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中国中医药信息杂志 2020年第8期27卷 68-72页

作者：刘建国赵红乐赵宇涛马亚玲李姣姣金保方陕西省中医医院陕西西安710003 陕西中医药大学陕西咸阳712046 东南大学附属中大医院江苏南京210009

目的观察补肾活血方对环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法将50只8~9周龄雄性Balb/C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾活血方低、中、高剂量组,每组10只。空白组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各... 详细信息

目的观察补肾活血方对环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤的影响,探讨其可能的作用机制。方法将50只8~9周龄雄性Balb/C小鼠随机分为空白组、模型组和补肾活血方低、中、高剂量组,每组10只。空白组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺50 mg/kg造模。空白组和模型组给予蒸馏水灌胃,补肾活血方低、中、高剂量组给予相应浓度补肾活血方灌胃,每日1次,连续30 d。检测各组小鼠体质量、睾丸和附睾脏器指数、精子浓度和活力,睾丸组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,RT-PCR和Western blot分别检测小鼠睾丸组织Nrf2 mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、睾丸和附睾脏器指数、精子浓度和活力及睾丸组织SOD、CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,睾丸组织Nrf2 mRNA和蛋白表达均显著降低;与模型组比较,补肾活血方组小鼠精子浓度和活力,睾丸组织SOD、CAT活性明显增加,MDA水平显著降低,睾丸组织Nrf2 mRNA和蛋白表达均显著升高。结论补肾活血方可能通过激活Nrf2/ARE信号通路,改善环磷酰胺所致小鼠睾丸氧化应激损伤及生精损伤。

关键词：补肾活血方环磷酰胺 Nrf2/ARE信号通路睾丸氧化应激损伤生精损伤小鼠

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参精固本丸对大鼠睾丸氧化应激损伤后生精功能的修复

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中华男科学杂志 2019年第12期25卷 1118-1125页

作者：邓宇飞翁治委梁爱军李翎翁浩伟刘志丹周少虎广州中医药大学第一临床医学院/广州中医药大学第一附属医院广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院/广州中医药大学第一附属医院生殖医学科广东广州510405 广州中医药大学第一临床医学院/广州中医药大学第一附属医院实验中心广东广州510405

目的:探讨补肾活血中药参精固本丸对氯化镉造模的氧化应激损伤大鼠睾丸、附睾、精子的抗氧化及生精功能修复作用。方法:将SPF级Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,分别为正常对照组、模型对照组、五子衍宗丸组、参精固本丸高剂量组、参精... 详细信息

目的:探讨补肾活血中药参精固本丸对氯化镉造模的氧化应激损伤大鼠睾丸、附睾、精子的抗氧化及生精功能修复作用。方法:将SPF级Wistar大鼠随机分为6组,每组12只,分别为正常对照组、模型对照组、五子衍宗丸组、参精固本丸高剂量组、参精固本丸中剂量组、参精固本丸低剂量组。除正常对照组外,各组腹腔注射氯化镉1 mg/kg,24 h后各组分别灌胃给药,每天1次,共给药56 d。模型对照组和正常对照组予等体积生理盐水灌胃,参精固本丸高、中、低剂量组分别予以8倍等效剂量(11.2 g/kg)、4倍等效剂量(5.6 g/kg)、2倍等效剂量(2.8 g/kg)参精固本丸溶液灌胃,五子衍宗丸组予以4倍等效剂量(4.5 g/kg)五子衍宗丸溶液灌胃。56 d后,处死实验动物,分别称取大鼠精囊、附睾、睾丸的质量并计算相应脏器系数,大鼠睾丸、附睾、精囊行病理组织学检测。留取附睾内精液,测定大鼠附睾精子浓度、活力、正常形态精子百分率。同时测定大鼠睾丸组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,血清睾酮(T)水平。结果:①参精固本丸高、中、低剂量组睾丸系数分别为(0.403±0.090)、(0.357±0.150)、(0.348±0.140)g/100 g,精囊系数分别为(0.347±0.115)、(0.336±0.090)、(0.320±0.065)g/100 g,高剂量组附睾系数为(0.156±0.030)g/100 g,均显著高于模型对照组[(0.237±0.098)、(0.241±0.118)、(0.099±0.088)g/100 g](P精子浓度分别为(58.1±32.2)、(36.0±36.2)、(31.9±32.7)×10^6/ml,显著高于模型对照组[(10.5±17.7)×10^6/ml](P精子总活力分别为(26.5±15.5)%、(18.9±8.2)%,高、中剂量组正常形态精子百分率分别为(85.3±23.3)%、(65.8±28.1)%,均显著高于模型对照组[(9.5±13.0)%、(36.2±40.2)%](P精固本丸高、中剂量组睾丸的GSH-PX水平分别为(5.70±1.73)、(5.42±2.35) U/mg prot,SOD水平分别为(52.7±14.6)、(51.3±14.7) U/mg prot,均显著高于模型对照组[(3.62±2.22)、(41.3±8.8)U/mgprot](P生精小管均发生凝固性坏死并钙化,生精细胞及支持细胞消失,精囊管腔内分泌物减少,上皮乳头萎缩;附睾萎缩,管腔缩小,管腔内未见精子。与模型对照组相比,随着剂量增加,参精固本丸组具有生精功能的生精小管面积逐渐增加,精囊上皮恢复为高柱状,附睾管管腔逐渐增大,管腔内精子逐渐增多,疗效与剂量间有依从关系,参精固本丸高、中剂量组疗效明显好于五子衍宗丸组。结论:参精固本丸可以拮抗氧化应激损伤,提高实验大鼠睾丸抗氧化物酶、血清T水平、精液质量,修复睾丸、附睾、精囊组织病理损伤,改善生精功能。

