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食品工业科技 2018年第10期39卷 138-142页

作者：朱晨李曼宁王蕊刘变芳宋巧智夏效东西北农林科技大学食品科学与工程学院陕西杨凌712100

冷鲜肉中微生物极易在设备表面附着形成生物膜,引起肉类腐败变质,同时还会引起食源性疾病传播和食物中毒。本文研究不同温度下冷鲜猪肉中菌群在玻璃和不锈钢表面的成膜规律,分离鉴定成膜微生物,并采用Na Cl O、超声波清除生物膜。结果表... 详细信息

冷鲜肉中微生物极易在设备表面附着形成生物膜,引起肉类腐败变质,同时还会引起食源性疾病传播和食物中毒。本文研究不同温度下冷鲜猪肉中菌群在玻璃和不锈钢表面的成膜规律,分离鉴定成膜微生物,并采用Na Cl O、超声波清除生物膜。结果表明,4、15和26℃生物膜形成量分别在第10、6和3 d达到峰值,且细菌在不锈钢表面形成的生物膜量大于玻璃材质;分离鉴定出普通变形杆菌、腐败希瓦氏菌和假单胞菌等9株成膜细菌。Na Cl O溶液浸泡对不锈钢和玻璃表面的变形杆菌生物膜均有显著清除效果(p清除效果均能达到98%以上。100 k Hz超声1 min结合400 mg/L Na Cl O溶液浸泡5 min清除率达99%以上,效果优于Na Cl O溶液和超声波单独作用。

关键词：冷鲜猪肉细菌生物膜分离鉴定变形杆菌生物膜清除

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甘草与厚朴复配物对变异链球菌及生物膜形成的抑制作用

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华东理工大学学报（自然科学版） 2021年第2期47卷 202-208页

作者：蔡昀盈吴梦琪夏玮宋金星张文清华东理工大学化学与分子工程学院上海200237

比较了甘草和厚朴的提取物以及两者复配物的抑菌效果,并研究了甘草和厚朴的提取物对变异链球菌乳酸脱氢酶活性的影响和生物膜形成的抑制效果。通过抑菌圈、最小抑菌浓度和部分抑菌浓度指数测试抑菌能力,结果显示甘草和厚朴联合使用时对... 详细信息

比较了甘草和厚朴的提取物以及两者复配物的抑菌效果,并研究了甘草和厚朴的提取物对变异链球菌乳酸脱氢酶活性的影响和生物膜形成的抑制效果。通过抑菌圈、最小抑菌浓度和部分抑菌浓度指数测试抑菌能力,结果显示甘草和厚朴联合使用时对变异链球菌具有协同作用,且当甘草和厚朴提取物的质量比为1∶2(G-M_(1∶2))时抑菌效果最佳。通过变异链球菌生长曲线探究G-M_(1∶2)对变异链球菌的抑菌时期,研究G-M_(1∶2)对乳酸脱氢酶的活性和生物膜形成的影响,结果显示G-M_(1∶2)能有效抑制乳酸脱氢酶(LDH)的活性和生物膜的形成。

关键词：甘草厚朴抑菌活性生物膜清除变异链球菌

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不同种类消毒剂对肺炎克雷伯菌生物膜形成能力的研究

不同种类消毒剂对肺炎克雷伯菌生物膜形成能力的研究

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作者：黄晨蕾皖南医学院

学位级别：硕士

目的:探讨3种不同耐药性肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)形成生物膜的能力,评价不同种类消毒剂对不同耐药性肺炎克雷伯菌的抗菌活性及对生物膜的抑制和清除作用,为更好地控制肺炎克雷伯菌在院内的感染和传播提供依据。方法:收... 详细信息

