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生物催化活性的高通量筛选与药物发现

生物技术世界 2006年第6期3卷 35-36,25页

作者：王丽红刘均洪青岛科技大学化工学院药物工程实验室

酶能催化各种各样的反应，从而推动了生命的进程，因此可用来作为有价值的治疗药物。高通量筛选方法已成为药物研发中筛选出候选药物，几种灵敏可靠的分析技术也已特定地应用于生物催化活性的高通量检测。高能量生物催化检测平台加速了... 详细信息

酶能催化各种各样的反应，从而推动了生命的进程，因此可用来作为有价值的治疗药物。高通量筛选方法已成为药物研发中筛选出候选药物，几种灵敏可靠的分析技术也已特定地应用于生物催化活性的高通量检测。高能量生物催化检测平台加速了酶靶标的筛选，且对药物发现过程的各个阶段都有潜在的影响，

关键词：生物催化活性高通量筛选药物发现检测平台治疗药物药物研发筛选方法发现过程

预混合自组装辣根过氧化物酶生物活性膜及其催化活性研究

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高分子学报 2005年第2期15卷 181-185页

作者：江秀明陈志春杨绍明林贤福浙江大学化学系

以阳离子化的辣根过氧化物酶 (HRP)和阴离子聚苯乙烯磺酸钠 (PSS)的预混合溶液 ,与阳离子聚电解质聚二甲基二烯丙基氯化铵 (PDDA)通过逐层组装 ,在阴离子化聚对苯二酸乙二酯 (PET)表面构建了多层生物活性膜 .用紫外可见光谱仪 (UV Vis... 详细信息

以阳离子化的辣根过氧化物酶 (HRP)和阴离子聚苯乙烯磺酸钠 (PSS)的预混合溶液 ,与阳离子聚电解质聚二甲基二烯丙基氯化铵 (PDDA)通过逐层组装 ,在阴离子化聚对苯二酸乙二酯 (PET)表面构建了多层生物活性膜 .用紫外可见光谱仪 (UV Vis)和原子力显微镜 (AFM)研究了交替自组装膜的结构和表面形膜 ,并测定了自组装膜的生物催化活性 .结果表明 ,预混合溶液中的PSS与HRP一起沉积在PDDA膜层上组装成 (PSS+HRP)膜层 ,且每层中PSS和HRP的比例一致 ;(PSS +HRP)膜层呈条状分布 ,膜表面较为平整 ;多层膜中的HRP催化H2 O2 与 4 氨基安替比林的显色反应的表观米氏常数为 9 7× 10 - 5mol·L- 1 (相对于H2 O2 底物 ) ,较溶液中 (1 5 2× 10 - 4mol·L- 1 )的小 .

关键词：辣根过氧化物酶生物活性膜活性研究聚二甲基二烯丙基氯化铵原子力显微镜(AFM) 自组装预混合 4-氨基安替比林聚苯乙烯磺酸钠阳离子聚电解质生物催化活性混合溶液 H2O2 阳离子化对苯二酸 PDDA 米氏常数显色反应

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等离子体改性聚吡咯膜共价固定乳酸脱氢酶

功能材料 2004年第5期35卷 641-643页

作者：朱立平胡学清陆云南京大学高分子科学与工程系配位化学国家重点实验室江苏南京210093

　采用氨等离子体表面改性聚吡咯,使其表面具有活性氨基,并成功地将具有生物活性的乳酸脱氢酶共价连接在改性聚吡咯表面。用反射红外光谱研究了氨等离子体处理前后聚吡咯及聚吡咯酶多层薄膜的表面微观结构。紫外光谱和循环伏安测试结果... 详细信息

　采用氨等离子体表面改性聚吡咯,使其表面具有活性氨基,并成功地将具有生物活性的乳酸脱氢酶共价连接在改性聚吡咯表面。用反射红外光谱研究了氨等离子体处理前后聚吡咯及聚吡咯酶多层薄膜的表面微观结构。紫外光谱和循环伏安测试结果证实,表面固定了乳酸脱氢酶的聚吡咯多层薄膜具有生物催化活性和电化学活性,有望作为丙酮酸生物传感器。

关键词：氨等离子体改性聚吡咯乳酸脱氢酶生物催化活性生物传感器

血红蛋白/聚邻苯二胺膜电极的制备及其电催化性能的研究

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武汉大学学报（理学版） 2003年第4期49卷 501-504页

