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作者：伍信红中南大学

学位级别：硕士

博落回主要有效成分生物碱具有多种药理活性。本研究基于高通量测序技术,探究博落回不同生长时期根和果中内生菌群落特征及其与生物碱的关系,筛选得到的博落回内生菌,通过代谢物检测和全基因组测序确定产生物碱能力。弥补了直接从博落... 详细信息

博落回主要有效成分生物碱具有多种药理活性。本研究基于高通量测序技术,探究博落回不同生长时期根和果中内生菌群落特征及其与生物碱的关系,筛选得到的博落回内生菌,通过代谢物检测和全基因组测序确定产生物碱能力。弥补了直接从博落回植物中提取生物碱存在的植物生长周期长、提取效率低和成本高等不足,为生物碱资源优化提供指导。主要研究结果如下:(1)不同生长时期博落回根和果中的生物碱含量会发生一定变化。根中别隐品碱和原阿片碱含量远高于血根碱和白屈菜红碱含量,且在花果期时达到最高分别为16.764 mg/g和11.352 mg/g。果中血根碱含量先急剧增加然后有所下降趋于平稳,在果前期含量达16.467mg/g位居4种生物碱之首。博落回果中的生物碱含量比根中的生物碱含量高。(2)不同生长时期博落回根和果中的优势细菌门和真菌门分别是变形菌门(Proteobacteria)和子囊菌门(Ascomycota)。根和果中丰度最高的内生细菌属分别是慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)和草螺菌属(Herbaspirillum);根和果中丰度最高的内生真菌属均是枝孢属(Cladosporium)。分子生态网络分析可知,根中芽孢杆菌属(Bacillus)与原阿片碱、血根碱呈正相关;果中假单胞菌属(Pseudomonas)等属与血根碱呈正相关。在根和果中Deniquelata等与4种生物碱呈正相关。镰刀菌(Fusarium)在果中与血根碱呈负相关,但在根中与4种生物碱都呈正相关。(3)通过分离筛选,得到33株内生细菌,经鉴定来自3个门、18个属,有10株是芽孢杆菌属;得到13株内生真菌,经鉴定均来自子囊菌门,有7株是青霉属(Penicillium)。在Bacillus subtilis MCB20和Fusarium oxysporum MCF8发酵液中分别鉴定到25和29种生物碱。两株内生菌具有产生物碱的能力。(4)Fusarium oxysporum MCF8组装得到15,327个编码基因。通过与NR、GO、KOG、KEGG数据库比对,分别注释到15,316、11,190、7,194、3,749个基因。异喹啉生物碱、吲哚生物碱与托烷、哌啶和吡啶生物碱代谢途径在KEGG数据库中注释到7个、1个、5个关键基因;在自建数据库中注释到10个、11个和3个关键基因。代谢检测到的个别生物碱能在前体氨基酸合成途径中被注释到。从基因组层面分析Fusarium oxysporum MCF8具有产生物碱的能力。图49幅、表34个、参考文献238篇

关键词：博落回内生菌群落不同生长时期生物碱检测全基因组测序生物碱代谢途径

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具杀虫活性雷公藤内生菌的分离与筛选

具杀虫活性雷公藤内生菌的分离与筛选

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作者：张华姣西北农林科技大学

学位级别：硕士

从医用植物中筛选与开发具有农用价值的内生菌资源已成为研究热点。内生菌具有广泛性与多样性的特点，它们的代谢产物结构新颖、生物活性多样，已受到医药学、植物病理学和微生物学等多个领域的重视。雷公藤是中国传统医用植物，已从其... 详细信息

