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BMP-2/bFGF双基因转染的骨髓间充质干细胞复合生物陶瓷骨促进兔桡骨缺损修复

中国医科大学学报 2022年第2期51卷 125-130,135页

作者：韩操张丽娜颜南王正东沈阳医学院附属中心医院手外科沈阳110024 沈阳医学院附属中心医院重症医学科沈阳110024 沈阳医学院医学应用技术学院康复教研室沈阳110034 沈阳医学院基础医学院解剖教研室沈阳110034

目的探讨骨形态发生蛋白2(BMP-2)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因转染的骨髓间充质干细胞(BMSC)复合生物陶瓷骨在兔桡骨缺损模型中的治疗作用,及其与EphB4/ephrin-B2信号通路的调控关系。方法体外分离培养兔BMSC并经流式细胞术鉴定... 详细信息

目的探讨骨形态发生蛋白2(BMP-2)/碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)双基因转染的骨髓间充质干细胞(BMSC)复合生物陶瓷骨在兔桡骨缺损模型中的治疗作用,及其与EphB4/ephrin-B2信号通路的调控关系。方法体外分离培养兔BMSC并经流式细胞术鉴定,采用慢病毒载体将BMP-2/bFGF基因转染到兔BMSC,通过Western blotting鉴定过表达。制备BMSC复合生物陶瓷骨,植入兔挠骨缺损模型后,8周后取出缺损侧挠骨组织。HE染色观察桡骨组织形态变化;实时定量PCR检测成骨标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达;采用Lane-Sandhu组织学评分分析桡骨修复情况;采用免疫荧光检测桡骨组织ColⅠ、OPN的表达;采用Western blotting检测桡骨组织中EphB4、ephrin-B2水平。结果BMP-2/bFGF双基因转染的BMSC复合生物陶瓷骨能够改善缺损桡骨组织形态,提高桡骨组织Lane-Sandhu组织学评分,上调桡骨组织中Runx2、ALP、OPN和ColⅠ的表达,并能够上调缺损桡骨组织中EphB4和ephrin-B2的水平。结论BMP-2/b FGF双基因转染的BMSC复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损有修复作用,其机制可能与激活EphB4/ephrin-B2信号通路有关。

关键词：骨形态发生蛋白2 碱性成纤维细胞生长因子骨髓间充质干细胞桡骨缺损生物陶瓷骨 EphB4/ephrin-B2信号通路

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过表达BMP-4基因的BMSCs复合生物陶瓷骨在同种异体骨缺损模型中的研究

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解剖科学进展 2022年第2期28卷 185-188,196页

作者：白宇徐立张旭然阜新市中心医院骨外科三病房辽宁阜新123099

目的研究骨形态发生蛋白BMP-4转染骨髓间充质干细胞后与生物陶瓷骨形成复合材料对兔桡骨缺损的修复作用和机制。方法离体分离培养鉴定兔BMSCs,构建过表达BMP-4基因的慢病毒载体并转染BMSCs细胞,并通过流式细胞术和Western blot鉴定;... 详细信息

目的研究骨形态发生蛋白BMP-4转染骨髓间充质干细胞后与生物陶瓷骨形成复合材料对兔桡骨缺损的修复作用和机制。方法离体分离培养鉴定兔BMSCs,构建过表达BMP-4基因的慢病毒载体并转染BMSCs细胞,并通过流式细胞术和Western blot鉴定;制备复合生物陶瓷骨,ALP试剂盒检测桡骨组织ALP活性;HE染色观察桡骨组织形态变化;依据Lane-Sandhu法评价受体兔挠骨改善情况;采用免疫荧光检测桡骨组织Col I、OC和OPN表达;Western blot检测桡骨骨膜VEGF和EGF水平。结果成功分离兔BMSCs细胞,并获得BMP-4基因过表达的BMSCs细胞。BMP-4过表达的BMSCs复合生物陶瓷骨能够显著修复缺损的兔桡骨组织形态,提高组织的Lane-Sandhu评分,并上调挠骨的I型胶原、骨钙素和骨桥素的表达水平和骨膜中血管内皮生长因子(VEGF)和表皮生长因子(EGF)的表达。结论 BMP-4转染BMSCs与生物陶瓷骨复合材料能显著修复兔骨缺损,并增加骨膜组织中VEGF和EGF的表达。

关键词： BMP-4 BMSCs 骨缺损生物陶瓷骨

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BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用

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解剖科学进展 2022年第1期28卷 9-13页

作者：韩操颜南王正东张丽娜沈阳医学院附属中心医院手外科辽宁沈阳110024 沈阳医学院应用技术学院康复教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院基础医学院解剖教研室辽宁沈阳110034 沈阳医学院附属中心医院重症医学科辽宁沈阳110024

