前制作的水稻甲基化数据库和转录组中筛选得到一个未知的对莠去津胁迫响应的MT基因(LOC1g19840,这里命名为Atrazine Responsiveness Methyltransferase,OsARM)进行了系统的鉴定,对其参与水稻中莠去津降解效应进行研究,为降低水稻作物及环境中莠去津,减少农药对人类危害提供科学依据。具体内容如下:首先研究莠去津胁迫对甲基转移酶基因的影响,关联分析莠去津胁迫下转录组和DNA甲基化数据,以差异变化2倍为标准,共筛选了 20个既存在差异表达又存在差异甲基化的甲基转移酶基因。从中挑选12个基因进行实时荧光定量PCR验证,结果表明与测序结果一致。利用生物信息学分析方法,对20个甲基转移酶基因进行进化树、染色体定位、启动子顺式作用元件预测等分析。根据关联分析的结果,选择一个在莠去津胁迫下甲基化下调且基因表达上调的甲基转移酶基因OsARM,进行了详细的生物信息学分析。通过McrBC酶法和染色质免疫共沉淀法,验证该基因在莠去津胁迫下DNA甲基化下调,并且由甲基转移酶MET1,组蛋白甲基转移酶SDG714和去甲基转移酶ROS1特异性调控OsARM差异甲基化区域的DNA甲基化和组蛋白甲基化水平,进而共同调控OsARM的表达。在不同浓度莠去津胁迫下,OsARM可以诱导表达。为了研究OsARM对水稻体内莠去津降解代谢的影响,利用分子生物学技术,构建了OsARM过表达载体和CRISPR-Cas9表达载体。通过遗传转化,筛选鉴定,获得3个纯合过表达水稻株系(OE-1,OE-2,OE-5)和3个纯合的CRISPR-Cas9水稻株系(Cas9-1,Cas9-3,Cas9-6)。同时,构建OsARM的异源表达载体,通过毕赤酵母(Pichiapastoris X-33)诱导表达,进行该基因功能的互补验证。研究结果表明,莠去津胁迫下,重组酵母菌株的生长状况明显比空载酵母菌株好,重组毕赤酵母对莠去津的降解率是空载酵母的1.55倍。说明OsARM增强了毕赤酵母对莠去津的抗性,促进毕赤酵母对莠去津的降解。以获得的过表达和CRISPR-Cas9水稻株系为实验材料,野生型水稻为空白对照,系统地研究OsARM增强水稻对莠去津的耐受性,并促进水稻中莠去津的降解。在0.2 mg L-1莠去津胁迫下,与野生型相比,过表达水稻的生长状况更好,水稻的伸长量、干重和叶绿素含量比野生型更高,电解质渗透率明显低于野生型,而在CRISPR-Cas9水稻的生长及生理生化指标与过表达相反,表明OsARM增强了水稻对莠去津的耐受性。0.2 mgL-1莠去津处理6d,过表达水稻的积累量低于野生型,CRISPR-Cas9水稻的积累量高于野生型。与此同时,莠去津处理2d的水稻对莠去津单株移除量的大小顺序为:过表达>野生型>CRISPR-Cas9株系。表明OsARM促进了水稻对莠去津的降解。为进一步考察OsARM在水稻整个生长周期对莠去津的降解作用。分别检测了30 d、60d、120d水稻不同组织部位中莠去津的积累量。结果显示,当暴露农药30、60和120 d后,水稻不同组织部位的莠去津积累量高低均呈现过表达<野生型

关键词：莠去津甲基转移酶水稻降解效应