关键词：补肾活血参精固本丸氧化应激生精损伤大鼠

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枸杞多糖、槲皮素对双酚A致小鼠睾丸损伤的保护作用

枸杞多糖、槲皮素对双酚A致小鼠睾丸损伤的保护作用

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作者：孙小娜河北农业大学

学位级别：硕士

本试验主要研究枸杞多糖(LBP)、槲皮素(Que)对双酚A (BPA)致成年小鼠睾丸损伤的缓解作用。通过称量计算脏器系数;光镜检测睾丸病理学改变;试剂盒检测抗氧化能力;酶联免疫法检测血清中各种生殖激素水平的变化等方法,探讨枸杞多糖、槲皮... 详细信息

本试验主要研究枸杞多糖(LBP)、槲皮素(Que)对双酚A (BPA)致成年小鼠睾丸损伤的缓解作用。通过称量计算脏器系数;光镜检测睾丸病理学改变;试剂盒检测抗氧化能力;酶联免疫法检测血清中各种生殖激素水平的变化等方法,探讨枸杞多糖、槲皮素保护睾丸的生精功能及可能的作用机制,寻找环境雌激素诱导雄性动物生殖损伤的缓解措施。试验分三个部分:一、BPA对成年小鼠睾丸的损伤作用及机理研究研究不同剂量的BPA对雄性小鼠生殖系统的损伤作用。将25g左右的雄性小鼠40只,随机分成对照组、BPA 10、20、50、100 mg/kg染毒组,每组10只,连续7 d对小鼠腹腔注射BPA,对照组注射等量的橄榄油,1次/d,染毒结束24h后摘取并称量大鼠睾丸、附睾质量并计算脏器系数;光镜检测睾丸病理学改变;酶联免疫法检测血中睾酮(T)、黄体生成素(LH)水平。结果表明与对照组相比,小鼠睾丸重量、附睾重量及其脏器系数显著降低(P精管部分支持细胞与生精细胞分离,生精细胞松散,无规律,各层细胞排列紊乱;随染毒剂量的增加,小鼠血清中T和LH的含量显著降低(P损伤的模型。二、LBP对BPA所致睾丸损伤的缓解作用本试验旨在研究LBP对BPA诱导的成年小鼠睾丸损伤的保护作用。将成年雄性小鼠随机分为5组,除对照组A组外,其余4组的小鼠分别腹腔注射20 mg/kg的BPA,连续7 d,A组小鼠注射等量橄榄油;同时C、D、E组的小鼠分别灌服50、100、200 mg/kg的LBP,A组和B组小鼠灌服等量的生理盐水,连续7 d。处理结束24h后计算睾丸、附睾重量及脏器系数;检测睾丸病理学改变;检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的含量;检测血清中睾酮(T)、黄体生成素(LH)和促性腺激素释放激素(GnRH)的水平。结果表明,与BPA模型组比较,LBP各组睾丸质量、睾丸系数、附睾质量和附睾系数及其组织学变化均有改善趋势,其中补充100和200 mg/kg LBP的小鼠变化显著。抗氧化结果显示,LBP各剂量组血清中的SOD、GSH-Px活性均高于BPA组,差异极显著,其中100 mg/kg LBP组抗氧化酶的活性最高,MDA含量随LBP的增加而降低。补充LBP后,血清中T、LH和GnRH的含量均显著增加。结果提示,LBP对BPA导致的小鼠生殖损伤具有显著缓解作用。三、Que对BPA所致睾丸损伤的缓解作用Que对BPA致小鼠睾丸损伤的保护作用,并探讨其最佳剂量。