作者：李得加李海成邹国林武汉大学生命科学学院湖北武汉430072

用固定化方法在 0 .0 5mol/L硫酸介质中制备了血红蛋白 /聚邻苯二胺膜 (Hb/PPD)电极 .所得电极呈现良好的生物催化活性 ,具有典型的酶催化反应动力学特征 .固定化Hb的转移速率常数是Hb的 5 1.9% ,在 4℃下保存 5 0d ,还保持 91.2 %的活... 详细信息

用固定化方法在 0 .0 5mol/L硫酸介质中制备了血红蛋白 /聚邻苯二胺膜 (Hb/PPD)电极 .所得电极呈现良好的生物催化活性 ,具有典型的酶催化反应动力学特征 .固定化Hb的转移速率常数是Hb的 5 1.9% ,在 4℃下保存 5 0d ,还保持 91.2 %的活性 .研究了不同制备条件对酶电极性能的影响 ,分析了电极上Hb催化反应的动力学 ,探讨了电极电位下Hb的催化活性。

关键词：酶电极血红蛋白聚邻苯二胺膜电极制备方法电催化性能生物催化活性酶电化学固定化

界面电场对血红蛋白在多孔金电极上的吸附和生物活性的影响(英文)

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电化学 2011年第1期17卷 24-30页

作者：王翠红孔逸冰夏兴华南京大学生命分析化学教育部重点实验室化学化工学院江苏南京210093

蛋白质的界面吸附及其生物活性因它在构建生物传感、生物电子器件和生物燃料电池等方面具有重要的作用而倍受关注.对此,界面电场是吸附的一个重要影响因素,它能明显地影响蛋白质分子在材料界面的吸附量、分子构象以及分子定向.本文应用... 详细信息

蛋白质的界面吸附及其生物活性因它在构建生物传感、生物电子器件和生物燃料电池等方面具有重要的作用而倍受关注.对此,界面电场是吸附的一个重要影响因素,它能明显地影响蛋白质分子在材料界面的吸附量、分子构象以及分子定向.本文应用电化学方法和红外光谱技术研究了血红蛋白在三维多孔金膜电极上的吸附动力学及其生物活性随界面电场的变化关系.结果表明,由界面电场产生的过量表面电荷可借助与蛋白质分子之间的静电作用加速蛋白质分子在电极表面的吸附,提高其吸附量;但是,过高的界面电场将破坏吸附蛋白质的构象以及降低它还原过氧化氢的催化活性;只有在零电荷电位下,吸附在电极表面的血红蛋白才能保持其天然的构象和生物催化活性.本研究将为生物传感器、生物电子器件和生物燃料电池的构建提供理论依据,加深对荷电生物界面上生物分子界面行为的认识.

关键词：吸附蛋白质血红蛋白荷电界面界面电场生物催化活性

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高效产几丁质酶微生物的分离和筛选

植物保护学报 2018年第4期45卷 917-918页

作者：乔宏萍孙春黎武晓英吴丽华赵文婧太原师范学院生物系太原030619

几丁质酶是具有生物催化活性、能水解几丁质的一类水解酶,许多微生物可通过胞外诱导产生该酶。几丁质广泛存在于植物病原菌、线虫卵和昆虫的细胞壁中,防治植物土传病害时,在土壤中加入几丁质可以刺激土壤微生物胞外分泌几丁质酶,从而抑... 详细信息

几丁质酶是具有生物催化活性、能水解几丁质的一类水解酶,许多微生物可通过胞外诱导产生该酶。几丁质广泛存在于植物病原菌、线虫卵和昆虫的细胞壁中,防治植物土传病害时,在土壤中加入几丁质可以刺激土壤微生物胞外分泌几丁质酶,从而抑制病虫害发生（郑秀丽等,2006;孙建波等,2010）。

关键词：土壤微生物几丁质酶筛选分离生物催化活性植物土传病害植物病原菌病虫害发生

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纤维素降解细菌的细胞固定化技术初探

给水排水 2006年第3期32卷 115-116页

作者：杨仕健(研究生) 王洪涛(导师) 清华大学环境科学与工程系 100084

目前有效利用纤维素生物量的主要障碍是纤维索酶的酶解效率低。纤维素降解菌细胞固定化技术，是在纤维素酶固定化基础上发展起来的，为提高纤维素酶的利用效率，以及菌体的多次重复利用提供了有效途径。本文在实验室已经筛选出的若干株... 详细信息

目前有效利用纤维素生物量的主要障碍是纤维索酶的酶解效率低。纤维素降解菌细胞固定化技术，是在纤维素酶固定化基础上发展起来的，为提高纤维素酶的利用效率，以及菌体的多次重复利用提供了有效途径。本文在实验室已经筛选出的若干株具有较高纤维素降解活性的芽孢杆菌的基础上，对纤维素降解细菌的细胞固定化技术进行初步探索。

