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应用生物发光成像技术示踪植入的骨髓间充质干细胞

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中国实验血液学杂志 2009年第5期17卷 1307-1311页

作者：边素艳盖鲁粤叶平杨月峰王华郭子宽王立生解放军总医院老年心血管病二科解放军总医院心内科北京100853 军事医学科学院放射医学研究所实验血液学研究室北京100850

以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细... 详细信息

以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细胞克隆。将逆转录病毒上清转染C57小鼠来源的MSC,经G418筛选后得到稳定表达fluc的MSC。将2×106个标记好的细胞注射正常骨骼肌,应用生物发光技术检测移植后不同时间细胞的存活情况。结果表明,随着时间的延长,细胞存活数目逐渐减少;移植后1天细胞死亡率高达(43.2±11.7)%,3天后细胞存活(8.6±2.5)%,6天后仅为(5.4±3.1)%,10天时未检测到荧光信号。结论:生物发光成像技术可用于移植的MSC体内示踪,但是即使将MSC植入正常的骨骼肌组织,大部分注入的MSC也将在短期内死亡。

关键词：生物发光成像技术骨髓间充质干细胞细胞标记细胞移植

GFP+Luc双报告基因标记脂肪干细胞裸鼠体内示踪研究

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上海交通大学学报（医学版） 2014年第8期34卷 1147-1151页

作者：戴淼吴氢凯许培荣候旻冯洁苏州大学医学院研究生部苏州215123 上海交通大学附属第六人民医院妇产科上海200233

目的探索慢病毒载体GFP+Luc双报告基因标记和生物发光成像技术活体内示踪脂肪干细胞的可行性。方法利用慢病毒载体将绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luc)双基因标记脂肪干细胞,利用荧光显微镜观察人脂肪干细胞(ADSCs)体外转染率,裸鼠皮下... 详细信息

目的探索慢病毒载体GFP+Luc双报告基因标记和生物发光成像技术活体内示踪脂肪干细胞的可行性。方法利用慢病毒载体将绿色荧光蛋白(GFP)和荧光素酶(Luc)双基因标记脂肪干细胞,利用荧光显微镜观察人脂肪干细胞(ADSCs)体外转染率,裸鼠皮下注射脂肪干细胞后1 h,1、2、4、6和8周利用生物发光成像系统连续监测ADSCs在裸鼠活体内的发光强度。离体组织DAPI染色鉴定移植细胞的存在及其存在的组织层次。结果荧光显微镜下观察慢病毒感染后的人ADSCs的GFP表达率高,流式细胞术测定转染率为87.3%,传至25代的人ADSCs仍稳定表达GFP。慢病毒载体对人ADSCs的生长和增殖没有影响。裸鼠注射ADSCs后活体内生物发光时间可持续8周,ADSCs主要分布在移植部位。离体组织切片鉴定标记的脂肪干细胞存在于移植部位皮下。结论慢病毒介导GFP+Luc双报告基因标记和生物发光技术可用于监测脂肪干细胞在动物体内的生物行为。

关键词：绿色荧光蛋白荧光素酶脂肪干细胞生物发光成像技术

人脐带间充质干细胞不同移植途径治疗缺血性脑损伤以及生物发光技术示踪的研究及进展

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中国组织工程研究 2017年第33期21卷 5407-5412页

作者：王立新李惠平广东省中医院广东省广州市510120

背景:人脐带间充质干细胞移植能有效促进缺血性脑损伤实验动物神经功能恢复,但目前尚不明确人脐带间充质干细胞的治疗机制及最佳移植途径。活体生物发光成像技术能实时动态监测移植干细胞在体内增殖、迁移及存活等情况,已广泛运用于干... 详细信息

背景:人脐带间充质干细胞移植能有效促进缺血性脑损伤实验动物神经功能恢复,但目前尚不明确人脐带间充质干细胞的治疗机制及最佳移植途径。活体生物发光成像技术能实时动态监测移植干细胞在体内增殖、迁移及存活等情况,已广泛运用于干细胞移植领域。目的:综述人脐带间充质干细胞经不同移植途径治疗缺血性脑损伤的应用及活体生物发光成像技术在干细胞移植治疗缺血性脑损伤研究中的最新进展。方法:分别以"人脐带间充质干细胞,缺血性脑损伤,活体生物发光成像","human umbilical cord mesenchymal stem cells,brain ischemia,bioluminescence imaging"为检索词,由第一作者检索2011年1月至2016年12月中国期刊全文数据库、Pub Med数据库相关文献。排除相关性差及重复性研究的文献,计算机初检到98篇文献,最终保留38篇进行归纳总结。结果与结论:人脐带间充质干细胞可经静脉、动脉、腰穿、脑立体定向移植、侧脑室移植等不同移植途径治疗缺血性脑损伤,各有优缺点,主要集中在干细胞迁移范围、存活率和安全性等方面。研究发现活体生物发光成像技术具有实时动态监测、高灵敏度、高时间分辨率、操作方便等优点,可用于监测移植干细胞在体内迁移、增殖和存活等情况。运用活体生物发光成像技术示踪人脐带间充质干细胞不同移植途径治疗缺血性脑损伤,明确人脐带间充质干细胞的作用机制及选择最佳移植途径值得进一步探讨。

关键词：干细胞移植人脐带间充质干细胞移植途径缺血性脑损伤生物发光成像技术国家自然科学基金

贝伐单抗抑制人非小细胞肺癌A549-luc细胞裸鼠移植瘤的生长及浸润

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中国肿瘤生物治疗杂志 2012年第5期19卷 543-546页

作者：李煜姝郭彩玲温良鹤徐玉清哈尔滨医科大学附属第二医院肿瘤内科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨贝伐单抗(bevacizumab)对人非小细胞肺癌A549-luc细胞小鼠移植瘤生长、浸润的影响。方法:将稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞系A549-Luc接种于裸鼠皮下,成瘤后随机分为对照组、低剂量贝伐单抗组及高剂量贝伐单抗组。对移植瘤进行... 详细信息

目的:探讨贝伐单抗(bevacizumab)对人非小细胞肺癌A549-luc细胞小鼠移植瘤生长、浸润的影响。方法:将稳定表达荧光素酶的人肺癌细胞系A549-Luc接种于裸鼠皮下,成瘤后随机分为对照组、低剂量贝伐单抗组及高剂量贝伐单抗组。对移植瘤进行生物发光成像,并与体积测量结果拟合;检测移植瘤质量和体积,计算贝伐单抗的抑瘤率。结果:生物发光成像观察结果显示,贝伐单抗组移植瘤发光区域和荧光强度较对照组均显著降低,且荧光高峰值出现较晚,高剂量贝伐单抗组的抑制效果更为显著。随着治疗时间的延长,贝伐单抗组移植瘤体积增长速度小于对照组(P<0.05),高剂量贝伐单抗组移植瘤体积缩小更为显著(P<0.05)。贝伐单抗组移植瘤细胞浸润程度和对肺组织的破坏程度均低于对照组,高剂量贝伐单抗组抑瘤率为77.3%,高于低剂量组的52.3%(P<0.05)。结论:贝伐单抗可以有效抑制活体内非小细胞肺癌A549-luc细胞移植瘤的生长和浸润。

关键词：生物发光成像技术贝伐单抗非小细胞肺癌肿瘤浸润