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长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

作者：林旋豪汕头大学

学位级别：硕士

研究目的探讨长期不同强度的能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响,观察不同强度能量限制对卵泡发育、生育能力以及卵巢寿命的影响。材料与方法取6月龄雌性SD大鼠30只,分为对照（NC）组、能量限制（calorie restriciton, CR）20%组... 详细信息

研究目的探讨长期不同强度的能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响,观察不同强度能量限制对卵泡发育、生育能力以及卵巢寿命的影响。材料与方法取6月龄雌性SD大鼠30只,分为对照（NC）组、能量限制（calorie restriciton, CR）20%组和CR40%组,记录NC组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠。限食实验开始后的第一个月内两天记录一次大鼠体重;第二到第四个月大鼠生育2窝仔鼠观察生育力,因其处于妊娠阶段,不记录体重;第五个月开始到实验结束,每个月称量大鼠体重两次监测大鼠体重变化。实验开始前和实验开始后第1、5、7、9和11个月分别做阴道涂片监测动情周期。实验开始前和实验开始后第1、5、9和12个月分别取血一次监测血清激素（促性腺激素释放激素（GnRH）、黄体生成素（LH）和糖皮质激素（Cortisone））变化,12个月后取大鼠卵巢制作组织切片。从卵巢最大切面往两边依次选取7张组织切片用于苏木精-伊红染色,计数每张切片上不同发育阶段卵泡的数量,计算7张切片上健康卵泡总数和各级卵泡数量占健康卵泡总数的百分比。为了进一步细分和全面观察不同程度CR对大鼠卵泡发育和卵巢寿命的影响,我们在第一批大鼠实验开始后又补充了2个CR组,即CR10%和CR30%。其实验设计与第一批大鼠完全相同。结果在实验过程中NC组大鼠体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降。CR20%组、CR40%组卵巢湿重和体重的比值与NC组相比均有所增加,但差异无统计学意义。限食1个月后,连续生育2窝仔鼠观察大鼠生育力。与NC组生育的仔鼠数（9.3±1.2,9.3±1.3）及其体重（6.69±0.54 g,6.27±0.24 g）相比,CR20%组的仔鼠数（10.2±1.2,9.2±0.7）相近,第一窝仔鼠体重减轻（5.99±0.44）,且差异有统计学意义（P＜0.05）,但第二窝仔鼠体重相近（6.24±0.16 g）。CR40%组只生育了一窝仔鼠,且仔鼠数（9.3±1.2 vs. 4.5±3.7）及其体重（6.69±0.54 g vs. 5.12±0.33 g）与NC组相比差异均有统计学意义（P＜0.05,P＜0.001）。CR40%组大鼠的健康卵泡数量（105.7±9.5 vs. 51.2±5.4）和原始卵泡数量（55.0±6.8 vs. 18.3±3.7）均显著多于NC组（P＜0.001,P＜0.001）,原始卵泡比例（52.1%±2.9% vs. 35.8%±5.5%）也显著大于NC组（P＜0.001）,而成熟卵泡比例（6.8%±1.9% vs. 15.6%±6.2%）和发育卵泡比例（41.2%±3.0% vs. 48.9%±4.2%）则显著小于NC组（P＜0.001,P＜0.05）,其闭锁卵泡比例（52.7%±2.9% vs. 56.1%±1.8%）与NC组相比有所降低,但差异无统计学意义。CR20%组卵泡数量和各级卵泡比例与NC组相比差异无统计学意义。第二批大鼠与第一批结果趋势一致,相比NC组,CR10%组和CR30%组的原始卵泡、发育卵泡、健康卵泡和闭锁卵泡总数均增加。与NC组相比,CR30%组健康卵泡比例（48.7%±2.1% vs. 43.9%±1.8%）上升且差异有统计学意义（P＜0.05）;而闭锁卵泡比例（51.3%±2.1% vs. 56.1%±1.8%）下降,差异有统计学意义（P＜0.05）。CR10%组（49.5%±4.9% vs. 35.8%±5.5%）和CR30%组（42.3%±6.5% vs. 35.8%±5.5%）的原始卵泡比例与NC组相比显著增加（P＜0.001,P＜0.05）,CR10%组的发育卵泡比例（46.9%±5.3% vs. 48.9%±4.2%）、成熟卵泡比例（3.6%±2.5% vs. 15.6%±6.2%）下降,且成熟卵泡与NC组相比显著下降（P＜0.001）。CR30%组的发育卵泡（46.6±5.1 vs. 48.9±4.2）、成熟卵泡比例（11.1±1.8 vs. 15.6±6.2）下降,且成熟卵泡与NC组相比显著下降（P＜0.05）。限食1个月后,连续生育2窝仔鼠观察大鼠生育力。与NC组生育的仔鼠数（9.3±1.2,9.3±1.3）及其体重（6.69±0.54 g,6.27±0.24 g）相比,CR10%组的仔鼠数（7.7±1.3,8.9±1.2）减少,其仔鼠体重（6.03±0.18 g,5.91±0.18 g）减轻,但差异均无统计学意义（P＞0.05）。CR30%组的仔鼠数（6.0±0.7,6.3±0.3）减少、体重（6.44±0.29 g,5.62±0.15 g）减轻,且仔鼠数及第二窝仔鼠体重与NC组相比差异均有统