目的探究BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用及可能机制。方法分离培养兔BMSCs并鉴定,将BMP-2/bFGF过表达慢病毒转染兔BMSCs,Western blot验证转染效率;ALP试剂盒检测桡骨组织ALP活性,HE染色观察桡骨组织... 详细信息

目的探究BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损的修复作用及可能机制。方法分离培养兔BMSCs并鉴定,将BMP-2/bFGF过表达慢病毒转染兔BMSCs,Western blot验证转染效率;ALP试剂盒检测桡骨组织ALP活性,HE染色观察桡骨组织形态变化,并通过Lane-Sandhu组织学评分分析桡骨修复情况;免疫荧光检测桡骨组织Col I、OC和OPN表达;Western blot方法检测桡骨骨膜VEGF和EGF水平。结果BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs改善缺损桡骨组织形态,增加桡骨组织Lane-Sandhu组织学评分,增加桡骨组织Col I、OC和OPN表达及桡骨骨膜VEGF和EGF表达水平。结论BMP-2/bFGF双基因转染BMSCs复合生物陶瓷骨对兔桡骨缺损存在修复作用,其机制可能与增加骨组织VEGF和EGF水平有关。

关键词： BMP-2 bFGF BMSCs 桡骨缺损生物陶瓷骨

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3D打印多孔涂层钛棒与骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨（棒与颗粒）联合治疗犬股骨头早期坏死实验对照

3D打印多孔涂层钛棒与骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨（棒与颗粒）联合治...

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作者：王安西南医科大学

学位级别：硕士

目的:1、探索以3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(颗粒)联合治疗股骨头坏死具有可行性。2、探索3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(棒)结合髓芯减压能否增强股骨头抗塌陷的能力、延缓病程进展或有效治疗股骨头坏死... 详细信息

目的:1、探索以3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(颗粒)联合治疗股骨头坏死具有可行性。2、探索3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(棒)结合髓芯减压能否增强股骨头抗塌陷的能力、延缓病程进展或有效治疗股骨头坏死。3、比较3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(颗粒)联合、3D打印多孔涂层钛棒、骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(棒)及髓芯减压治疗股骨头坏死的疗效。方法:将32只健康成年比格犬随机分为4组,行液氮造模术后6周,分别为A、B、C、D四组,A组,行髓芯减压结合3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(颗粒)联合植入术。B组行行髓芯减压结合3D打印多孔涂层钛棒植入术,C组行骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(棒)。D组为对照组,单纯行髓芯减压术。不同手术方式处理A组、B组、C组、D组比格犬分别于术后6w、12w行影像学检查后处死,取组织学取样本和大体标本行观察,行组织学检查、生物力学检查及影像学检查。组织学行细胞计数和HE切片检查,细胞计数采用两独立样本T检验。生物力学压强结果,使用双因素方差分析比较6W与12W及不同手术方式的抗压强度差异是否有统计学意义,行Dunnett检验进行两两比较,P生物力学观察:A组6w和12w比格犬股骨头形态结构规整,密度均匀一致,软骨颜色正常,表面光滑无变形,透明,股骨头未见明显塌陷,明显增强股骨头抗压能力。3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导生物陶瓷骨与周围骨组织结合好,钛棒未见脱出松动。含有骨诱导磷酸钙生物陶瓷中有大量新生骨细胞形成且新生骨细胞排列较为整齐。B组6w和12w股骨头形态结构规整,软骨颜色正常,表面光滑,无明显变形,透明,股骨头未见明显塌陷,股骨头抗压能力有所增强。3D打印多孔涂层钛棒与周围骨组织结合较好,多孔钛棒未见脱出松动。未见明显新生骨细胞形成。C组6w和12w股骨头形态结构欠规整,软骨颜色偏暗,表面轻度变形,透明度差,股骨头呈现轻度塌陷。股骨头抗压能力有所增强,材料与周围骨组织结合较差,可见明显新生骨细胞形成,但新生骨细胞排列混乱。D组为对照组6w和12w股骨头形态结构不规整,软骨颜色偏暗,表面变形,透明度差,股骨头呈现明显塌陷,软骨下骨明显囊性变及囊变周围组织硬化,芯减压后未植入材料的缺损区被大量结缔组织覆盖,结缔组织周边可见少量骨细胞,且细胞排列不规则。综上所述,A组、B组抗压强能力都有所增强,但B组未见大量新生骨细胞。A组、C组材料周围骨髓细胞中含有大量骨细胞形成,C组虽然有大量新生骨细胞,由于没了力学支撑新生骨细胞排列混乱。D组坏死塌陷。结论:1.3D打印多孔涂层钛棒和骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨(颗粒)联合治疗早期股骨头坏死具有可行性。2.3D打印多孔涂层钛棒明显增强股骨头抗压能力。3.骨诱导磷酸钙生物陶瓷骨可在骨缺损区诱导新生骨细胞。

关键词： 3D打印多孔涂层钛棒骨诱导生物陶瓷骨早期股骨头坏死

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