关键词：固定化细胞纤维素降解细菌生物催化活性水凝胶吸附

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超声波对固定化酶活性的影响

应用声学 2002年第2期21卷 46-49页

作者：陈小丽黄卓烈丘泰球华南农业大学生命科学学院广州510642 华南理工大学食品与生物工程学院广州510641

本文介绍了超声波对固定化酶的影响，同时对作用过程中的影响因素进行了阐述，并探讨了超声波影响固定化酶的可能机理。

关键词：超声波固定化酶酶活性生物催化活性功率超声介质连续辐射时间

磁性二氧化钛相变材料微胶囊的制备及其在固定化脂肪酶领域中的应用

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磁性二氧化钛相变材料微胶囊的制备及其在固定化脂肪酶领域中的应...

作者：蒋彬彬北京化工大学

学位级别：硕士

脂肪酶作为一种常见的生物酶,具有专一性和高效性,但在应用过程中由于游离的脂肪酶对温度和pH值敏感、易失活和难回收等缺点限制了其应用。传统工艺上采用固定化载体对其进行固定化来克服其缺点,但常见的固定化载体只能一定程度上提高... 详细信息

脂肪酶作为一种常见的生物酶,具有专一性和高效性,但在应用过程中由于游离的脂肪酶对温度和pH值敏感、易失活和难回收等缺点限制了其应用。传统工艺上采用固定化载体对其进行固定化来克服其缺点,但常见的固定化载体只能一定程度上提高固定化脂肪酶活性。本文设计和制备了一种新型的应用能量微系统磁性二氧化钛相变材料微胶囊(MTPCM)并将其作为具有温度调节功能固定化脂肪酶的载体材料,扩展了其在生物技术和生物工程中的应用。磁性微胶囊以结晶TiO/FeO无机材料为壁壳,既能够防止相变材料的泄露又能提高热传导率降低材料的过冷度;结晶TiO结构紧凑不仅有利于固定化脂肪酶,而且具有无毒、抗菌、高热稳定性、高化学稳定性和良好的机械性能等特点;FeO无机纳米粒子也赋予微胶囊超顺磁性,为后期固定化脂肪酶的回收利用提供便利;以正二十烷相变材料为核与脂肪酶的最适反应温度相匹配,为提高脂肪酶的热性能提供可能。第二章首先设计了以正二十烷为核、结晶TiO/FeO无机杂化材料为壁壳的MTPCM的制备方法:第一步,通过Pickering乳液方法将FeO无机纳米粒子自组装到正二十烷表面;第二步,钛酸正丁酯前驱体通过界面缩聚形成TiO壁壳;加入NaF结晶诱导剂诱导结晶MTPCM。然后,对MTPCM羧基化处理,用琥珀酰亚胺基团进行活化后通过一系列的共价键反应将脂肪酶共价链接到MTPCM载体-表面上。第三章主要是通过控制含有引发剂的混合液的滴加速率来研究其对MTPCM载体的影响,选择最佳制备固定化脂肪酶载体的方案。发现在0.5 mL·min、0.7 mL·min和0.9 mL·min混合液滴加速率分别可以形成“核—壳”结构的正八面体、类球形和类八面体混合体以及微球MTPCM,经各项表征发现0.9 mL·min混合液滴加速率条件下形成的微球形貌的MTPCM有更好的热稳定性和比表面积,更适宜作为脂肪酶的固定化载体。第四章则是在第三章的基础上用最佳方案制备的MTPCM载体经改性共价固定化脂肪酶(MTPCM-CRL),并通过傅里叶红外光谱分析(FT-IR)和X射线光电子能谱(XPS)等分析证实脂肪酶被共价固定到载体表面;用振动样品磁强计(VSM)分析表征了MTPCM-CRL磁分离性能;通过对比纯TiO固体载体固定化脂肪酶(TiO-CRL),本实验制备的MTPCM-CRL展现了更好的生物活性、高热稳定性、持久的储存稳定性和良好的循环稳定性,主要是因为MTPCM载体材料的温度调控性能。本实验的研究开拓了相变材料微胶囊(MEPCM)新的发展和应用领域,并为脂肪酶的广泛使用提供了可能。

关键词：温度调节酶载体脂肪酶磁性微胶囊相变材料 TiO2/Fe3O4杂化壁壳生物催化活性