关键词：能量限制大鼠生殖寿命卵巢卵泡发育

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长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

热带医学杂志 2011年第5期11卷 487-490,504,F0002页

作者：林旋豪罗丽莉许锦阶陈晓纯栗丽陈振国傅玉才汕头大学医学院细胞衰老实验室广东汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院妇产科广东汕头515041

目的探讨长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响。方法 6月龄雌性SD大鼠30只,分为正常饮食组、能量限制(CR)20%组和CR40%组,记录正常饮食(NC)组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠,监测大鼠体重及动情... 详细信息

目的探讨长期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响。方法 6月龄雌性SD大鼠30只,分为正常饮食组、能量限制(CR)20%组和CR40%组,记录正常饮食(NC)组每日摄食量,并将此摄食量的80%和60%分别喂养CR20%组和CR40%组大鼠,监测大鼠体重及动情周期变化,12个月后取大鼠卵巢。卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察卵泡储备数量和不同发育阶段的卵泡比例。结果 NC组体重持续上升,而CR20%组体重小幅增加,CR40%组体重持续下降。CR40%组大鼠的卵泡储备数量(105.7±9.5)和原始卵泡数(55.0±6.8)与NC组(51.2±5.4,18.3±3.7)相比差异均有统计学意义(P生殖寿命延长。

关键词：能量限制大鼠生殖寿命卵巢卵泡发育

能量限制下SIRT1高表达对大鼠卵巢生殖寿命的影响

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生殖医学杂志 2014年第7期23卷 570-574页

作者：向延芳傅玉才许锦阶栗丽罗丽莉解放军第169医院妇产科衡阳421002 汕头大学医学院细胞衰老实验室汕头515041 汕头大学医学院第一附属医院妇科汕头515041

目的观察能量限制后成年大鼠卵巢SIRT1高表达对卵巢功能和寿命的影响。方法 24只10周龄雌性SD大鼠,随机分为35%能量限制组和对照组。对照组不给予特殊处理自由取食,能量限制组予对照组食量的65%,每日调整饲料量,每周称体重。HE染色卵巢... 详细信息

目的观察能量限制后成年大鼠卵巢SIRT1高表达对卵巢功能和寿命的影响。方法 24只10周龄雌性SD大鼠,随机分为35%能量限制组和对照组。对照组不给予特殊处理自由取食,能量限制组予对照组食量的65%,每日调整饲料量,每周称体重。HE染色卵巢组织形态学观察及卵泡分类计数,免疫组织化学法观察SIRT1蛋白定位,Western blot检测SIRT1蛋白表达。结果能量限制组大鼠摄入能量少,体重的增长速度要低于对照组(P生殖寿命及提高卵巢的储备有积极作用。

关键词：能量限制 SIRT1 卵巢储备生殖寿命

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短期能量限制对成年雌性大鼠生殖寿命的影响

汕头大学医学院学报 2011年第3期24卷 141-144页

作者：陈晓纯罗丽莉许锦阶傅玉才栗丽林旋豪汕头大学医学院第一附属医院妇产科汕头大学医学院细胞衰老实验室广东汕头515041

目的:探讨短期能量限制对雌性大鼠生殖寿命的影响。方法:21只8周龄雌性SD大鼠随机分为对照组和能量限制组,并监测大鼠体质量及动情周期变化,8周后取大鼠卵巢,其切片由苏木精-伊红染色,观察存活卵泡数和不同发育阶段的卵泡比例。结果:对... 详细信息

目的:探讨短期能量限制对雌性大鼠生殖寿命的影响。方法:21只8周龄雌性SD大鼠随机分为对照组和能量限制组,并监测大鼠体质量及动情周期变化,8周后取大鼠卵巢,其切片由苏木精-伊红染色,观察存活卵泡数和不同发育阶段的卵泡比例。结果:对照组体质量持续上升,能量限制组较平缓。能量限制组健康卵泡(135.3±11.7)比对照组(90.7±7.1)多(P生殖寿命延长。