目的:探讨3种不同耐药性肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)形成生物膜的能力,评价不同种类消毒剂对不同耐药性肺炎克雷伯菌的抗菌活性及对生物膜的抑制和清除作用,为更好地控制肺炎克雷伯菌在院内的感染和传播提供依据。方法:收集不同科室住院患者感染性标本中分离的肺炎克雷伯菌,分为敏感组、产超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrumβ-Lactamases,ESBLs)组和耐碳青霉烯类(Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)组,每组各15株。采用微量肉汤稀释法测定碘伏、洗必泰、戊二醛、新洁尔灭和84消毒液对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC)并测定不同浓度的各消毒剂杀菌所需时间;体外构建3种不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜模型,采用结晶紫染色法连续7天测量590nm处的光密度(OD)来检测不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜的生长趋势;采用结晶紫染色法联合激光扫描共聚焦荧光显微镜研究洗必泰、新洁尔灭和84消毒液对肺炎克雷伯菌生物膜的形成抑制能力和清除能力。结果:3组菌测得的各种消毒剂MIC和MBC相同,碘伏的MIC为256μg/ml、MBC为512μg/ml;戊二醛的MIC为2500μg/ml、MBC为5000μg/ml;洗必泰的MIC为16μg/ml、MBC为32μg/ml;新洁尔灭的MIC为32μg/ml、MBC为64μg/ml;84消毒液的MIC为1000μg/ml、MBC为2000μg/ml。另测得不同浓度的消毒剂对3组菌的杀菌时间略有不同,2000μg/ml洗必泰、3000μg/ml新洁尔灭、20000μg/ml戊二醛和5000μg/ml碘伏杀菌时间均为5min,5000μg/ml84消毒剂杀菌时间为10min。3组肺炎克雷伯菌生物膜体外培养后其OD值逐日升高,至第5天达到高峰。加入不同消毒剂后,3组肺炎克雷伯菌第1-5天的OD值逐渐增多,但与阳性对照组相比均有所下降。第5天16μg/ml洗必泰组、32μg/ml新洁尔灭组和1000μg/ml84消毒液组的OD值与阳性对照组相比差异均有统计学意义(P生物膜抑制率分别为敏感组:77.29%,ESBLs组:78.55%,CRKP组:76.86%;32μg/ml新洁尔灭对各组肺炎克雷伯菌生物膜抑制率分别为敏感组:84.59%,ESBLs组:81.73%,CRKP组:83.98%;1000μg/ml84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜抑制率分别为敏感组:36.30%,ESBLs组:36.25%,CRKP组:38.31%。在生物膜成熟后加入不同浓度消毒剂,2000μg/ml洗必泰和5000μg/ml84消毒液作用下3组肺炎克雷伯菌的OD值与空白对照组相比均有所下降且差异均有统计学意义(P0.05)。1000μg/ml洗必泰对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:7.95%,ESBLs组:6.92%,CRKP组:7.69%;2000μg/ml洗必泰对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:19.75%,ESBLs组:18.16%,CRKP组:16.13%;1000μg/ml新洁尔灭对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:6.11%,ESBLs组:6.65%,CRKP组:6.95%;2000μg/ml 84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:5.03%,ESBLs组:4.86%,CRKP组:5.16%;5000μg/ml 84消毒液对各组肺炎克雷伯菌生物膜清除率分别为敏感组:12.86%,ESBLs组:15.13%,CRKP组:16.02%。结论:敏感型、ESBLs型和CRKP型3种不同耐药性肺炎克雷伯菌形成生物膜的能力无差异。5种消毒剂中,洗必泰和新洁尔灭对敏感型、ESBLs型和CRKP型的肺炎克雷伯菌的抗菌作用最强。洗必泰、新洁尔灭和84消毒液对3种不同耐药性肺炎克雷伯菌生物膜均有抑制作用,且新洁尔灭和洗必泰对生物膜的抑制作用强于84消毒液。洗必泰和84消毒液对3种耐药性肺炎克雷伯菌生物膜均有清除作用,且洗必泰的清除作用强于84消毒液。

关键词：肺炎克雷伯菌生物膜消毒剂生物膜抑制生物膜清除

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阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜形成的研究

阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜形成的研究

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作者：曹若楠皖南医学院

学位级别：硕士

目的:采用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)技术对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)进行分型,分析本地区肺炎克雷伯菌的流行态势,并探讨不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的形成能力是否存在差异。研究阿奇霉素联合左... 详细信息