方法:50只雄性昆明小鼠随机分为5组,A组(n=10)正常喂饲,B、C、D、E组(各10只)小鼠均腹腔注射50 mg/kg的BPA,1次/d,构建小鼠睾丸损伤模型,同时C、D、E组分别用100、200、400 mg/kg浓度的槲皮素灌胃7天,A组和B组给予等量生理盐水。记录小鼠的一般状况、体征及体重变化和实验结束时睾丸、附睾的重量;试剂盒检测血清中SOD、GSH-Px和MDA的含量;酶联免疫法测定T、LH和GnRH的水平;对睾丸组织进行组织学观察。结果:200mg/kg槲皮素组小鼠体重、各脏器质量均较B组有明显改善(P生殖激素水平均有一定程度的恢复,但D组各生殖激素指标均接近A组;组织学观察见各给药组睾丸生精小管生精细胞层数、精子数目均高于B组,尤以D组200 mg/kg恢复最为明显。结论:Que能够促进BPA致小鼠睾丸生精功能障碍后生精功能的恢复。总之,本试验通过BPA构建成年雄性小鼠睾丸损伤模型,添加LBP或Que后,明显降低了睾丸组织脂质过氧化水平、提高了雄性小鼠的抗氧化能力,使生殖激素也保持一定的平衡,说明LBP和Que可以有效对抗BPA造成的生精损害,提示LBP和Que均是缓解环境雌激素生殖毒性的有效中药成分。

关键词：枸杞多糖槲皮素双酚A 小鼠睾丸生精损伤

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枸杞多糖对己烯雌酚暴露成年仓鼠睾丸Caspase-8、Caspase-9及p53凋亡蛋白的影响

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中国兽医学报 2015年第7期35卷 1148-1152页

作者：刘玉姣王安忠张彩利马爱团河北农业大学动物医学院河北保定071001

66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A)、DES组(B)、1 mg/kg LBP组(C)、10 mg/kg LBP组(D)、50mg/kg LBP组(E)及VC+VE组(F)。除对照组外,其余5组均皮下注射1mg/kg己烯雌酚,对照组注射等剂量的橄榄油,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1... 详细信息

66只成年雄性仓鼠随机分为空白对照组(A)、DES组(B)、1 mg/kg LBP组(C)、10 mg/kg LBP组(D)、50mg/kg LBP组(E)及VC+VE组(F)。除对照组外,其余5组均皮下注射1mg/kg己烯雌酚,对照组注射等剂量的橄榄油,连续用药7d,同时C、D、E组分别灌服1、10、50mg/kg的LBP,F组灌服100mg/kg的VC及200IU/kg的VE,A、B组灌服等剂量的生理盐水。于末次给药24h后,乙醚麻醉致死仓鼠,取睾丸进行免疫组化检测,确定Caspase-8、Caspase-9和p53的表达。结果显示,通过免疫组化法检测证实,DES引起成年仓鼠睾丸内生精细胞大量凋亡,显著提高Caspase-9的表达(P生精细胞中凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-9和p53的表达,且以50mg/kg剂量作用最为显著。

关键词：己烯雌酚枸杞多糖凋亡蛋白生精损伤

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