关键词：能量限制生殖寿命卵巢卵泡发育

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哺乳动物卵巢卵泡发育调控机制研究进展

生理学报 2020年第1期72卷 63-74页

作者：张焱张华中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室北京100193

卵巢作为雌性哺乳动物的性腺,是由卵母细胞和不同类型的体细胞组成的异质性器官。卵巢在功能上,一方面担负了与雌性个体健康有关的内分泌调节功能,另一方面则承载了产生成熟卵母细胞并繁衍子代的重要任务。而承担上述功能的单位为卵泡,... 详细信息

卵巢作为雌性哺乳动物的性腺,是由卵母细胞和不同类型的体细胞组成的异质性器官。卵巢在功能上,一方面担负了与雌性个体健康有关的内分泌调节功能,另一方面则承载了产生成熟卵母细胞并繁衍子代的重要任务。而承担上述功能的单位为卵泡,即卵母细胞和卵泡体细胞共同构成的复合体。对于具有较长生殖寿命的哺乳动物而言,卵泡在卵巢内的发育是一个内部协同与外部调控的精密有序过程。其中后期促性腺激素依赖的有腔卵泡发育直接调控生殖周期的产生,而近期越来越多的证据表明早期卵泡的有序发育与雌性生殖寿命维持密切关联。因此,卵泡在体正常发育与雌性个体的健康息息相关;而深入探索卵泡发育调控机制,可直接指导我们认识包括人类在内的雌性哺乳动物生殖寿命的维持机制,并在未来对其进行可能的调控。近年来,伴随着新技术和新方法的产生,特别是基因修饰动物的开发以及新型显微技术的出现,对卵泡发育特别是早期卵泡发育的调控机制研究有了长足的进步。本综述围绕着卵泡在体发育中的关键生理事件,将近年来对卵泡的生理发育调节机制研究进行梳理,并重点聚焦于早期卵泡发育的体内相关调控机制研究进展。

关键词：卵巢卵泡信号通路动物模型生殖寿命

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植物多酚类物质对大鼠卵巢衰老的影响

植物多酚类物质对大鼠卵巢衰老的影响

作者：陈振国汕头大学

学位级别：硕士

研究目的探讨姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。材料与方法雌性SD大鼠分为母鼠灌胃组(受孕11.5 d母鼠灌胃姜黄素(100 mg﹒kg﹒d)直至分娩,分别取出生后1、2和4 d龄雌仔鼠卵巢),新生鼠腹腔注射组(正常出生1 d的雌仔... 详细信息

研究目的探讨姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。材料与方法雌性SD大鼠分为母鼠灌胃组(受孕11.5 d母鼠灌胃姜黄素(100 mg﹒kg﹒d)直至分娩,分别取出生后1、2和4 d龄雌仔鼠卵巢),新生鼠腹腔注射组(正常出生1 d的雌仔鼠腹腔注射姜黄素(100 mg﹒kg﹒d),连续4 d,分别取出生后2、4 d龄卵巢)和对照组(以母、幼均未用药的正常同天龄新生鼠的卵巢为对照)。所取卵巢经固定、脱水、包埋后切片,应用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,末端脱氧核苷酰基转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling, TUNEL)染色检测卵巢内卵母细胞凋亡情况。结果在1 d龄卵巢中,母鼠灌胃组未装配卵泡的比例明显低于对照组(P 生殖寿命。材料与方法54只11月龄的SD大鼠分为五组,分别为对照组、茶多酚灌胃组(100 mg﹒kg﹒d)、槲皮素灌胃组(50 mg﹒kg﹒d)、染料木素灌胃组(160 mg﹒kg﹒d)和白藜芦醇灌胃组(25 mg﹒kg﹒d),用药组大鼠每天灌胃一次。每天检查阴道涂片观察动情周期,每周对大鼠称重观察药物对老年大鼠体重的影响,连续进行四个月。实验结束时,所有大鼠麻醉后处死,取卵巢组织进行切片,HE染色观察并分别计数5张有代表性的组织切片中存活和闭锁的卵泡数以及存活卵泡中各级卵泡数占存活总卵泡数的比例。所有数据以±SEM表示,组间比较用方差分析和卡方检验。结果与对照组相比,茶多酚组存活卵泡总数为27.8±3.2,与对照组(26.9±3.8)相近,但闭锁卵泡总数明显减少(43.4±5.9 vs 79.7±7.5) (P 生殖寿命。

关键词：姜黄素新生大鼠卵泡发育卵母细胞凋亡 TUNEL 老年大鼠生殖寿命卵泡储备植物多酚动情周期