目的:采用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)技术对肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)进行分型,分析本地区肺炎克雷伯菌的流行态势,并探讨不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的形成能力是否存在差异。研究阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物被膜的影响,旨在为预防及治疗产生物被膜肺炎克雷伯菌感染提供新思路。方法:1.分别收集皖南医学院弋矶山医院医院2019年8月至2021年11月从住院患者标本分离的敏感组(野生组)肺炎克雷伯菌9株、产超广谱β-内酰胺酶(Extended spectrumβ-Lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌19株、耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(Carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)37株,细菌均采用VITEK MS IVD KB V3.2质谱仪鉴定。对各菌株进行MLST同源性分析。2.体外构建不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜模型,采用结晶紫染色法测量590nm处的光密度(OD)来检测不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的生长趋势,比较不同ST型肺炎克雷伯菌之间生物膜形成能力之间的差异。3.采用微量肉汤稀释法测定阿奇霉素及左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌的最低抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC),计算部分抑菌浓度指数(Fractional inhibitory concentration index,FICI)判断联合效果并选择最佳联合浓度。探究阿奇霉素联合左氧氟沙星对不同ST型肺炎克雷伯菌生物膜的抑制及清除效果。4.使用激光扫描共聚焦荧光显微镜(Confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察抗菌药物作用前后肺炎克雷伯菌生物膜的结构变化。结果:***分型显示敏感组肺炎克雷伯菌株属于ST86、ST727、ST29、ST111、ST1049、ST421、ST592、ST268共8个不同序列型;ESBLs组肺炎克雷伯菌株属于ST15、ST37、ST11、ST23、ST25、ST1109、ST893、ST485、ST1798、ST133、ST967、ST264、ST726、ST273共14个不同序列型,其中ST15占26.30%,ST37占10.50%;CRKP组肺炎克雷伯菌株属于ST11、ST15、ST656、ST1805、ST147、ST4587、ST219、ST5636、ST34共9个不同序列型,其中ST11占48.70%,ST15占27.00%,ST656占5.40%。我院耐碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌以ST11,ST15为主。37株CRKP中主要来源于神经外科(13株),其中ST11型5株,ST15型5株、ICU(8株),其中ST11型7株,ST15型1株,均为主要流行株。***组ST15型、CRKP组ST11型,CRKP组ST15型肺炎克雷伯菌均形成生物被膜,并于第5天达到成熟,随后生物膜开始分散。分别比较ST15(ESBLs)组与ST15(CRKP)组及ST11(CRKP)与ST15(CRKP)组第五天生物膜成熟时生物膜产量,ST15(ESBLs)组较ST15(CRKP)组产生物被膜能力强,ST11(CRKP)组较ST15(CRKP)组形成生物膜能力强,且差异均具有统计学意义(P生物膜形成具有抑制作用,第5天时,ST11(CRKP)组生物膜形成抑制率为2×MIC阿奇霉素组84.00%、1×MIC左氧氟沙星组46.83%以及联合药物组85.13%;ST15(CRKP)组生物膜形成抑制率为2×MIC阿奇霉素组78.07%、1×MIC左氧氟沙星组66.20%以及联合药物组83.93%;ST15(ESBLs)组生物膜形成抑制率为2×MIC阿奇霉素组75.73%、1×MIC左氧氟沙星组51.10%以及联合药物组89.93%。在所选择实验浓度范围内,2×MIC阿奇霉素组及联合药物

关键词：肺炎克雷伯菌生物膜阿奇霉素左氧氟沙星生物膜抑制生物膜清除

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表没食子儿茶素没食子酸酯对牙龈卟啉单胞菌细菌毒力抑制作用的体外研究

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口腔疾病防治 2021年第5期29卷 314-321页

作者：齐霞孔令雪李淑娟马思婷齐雅丽赵蕾河北医科大学口腔医学院·口腔医院牙周一科河北省口腔医学重点实验室河北省口腔疾病临床医学研究中心河北石家庄050017 济南口腔医院牙周黏膜科山东济南250001 口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院牙周科四川成都610041

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin⁃3⁃gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por⁃phyromonas gingivalis,***)体外抑菌活性及EGCG对***诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi⁃val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用。方法采用微量稀释法分析EGCG对***浮游菌和生物膜的抑制作用。扫描电镜检测EGCG作用下***生物膜微观结构的变化。特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi⁃nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响。***⁃valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP⁃1和MMP⁃2的蛋白分泌水平,qRT⁃PCR检测MMP⁃1及MMP⁃2 mRNA的表达。结果EGCG对***浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL。EGCG可抑制***生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性。10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05)。此外,50μg/mL EGCG对***刺激HGFs表达及分泌MMP⁃1、MMP⁃2均有抑制作用(P<0.05)。结论EGCG对***有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs。

关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯牙龈卟啉单胞菌生物膜形成生物膜清除精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶抗菌抗炎牙龈成纤维细胞基质金属蛋白酶

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