从医用植物中筛选与开发具有农用价值的内生菌资源已成为研究热点。内生菌具有广泛性与多样性的特点，它们的代谢产物结构新颖、生物活性多样，已受到医药学、植物病理学和微生物学等多个领域的重视。雷公藤是中国传统医用植物，已从其根皮中分离得到多种具有医用及农用活性的化合物。本研究以雷公藤为植物材料，对其内生菌进行较为系统的分离，并进行杀虫活性的筛选，以期得到能够产生较高杀虫活性的物质的菌株。主要过程和结果如下： 1.从雷公藤植物材料中共分离得到内生菌183株，其中真菌111株，放线菌23株，细菌49株。真菌比例最大，占总分离菌株数的60.65%，细菌占总分离株数的26.78%，放线菌占总分离株数的12.57%。雷公藤植株的不同组织部位的内生菌数量有较大的差异，雷公藤根中分离得到的内生菌最多(89株)，占总数的48.63%，叶部次之(72株)，占总数的39.35%茎部分离得到的内生菌最少(22株)，占总数的12.02%。 2.以卤虫和三龄淡色库蚊幼虫为试虫对183株内生菌的杀虫活性进行初步筛选，结果表明，卤虫24h后死亡率在90%以上的菌株有11-3-8、11-3-37、11-6-58、11-6-76、11-6-73等34株菌株，占供试菌株的18.58%。根部、茎部和叶部分别有19株、11株和3株，分别占活性菌株数的55.88%、32.35%和8.82%。34株活性菌株中有33株真菌，1株放线菌;3龄蚊幼24h死亡率在70%以上的菌株有11-3-37、11-6-58、11-6-76、11-6-71等18株，占分离总株数的9.83%，其中根部和叶部有13和5株，分别占活性菌株的72.22%和27.78%，茎部无对三龄蚊幼有毒杀活性的菌株。 3.以蚜虫为试虫，采用浸虫浸液法对初筛得到的18株内生菌的杀虫活性进行复筛，筛选得到3株对蚜虫具有较高毒杀活性的菌株。其中菌株11-6-76的胞内和胞外代谢物均具有较高的杀蚜活性，蚜虫的死亡率分别为78.64%和70.75%;菌株11-3-37和12-2-47的胞内代谢产物提取物对蚜虫的毒杀活性较高，蚜虫死亡率分别为82.74%和76.97%。菌株11-3-37、11-6-76和12-2-47胞内代谢产物粗提物对蚜虫的LC50分别为34.8mg/mL，31.2mg/mL和46.4mg/mL。 4．用4种不同的显色剂对初筛得到的18株内生菌发酵液及菌丝体提取液进行显色反应，以明确内生菌是否产生生物碱类化合物。结果表明，内生真菌11-3-37和内生放线菌11-6-76的胞内代谢物粗提物成阳性反应，初步断定其中含有生物碱类化合物。进一步通过HPLC分析，初步确定2株内生菌菌丝体中含有的生物碱的量分别为：8μg/g和40μg/g。 5.对放线菌菌株11-6-76的培养特征和生理生化特性进行研究，根据菌株的培养特征和生理生化特性，将菌株11-6-76初步归为链霉菌白孢类群。

关键词：雷公藤内生菌分离杀虫活性生物碱检测形态鉴定

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谈对加强保健类药品质量监控的必要性

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医药论坛杂志 1996年第8期7卷 45-45页

作者：张军胡会平洛阳市第二人民医院中药制剂室

谈对加强保健类药品质量监控的必要性张军胡会平１（洛阳市第二人民医院中药制剂室洛阳市４７１００９）目前市场上流行众多的保健类药品，如延生护宝液、太阳神口服液、巨人脑黄金、太太口服液等等。这一类药品或保健药品品种多、数量... 详细信息

谈对加强保健类药品质量监控的必要性张军胡会平１（洛阳市第二人民医院中药制剂室洛阳市４７１００９）目前市场上流行众多的保健类药品，如延生护宝液、太阳神口服液、巨人脑黄金、太太口服液等等。这一类药品或保健药品品种多、数量大，许多患者或健康人在其大量广告宣...

关键词：质量监控类药品延生护宝液质量标准生物碱检测保健雄蚕蛾新标准大规模生产洛阳市

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